学术投稿

在人消化道肿瘤细胞表面构建α-gal表位的研究

张睿;迟宝荣;朱学伟

关键词:α-1, 3-半乳糖基转移酶, α-gal表位, 催化结构域, 人消化道肿瘤, 肿瘤疫苗
摘要:目的 在大肠杆菌中以可溶性形式表达鼠源性α-1,3-半乳糖基转移酶的催化结构域(α1,3 GTcd;catalytic do-main of α1,3GT),利用其在人消化道肿瘤细胞表面构建α-gal表位(Galαl-3Gal-β1-4GlcNAc-R),拟用来制备一种新的自体肿瘤疫苗.方法 利用pET-15 b载体以可溶性形式表达鼠源性α1,3 GTcd,利用高效液相色谱阴离子交换柱检测酶的活性.通过其在人不同消化道肿瘤细胞表面构建α-gal表位,先与人血清孵育,FITC标记的羊抗人的IgG为第二抗体,用流式细胞仪检测荧光强度,以分析α-gal表位的表达结果.结果 可溶性高效表达与纯化了带有His-tag的α1,3GTcd并利用HPLC阴离子交换柱检测α1,3 GTcd的活性.流式细胞仪检测结果证明了在人消化道肿瘤细胞表面成功构建了α-gal表位.结论 本研究可溶性的表达了α1,3 GTcd,并利用其在人消化道肿瘤细胞表面成功地构建了α-gal表位.为该方法的临床治疗的应用打下坚实的基础.
中国实验诊断学杂志相关文献
  • 江汉平原儿童全血微量元素分布特点

    微量元素是参与机体组成的化学成份[1],必需微量元素缺乏可对人体产生不良影响[2],并引发相应疾病.由于微量元素的含量与人体所处外界环境有重要关系,因此在不同地区的不同人群体内的微量元素含量也不相同.我们结合本地的实际情况,对当地的人群进行大范围的微量元素测定,现将结果报告如下.

    作者:田宇 刊期: 2007年第03期

  • 化疗药物对体外培养同步化MCF-7细胞存活和凋亡的影响

    目的 探讨不同化疗药物在体外培养的经TAM同步化MCF-7细胞存活率和凋亡的影响.方法 以体外培养雌激素受体阳性细胞MCF-7为研究对象,采用MTT法和流式细胞术法检测MCF-7细胞存活率和细胞凋亡.结果 体外培养的MCF-7细胞的倍增时间是33 h,TAM可使MCF-7同步化于G0/G1期,5-Fu、DDP、ADM在中低剂量时可使同步化的MCF-7细胞存活率降低,与不同步化组比较差异具有显著性(P<0.05).采用流式细胞术方法检测DDP、ADM中低剂量组可使经TAM同步化的MCF-7细胞PCD%增加,与不同步化组相比较差异具有显著性(P<0.05).结论 不同化疗药物可诱导经TAM同步化的细胞发生凋亡.

    作者:刘亚辉;刘波;谭岩 刊期: 2007年第03期

  • 乳腺癌患者血清ADA及其同工酶的检测分析

    目的 探讨ADA总活性及其同工酶ADA1和ADA2活性与乳腺癌发生发展的关系.方法 应用日立7150全自动生化分析仪,采用酶显色法测定ADA总活性;在反应体系中加入ADA1的抑制剂后,再测定ADA的活性,即为ADA2的活性;通过计算求得ADA1活性.分别检测112例乳腺癌患者和98例对照组ADA、ADA1和ADA2的活性.根据有无绝经、肿瘤大小、淋巴侵袭进行分组,分析不同组别的差异性.结果 乳腺癌患者的血清ADA和ADA2的活性明显高于对照,ADA1活性无差异;乳腺癌患者中绝经后的血清ADA和ADA2活性高于未绝经者;肿瘤大小、淋巴浸润组无统计学意义.结论 乳腺癌患者的血清中ADA和ADA2的活性增高,可能与年龄和激素水平有关,与乳腺癌的预后无关.

    作者:孔虹;梁彬 刊期: 2007年第03期

  • 头孢西丁纸片扩散法检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌及其耐药状况分析

    我们对我院2004年1月-2005年12月间分离到的254株金黄色葡萄球菌采用头孢西丁纸片散法检测到耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)87株,并对其耐药状况进行回顾性分析,结果报告如下.

    作者:王萍;周丽华 刊期: 2007年第03期

  • 16例小儿慢性粒细胞白血病的血象和骨髓象分析

    慢性粒细胞白血病在小儿时期较少,约占儿童白血病的3%-5%[1],其中主要为慢性粒细胞白血病.现将近8年诊治的16例小儿慢粒患者的血象及骨髓象分析如下.

    作者:张秋桂 刊期: 2007年第03期

  • 47,XX,(+18)染色体病1例报告

    先天性染色体数目异常或结构畸变而发生的疾病,称为染色体病或染色体综合征.现已发现人类的染色体数目异常和畸变约10000余种.除平衡易位携带者和少数性染色体异常外,智能低下和发育迟缓几乎是所有染色体异常患者共同的特征.18三体综合征在临床上存活病例少见,本文就疾病的诊断分析如下:

    作者:王军荣;刘志婷;续薇;关宝杰 刊期: 2007年第03期

  • 精神疾病患者心肌酶检测结果分析与临床评价

    心肌酶活性有明显改变,临床上一般用于监测心肌功能状态,是急性心肌梗死(AMI)早期诊断和病情监测的指标.我们在临床检测中发现很多精神病患者呈现心肌酶谱异常,为探讨精神疾病患者血清心肌酶谱的变化是否与病种和病情有关,我们对357例住院病人进行了心肌酶谱检测,报道如下.

    作者:凌迎春;徐红英 刊期: 2007年第03期

  • 对500例阴道炎病原体检测情况分析

    近年来,阴道炎有逐步上升超势,尤其是多种病原体合并感染已成为目前临床上一个非常棘手的问题[2-3],笔者应用超高倍显微诊断仪对500例炎性阴道分泌物进行动态检测,分析统计病原体感染状况并报告如下.

    作者:谢冰 刊期: 2007年第03期

  • 冠心病患者发生阿司匹林抵抗的有关研究

    目的 探讨冠心病患者发生阿司匹林抵抗的概率以及相关影响因素方法 79名冠心病患者服用阿司匹林(100 mg/d)7天以上,分别用ADP和AA作诱导剂,检测血小板聚集功能.结果 用光学法(广为使用的方法)测定血小板聚集功能,阿司匹林抵抗发生率为11.4%(n=9).阿司匹林抵抗组高血压患者的比率(44.4%)与阿司匹林敏感组(25.0%)比较有显著差别(P=0.01).结论 对服用阿司匹林的患者要检测其血小板聚集功能.高血压患者易发生阿司匹林抵抗,这提示这类患者要调整抗血小板药物,加大阿司匹林的剂量或换用其他抗血小板药物.

    作者:辛晓敏;金英玉;张云平;李洁 刊期: 2007年第03期

  • 尿微量蛋白联合检测对早期糖尿病肾病诊断价值分析

    目的 探讨尿微量蛋白联合检测对早期糖尿病肾病(DN)的诊断价值.方法 采用免疫速率散射比浊法,检测80例尿蛋白定性阴性的DM患者及60例健康对照者的尿MA、TRF、IgG、αl-MG、RBP、β2-MG的含量.结果 DM尿6种微量蛋白水平均显著高于对照组(P<0.01),阳性率分别为MA(43.2%)、TRF(47.8%)、IgG(36.4%)、al-MG(40.7%)、RBP(53.8%)、β2-MG(59.6%),联合检测阳性率为85.7%.结论 尿MA、TRF、IgG、al-MG RBP及β2-MG可作为DN早期诊断的灵敏指标,并且6项指标联合检测有助于提高阳性率.

    作者:曹忠帅;马淑红;孙淑艳;密宇仙 刊期: 2007年第03期

  • 正电子发射型断层显像仪的临床应用

    正电子发射型断层显像仪(PET)是利用发射正电子的放射性核素及其标记化合物为显像剂对脏器或组织进行功能、代谢和分子成像的仪器.广泛应用于肿瘤、神经与精神疾病以及心血管等疾病的诊断、治疗与研究中,是本世纪重要的成像设备.

    作者:张浩然;高识;马庆杰 刊期: 2007年第03期

  • 结肠癌病人手术前后血中CK-20 mRNA检测的临床意义

    目的 探讨结肠癌病人手术前后外周血中CK-20 mRNA水平变化的情况,从而判断肿瘤微转移情况.方法 采用逆转录多聚酶链式反应方法(RT-PCR方法),以CK-20 mRNA为靶基因,检测了38例结肠癌病人手术前后CK-20mRNA表达情况.结果 结肠良性疾病组CK-20 mRNA表达均为阴性.结肠癌组(38例)术前CK-20 mRNA阳性率为23.7%(9/38),术后阳性率为37%(14/38),术后明显高于术前(P<0.05).A组(术中先结扎回流静脉及切断相应系膜)术前术后阳性率为30%(6/20),B组(不结扎回流静脉及不切断相应系膜)术前阳性率为35%(7/20),术后阳性率为50%(19/20),B组术后阳性率明显高于术前(P<0.05).结论 结肠癌病人(B期、C期)术前已有部分病人血中存在游离癌细胞,手术中的牵拉刺激可能增加癌细胞扩散的可能性,术中先结扎回流静脉及切断相应系膜可起到阻止癌细胞血行播散的可能性.

    作者:乔士兴;乔昕;宋斌 刊期: 2007年第03期

  • 乙醇脱氢酶在各类肝损伤中的变化

    乙醇脱氢酶(Alcohol delydrogenase,简称ADH)的系统名为:乙醇:辅酶Ⅰ氧化还原酶(alcohol:NAD+oxidoreductase).ADH催化乙醇氧化生成的乙醛,可在体内进一步氧化成乙酸,并氧化成乙酰辅酶A,或经三羧酸循环彻底氧化供能,或作为某些物质(如脂酸,胆固醇等)的合成原料.体内ADH的分布有较高的器官特异性,除肝脏含量丰富外,其他组织如视网膜、胃、小肠黏膜及肾的ADH含量甚微,多数器官如心、胰、骨骼肌及红细胞等均不含此酶[1].肝内ADH主要位于细胞液(占80%-90%),少量位于微粒体(3%-12%)和线立体(4%-6%).这些活性的95%分布于肝小叶中心区.本人对我院住院的各类肝损害患者的血清ALT AST GGT ALP ADH进行检测,以探讨血清ADH与ALT AST GGT ALP活性的相关性及ADH各类肝实质损伤之间的关系.

    作者:周泽云 刊期: 2007年第03期

  • 哮喘病人外周血CD4+ T淋巴细胞自噬现象的观察

    目的 观察分离培养的哮喘病人外周血CD4+ T淋巴细胞的自噬现象.方法 密度梯度离心法、尼龙棉柱法及磁分离法分离哮喘病人外周血CD4+ T淋巴细胞,分空白组及地塞米松(DXM)组,培养72 h后用流式细胞仪检测自噬细胞比例变化.结果 DXM组与空白组72 h自噬细胞发生率有显著性差异.结论 DXM可诱导哮喘病人外周血CD4+ T淋巴细胞自噬.

    作者:孟宪明;黄勤欢;黄瑾 刊期: 2007年第03期

  • 小儿肾病、乙肝患者血清CaM与抗CaM自身抗体的测定研究

    目的 研究小儿疾病患者血清中CaM含量和抗CaM自身抗体阳性检出水,探讨CaM及抗CaM抗体与临床小儿疾病的关系.方法 优化实验反应条件,建立检测CaM和抗CaM抗体的ELISA测定方法,并将其初步应用于临床小儿疾病患者血清CaM和抗CaM自身抗体水平测定.结果 优化后的ELISA对CaM和抗CaM自身抗体的实验结果特异、敏感、可靠.在CaM浓度为39 ng/ml-2500 ng/ml范围内,该法对CaM的测定具有良好的线性关系,相关系数(r)大于0.99.临床研究结果表明,各类小儿肾脏疾病血清CaM含量与抗CaM自身抗体均处在与正常对照组相同的水平.但在小儿乙型肝炎患者血清中,两者水平均显著高于正常对照组.25例被检者中分别有5例CaM水平升高,有6例为抗CaM自身抗体阳性,其中有5例为二者水平同时升高.结论 小儿在感染乙型肝炎病毒的发病过程中,即伴有一定程度的CaM和抗CaM自身抗体水平升高,据比推测抗CaM抗体在继发引起小儿自身免疫性肝损害的过程中可能起一定作用.

    作者:谈华;王惠云;虞伟;李晓军;武建國 刊期: 2007年第03期

  • PCR-SSCP法检测耐多药结核分支杆菌耐药性

    我国是结核病疫情严重的国家之一,其主要原因是耐药和耐多药结核病的广泛分布和迅速传播.异烟肼(INH)和利福平(RFP)均是抗结核的一线药物,对于其作用机理及结核杆菌的耐药机制的研究日益受到重视.据报道认为结核分支杆菌耐与RNA聚合酶的β亚基的编码基因rpoB的突变有关;耐异烟肼的产生是过氧化氢酶-过氧化物酶的编码基因KatG基因的缺失和突变有关,也inhA基因突变也有相关性[1,2].我们采用PCR-SSCP银染法直接检测临床分离株中结核分支杆菌rpoB基因和KatG基因突变,现将结果报告如下.

    作者:于宏波;宋阳;侯晓杰;韩中波 刊期: 2007年第03期

  • 糖尿病患者肾脏早期损害指标的探讨

    糖尿病肾病是糖尿病重要并发症之一,各类因糖尿病所致肾功能损伤日益增多,是导致末期肾功能衰竭的重要原因.因此,对糖尿病肾病的防治,尤其是对早期糖尿病肾病的及早发现更是有着重要的意义.我们通过对98例糖尿病患者的尿蛋白定性(URO)、尿微量白蛋白(mAlb)、N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)测定,以探讨糖尿病患者肾脏早期损害的监测指标.

    作者:李毅;詹贞芳;谢必会;宋智盛 刊期: 2007年第03期

  • 原发性胆汁性肝硬化患者肝组织和外周血单个核细胞Fas、FasL的检测

    目的 通过原发性胆汁性肝硬化患者肝组织和外周血单个核细胞Fas、FasL的表达,探讨Fas、FasL在原发性胆汁性肝硬化患者发病机制中的作用.方法 应用免疫组织化学技术,以兔抗Fas及兔抗FasL多克隆抗体,对20例原发性胆汁性肝硬化(PBC)患者肝组织和外周血单个核细胞中的Fas、FasL进行检测.结果 18例PBC患者外周血单个核细胞检出Fas、FasL,检出率均为90%,Fas、FasL平均阳性细胞数分别为62%、59%.20例PBC患者16例Fas阳性颗粒表达于肝细胞胞浆,4例表达于肝细胞胞膜;20例FasL棕黄色阳性颗粒均表达于肝细胞胞浆,Fas、FasL在肝组织中浸润的淋巴细胞胞浆有表达,并多聚集于汇管区周围.结论 PBC患者的Fas、FasL表达增加,它们在PBC的发病机制中发挥重要作用.

    作者:刘妍;闫惠平;唐乐;张立洁;冯霞;檀玉芬;马冬梅;李伟华 刊期: 2007年第03期

  • 重组促红细胞生成素对血液透析患者铁代谢的影响

    目的 测定维持性血液透析患者血清促红细胞生成素(erythropoietin,EPO)及铁参数,探讨血液透析患者的铁代谢状况及重组EPO(recombinant human erythropoietin,rh-EPO)治疗对铁代谢的影响.方法 选择单纯血液透析和接受rh-EPO治疗的血液透析患者31例,分别测定血常规及血清EPO、铁参数,并与健康对照组进行比较.结果 血液透析患者和rh-EPO治疗的血液透析患者RBC、Hb、Hct、SI、TS显著低于健康对照组(P<0.05,P<0.01),SF、sTrFR和TIBC高于健康对照组,尤其是sTrFR和血液透析组的SF显著升高(P<0.05).血清EPO的检测3组间无明显差异.结论 血液透析患者存在贫血伴缺铁及铁代谢紊乱.给予rh-EPO治疗可改善肾性贫血,同时改善铁代谢紊乱.rh-EPO的应用对血液透析患者体内EPO水平影响不大.

    作者:杜玉君;王冠军;窦海川;艾清 刊期: 2007年第03期

  • CD44拼接变异体V6与上皮钙粘附素在胰腺癌中的表达及意义

    目的 探讨CD44拼接变异体V6(CD44 Splice varint V6,CD44V6)和上皮钙粘附素(E-Cadherin,E-CD)在胰腺癌中表达及与胰腺癌浸润、转移的关系,评价CD44V6和E-CD在胰腺癌浸润转移中的作用.方法 采用SP免疫组化染色方法,检测43例胰腺癌组织中CD44V6和E-CD的表达情况.结果 正常胰腺导管上皮细胞CD44V6呈阴性表达,胰腺癌组织中CD44V6阳性表达率达58.1%(25/43),CD44V6阳性表达与胰腺癌浸润深度、淋巴结转移情况密切相关(P<0.05),与胰腺癌组织分化程度无关(P>0.05).正常胰腺导管上皮细胞E-CD呈强阳性表达,60.5%(26/43)的胰腺癌组织中E-CD呈异常表达,E-CD的异常表达与胰腺癌组织分化程度、浸润程度、淋巴结转移情况关系密切(P<0.01).CD44V6和E-CD在胰腺癌中的表达无明显相关性(P>0.05).结论 CD44V6阳性表达和E-CD异常表达与胰腺癌浸润、转移关系密切,检测CD44V6和E-CD表达有助于对胰腺癌浸润转移潜能的判断,二者可以作为胰腺癌浸润转移的生物学指标.

    作者:介建政;田力;王巍;刘治滨;王文跃 刊期: 2007年第03期

中国实验诊断学杂志

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