张倩倩;杜晓扬;水庆付;褚燕军;王明刚
目的探讨谷胱甘肽 S 转移酶 M1、T1( GSTM1、GSTT1)基因多态性与新疆维吾尔族慢性阻塞性肺疾病( COPD)易感性的关系。方法通过多重聚合酶链反应( PCR)法检测新疆维吾尔族80例COPD患者和80例健康对照者GSTM1、GSTT1的基因型,应用SPSS 17.0软件分析GSTM1、GSTT1基因多态性与COPD易感性的关系;并与其他种族的基因型分布进行比较。结果 COPD 组 GSTM1、GSTT1纯合缺失基因型频率均高于对照组的频率( P =0.015,P=0.010); GSTM1和 GSTT1基因均为纯合缺失型的基因频率在COPD组与对照组间的差异有统计学意义( P=0.002)。以研究对象是否患COPD为因变量经Logistic回归分析(协变量包括年龄、性别、吸烟史、GSTM1及GSTT1基因型),经调整年龄、性别和吸烟史后,发现 GSTM1和GSTT1基因单独纯合缺失型均是COPD的危险因素( OR=2.22,95%CI:1.16~4.25, P=0.016; OR=2.47,95% CI:1.23~4.97, P=0.011),GSTM1和GSTT1同时为纯合缺失型也是 COPD 的危险因素( OR =4.67,95% CI:1.65~13.14, P=0.004)。结论维吾尔族人群中GSTM1纯合缺失型和GSTT1纯合缺失型均与COPD易感性相关。
作者:王妨娥;凌敏;白杰;苟安栓;钱建辉;赵宗峰 刊期: 2014年第03期
阿尔茨海默病( AD)是一种中枢神经系统退行性疾病,致残率、死亡率高。近年来,国内外学者着重研究了传统中药对AD的干预治疗作用,并取得一定成效。现将近5年传统中药及复方制剂干预AD的研究进展做一综述。
作者:王涛涛;程娟(综述);姚余有(审校) 刊期: 2014年第03期
目的探讨Aβ1-42寡聚体侧脑室灌注对大鼠大脑皮质Bcl-2、Caspase-3表达的影响。方法采用Morris水迷宫法筛选出逃避潜伏期少于60 s的60只雄性大鼠随机均分为4组:正常组、PBS 对照组、Aβ1-42纤维组、Aβ1-42寡聚体组。右侧脑室注射Aβ1-42纤维体或Aβ1-42寡聚体复制阿尔茨海默病( AD)模型;PBS对照组注射等量的PBS;正常组不作任何处理。模型建立后第4周,采用Morris水迷宫测试大鼠学习记忆能力的变化,用RT-PCR法检测大鼠皮质Bcl-2、Caspase-3 mRNA的表达,用Western blot法检测AD大鼠皮质Bcl-2蛋白表达以及Caspase-3活性。结果造模后,与正常组和PBS对照组相比, Aβ1-42纤维组、Aβ1-42寡聚体组逃避潜伏期较造模前均延长(P<0.05),Aβ1-42寡聚体组大鼠逃避潜伏期长于 Aβ1-42纤维组大鼠的逃避潜伏期;Aβ1-42纤维组及Aβ1-42寡聚体组脑组织中Bcl-2表达均下调(P<0.05),Caspase-3表达均上调(P<0.05),以Aβ1-42寡聚体组较为显著。结论 Aβ1-42纤维、Aβ1-42寡聚体均可导致大鼠认知功能障碍,抑制大鼠皮质Bcl-2 mRNA表达,上调Caspase-3 mRNA表达,活化Caspase-3,其中,Aβ1-42寡聚体对Bcl-2 mRNA和Caspase-3 mRNA表达影响较大。
作者:陈雪;孙婧霞;曹翠丽;蒋常文 刊期: 2014年第03期
目的探讨CT对腮腺良恶性肿瘤的定性诊断及鉴别诊断价值。方法回顾性分析72例腮腺肿瘤患者CT平扫及增强图像。分析比较肿瘤的分布、形态、密度、边缘、囊变坏死、强化程度、颈部淋巴结肿大情况,并与终病理结果对照。结果病灶80个,其中良性59个,恶性21个。良性组:42个(71.2%)位于腮腺浅叶、形态规则、密度均匀,62.7%边缘清楚,57.6%呈轻中度强化,2例良性肿瘤出现颈部淋巴结肿大,术后病理均炎性肿块。恶性组:12例(57.1%)位于腮腺深叶或跨深浅两叶,15例(71.4%)表现为形态不规则、密度不均匀,81%边缘不清,71.4%增强后明显强化,9例出现颈部淋巴结转移。两组肿瘤形态、边缘、密度、囊变坏死、淋巴结转移差异均有统计学意义(P<0.05),两组发生部位、强化程度差异无统计学意义( P>0.05)。结论 CT可用于定性诊断大部分腮腺良恶性肿瘤。
作者:余韵;颜雨春 刊期: 2014年第03期
血小板在生理性止血和病理性血栓形成中起关键作用。血小板黏附受体GPIb-IX-V复合物能与血管性血友病因子( VWF)、P-选择素、凝血酶等结合,在血小板血栓形成的起始阶段和凝血过程中起重要作用。磷脂酶C( PLC)、磷脂酶A2( PLA2)、14-3-3灼蛋白、细胞骨架等参与 GPIb-IX-V介导的信号通路,现就GPIb-IX-V复合物介导的信号通路作一综述。
作者:胡萍(综述);谢如锋;王志成(审校) 刊期: 2014年第03期
目的通过构建真核表达pEGFP-C2-ASIC2a质粒,转染大鼠关节软骨细胞,建立ASIC2a在关节软骨细胞中过表达的模型,观察 ASIC2a mRNA及其蛋白在细胞中的表达。方法从大鼠脑组织中提取目的基因ASIC2a,并用EcoR玉和Kpn玉进行双酶切,同时用这两种酶双酶切质粒pEGFP-C2,将其酶切产物按常规方法连接并转化入大肠杆菌DH5a,挑单克隆菌进行培养,提取质粒,再通过双酶切鉴定及测序后,用Lipofectamine 2000将所构建质粒转染入关节软骨细胞,在荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白的表达,使用RT-PCR和Western blot法检测ASIC2a mRNA和蛋白表达,以鉴定模型建立成功与否。结果进行双酶切鉴定目的条带清晰准确,转染后可在荧光显微镜下观察到绿色荧光表达,通过RT-PCR可发现mRNA转录,Western blot法可发现目的蛋白表达。结论成功构建重组pEGFP-C2-ASIC2a表达载体,将用于进一步观察ASICs对软骨细胞的影响。
作者:倪文琳;唐杰;潘春晓;葛金芳;陈飞虎 刊期: 2014年第03期
目的研究巨噬细胞转移抑制因子( MIF)及血管内皮生长因子( VEGF)在膀胱尿路上皮癌( BTCC)组织中表达水平及其临床意义。方法采用实时荧光定量 PCR ( RT-qPCR)及免疫组化法检测MIF及VEGF在BTCC及正常膀胱黏膜组织中的表达水平,并进一步分析MIF及VEGF与患者临床病理特征之间的关系。结果 RT-qPCR 结果显示MIF mRNA及VEGF mRNA在BTCC组织中的表达水平均高于正常膀胱黏膜组织( P<0.05);两者在浸润性膀胱癌组织中表达水平亦高于表浅性膀胱癌组织( P<0.05)。免疫组化结果显示膀胱癌组织中MIF和VEGF的阳性表达率分别为70.6%(53/75)和61.3%(46/75),均高于正常膀胱黏膜组织( P<0.05)。进一步的统计分析提示MIF和VEGF的表达水平同膀胱癌的淋巴结转移、初复发性、病理分级及临床分期呈正相关,与患者性别、年龄、肿瘤大小及癌灶数量无明显相关性。结论在BTCC组织中,MIF与VEGF的过度表达对肿瘤的血管形成和发展过程起着重要作用,且 MIF可能是促进VEGF表达的重要因素之一。
作者:张珺;吴奎;肖峻;陈远哲;熊宇 刊期: 2014年第03期
目的通过医院感染现患率的调查,掌握医院感染的实际情况,为医院感染防控提供依据。方法采用横断面调查的方法,在同一时间内对所有住院患者进行医院感染现患率调查,采取床旁及病案调查相结合的方式进行。结果共调查3032例患者。3年医院感染现患率分别为6.10%、5.30%、4.17%,感染率高的科室是 ICU (39.29%),感染部位以下呼吸道为主(45.16%),侵袭性操作是发生医院感染的危险因素。2010~2012年住院患者抗菌药物使用率分别为67.21%、64.77%、54.10%,治疗性用药微生物送检率分别为39.00%、46.99%、55.01%,医院感染主要分离菌为革兰阴性菌,占61.39%。结论通过近3年现患率调查发现,随着住院条件的改善、抗菌药物的严格管理以及医院感染防控措施的加强,医院感染现患率呈现下降趋势,治疗性用药微生物送检率也逐年上升。
作者:李金梅;王进 刊期: 2014年第03期
目的研究NEDD4-1基因在正常皮肤与增生性瘢痕和瘢痕疙瘩中的表达情况,探讨其在病理性瘢痕发病机制中的作用。方法收集临床标本30例,其中增生性瘢痕10例(A组)、瘢痕疙瘩10例(B组)、正常皮肤10例(C组),采用Western blot 法和普通 RT-PCR 方法检测 A、B、C 3组中NEDD4-1蛋白和mRNA表达情况,并进行统计学分析。结果在A、B组中,NEDD4-1 mRNA和蛋白均可表达,但表达差异无统计学意义(P>0.05),两组分别与C组比较,差异无统计学意义( P>0.05)。结论 NEDD4-1基因在病理性瘢痕中均可表达,但NEDD4-1的表达与病理性瘢痕的发生机制之间的关系仍需进一步研究。
作者:张锦松;朱飞;胡超;张胜权;杨森 刊期: 2014年第03期
目的观察肝癌患者血清miR-106b的表达变化,并探讨其临床意义。方法收集47例肝癌患者、31例正常人、22例慢性肝病患者作为研究对象,应用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测其血清 miR-106b表达水平,并比较肝癌患者血清miR-106b表达水平与临床病理特征之间的关系。应用接受者工作特征(ROC)曲线分析血清miR-106b用于肝癌诊断的价值。结果肝癌患者血清miR-106b表达水平较正常对照组及慢性肝病组均显著升高( P<0.01);血清miR-106b表达水平与肿瘤分化程度、脉管侵犯及TNM分期等临床病理特征显著相关( P<0.05)。 ROC曲线分析显示血清miR-106b 区分肝癌与正常人的 ROC 曲线下面积(AUC)为0.868,诊断敏感度与特异度分别为87.2%、74.2%,区别肝癌与肝硬化患者时AUC为0.791,敏感度与特异度分别为72.3%、77.3%。结论 miR-106b在肝癌患者血清中表达显著上调,是潜在的肝癌诊断及预后指标。
作者:孟凡龙;荚卫东;许戈良;李建生;王伟;孙其恺 刊期: 2014年第03期
目的记录大鼠心肌细胞生物电活动并观察天麻素对大鼠心肌细胞生物电活动的影响。方法选用健康 SD大鼠,应用心肌细胞内生物电记录的方法,了解正常窦房结及心房肌细胞的生物电活动情况,观察并分析天麻素对大鼠窦房结和心房肌细胞生物电活动的影响。结果在目前实验条件下,能真实记录到窦房结和心房肌细胞电活动,在此基础上观察到天麻素能加快大鼠窦房结细胞Vmax 4,缩短心房肌细胞APD90,其余的电生理参数变化不明显。结论记录离体心肌细胞生物电活动的实验条件相对成熟;天麻素能影响离体心肌细胞生物电活动,可能与天麻素增强 T-Ca2+通道通透性,促进KATP的开放有关。
作者:王飞;位凯;沈兵;王烈成;孔德虎;胡金兰 刊期: 2014年第03期
目的调查安徽省Miltenberger血型的分布情况,为建立红细胞库奠定基础。方法随机采集安徽省血液中心2660例非血缘关系汉族无偿志愿献血者外周血样乙二胺四乙酸( EDTA)抗凝血标本,并提取DNA。采用序列特异性引物PCR( PCR-SSP)方法对Miltenberger血型系统进行检测,并通过血清学及测序方法验证。结果2660例献血者中有24例PCR-SSP阳性,经血清学及测序确认均为 GP. Mur表型。结论在安徽省汉族人群中, GP. Mur 表型的频率为0.9%。目前还未发现Miltenberger血型系统的其他表型。
作者:周娟;吕蓉;朱帮强;韩婷婷;刘忠 刊期: 2014年第03期
目的探讨人胃癌组织及其癌旁正常组织中巨噬细胞移动抑制因子( MIF )和基质金属蛋白酶9( MMP-9)的表达及临床意义。方法选取手术切除并经病理证实的胃癌标本80例作为实验组,另取80例相应癌旁组织作为对照组。应用免疫组化SP法检测癌组织及其癌旁正常组织标本中MIF、MMP-9的表达。结果[1]胃癌组织中MIF、MMP-9有不同程度的表达, MIF、MMP-9二者的阳性率分别为68.8%和67.5%,均高于癌旁正常组织中的32.5%和37.5%,差异有统计学意义( P<0.05);[2]MIF的表达与肿瘤浸润深度、分化程度、淋巴结转移及 TNM 分期呈正相关(P<0.05),与其他临床病理参数无关; MMP-9与肿瘤浸润深度、淋巴结转移及TNM分期呈正相关( P<0.05),与其他临床病理参数无关;[3] MIF与MMP-9的表达存在关联(χ2=9.154, P<0.01,r=0.338)。结论胃癌组织中MIF与MMP-9均呈阳性表达,且二者的表达呈正相关;二者在胃癌组织中不同程度的表达与胃癌的发生、发展密切相关,并可能指导胃癌的诊断、治疗及预后。
作者:包泱;常家聪;王道斌 刊期: 2014年第03期
在犬的上颌前牙区(右上颌侧切牙、左上颌中切牙)制造残根模型,将牙冠磨至龈缘下约平齐牙槽嵴顶水平,避免磨损牙龈软组织,术后第1、3、4、5周观察其牙龈生长情况,测量龈乳头至邻牙牙尖顶的距离、龈乳头至邻牙牙尖顶的水平面的垂直距离、龈缘中点至邻牙牙尖顶的距离、龈缘中点至邻牙牙尖顶的水平面的垂直距离。利用SPSS软件对测量的实验数据进行线图分析。结果显示术后第4周增生的软组织基本长满残根断面,术后第5周新生的软组织与正常牙龈在颜色、质地上基本一致,测量数据显示在观察周期内牙龈软组织增生的总体趋势是朝着增生方向发展。研究发现牙龈在无损伤的情况下具有一定的自我修复能力,4周时残根周围的牙龈软组织可基本完成修复。
作者:黄伟;张志宏;刘红红;鲍军燕;张敏;韩倩;何华 刊期: 2014年第03期
目的探讨PI3K/Akt抑制剂LY294002对慢性髓系白血病细胞株K562的增殖抑制作用及相关机制。方法MTT法检测LY294002对K562细胞增殖的抑制作用;10、20μmol/L LY294002作用K562细胞36 h,流式细胞术观察细胞周期的变化, RT-PCR 法测定 LY294002对 K562细胞Skp2基因表达的影响,Western blot法检测Skp2蛋白表达的变化。结果 LY294002能够抑制K562细胞的生长,该抑制作用具有浓度及时间依赖性( P <0.05)。 LY294002作用K562细胞36 h,随着浓度的增加,G0/G1期阻滞增强,S期细胞减少(P<0.05),Skp2的mRNA表达量减少,Skp2蛋白的表达量显著降低。结论 LY294002能够抑制K562细胞的生长,诱导细胞发生 G0/G1期阻滞,这可能是通过LY294002影响了Skp2表达而实现的。
作者:耿英华;武文娟;于北凯;夏瑞祥 刊期: 2014年第03期
采用免疫组化法检测60例十二指肠腺癌组织及30例癌旁正常组织中凋亡抑制蛋白Livin和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-9(Caspase-9)的表达。结果显示十二指肠腺癌标本Livin和Caspase-9的阳性表达率分别为71.7%、25.0%,与癌旁正常组织阳性表达率(26.7%、76.7%)差异有统计学意义(P<0.01)。 Livin的表达随着十二指肠腺癌病变化进展、程度的发展,阳性表达率增高,Caspase-9的表达随着十二指肠腺癌病理变程度的发展,阳性表达率降低,两者比较差异有统计学意义(P<0.05,r=-0.320)。十二指肠腺癌组织标本中 Livin 和 Caspase-9的表达呈负相关性。 Livin 和Caspase-9在十二指肠腺癌的发生、发展中起着重要的作用,可能会成为十二指肠腺癌的分子标志物或十二指肠腺癌治疗的新分子靶点。
作者:倪文凯;于东风;刘弋 刊期: 2014年第03期
目的观察大鼠同种异体骨髓间充质干细胞( MSCs)在体内心肌缺血微环境中,向心肌细胞分化过程中主要心肌特异性标志物的分化表达及存活。方法采用左冠状动脉前降支( LAD)结扎术建立大鼠急性心肌梗死( MI)模型( n=62),将绿色荧光蛋白(GFP)转染标记的MSCs,于心外膜下注射到心肌梗死周边区;免疫荧光染色观察移植后3、5、7、9 d移植的MSCs的存活情况及其主要特异性标志物( MYH、Cx43、cTnI、α-actin)蛋白的表达;应用激光捕获显微切割技术分离心肌组织中GFP标记的MSCs群,应用Real-time PCR法测定其MYH、Cx43、cTnI、α-actin相对于未移植的MSCs的mRNA表达,对移植后9 d的移植区域行TUNEL凋亡染色。结果免疫荧光染色观察到移植的MSCs于移植后3 d开始持续表达MYH、Cx43,于移植后5 d开始持续表达cTnI,未观察到α-actin 的表达;Real-time PCR 法结果显示,移植的MSCs上MYH于移植后5、7 d的表达量较3 d的明显增多(P<0.05),Cx43、cTnI于移植后7 d的表达量较5 d的均增加(P<0.05),于移植后9 d MSCs几乎观察不到,TUNEL凋亡染色示移植的MSCs发生了凋亡。结论移植的MSCs在大鼠体内心肌缺血微环境下向心肌细胞分化的过程中能够表达部分主要心肌特异性标志物,但其不能长时间、有效的存活。
作者:张静;魏峰;吴忠东;王亭忠;倪雅娟;马爱群 刊期: 2014年第03期
目的建立乙肝病毒( HBV) HBx基因稳转细胞系,并观察该细胞系的增殖活性及内质网应激相关基因的表达情况。方法采用 RT-PCR 法从 HepG2.2.15细胞株中克隆HBx基因编码区片段,构建pcDNA3.1-HBx真核表达质粒。利用脂质体将pcDNA3.1-HBx转染至人HepG2细胞系,通过G418筛选后,经Western blot法对HBx的表达进行验证。并用MTT法检测细胞的增殖活性,同时观察过表达HBx蛋白对内质网应激相关基因表达的影响。结果成功构建了HBx的真核表达质粒;建立了HBV HBx基因稳转细胞系;MTT法检测显示该细胞系增殖活性明显上升;同时也发现HBx基因的过表达可上调内质网应激相关基因 BiP、PERK、ATF6、XBP1、MANF的表达,而CHOP的表达降低。结论 HBx基因过表达可诱导内质网应激,并促进HepG2细胞增殖。
作者:陆鹏;姜同翠;陈露;沈玉君;沈玉先;方圣云 刊期: 2014年第03期
对行飞秒制瓣准分子激光原位角膜磨镶术( FS-LASIK)的84只眼和行小切口基质透镜切除术( SMILE)的110只眼,根据手术方式分为FS-LASIK组和SMILE组,于术前、术后1周、1个月及3个月利用Pentacam测量患者角膜前表面的高阶像差(包括总高阶像差、球差、水平慧差以及垂直慧差),高阶像差用泽尼克多项式描述。结果显示 FS-LASIK组在术后不同时期角膜前表面各高阶像差中除了水平慧差较术前无差异,总高阶像差和球差较术前均显著增加,垂直慧差较术前显著减少; SMILE组术后不同时期总高阶像差、球差、水平像差均显著增加,垂直慧差显著降低(P<0.05)。 SMILE组术后不同时期的总高阶像差和球差以及其较术前的变化值均低于FS-LASIK组( P<0.05)。 SMILE术后的总高级像差和球差的增加较FS-LASIK术少。
作者:叶敏捷;廖荣丰;刘才远 刊期: 2014年第03期
目的回顾性调查儿童精神分裂症预后影响因素并进行前瞻性综合干预研究,探讨改善儿童精神分裂症患者预后的方法。方法首先回顾性调查安徽省精神卫生中心儿童青少年心理科符合中国精神疾病分类方案与诊断标准第3版关于儿童精神分裂症诊断标准的166例患者(调查组)。另选126例出院的儿童精神分裂症患者(干预组)进行前瞻性综合干预研究。两年后进行预后评估,采用临床总体印象量表( CGI)、个人和社会功能量表( PSP)作为预后结局标准。综合干预方案:[1]知情同意;[2]每月定期随访;[3]通过电话、网络等平台建立沟通渠道,出现问题及时联系及时解决;[4]服药依从性干预包括科普知识普及和健康宣教;[5]家庭干预;[6]心理干预。结果[1]调查组 PSP 评分11~93(65.6±23.9)分。以PSP得分为因变量经多元逐步回归分析,有明确影响的是出院疗效、居住地、自知力和是否独生子女。于干预组有89例完成两年随访。两年后完成横断面评估121例,其中CGI评分情况如下:1分51例,2分20例,3分8例,4分以上共42例。 PSP评分5~99(76.7±28.4)分。[3]经字2检验和独立样本t检验,调查组与干预组在性别、年龄、住院天数、出院疗效上差异无统计学意义。榆干预组两年后PSP评分为(76.7±28.4)分,明显高于干预前和调查组(P<0.05)。结论经综合干预,儿童精神分裂症预后显著改善;总体预后高于前期调查组。
作者:刘寰忠;郜见亮;潘多;沈怡芳;王克永 刊期: 2014年第03期