学术投稿

基因重排检测技术操作体会及注意事项

倪灿荣;张太明;何妙侠;陈颖;朱明华

关键词:基因重排, Ig, TCR
摘要:临床表现、形态学、免疫表型以及分子遗传学特征对淋巴组织增生性病变的诊断均具有重要的意义,尤其是分子遗传学特征是确定淋巴组织增生性病变的克隆性及其细胞来源的可靠依据.近年来开展的PCR法基因重排检测技术,能从DNA水平更早期、敏感、精确地在亚病理与亚临床阶段检测出肿瘤性克隆,对淋巴造血组织疾病的良恶性判断具有重要意义.该技术目前已用于淋巴造血组织疾病良恶性诊断、肿瘤性病变的追踪及复发预测等方面.本文就基因重排检测技术和在日常工作中的操作体会、改进意见、注意事项以及与病理形态学诊断有关的一些问题做一简单总结.
临床与实验病理学杂志相关文献
  • XXIV型蛋白酶在肾穿组织石蜡切片HBV免疫组化染色中应用

    肾组织中HBV标记物阳性是诊断乙型肝炎病毒相关性肾炎(HBV-N)的重要条件之一[1].国内外大多数临床肾病实验室采用免疫荧光方法检测肾穿组织中HBV标记物,但也有不少实验室采用免疫组化方法检测该项指标.

    作者:王晨;郑智勇;曾玲 刊期: 2007年第04期

  • Castleman病并发霍奇金淋巴瘤1例报道及文献复习

    目的 探讨Castleman病(Castleman's disease,)并发霍奇金淋巴瘤(Hodgkin′s lymphoma,HL)的诊断要点与发病机制.方法 应用病理组织学、免疫组化技术对1例并发HL进行分析.结果 具有弥漫性多细胞成分的背景中有散在胸腺小体样生发中心和双核、单核、多核及嗜酸性大核仁的R-S细胞(30与15膜点阳性).本例与文献报道共23例并发HL病例中,浆细胞型占73.9%(17/23).HL中滤泡间HL 12例,NSHL 6例,两者占78.3%(18/23).结论 并发HL病例多发于浆细胞型、滤泡间与NSHL,其发病机制可能与生发中心B细胞、HL的R-S细胞及组织细胞产生IL-6以及患者免疫机能异常有关.

    作者:张林;朱梅刚;赵川 刊期: 2007年第04期

  • 婴儿型纤维肉瘤的临床病理分析

    目的 探讨婴儿型纤维肉瘤的临床病理学特征、诊断、鉴别诊断和预后.方法 收集12例手术切除的婴儿型纤维肉瘤的临床资料进行肉眼观察、光镜和免疫组化检查,并进行随访.结果 12例中,男性患儿5例,女性7例;平均年龄(4.7±4.4)个月,术前病程(18.7±30.5)个月.肿块以胸背部和头颈部好发,平均直径(5.8±3.2)cm,无包膜.镜下梭形细胞形态较一致,致密,排列成鲱鱼骨样,核分裂显著,胶原纤维较少或缺乏.瘤细胞免疫组化染色表达vimentin,SMA、MSA染色结果不明确.手术切除后未见局部复发及转移的病例.结论 婴儿型纤维肉瘤大多发生于1岁之内,染色体的检查可帮助诊断,治疗以广泛局部手术切除为主,可辅以化疗.需与婴幼儿纤维瘤病、恶性纤维组织细胞瘤、横纹肌肉瘤、良性或恶性神经鞘瘤、平滑肌肉瘤、滑膜肉瘤、血管外皮瘤及成人型纤维肉瘤相鉴别.

    作者:张忠德;殷敏智;奚政君;吴湘如 刊期: 2007年第04期

  • 促纤维增生性恶性黑色素瘤临床病理学研究进展

    促纤维增生性恶性黑色素瘤(desmoplastic melanoma,DM)是浸润性皮肤恶性黑色素瘤的一种少见亚型,占所有皮肤恶性黑色素瘤不到4%.自DM首次报道以来,目前文献中已有600余例报道[1,2].DM作为梭形细胞黑色素瘤的一种类型,病理学特征为梭形的恶性细胞被胶原纤维或纤维性间质分隔,细胞有不同程度的异型性、细胞密度增加和纤维化.DM的病理学特征非常轻微,不同于普通型黑色素瘤,特别是当其促纤维增生性痣、皮肤纤维瘤或纤维瘤病.为了提高对该病的认识,现就其组织学发生、临床病理学特征、免疫组化表型及鉴别诊断、治疗和预后作一综述.

    作者:黄文斌;周晓军 刊期: 2007年第04期

  • 甲状腺微小浸润型滤泡癌组织学诊断与鉴别诊断

    甲状腺滤泡癌(follicular carcinoma, FC)是由甲状腺不同分化的滤泡结构组成而缺乏乳头状癌核特征的甲状腺恶性上皮性肿瘤,包括嗜酸细胞性(Hurthle 细胞)癌,占甲状腺恶性肿瘤的10%~15%,女性多于男性,高发年龄为50~60岁,儿童期少见.组织学类型分为微小浸润型(minimally invasive follicular carcinoma, MIFC)与广泛浸润型(widely invasive form)后者瘤组织广泛浸润生长,易于确诊,而MIFC具有包膜,与相应的腺瘤区别主要依据瘤组织浸润包膜与血管的病变确诊[1].目前有关瘤组织浸润包膜与血管的识别及诊断标准尚存在争论.常导致病理工作者的困惑或误诊[2,3].为此作者查阅有关文献,重点探讨MIFC包膜与血管浸润的不同观点,为同道提供有益的参考.

    作者:朱梅刚 刊期: 2007年第04期

  • 肾管状囊性癌

    1 临床资料患者,男,46岁,因左侧腰背部不适1月,CT发现左肾占位1周入院,无血尿.先行肿块切除,后行左肾根治术.

    作者:刘强;高润霖;朱建善 刊期: 2007年第04期

  • 全国性免疫组织化学质量控制活动介绍及总结

    1 质控活动介绍免疫组织化学染色在病理诊断中的作用已经得到了广泛的认同.然而,免疫组化是一种多步骤、多因素决定的实验方法,由于各实验室采用的组织处理、染色方法、抗体来源和抗体克隆号的不同,染色结果有时会出现较大差异,不合格的染色切片时有发生.至今相当部分的实验室对免疫组化标准化尚欠足够重视, 不合格的染色结果会影响病理医师做出正确的诊断,因此,免疫组化染色结果的可靠性受到了极大的关注[1].在英国、北欧和美国相继开展了免疫组化质量控制工作,建立了一套比较完善的质量控制方法和程序[2].

    作者:周小鸽 刊期: 2007年第04期

  • 恶性血管内乳头状血管内皮瘤1例

    患者,男,18岁,因右肘部肿物1年,伴疼痛10日入院.曾于10年前在同部位切除过类似肿物,当时因条件受限未送病理诊断,今复发.

    作者:郑景鹤;纪立功 刊期: 2007年第04期

  • 实体组织单细胞悬液制备方法

    在实际工作中由于机器操作和手工操作均不能保证每张玻片的条件一致,因此到目前为止还没有有效可靠的对照方法,故其标准化问题日益受到大家的重视.我们以新鲜组织和固定组织为标本,探讨实体组织单细胞悬液制作的具体过程,为实现一一对照式原位玻片检测技术寻求一套全面、可靠的技术方法.

    作者:任兴昌;方黎;陈洪勋 刊期: 2007年第04期

  • VEGF、survivin、bcl-2在膀胱移行细胞癌中的表达和意义

    肿瘤血管形成过程复杂,其中血管内皮细胞生长因子(VEGF)发挥重要作用.膀胱移行细胞癌发生、发展受多种基因调控.survivin蛋白作为凋亡抑制蛋白(inhibitor of apoptosis protein,IAP)家族中的IAP蛋白,其结构独特,与多种肿瘤的恶性程度和预后密切相关.bcl-2基因具有抑制细胞凋亡和延长细胞存活的功能,它不加速细胞分裂、增殖,而是促进细胞生存.

    作者:万丽;任雨;吴秀玲 刊期: 2007年第04期

  • 直肠类癌20例临床病理分析

    目的 探讨直肠类癌的临床病理、免疫组化特点及其与预后的关系. 方法对20例直肠类癌临床及病理资料进行复习,应用SP法免疫组织化学染色,并随访.结果 20例均为典型类癌,组织构型上可分为实性小巢状或岛状、梁状、腺管状、混合性等四种.免疫表型20例Syn均阳性,14例CgA阳性, 20例CEA均阴性.本组病变均位于距肛门10 cm以内,20例共22个病灶,直径≤1 cm者13个,均位于黏膜固有层;1.1~2 cm者7个,其中4个侵犯黏膜下层,3个侵犯浅肌层;2个>2 cm者均侵犯深肌层;肿瘤≤2 cm者的Ki-67阳性表达率均<5%或阴性.17例获随访者均存活.结论 直肠类癌生物学行为低度恶性,一般不侵犯肌层,也很少转移,大多数病例可以在内镜下行黏膜切除术获得治愈.免疫组化Syn染色可作为直肠类癌的首选内分泌标记物.

    作者:刘志;张新华;汪芳裕;周航波;章如松;周晓军 刊期: 2007年第04期

  • 男性164例锁骨上淋巴结转移瘤的病理学特点

    目的 分析男性锁骨上淋巴结转移瘤的某些病理学特点,为推测男性锁骨上淋巴结来源未明转移瘤(MUO)的可能原发部位提供参考性诊断思路.方法 对近20年(1980~1999年)收验的164例男性锁骨上淋巴结转移瘤患者的年龄、转移瘤的组织学类型和原发部位进行分析,并对其中已知原发瘤部位(MKO)的131例患者年龄、受累及淋巴结侧位、转移瘤基本组织学类型等与原发瘤部位进行相关性分析.结果 ① 33/164(20.12%)例未知原发部位.② MKO组与MUO组患者的年龄参数总体上相同或趋同. ③ MKO组和MUO组转移瘤皆半数以上为腺癌,居首位,腺癌与鳞癌之比分别为1 ∶ 0.47和1 ∶ 0.52.④原发瘤部位共计14处,皆来自远隔部位,分布于胸腔、腹腔和盆腔(计占96.1%).⑤肺居原发瘤部位之首,且右侧者(77.09%)显著多于左侧(47.06%)(P< 0.01);其次为胃,左侧者(28.74%)显著多于右侧(11.63%)(P<0.05),而后依序为食管、肝、鼻咽、胰腺、消化道(具体部位未明)、喉、眼睑、胆管、大肠、膀胱、前列腺和睾丸.结论 对MUO和MKO组男性锁骨上淋巴结转移瘤的比较分析,显示了两组一些基本参数具有较好的(如年龄、组织学类型)或一定的(如侧位比率)可比性,提示有关男性锁骨上淋巴结MKO组原发瘤部位的资料对于推测该处淋巴结MUO组患者的转移瘤原发部位具有一定的参考意义.

    作者:杨晶;张亮;张乃鑫;赵天如 刊期: 2007年第04期

  • 髓母细胞瘤8号染色体短臂的杂合性丢失

    目的 研究髓母细胞瘤8号染色体的遗传学异常,寻找与该肿瘤发病机制有关的杂合性丢失位点.方法 通过微卫星分析(microsatellite analysis)方法,应用19个位于8号染色体短臂(8p)上的多态性标记物,检测髓母细胞瘤的杂合性丢失(loss of heterozygosity,LOH). 结果在所检测的23例髓母细胞瘤中,21例为原发肿瘤,2例为复发肿瘤. 染色体8p总的LOH比率为51%(124个LOH/243个可分析位点).我们在8p22-23.2之间发现了一个高比率的共同丢失区,其长度为18.14 cM.结论 染色体8p22-23.1上很可能存在重要的抑癌基因,该基因的丢失可能与髓母细胞瘤发病有关.

    作者:殷晓璐;沈艳莹 刊期: 2007年第04期

  • 甲状腺多结节性增生的克隆性分析

    目的 分析甲状腺结节状增生、甲状腺多发性腺瘤样结节和甲状腺结节状增生背景上的腺瘤样增生结节的克隆起源,为甲状腺多结节性增生的临床诊断和治疗提供依据.方法 采用激光捕获显微切割技术及基于HUMARA基因多态性克隆性分析检测5例甲状腺结节状增生、5例甲状腺腺瘤、12例甲状腺多发性腺瘤样结节、15例甲状腺结节状增生背景上的腺瘤样增生结节是否为肿瘤性增生.结果 HUMARA基因杂合率为86.5%(32/37).5例单纯结节状增生为多克隆,5例单发包膜完整的腺瘤中1例为HUMARA基因纯合子,其余4例为单克隆.12例多发性腺瘤样结节中2例为HUMARA纯合子,4例多发腺瘤样结节中有多克隆性结节(1/3,1/3,1/2,2/2),其中4枚包膜包裹不完整,其余6 例多枚结节均为单克隆且包膜完整.15例甲状腺结节状增生背景上的腺瘤样增生结节中2例为HUMARA纯合子,另13例结节状增生背景均为多克隆,其中8例结节为多克隆(3例无包膜,5例包膜不完整),余5例为单克隆(包膜完整).结论 克隆性分析有助于甲状腺结节状增生和腺瘤的鉴别,而多发性腺瘤和结节状增生伴腺瘤形成的诊断还需要结合包膜的完整性做出判断.

    作者:樊洁;唐峰;包芸;陈忠清;李琼;王虹;许祖德 刊期: 2007年第04期

  • 子宫内膜癌中端粒酶逆转录酶与p53、拓朴异构酶Ⅱα、激素受体、凋亡小体的检测及相关性

    目的 观察端粒酶逆转录酶(hTERT)、p53、拓朴异构酶(TP)Ⅱα、激素受体(ER、PR)、凋亡小体在子宫内膜癌中表达情况,探讨上述因子在子宫内膜癌发生、发展中的作用及其相互关系.方法 收集上海市长宁区中心医院2000~2006年全子宫切除标本54例,其中子宫内膜癌44例,子宫内膜增生反应10例.免疫组化SP法检测子宫内膜癌、子宫内膜增生反应病例中hTERT、p53、TPⅡα、ER、PR的表达情况,并对其染色强度作定量分析.HE切片中观察凋亡小体,高倍镜下计数凋亡小体及TPⅡα阳性细胞.结果 hTERT、p53、TPⅡα、凋亡小体在子宫内膜癌中均有表达,并随着肿瘤组织学分级的增加而表达增强(P<0.05),而在子宫内膜增生反应中上述标志物不表达或仅有微弱表达.ER、PR在子宫内膜增生反应中表达广泛,但在内膜癌组织中表达下降,而且恶性程度越高其表达越少(P<0.05).子宫内膜癌中hTERT表达与p53、TPⅡα、凋亡小体表达成正相关(P<0.01);p53表达与凋亡小体表达成正相关,而与ER、PR表达为负相关(P<0.05).结论 子宫内膜癌中hTERT、p53与细胞凋亡、增殖以及肿瘤恶性程度等密切相关,表明细胞周期失调节在子宫内膜癌发生发展中具有重要作用.

    作者:杨静;张农;陶琨;盛惠珍 刊期: 2007年第04期

  • 膀胱移行细胞癌中促红细胞生成素及其受体的表达

    目的 探讨促红细胞生成素(EPO)及其受体(EPOR)在膀胱移行细胞癌(TCC)组织中的表达,并探讨其临床意义.方法 应用免疫组织化学方法、RT-PCR方法检测70例膀胱TCC组织、15例癌旁组织、10例正常膀胱组织中EPO和EPOR的蛋白和mRNA的表达.结果 70例膀胱TCC组织有44例(62.9%)EPO蛋白阳性表达,有29例(41.4%)EPOR蛋白阳性表达;15例膀胱TCC癌旁组织及10例正常膀胱组织均未见EPO、EPOR蛋白的表达.EPO蛋白表达强度与膀胱TCC的组织学分级相关(rs=0.329,P<0.05),而与临床分期则无明显的相关性.膀胱癌组织中EPO与EPOR表达具有相关性(rs=0.346,P<0.01).RT-PCR检测发现膀胱移行细胞癌组织中EPO及其受体mRNA的表达明显高于正常膀胱组织、癌旁组织中EPO及其受体mRNA的表达(P<0.01).结论 EPO、EPOR在膀胱TCC组织中过表达,提示EPO、EPOR在膀胱TCC的发生、发展过程中可能起重要作用;EPO蛋白表达强度与膀胱TCC的组织学分级有明显相关性,可能成为膀胱TCC不良预后的指标之一.

    作者:宋华;孙颖浩;许传亮;周铁;孟建中 刊期: 2007年第04期

  • 子宫胎盘部位滋养细胞肿瘤1例

    患者,女,35岁,因停经5个月、腹腔出血3 h入院.术中见腹腔大量积血4 500 ml左右,子宫破裂,胎儿、胎盘破入腹腔. 病理检查眼观:子宫壁组织4块,约5 cm×2 cm×1 cm,一面光滑,一面粗糙,切面灰白灰红,质地中等.胎盘16 cm×11 cm×3 cm,胎儿面光滑,脐带偏于一侧,距胎盘边缘近为2 cm;母体面见一血肿7 cm×5 cm×1 cm,未见梗死;脐带长3 cm,直径1 cm,表面光滑.镜检:瘤细胞呈片状、条索状或弥漫性浸润子宫肌间(图1),瘤细胞比细胞滋养细胞大,呈多角形、卵圆形或梭形,少数为瘤巨细胞,胞质较丰富,淡红染或透亮,比合体滋养细胞染色浅.瘤细胞多为单核,少数为双核或多核.可见核仁,未见核分裂象.

    作者:吴晓辉;蔡圣芸;林云;朱明华 刊期: 2007年第04期

  • 婴儿性血管瘤24例临床病理分析

    目的 探讨婴儿性血管瘤的临床病理、免疫组化特征以及鉴别诊断.方法 采用HE及免疫组化技术对24例婴儿性血管瘤进行观察,并结合文献复习.结果 17例呈增殖期图像:细胞丰富,增生的毛细血管排列成小叶状,血管内皮细胞肥胖,管腔不明显,内皮细胞周围为梭形的血管周细胞;7例呈消退期图像:皮下组织中纤维脂肪组织增生,血管减少,残留血管腔扩张,内皮细胞扁平,血管周细胞减少.血管内皮细胞GLUT1阳性, 血管周细胞SMA阳性.结论 婴儿性血管瘤是儿童期常见的良性肿瘤,在年龄、性别、发病部位及病程上具有明显特点,组织学特点是肿瘤由血管内皮细胞及血管周细胞组成,内皮细胞特异性表达GLUT1.

    作者:殷敏智;张忠德;吴湘如;奚政君;储谦 刊期: 2007年第04期

  • 活化肝星状细胞与肝细胞肝癌发生及转移的相关性

    肝星状细胞(hepatic stellate cells, HSC)是一种具有多向潜能的间质细胞,其激活和增殖是肝纤维化相关研究的热点,但其与肝细胞肝癌(hepatocellular carcinoma, HCC)发生、发展的相关性国内外少见报道.我们应用免疫组织化学结合计算机图像分析技术,观察人HCC中HSC的活化情况,并分析其与肝癌临床病理指标的关系.

    作者:王伟;官阳;杨木兰;张春明 刊期: 2007年第04期

  • 皮肤Rosai-Dorfman病1例

    患者,男,35岁,发现右臂皮疹逐渐增大3年,左背皮疹逐渐增大1年来本院就诊.皮疹开始均为米粒大小,之后逐渐增大,无痛、搔痒感,无发热、贫血等症状.曾先后3次于各级医院行皮疹活检,病理诊断为皮肤慢性炎症性病变、淋巴细胞浸润症等.

    作者:王进;郭振英;许敬尧;朱涛 刊期: 2007年第04期

临床与实验病理学杂志

临床与实验病理学杂志

主管:

主办:安徽医科大学;中华医学会安徽分会