王冠军；马俐君；李梁；裴雪涛
目的：对比研究双歧杆菌、大肠杆菌菌体多糖对iIEL的激活作用。方法：采用Percoll非连续密度梯度离心法从小鼠小肠提取小肠上皮间淋巴细胞(iIEL)；应用有机溶剂提取的双歧杆菌、大肠杆菌菌体多糖与iIEL细胞共同孵育作用后，检测iIEL细胞的自然杀伤活性、IFNγ和IL-2产生能力。结果：大肠杆菌、双歧杆菌菌体外多糖均能显著增强iIEL细胞的自然杀伤活性、IFNγ和IL-2的产生能力(P＜0.01)，双歧杆菌组的作用显著高于大肠杆菌组(P＜0.01)。结论：双歧杆菌和大肠杆菌菌体外多糖均对iIEL细胞具有免疫激活作用，但双歧杆菌菌体多糖的作用强。
作者：周正任；王舰；杨晓临；王丹 刊期： 2001年第06期
目的：观察α-干扰素治疗慢性病毒性肝炎前后免疫细胞因子的变化，探讨α-干扰素与细胞因子之间的关系，为干扰素治疗选择合适的适应症。方法：用双抗体夹心ELISA法对80例慢性病毒性肝炎患者α-干扰素治疗前后IL-2、γ-IFN、IL-10进行了检测，同时观察了T细胞亚群的变化。结果：82例乙丙肝患者，用α-干扰素治疗后，治疗有效40例，有效率48.78％，随访1～2年，10.98％复发。干扰素治疗前：慢性病毒性肝炎患者Cd4+/CD8+比值、血清IL-2、γ-IFN水平降低，而IL-10水平明显升高。治疗有效组IL-10显著低于治疗无效组。治疗后：有效组CD4+/CD8+比值、血清IL-2、γ-IFN水平较治疗前显著升高，IL-10明显下降(P＜0.05)，而治疗无效组，治疗后仅IL-2较治疗前增高，CD4+/CD8+比值、血清IL-10、γ-IFN较治疗前无明显变化。结论：用干扰素治疗慢性病毒性肝炎可以明显提高CD4+/CD8+比值，使T细胞活化，促进Th1因子的产生，抑制Th2细胞因子。干扰素治疗无效组治疗前IL-10水平显著高于治疗有效组，可能是部分慢性病毒性肝炎干扰素疗效差的原因之一。T细胞亚群、Th1/Th2细胞因子的检测可用于干扰素抗病毒治疗适应症的选择和疗效监测。
作者：赵彩彦；刘金星；李跃林；冯忠军；甄真 刊期： 2001年第06期
目的：建立了预测受、供者间组织相容性信息的体外实验模型，探讨了借助此模型预测的组织相容性与BMT术后GVHR发生时间的相关性及其与小鼠移植皮肤存活时间的相关性。方法：借助所建立的实验模型和细胞模型预测供、受者间组织相容性差异。结果：①显示其与BMT术后GVHR发生时间呈一定相关性，即实验模型检测的受、供者间杀伤活性比值愈大，GVHR发生时间愈晚；②显示其与同种异体小鼠皮肤移植物存活时间呈正相关，即实验模型检测的供、受者间杀伤活性比值愈大，小鼠皮肤移植物存活时间愈长。结论：该模型对选择组织兼容性的移植物供者和判断移植术的预后，提供了实验依据和研究线索。
作者：郝友华；吴雄文；梁智辉；熊平；姜晓丹；徐勇；龚非力 刊期： 2001年第06期
D抗原抗体与输血的关系仅次于ABO血型。50％～75％ RhD阴性的人接受RhD阳性的血可产生抗-D，导致溶血性输血反应[1]。为了减少输血反应，正确检定RhD阴性个体就显得非常重要。我们对我院38例初检为Rh阴性的样本进行了更深一步的检定，现报道如下。
作者：张志梅；兰炯采 刊期： 2001年第06期
BCG膀胱内注入疗法是治疗膀胱上皮癌较为有效的疗法之一，但对其作用机制尚未完全阐明。Kurisu等报道BCG可在体外诱导人外周血单核细胞产生TNF-α和IFN-γ[1]。本文对膀胱上皮癌患者行BCG膀胱内注入疗法后，通过检测注入前后患者尿中TNF-α和IFN-γ的浓度，探讨对膀胱癌患者的抗肿瘤作用。现将我们的研究结果报道如下。
作者：尹明实；吴龙仁；朴红心；崔伟哲；韩学吉；王群 刊期： 2001年第06期
目的：构建人FL真核表达载体-pIRES1neo/hFL，观察其在COS-7细胞中的表达。方法：采用RT-PCR方法自人白血病细胞系TF-1中克隆可溶型FL(Flt3-ligand)cDNA片段，测序鉴定正确后，插入真核表达载体-pIRES1 neo中的EcoR I和BamHI位点，构建hFL真核表达载体-pIRES1neo/hFL。脂质体介导法将其转染COS-7细胞，72h以RT-PCR检测转染细胞中外源hFL基因的转录、ELISA法及脐血CD34+细胞增殖实验测定转染细胞上清中hFL的含量和活性。结果：酶切鉴定表明成功构建了重组真核表达载体-pIRES1neo/hFL；外源hFL基因能在转染细胞中有效转录；ELISA法测得72 h后培养上清中的hFL含量为每24小时251 ng/106 cells，并且分泌的hFL具有良好的生物学活性。结论：构建hFL真核表达载体在COS-7细胞中具有良好的表达活性。
作者：王冠军；马俐君；李梁；裴雪涛 刊期： 2001年第06期
目的：选用高效表达载体分别高效表达人源抗HBsAg抗体的Fd段和L链，经包涵体纯化和变性复性使Fd段和L链之间形成二硫键，终制备有活性、高产量的人源抗HBsAg基因工程抗体Fab。方法：用PCR法从可溶性表达重组质粒抗HBsAg Fad Comb3扩增Fd段和L链后分别构建高效表达载体PQE32-Fd和PQE32-L，并分别导入大肠杆菌M15中进行表达，用SDS-PAGE筛选出高效表达克隆。结果：SDS-PAGE筛选的高效表达克隆M15-PQE32-Fd和M15-PQE32-L经IPTG诱导后以包涵体形式表达，其表达量很高。从高效表达克隆重新扩增Fd段和L链后进行测序鉴定发现所得的序列与已报道的抗HBsAg抗体Fab基因吻合率为97％。结论：虽然已有表达可溶性人源抗HBsAg基因工程抗体Fab的报道，但因其表达量低而不能实际应用。筛选出高效表达人源抗HBsAg抗体Fd段和L链的克隆，因为包涵体形式表达需经变性复性，虽然变性复性后其产量会受影响，但因表达量很高，所以还是有很高的实际应用价值。其包涵体变性复性条件仍需进一步探讨。
作者：刘顺爱；何玉先；徐道振；王学；田波 刊期： 2001年第06期
目的：探讨中国湖北地区汉族人群中TNF微卫星遗传多态性分布。方法：收集湖北地区164名无血缘关系健康个体的静脉血，提取DNA，应用PCR结合变性聚丙烯酰胺凝胶高压电泳和AgNO3染色，对TNF微卫星进行分型，并将PCR产物克隆及测序鉴定。结果：TNFb检测到7个等位基因，11种基因型；TNFe检测到4个等位基因，7种基因型。TNFb和TNFe位点多态信息含量(PIC)分别为0.67和0.33，两者基因型分布皆符合Hardy-Weinberg平衡定律。统计分析显示，中国汉族人群TNFb、TNFe等位基因频率分布与欧美白种人均有显著性差异(P＜0.05)。结论：TNFb和TNFe等位基因频率分布具有种族的差异性。
作者：费保莹；邓长生；夏冰 刊期： 2001年第06期
目的：探讨人白细胞介素15的纯化工艺和进行活性鉴定。方法：将rhIL-15工程菌大量扩增后通过包涵体提取、复性、凝胶过滤、阴离子交换层析、高效反相液相色谱等技术进行纯化。结果：经纯化得到rhIL-15，其分子量为14.4kD，蛋白纯度为99％以上，比活为1×107 U/mg，对NK细胞杀伤活性具有明显的促进作用。结论：通过三步纯化方法可以获得高纯度、高回收率和高生物学活性的rhIL-15，且具有明显的促NK细胞杀伤活性。
作者：孙安源；孙汭；田志刚；王郡甫；朱法良；刘金生；张捷 刊期： 2001年第06期
血小板相关抗体(PAIg)是特发性血小板减少性紫癜(ITP)的诊断、疗效及预后估计的有效指标[1]。用酶联免疫吸附竞争法(ELISA)定量测定7例血小板减少而骨髓巨核细胞不增多患者的PAIg。结果发现，7例ITp病人的PAIg增高，说明PAIg是用于诊断骨髓巨核细胞不增多ITP患者的重要指标。
作者：朱华锋；陈协群；张红 刊期： 2001年第06期
目的：研究痢疾杆菌侵袭蛋白与局部免疫反应的关系，为痢疾菌苗的研制提供理论依据。方法：用表达和不表达侵袭蛋白(Ipa+/Ipa-)的两株福氏、宋内氏双价痢疾菌苗经角结膜免疫豚鼠，并分别用福氏、宋内氏毒株攻击，BA-ELISA方法检测豚鼠泪液中特异性抗体升高情况。结果：发现角结膜免疫后豚鼠泪液中特异性双价抗体水平较对照显著升高，差别具有统计学意义，Ipa+菌苗免疫组宋内氏抗体水平较Ipa-免疫组升高，差别具有统计学意义；攻击后，两免疫组局部抗体呈二次反应变化。结论：侵袭蛋白的表达可加强痢疾菌苗诱导的局部抗体水平。两株双价痢疾菌苗均有较好的免疫原性。
作者：石辛甫；邢丽；陈志华；彭虹；高杰英 刊期： 2001年第06期
目的：将人重组成纤维细胞生长因子受体1(FGFR1)表达在昆虫细胞膜表面，用作筛选成纤维细胞生长因子(FGFs)拮抗肽探针。方法：将人FGFR1 cDNA克隆人昆虫病毒的转递质粒pFastBac I上，然后转座到昆虫病毒Bacmid上。以重组Bacmid转染昆虫细胞Sf9并表达人FGFR1，以Western印迹和ELISA对表达出的蛋白质进行鉴定。结果：FGFR1 cDNA片段2 100 bp，重组FGFR1表达产物分子量78 kD。ELISA结果显示，人重组FGFR1高效地在昆虫细胞Sf9膜表达。结论：这个表达系统能很好地表达出人重组FGFR1，并能准确地将其定位到昆虫细胞膜的表面。
作者：孙铭一；万敏；王丽颖；周慧 刊期： 2001年第06期
枸杞子是茄科落叶灌木植物宁夏枸杞(Lycium barbarum L.)和枸杞(L.chinense Mill.)的成熟干燥果实，具有滋补肝肾、益精明目之功。枸杞多糖(lycium barbarum polysaccharides，LBP)是枸杞子的主要活性成分。现代药理学研究发现，枸杞多糖具有广泛的药理学作用：增强免疫，抗癌抑瘤，抗过氧化、抗衰老，促进造血等[1-4]。近些年有关从枸杞多糖对IL-2影响来探讨其免疫调节机理的报道很多[1,5-7]，但对IL-2R的研究则少见。本文采用老年小鼠和目前应用得较成熟的D-半乳糖致衰老小鼠模型，研究了其IL-2活性、IL-2R表达的变化以及枸杞多糖的作用。
作者：陈智松；吴志奎；王蕾；蔡永春；陈玉英；吕鑫霞 刊期： 2001年第06期
目的：用抗HBsAg和抗RBC单链抗体构建双特异minibody抗体模型。方法：将人IgG1 CH3经点突变方式，在CH3界面由大分子氨基酸代替小分子氨基酸形成“knob”(T366W)(杵状结构)，另一个CH3分子由3个小分子氨基酸代替3个大分子氨基酸形成“hole”(T366S：L368A：Y407V)(臼状结构)，并在此基础上在适当位置引入半胱氨酸残基形成二硫键(S354C：T366W/Y349C：T366S：L368A：Y407V)。然后将“knob”和“hole”分别接连于抗HBsAg和抗RBC单链抗体基因3'端，并将两基因组装于同一表达载体中，在大肠杆菌中分泌表达。结果：依CH3界面不同共构建3种不同的表达载体，分别带有①野生型CH3，②杵臼结构(T366W/T366S：L368A：Y407V)突变型CH3，③杵臼结构加二硫键(S354C：T366W/Y349C：T366S：L368A：Y407V)突变型CH3。大肠杆菌分泌表达后，ELISA法检测抗HBsAg和抗RBC活性，3种表达上清均有相同的抗HBsAg和抗RBC活性；两种带有突变型CH3的minibody用血球凝集法可检测到抗HBsAg和抗RBC双特异活性。结论：CH3界面经适当改造可促进异源二聚体形成，并在大肠杆菌获得功能性表达，得到双特异minibody。
作者：陈宇萍；乔媛媛；化冰；刘晓琳；谢帮铁；马大龙；王琰 刊期： 2001年第06期
目的：利用未成熟DC免疫受鼠诱导同种移植物存活延长，分析未成熟DC在诱导同种免疫低应答反应中的可能机理。方法：以小鼠耳后心肌移植为模型，观察未成熟DC和成熟DC免疫受鼠同种移植心肌的存活情况。同时检测未成熟DC免疫的小鼠脾细胞对同种细胞的CTL活性。结果：未成熟DC免疫受鼠的同种移植物存活时间明显延长，平均存活期从9.1±0.73 d延长到25.4±4.27 d，联合使用阿霉素效果更好，平均存活期为30.5±3.98d；C57BL/6未成熟DC免疫的Balb/c小鼠脾细胞对C57BL/6靶细胞的杀伤(3H-TdR释放率为16.32％)明显低于经成熟DC免疫的受鼠的脾细胞(3H-TdR释放率为39.58％)。结论：未成熟DC免疫可诱导同种移植心肌的存活明显延长，可能与受鼠体内的效应T细胞对移植物细胞杀伤低下有关。
作者：叶闻斐；何球藻 刊期： 2001年第06期
近几年我们常年进行人群流感抗体监测，北京1998年12月开始流感暴发流行，现将暴发流行前后的血清抗体结果比较分析报告如下。
作者：段佩若；赵华；张励力；林京；周继刚；王剑 刊期： 2001年第06期
复发性口腔溃疡也叫复发性阿弗他溃疡(recurrent aphthous ulcer，RAU)，是一种常见的口腔粘膜疾病，其病因复杂，至今未明确。本文从细胞免疫的角度出发，研究了RAU患者外周血中淋巴细胞对丝裂原刺激的增殖反应能力和分泌与创伤愈合有关的细胞因子的水平及淋巴细胞表面IL-2R表达等几种细胞免疫功能指标的变化，对RAU发病的免疫机理作以探讨。
作者：孙黎飞；刘海军；于广远；田野苹；曹雪涛 刊期： 2001年第06期
目的：观察造血干细胞表面粘附分子的变化在外周血干细胞动员中的作用。方法：用双色免疫荧光法研究15例恶性血液病患者经化疗+ G-CSF动员外周血干细胞前后、骨髓和外周血CD34+细胞表面β1整合素(CD49d)、β2整合素(CD11a、CD11b)及L-选择素(CD62L)的表达。结果：①动员后第7天CD34+细胞表面较动员前CD49d、CD11a、CD62L表达下降(P＜0.01)，而CD11b无变化(P＞0.05)。②外周血CD34+细胞表达CD49d、CD11a、CD11b、CD62L较骨髓低(P＜0.05)。③外周血CD34+细胞绝大多数处于GO/G1期，该期的干细胞CD49d的密度低于S+G2/M期。结论：化疗+G-CSF通过粘附分子的变化而使造血干细胞从骨髓进入外周血中。
作者：罗绍凯；童秀珍；洪文德；孔庆瑜；陈惠珍；彭爱华；李娟 刊期： 2001年第06期
中国免疫学杂志
主管:中国科学技术协会
主办：中国免疫学会,吉林省医学期刊社
