学术投稿

辛酯酶荧光试验快速检测沙门菌的方法研究

赵冬;高燕;王珂;孙明洁;胡永秀

关键词:酯酶, 荧光试验, 快速检测, 沙门菌属, 甲基伞形酮, 种特异性, 临床医学专业, 紫外光照射, 病原生物学, 水解反应, 水和食品, 释放, 实验条件, 实验教学, 培养时间, 粪便标本, 底物用量, 预实验, 实用性, 实验课
摘要:沙门菌属能产生一种特异性的辛酯酶,此酶的底物为4-甲基伞形酮辛酸酯(4-Methylumbelliferyl-caprylate,MUCAP).MUCAP本身没有荧光,但遇到沙门菌释放的辛酯酶时可发生水解反应,释放出4-甲基伞形酮,后者在波长365 nm的紫外光照射下,数分钟内即可发出蓝色荧光[1-4].近年来,根据上述原理建立的辛酯酶荧光试验已先后应用于临床粪便标本、水和食品中沙门菌的快速检测[5-8].此法灵敏性和特异性好,操作简便、省时,具有实用性.我们将辛酯酶荧光试验引入本科生实验教学,在预实验中从培养基的选择、细菌培养时间、底物用量等方面对实验条件进行了优化,在我校七年制临床医学专业的病原生物学实验课中试行.
中国实验诊断学杂志相关文献
  • MRSA分子演化和致病因子研究进展

    金黄色葡萄球菌(staphylococcus aureus,Sau)是条件致病菌,也是目前引起多种医院获得(hospital-acquired,HA)感染和社区获得 (community-acquired,CA) 感染的主要病原菌.耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌(methicillin-resistant S.aureus,MRSA),包括HA-MRSA 和CA-MRSA,前者对至少包括β-内酰胺类抗生素在内的多种抗生素耐药,甚至万古霉素,后者目前仅发现对β-内酰胺类抗生素耐药.两者均具有强致病性,可引起死亡.MRSA以其高致病性和多重耐药性成为人类健康的巨大威胁,已引起广泛重视[1].现就MRSA耐药基因分子演化、相关研究技术及其致病因子研究进展做一综述.

    作者:刘敏;刘井波;张正 刊期: 2009年第11期

  • 子宫内膜癌中Glut-1、C-erbB-2表达及其相互关系

    目的 探讨C-erbB-2和葡萄糖转运蛋白1(Glut-1)在不典型增生子宫内膜和子宫内膜腺癌中的表达特点及其相互关系.方法 应用免疫组织化学方法检测Glut-1、C-erbB-2在30例正常增生期子宫内膜、32例不典型增生子宫内膜和35例子宫内膜腺癌中的表达,并结合临床资料进行分析.结果 Glut-1、C-erbB-2在各组中的阳性表达率增生期子宫内膜均为0,不典型增生组分别为46.9%和59.4%,子宫内膜腺癌组82.9%,74.3%;二者在各试验组间均有显著差异(P<0.005).不典型增生组和子宫内膜腺癌组间差异有显著性(P<0.005).Glut-1与C-erbB-2在各组的表达呈显著正相关关系(P<0.01).结论 Glut-1和C-erbB-2在子宫内膜腺癌的发生、发展中起着协同而独立的作用,对其进行联合检测有助于子宫内膜腺癌及癌前病变的早期诊断.

    作者:张颖;陈海玲 刊期: 2009年第11期

  • 辛酯酶荧光试验快速检测沙门菌的方法研究

    沙门菌属能产生一种特异性的辛酯酶,此酶的底物为4-甲基伞形酮辛酸酯(4-Methylumbelliferyl-caprylate,MUCAP).MUCAP本身没有荧光,但遇到沙门菌释放的辛酯酶时可发生水解反应,释放出4-甲基伞形酮,后者在波长365 nm的紫外光照射下,数分钟内即可发出蓝色荧光[1-4].近年来,根据上述原理建立的辛酯酶荧光试验已先后应用于临床粪便标本、水和食品中沙门菌的快速检测[5-8].此法灵敏性和特异性好,操作简便、省时,具有实用性.我们将辛酯酶荧光试验引入本科生实验教学,在预实验中从培养基的选择、细菌培养时间、底物用量等方面对实验条件进行了优化,在我校七年制临床医学专业的病原生物学实验课中试行.

    作者:赵冬;高燕;王珂;孙明洁;胡永秀 刊期: 2009年第11期

  • 姜黄素联合热疗对Hep-2细胞凋亡及细胞周期的影响

    近年来,生命科学家把发现新型低毒高效和高特异性抗肿瘤药物做为研究的重要方向,尤其是调节细胞增殖周期和诱导肿瘤细胞凋亡倍受关注[1],新近的细胞实验和动物实验均证明姜黄素具有确切的抗肿瘤活性,且抗癌谱较广.本研究以Hep-2细胞为靶点,观察姜黄素联合热疗对Hep-2细胞周期进程及凋亡率变化.旨在为人喉癌治疗提供理论依据.

    作者:李石伟;刘跃明 刊期: 2009年第11期

  • 病毒性心肌炎小儿血清IL-2、IL-4、IL-6浓度的检测

    病毒性心肌炎是病毒侵犯心脏所引起的以心肌细胞变性、坏死和间质性炎症等心肌炎性病变为主要表现的疾病.在小儿中发病率较高,并呈上升趋势,临床表现轻重不一,严重危害小儿的健康.其发病机制尚不完全清楚,与病毒感染后直接作用于心脏及病毒感染后的免疫损伤有关.本文检测了病毒性心肌炎患儿血清白介素IL-2(IL-2)、白介素IL-4(IL-4)、白介素IL-6(IL-6)的浓度.探讨细胞因子在病毒性心肌炎时对机体的作用.

    作者:王淑桂 刊期: 2009年第11期

  • 不育症患者精浆弹性蛋白酶检测的临床意义

    目的 研究男性不育患者精浆中弹性蛋白酶的含量变化和临床意义,探讨其在诊断无症状性生殖道炎症中的作用;以及其对精子DNA完整性的保护作用的研究.方法 收集140例不育症门诊患者的精浆标本(实验组);按WHO标准80例诊断为弱精子症;60例为精液常数正常的不育症男性.所有患者都没有生殖道感染的症状,3个月前无抗菌治疗.采用ELISA双抗体夹心酶联免疫吸附法检测患者精浆弹性蛋白酶水平,20例生育男性作对照.采用硝酸还原酶法检测精浆一氧化氮水平;采用吖啶橙染色,计算单链DNA精子比例,对精子DNA完整性进行评估.结果 1、140例不育男性患者(实验组)精浆中的弹性蛋白酶、一氧化氮(NO)浓度、精子单链DNA百分比明显高于生育男性(对照组)(P<0.001).2、弹性蛋白酶浓度与患者年龄(r=0.255,P<0.01)及精液中白细胞数(r=0.569,P<0.01)有正相关关系.3、弹性蛋白酶浓度与精液量(r=-0.537,P<0.01)及精子单链DNA比率(r=-0.436,P<0.01)呈负相关关系;与精浆NO浓度无相关关系(r=0.083,P=0.331).结论 精浆中粒细胞弹性蛋白酶检测对诊断无症状性生殖道炎症是一种可靠的筛查试验,另外,弹性蛋白酶可能对精子DNA有保护性作用.

    作者:魏小斌;白志明;李春芸;刘振湘 刊期: 2009年第11期

  • 由拉米夫定导致乙肝患者HBV YMDD变异主要原因分析

    拉米夫定是近年来临床应用较广泛的治疗慢性HBV感染的胞嘧啶核苷类药物,可有效抑HBV多聚酶的逆转录活性,使血清HBV DNA含量明显降低,提高血清HBeAg/HBeAb转换率,改善肝功能,具有较强的抗乙肝病毒的作用.但随着拉米夫定治疗时间的延长,出现耐药及HBV多聚酶逆转录酶区YMDD序列发生变异.

    作者:冯恩航;张兰萍;王冬梅 刊期: 2009年第11期

  • 动态分析肾综合征出血热外周血T淋巴细胞亚群及其临床意义

    目的 动态研究肾综合征出血热(HFRS)患者不同临床时期T细胞亚群的变化规律,为临床判断病情、评估预后提供免疫学依据.方法 在HFRS患者的疾病进展期和恢复期分别应用荧光标记单克隆抗体对患者外周血淋巴细胞进行标记,用流式细胞仪检测T细胞亚群.结果 在疾病进展期,CD3+T细胞、CD4+T细胞、CD4/CD8比值均低于恢复期和正常对照组,CD8+T细胞高于恢复期和正常对照组;在疾病进展期,CD4-CD28和CD8-CD28细胞也低于恢复期和正常对照组.结论 HFRS患者在疾病进展期存在T细胞亚群功能紊乱和比例失调,在恢复期得以恢复;动态监测T细胞亚群有助于了解机体细胞免疫情况,可以为判断病情、评估预后提供免疫学依据.

    作者:杨朝辉 刊期: 2009年第11期

  • 802株酵母样真菌对伏立康唑等抗真菌药物的体外敏感性分析

    近二十年来随着广谱抗生素的使用、器官移植的开展、糖皮质激素及免疫抑制剂的广泛应用和介入治疗等,深部真菌感染的发病率呈现逐年增高之势[1].为了解第二代三唑类新药伏立康唑及其他抗真菌药物对临床各种酵母样真菌的体外敏感性,我们统计分析了近一年来临床检出的802株酵母样真菌药敏结果,报告如下.

    作者:张静;蒋蕾;赵华江 刊期: 2009年第11期

  • 代谢基因MPO G-463A多态检测在大肠癌早期诊断中的研究

    目的 探讨MPO G-463A基因多态性与大肠癌易感性的关系.方法 取103例大肠癌组织和143例癌旁正常大肠组织(对照组)的石蜡切片样本,应用聚合酶联反应(PCR)及限制性片断长度多态性(RFLP)进行检测.结果 MPO基因型(GG,GA,AA)在大肠癌组的分布为47.57%、31.07%、21.35%,正常组为27.97%、37.06%、34.97%,两组间比较差异有统计学意义(P<0.05);含MPO G-463A等位片段的基因型在大肠癌组中的分布为38.3%,正常组为53.5%,两组间比较差异有统计学意义(P<0.05).结论 MPO G-463A基因多态性可能是大肠癌发病的一个基因型危险因素,具有对肿瘤进行早期诊断和判断预后的潜在价值.

    作者:孙丽芳;胡立华;王燕颖;赵欣;李秀荣;毛晓光 刊期: 2009年第11期

  • 结核性脑膜炎的诊断现状与研究进展

    结核性脑膜炎(简称结脑)是神经系统结核病常见的类型,是由结核杆菌侵入蛛网膜下腔引起的软脑膜、蛛网膜进而累及脑血管部分可累及脑实质病变的疾病,其死亡率高、致残率高,是一种严重的结核病[1].

    作者:孙力 刊期: 2009年第11期

  • 肝脓肿的CT表现及其相关病理(附17例分析)

    肝脓肿是临床较为常见的疾病,其预后取决于早期诊断及早期治疗.而近年来随着抗生素的广泛应用以及病理演变的个体差异,肝脓肿的影像学表现多种多样,使得该病的诊断具有一定的困难.本文收集了近年来经临床、手术及病理证实的17例共22个病灶的CT表现及临床资料进行回顾性分析,加深对肝脓肿的认识,提高诊断水平.

    作者:成钢;潘润铎 刊期: 2009年第11期

  • 超声引导穿刺活检在关节滑膜病变中的临床应用

    目前,彩色多普勒超声已应用到骨骼与肌肉系统疾病的诊断,尤其对关节及软组织病变的诊断准确性不断提高,可作出一定的定位及定性诊断,但不能提供组织学诊断,彩色多普勒超声引导下穿刺活检技术可弥补这一不足.关节肿痛是一常见病,由于其病因不明确,缺乏特异性临床表现,早期诊断十分困难.彩色多普勒超声引导下穿刺活检,可获得明确的病理学诊断,为临床诊疗提供依据.本文旨在探讨彩色多普勒超声引导下关节滑膜穿刺活检在关节滑膜病变中的临床应用价值.

    作者:冯海艳;刘庆鑫;宋军;周建平;王辉 刊期: 2009年第11期

  • 肝硬化的门静脉血流改变与血清甲状腺激素水平关系的探讨

    肝硬化是一种常见的慢性疾病,失代偿期的症状显著为肝功能减退,可出现内分泌系统的紊乱,导致雌激素增多、雄激素及糖皮质激素减少已被公认[1]. 肝硬化患者甲状腺激素水平的变化,报道较少.本研究目的是观察肝硬化的超声改变与血清甲状腺激素水平以及肝功能Child-Pugh分级的关系.以评价肝硬化患者的甲状腺功能,对于评估病情的严重程度,指导治疗以及判断预后有重要意义.

    作者:闫威;丁怡敏 刊期: 2009年第11期

  • 血清脂蛋白(a)检测在临床疾病诊断中的意义

    血清脂蛋白(a)[Lipoprotein(a),Mp(a)]是1967年由挪威遗传学家Berg[1]首先发现并命名的,主要由蛋白质、类脂和糖类组成,是载脂蛋白a(Apoa)和载脂蛋白B(ApoB)两部分以二硫键共价结合的一种低密度脂蛋白(LDL).Lp (a)的升高与许多疾病密切相关.本研究首先对心脑血管疾病、肾病、2型糖尿病患者以及正常对照组个体的血清中Lp (a)含量进行测定,以探讨其在临床疾病诊断中的作用.并对冠心病(CHD)组与对照组做进一步比较,分析CHD患者的血清Lp(a)水平,旨在评价Lp (a)对CHD的诊断价值及地位.

    作者:安月;李振国;王敏;鲁颖 刊期: 2009年第11期

  • 骨髓单个核细胞抗人球蛋白分型试验在免疫相关性全血细胞减少症(IRP)中的诊断意义

    本文研究骨髓单个核细胞抗人球蛋白分型试验在诊断免疫相关性全血细胞减少症(IRP)的临床意义.90例血细胞减少症患者入院后完善血清铁蛋白(SF),叶酸(FA)及维生素B12浓度,免疫学检查,血小板抗体,乙肝六项,甲肝及丙肝抗体、溶血相关检查、骨髓涂片及染色体核型分析等常规检查.实验组:28例拟诊免疫相关性全血细胞减少症.阳性对照组:自身免疫性溶血性贫血19例.阴性对照组:43例,包括再生障碍性贫血12例、骨髓增生异常综合征14例、巨幼细胞性贫血10例,阵发性睡眠型血红蛋白尿3例,缺铁性贫血4例.所有患者均进行骨髓单个核细胞抗人球蛋白分型试验.结果 28例拟诊免疫相关性全血细胞减少症患者中13例骨髓单个核细胞抗人球蛋白试验阳性,阳性率为46.43%,抗体结合类型以IgG型多见,IgA型较少.19例阳性对照组中仅2例骨髓单个核细胞抗人球蛋白分型试验阳性,阳性率为10.53%.43例阴性对照组中1例骨髓单个核细胞抗人球蛋白试验阳性,阳性率为2.33%.实验组骨髓单个核细胞分型试验阳性率显著高于阳性对照组及阴性对照组(P<0.01). 结论骨髓单个核细胞抗人球蛋白分型试验为免疫相关性全血细胞减少症的诊断提供了一定的依据,并有利于制定更有效的治疗策略,而且为血细胞减少症的鉴别诊断提供了更多的检测手段.

    作者:李燕;王晓敏;富玲;木拜尔;聂玉玲 刊期: 2009年第11期

  • 胰腺实性-假乳头状瘤11例临床分析

    胰腺实性-假乳头状瘤(SPT)是近年来所认识的一种新型的少见胰腺肿瘤,因具有良性或低度恶性的临床病理及较高的手术治愈率,而引起临床关注.作者回顾性分析经我院手术后病理证实的11例患者,旨在探讨和分析图像特征,提高对本病的认识和诊断水平.

    作者:左晓文;王娟;王海燕;孙玉华 刊期: 2009年第11期

  • 病例引导结合验单分析教学法在实验诊断学教学中的应用探索

    实验诊断学(laboratory diagnosis)是大诊断学的重要组成部分,是将检验医学提供的实验室结果应用于临床诊断、疗效观察、预后估计和健康评价的桥梁学科,是临床医生诊疾病的重要方法和手段,也是医学生必须学习的重要课程之一,医学生学习的好坏直接关系到将来医生应用实验室诊断的水平.

    作者:程涌江;李丽;卢卫国 刊期: 2009年第11期

  • 急性冠脉综合征肌酸肌酶升高的临床分析

    目前急性心肌梗死(AMI)的诊断通常使用世界卫生组织1979年的修订标准[1].选项标准以肌酸激酶(CK-MB)测定为基础.对于ACS病人,数据显示肌钙蛋白Ⅰ和T是更敏感和特异的预后指标.因此,在2000年欧洲心脏学会和美国心脏学会共同会议建立了一个新的AMI诊断标准:肌钙蛋白和CK-MB的升高均为诊断标准之一[2,3].我们在此探讨初肌钙蛋白Ⅰ正常,而CK-MB升高对预后的影响.

    作者:张雪莲;张广成;陈立涛 刊期: 2009年第11期

  • 肺癌患者血清环氧化酶-2的水平及临床意义

    目的 探讨环氧化酶-2(COX-2)在肺癌患者血清中的表达情况以及病理类型、临床分期、预后关系.方法 用ELISA方法检测56例肺癌患者血清COX-2水平,比较不同患者血清COX-2水平差异.结果 血清COX-2水平在非小细胞肺癌患者明显高于小细胞肺癌患者,Ⅲ+Ⅳ期患者高于Ⅰ+Ⅱ期患者,有淋巴结转移者高于无淋巴结转移者.结论 血清COX-2水平可用于非小细胞肺癌病理类型、分期、转移、预后的评估.

    作者:张爽;王杨;丁慧鑫 刊期: 2009年第11期

中国实验诊断学杂志

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主办:吉林大学中日联谊医院 上海交通大学医学院附属瑞金医院