学术投稿

DNA芯片快速检测淋球菌16S rRNA基因突变

周文明;杨森;赵建龙;曹慧敏;张学军

关键词:奈瑟球菌, 淋病, 大观霉素, 点突变, 寡核苷酸序列分析
摘要:目的 探讨新研制的DNA芯片应用于快速检测淋球菌16S rRNA 基因突变的临床应用价值.方法 根据淋球菌16SrRNA 基因的序列信息设计探针并制作DNA芯片,PCR扩增并荧光标记包含16S rRNA 基因突变的目的 DNA片段,与芯片杂交,同时以测序法为对照.结果 87份泌尿生殖道拭子均可被DNA芯片检测,同时检测发现有1株淋球菌16S rRNA基因突变(2709 C→T),与测序结果 一致.结论 DNA芯片检测淋球菌16SrRNA基因突变具有快速、高特异性和高灵敏度,可以应用于对大观霉素的耐药性临床检测.
安徽医科大学学报杂志相关文献
  • ω-3多不饱和脂肪酸对严重烧伤大鼠肠道炎症反应的影响

    目的 观察ω-3 多不饱和脂肪酸对严重烧伤大鼠肠道炎症反应的影响,初步探讨其对肠道功能调节的机制.方法 清洁级SD大鼠72只,随机分为3组:正常组(A组)、力能对照组(B组)和鱼油治疗组(C组).复制大鼠30%TBSA Ⅲ度烧伤模型,A组大鼠经尾静脉注射生理盐水2 ml/(kg·d),B组每天定时经尾静脉注射20%力能中长链脂肪乳 2 ml/(kg·d),C组在相同时间点经尾静脉注射与B组等氮等热量的尤文ω-3鱼油脂肪乳2 ml/(kg·d).分别观察伤前(A组)、伤后(B、C组)1、4、7、10 d血清二胺氧化酶(DAO)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)水平;免疫组织化学染色法观察肠组织TNF-α的表达.结果 B、C两组在伤后各时相点血清DAO、TNF-α、IL-6水平显著高于伤前(P<0.01);C组血清DAO、TNF-α、IL-6水平较B组降低,在伤后4、7、10 d与B组比较差异有显著性(P<0.05 或P<0.01).与B组相比,C组TNF-α活性明显减弱.结论 ω-3鱼油脂肪乳降低烧伤后血清DAO水平,改善烧伤后肠黏膜损伤,保护肠黏膜屏障功能.ω-3鱼油脂肪乳减轻烧伤后促炎症介质TNF-α、IL-6的释放,抑制烧伤后全身炎症反应的程度.

    作者:李兴照;蔡晨;徐庆连;胡宏;夏正国 刊期: 2012年第04期

  • COX-2、RAR-β2在食管鳞状细胞癌组织中的表达及相互关系

    目的 研究环氧化酶-2(COX-2)、维甲酸受体β2(RAR-β2)在食管鳞状细胞癌(ESCC)及周围正常黏膜组织中差异表达状况,探讨两者间相互关系及在ESCC中的作用.方法 常规抽提33例食管癌及相应正常食管黏膜组织中总RNA,采用实时荧光定量PCR检测33例新鲜食管癌组织和正常黏膜组织中COX-2和RAR-β2基因的表达情况.结果 与正常食管黏膜组织相比,食管癌组织中COX-2的表达明显上调,而RAR-β2的表达下调(P<0.05).Ⅰ-Ⅱ级ESCC组织中RAR-β2 mRNA的表达明显高于Ⅲ级ESCC组织(P<0.05);且RAR-β2 mRNA的表达与患者是否喜好热烫饮食(T≥70℃)关系密切(P<0.05).而COX-2 mRNA的表达与患者是否喜好腌制食物显著相关(P<0.05).结论 食管鳞状细胞癌与RAR-β2、COX-2的表达有密切相关性.

    作者:唐曼;吴强;吴正升;张瑰红;徐晓春 刊期: 2012年第04期

  • 人cystatin B基因在哺乳动物细胞株中的定位与表达

    目的 用基因克隆方法 构建带FLAG-tag的人cystatin B真核表达载体,用其转染COS-7和HEK 293 T细胞观察cystatin B在增殖细胞内的定位;转染HEK 293 T细胞检测其表达.方法 设计带FLAG-tag的引物,以人cystatin B全长cDNA序列的质粒为模板,PCR法扩增cystatin B全长序列,然后插入pCDNA 3中构建pCDNA 3-cystatin B-FLAG(CSTBF)质粒;脂质体法转染至COS-7、HEK 293 T细胞,荧光显微镜下观察其在细胞内定位;转染至HEK 293 T细胞,提取细胞总蛋白进行Western blot.结果 正确构建了pCDNA 3- cystatin B-FLAG质粒;定位实验表明在COS-7和HEK 293 T细胞中,cystatin B主要分布在细胞核内,核膜处更集中,胞浆内也有广泛分布;Western blot结果 表明该质粒能在细胞中有效表达.结论 该研究结果 为了解cystatin B在细胞内与其他蛋白质相互作用及功能提供了一定的基础.

    作者:耿慧武;刘君;陈应炉;杨军;刘晓颖;范礼斌 刊期: 2012年第04期

  • 依达拉奉联合高压氧对CO中毒迟发性脑病小鼠血清MDA水平、SOD活性及海马神经元凋亡的影响

    目的 观察依达拉奉联合高压氧对急性一氧化碳中毒迟发性脑病小鼠血清丙二醛(MDA)水平、超氧化物歧化酶(SOD)活性及海马CA1区神经元凋亡的影响.方法 将72只小鼠随机分为对照组、迟发性脑病(DEACMP)组、生理盐水组、高压氧(HBO)组、依达拉奉组及联合治疗组.使用腹腔注射一氧化碳的方法 制备一氧化碳中毒迟发性脑病的模型.染毒后15~28 d生理盐水组腹腔注射生理盐水,HBO组行HBO治疗,依达拉奉组腹腔注射依达拉奉,联合治疗组行HBO加腹腔注射依达拉奉治疗.治疗结束后每组分别检测血清MDA水平、SOD活性及海马CA1区神经元凋亡情况.结果 ①血清MDA、SOD测定结果:DEACMP组小鼠血清MDA含量高于对照组,SOD活性低于对照组(P<0.05);与DEACMP组相比,除生理盐水组外,余治疗组血清MDA含量降低,SOD活性升高,差异有统计学意义(P<0.05);HBO组及依达拉奉组MDA含量高于联合治疗组,而SOD活性均低于联合治疗组,差异有统计学意义(P<0.05);②海马CA1区神经元凋亡:对照组海马CA1区偶见少量凋亡细胞,除生理盐水组外的各治疗组凋亡指数均低于DEACMP组(P<0.05);HBO组及依达拉奉组凋亡指数高于联合治疗组(P<0.05).结论 依达拉奉与HBO联合治疗可以有效降低急性一氧化碳中毒迟发性脑病小鼠血清MDA水平、提高SOD活性,并可以显著抑制海马CA1区神经元凋亡发生,效果优于单纯HBO或者依达拉奉治疗.

    作者:王静;汪青松;黄海丽;管叶明;刘学春;刘红娟 刊期: 2012年第04期

  • DNA芯片快速检测淋球菌16S rRNA基因突变

    目的 探讨新研制的DNA芯片应用于快速检测淋球菌16S rRNA 基因突变的临床应用价值.方法 根据淋球菌16SrRNA 基因的序列信息设计探针并制作DNA芯片,PCR扩增并荧光标记包含16S rRNA 基因突变的目的 DNA片段,与芯片杂交,同时以测序法为对照.结果 87份泌尿生殖道拭子均可被DNA芯片检测,同时检测发现有1株淋球菌16S rRNA基因突变(2709 C→T),与测序结果 一致.结论 DNA芯片检测淋球菌16SrRNA基因突变具有快速、高特异性和高灵敏度,可以应用于对大观霉素的耐药性临床检测.

    作者:周文明;杨森;赵建龙;曹慧敏;张学军 刊期: 2012年第04期

  • 氧化应激促进凋亡相关因子在糖尿病大鼠坐骨神经中表达的研究

    目的 观察糖尿病早期大鼠坐骨神经组织中氧化应激损伤和凋亡相关因子表达情况及其相关性,进一步探讨糖尿病周围神经病变(DPN)的发病机制.方法 采用链脲佐菌素(STZ)一次性腹腔注射诱导糖尿病大鼠模型.随机选取成模大鼠17只作为模型组(M组),另设正常对照组(N组)大鼠15只.8周后,取大鼠左侧坐骨神经,采用HE染色观察形态学改变,并采用免疫组化法检测8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)和Caspase-3表达,Western blot分析检测发动相关蛋白-1(Drp-1)和Bax的表达.结果 与N组相比,M组大鼠坐骨神经形态学改变明显,体重增加不明显,血糖明显增高,差异有统计学意义(P<0.05);Drp-1、Bax、8-OHdG及Caspase-3表达均增多,差异有统计学意义(P<0.05).M组8-OHdG与Caspase-3表达呈明显正相关(r=0.798,P<0.05).结论 早期糖尿病大鼠坐骨神经组织中氧化应激损伤促进凋亡相关因子表达增多,终促发细胞凋亡可能是DPN发病原因之一.

    作者:施丽丽;任明山;吴元洁;吴元波;沈玲玲 刊期: 2012年第04期

  • 骨质疏松性椎体骨折手术治疗进展

    骨质疏松性压缩性骨折(OVCF)是骨质疏松患者常见的并发症之一,严重影响着老年人的生活质量.除了要保守治疗外,外科干预也是一种必要的选择,现对常用的脊柱后路手术与微创治疗两种方案在OVCF的进展进行综述.

    作者:范海涛 刊期: 2012年第04期

  • 柠檬醛诱导急性早幼粒细胞白血病细胞株NB4凋亡机制的研究

    目的 探讨柠檬醛诱导急性早幼粒细胞白血病细胞株NB4凋亡的机制.方法 不同浓度的柠檬醛处理NB4细胞48 h后,RT-PCR法检测凋亡相关基因Bcl-2及Bax的mRNA表达变化,流式细胞仪检测细胞caspase-3及核因子kappaB (NF-κB)表达的变化.结果 随着柠檬醛浓度增加,RT-PCR结果显示受测细胞的Bax mRNA表达增强,Bcl-2 mRNA表达减弱;流式细胞仪检测结果显示受测细胞的caspase-3表达增加,NF-κB表达下降.结论 降低NF-κB、Bcl-2表达及促进Bax、caspase-3表达可能是柠檬醛诱导NB4细胞株凋亡的机制之一.

    作者:宋琴;夏海龙 刊期: 2012年第04期

  • 胃癌患者呼气中挥发性标志物的筛选分析

    目的 应用固相微萃取-气相色谱/质谱技术筛选胃癌患者呼气中挥发性标记物.方法 用Tedlar采样袋收集37例胃癌患者呼气样本,32例正常人的呼气标本作为对照,同时收集周围空气作为参照.经固相微萃取浓缩,通过气相色谱/质谱检测呼气中的挥发性有机化合物,通过Wilcoxon非参数检验筛选胃癌患者呼气中的特征性挥发性标志物.结果 在胃癌呼气标本中筛选出丙烯腈和甲基环己烷两种挥发性标志物.丙烯腈的浓度范围为14.72~594.29 ng/L,甲基环己烷的浓度范围为9.20~970.89 ng/L.比较胃癌患者和正常对照呼气中两种物质浓度,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 丙烯腈和甲基环己烷可作为胃癌潜在的挥发性标志物辅助胃癌诊断.

    作者:丁露;徐珍琴;石大友;刘虎 刊期: 2012年第04期

  • 系统性红斑狼疮患者外周血CD3+CD56+自然杀伤样T细胞体外活化特性研究

    目的 探讨系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血CD3+CD56+自然杀伤样T(NKT样)细胞的表达以及体外活化后的增殖能力和生物学特性.方法 采用流式细胞仪检测30例SLE患者(疾病活动组20例,稳定组10例)和20例正常对照组外周血CD3+CD56+ NKT样细胞的表达及不同体外刺激活化后的增殖能力.通过检测Th1型细胞因子干扰素γ(IFN-γ)和Th2型细胞因子白介素(IL)-4表达水平来判断其在调节炎症免疫反应中的作用.结果 SLE患者外周血CD3+CD56+NKT样细胞的表达明显低于正常对照组,差异有统计学意义(P<0.05),而SLE疾病活动组与稳定组之间差异无统计学意义.与佛波酯 (PMA)和离子霉素的非特异性刺激相比,经抗CD3单克隆抗体和IL-2特异性诱导刺激对CD3+ CD56+ NKT样细胞的增殖能力更强,Th1型细胞因子IFN-γ表达水平更高,差异有统计学意义(P<0.05),而Th2型细胞因子IL-4在两种刺激条件下几乎均不表达.结论 CD3+CD56+ NKT样细胞通过分泌Th1型细胞因子IFN-γ来调节炎症免疫作用,SLE的发病可能与外周血CD3+CD56+ NKT样细胞表达数量减少及其免疫功能严重失调有关.

    作者:张铭明;夏丹;唐婷婷;王路;徐建华;沙泉 刊期: 2012年第04期

  • MSCT诊断颈部淋巴结病变的价值

    目的 探讨颈部淋巴结肿大的MSCT表现,以提高病变诊断的准确性.方法 48例经手术或穿刺病理证实的颈部淋巴结肿大患者,均行MSCT平扫及增强扫描,分析其CT表现.结果 淋巴结结核10例:多为环形强化;淋巴结慢性肉芽肿性炎1例:病灶较大,边界不清晰;淋巴结反应性增生6例:肿大淋巴结孤立存在,病变平扫密度较均匀,增强有强化;巨大淋巴结增生症1例:肿块均呈均质密度伴显著持续性强化;淋巴瘤5例:增强病灶稍有强化,边界不清晰,部分呈融合状;转移瘤25例:淋巴结均匀或不均匀强化.结论 MSCT对颈部淋巴结病变的诊断具有重要的价值.

    作者:韦炜;程涛;周燕;罗英姿 刊期: 2012年第04期

  • 化疗药物的心脏毒性及研究进展

    化疗在肿瘤治疗中起到重要作用,同时具有一定的潜在心脏毒性.化疗药物对心脏有多种损害机制及不同临床表现,对患者的生存和预后有着明显影响.近年来针对化疗药物的心脏毒性的监测及防治取得了一定进展,尤其一些早期发现心脏受损的新技术问世为临床药物心脏损伤的早期诊断及治疗提供了一种全新的可靠检测手段.现就临床常用化疗药物的心脏损害及其监控、防治措施等研究进展做一综述,以求为减轻此类心脏毒性提供研究方向.

    作者:陈剑琼 刊期: 2012年第04期

  • 下肢深静脉血栓形成急性期C-反应蛋白、IL-6、IL-8及纤维蛋白原的作用研究

    目的 研究炎症因子血清C-反应蛋白(CRP)、白介素-6(IL-6)、IL-8和凝血因子纤维蛋白原(FIB)与下肢深静脉血栓形成(DVT)急性期的关系.方法 检测并比较30例DVT急性期患者治疗前后与15例对照组中CRP、IL-6、IL-8和FIB水平.结果 DVT急性期患者治疗前血清CRP、IL-6、IL-8及FIB浓度显著高于对照组(P<0.01);治疗后显著低于治疗前(P<0.01).结论 CRP、IL-6、IL-8及FIB在DVT急性期的发生和发展过程中起重要作用.

    作者:徐余兴;刘斌;朱化刚;余昌俊;叶雨生;宋海屏 刊期: 2012年第04期

  • 支架荷载的骨髓间充质干细胞的分化实验研究

    目的 探讨大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)在改性聚乳酸-Ⅰ型胶原复合支架上向表皮干细胞分化的可行性.方法 体外诱导改性聚乳酸-Ⅰ型胶原复合支架荷载的大鼠骨髓间充质干细胞向表皮干细胞分化,免疫组织化学法检测表皮干细胞标志物CK19和整合素β1的表达.结果 诱导液作用2周后,免疫组织化学法检测到改性聚乳酸-Ⅰ型胶原复合支架荷载的大鼠BMSCs中大量阳性双表达CK19和整合素β1.结论 改性聚乳酸-Ⅰ型胶原复合支架荷载的大鼠BMSCs仍具有向表皮干细胞分化的潜能,此支架具备作为组织工程皮肤支架材料的条件.

    作者:贺斌;王明刚;赵李平;钟晓红;徐飞 刊期: 2012年第04期

  • rAd-p53对人肝癌细胞放射敏感性影响的实验研究

    目的 探讨重组p53腺病毒(rAd-p53)对不同p53基因型的肝癌细胞放射敏感性的影响及差异.方法 用rAd-p53、Ad-EGFP(构建方式及载体的结构与rAd-p53完全相同,仅目的 基因不同的腺病毒),分别感染人肝癌细胞HepG2(p53野生型)和人肝癌细胞PLC/PRF/5(p53突变型),MTT法检测细胞存活率;不同剂量X射线照射克隆形成率检测细胞放射敏感性,流式细胞仪检测细胞凋亡.结果 15MOI rAd-p53感染48 h后,2种细胞生长抑制率分别为(7.30±1.78)%、(11.51±1.53)%,并且随着病毒滴度或感染时间的增加,生长抑制效应亦逐渐增强(P<0.01); HepG2和PLC/PRF/5细胞放射增敏比(SER值)分别为1.24和1.52;细胞凋亡率分别为(22.19±1.04)%、(30.36±2.74)%;均明显高于空白组和Ad-EGFP组(P<0.01).结论 rAd-p53能显著抑制人肝癌细胞生长、诱导细胞凋亡和提高细胞放射敏感性,并且对PLC/PRF/5细胞(p53突变型)作用强于HepG2(p53野生型).

    作者:陶振超;邱俊;钱立庭;王明明;吴爱东;闫冰 刊期: 2012年第04期

  • 异位妊娠患者焦虑抑郁情绪分析

    对接收调查的异位妊娠患者80例及对照组60例进行焦虑抑郁问卷及艾森克人格问卷调查,采用SPSS 16.0统计软件对数据进行统计分析.异位妊娠患者的抑郁、焦虑均数与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05).在影响因素上,患者的婚姻状况、有无生育要求,焦虑抑郁差异有统计学意义(P<0.05),而治疗方式差异无统计学意义.人格特质与焦虑抑郁状况的相关性研究显示维度E与焦虑抑郁具有相关性(P<0.05).

    作者:洪琼;章一涓 刊期: 2012年第04期

  • IL-1β和IL-1RN基因多态性与胃食管反流病相关性的研究

    目的 研究胃食管反流病(GERD)患者白细胞介素1B(IL-1β)基因和白细胞介素1受体拮抗剂(IL-1RN)基因的基因多态性情况,并分析各种基因型与GERD的发病风险、内镜下表现的相关性.方法 采用病例对照研究方法,收集154例GERD患者和160例健康人外周静脉血,提取DNA,采用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法 检测IL-1β-511基因型,采用聚合酶链式反应 (PCR)方法 测定IL-1RN基因型,比较各种基因型及各等位基因的分布情况.结果 IL-1β-511基因多态性及各等位基因与GERD患病风险均无相关性; IL-1RN*1,2基因型及2等位基因可能增加GERD患病风险(P<0.05);IL-1β-511*T/IL-1RN*1(T1) 可能降低GERD患病风险(P<0.05),其他各组基因型差异均无显著性;IL-1β-511-CC基因型及C等位基因频率在NERD组明显高于反流性食管炎组,差异有显著性(P<0.05),在没有Hp感染时,这种差异更明显.结论 IL-1β和IL-1RN基因多态性与GERD的患病风险、内镜下表现之间具有相关性.

    作者:程鹏;王亚雷;许建明;唐小波;王凯;冯慧 刊期: 2012年第04期

  • 二苯乙烯苷对沙鼠脑缺血/再灌注损伤的保护作用及部分机制

    目的 研究二苯乙烯苷(TSG)对沙鼠脑缺血/再灌注损伤的保护作用及部分机制.方法 采用改良法建立沙鼠脑缺血/再灌注模型.沙鼠随机分为6组,假手术组、模型对照组、TSG大、中、小剂量(6、3、1.5 mg/kg),阳性对照药依达拉奉注射组(3 mg/kg).7 d后通过Morris水迷宫测定学习记忆功能;脑组织匀浆行超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性和丙二醛(MDA)含量测定;免疫组化SABC法显示Nestin蛋白在脑组织中的表达.结果 与假手术组相比,模型组游出时间和游泳距离明显延长,而TSG治疗组、依达拉奉对照组较模型组明显缩短(P<0.05,P<0.01).与假手术组相比,模型组沙鼠脑组织中SOD活性、GSH-Px酶活力单位明显降低,MDA含量明显升高.TSG(6、3 mg/kg)可显著提高血清SOD活性和GSH-Px酶活力单位,TSG(6、3、1.5 mg/kg)可明显降低MDA含量;TSG(6、3、1.5 mg/kg)Nestin蛋白的表达水平较模型组有明显增高.结论 TSG对脑缺血/再灌注损伤有明显的保护作用,其机制可能与抗自由基损伤、抑制体内脂质过氧化水平及促进神经细胞的修复有关.

    作者:王栋;陈晓宇;刘晓利;赵欢;张腾腾;赵中原;白璐 刊期: 2012年第04期

  • CTLA-4基因多态性与豫南地区汉族人群1型糖尿病的相关性

    目的 探讨细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4(CTLA-4)基因第一外显子+49 A/G的多态性与豫南地区汉族人群1型糖尿病(T1DM )的相关性.方法 采用PCR-RFLP技术分析108 T1DM患者及100例正常对照组的CTLA-4基因第一外显子+49 A/G多态性.结果 T1DM 组等位基因+49G 频率明显高于正常对照组(P=0.001),基因型GG明显高于正常对照组(P=0.005).结论 CTLA-4基因第一外显子+49 A/G多态性与豫南地区T1DM 易感性相关.

    作者:宋新强;易朝辉;潘莉;张斯荷 刊期: 2012年第04期

  • 帕瑞昔布钠对骨科患者术后舒芬太尼静脉镇痛效果的影响

    目的 观察帕瑞昔布钠对骨科患者术后舒芬太尼静脉镇痛效果的影响.方法 全麻下行骨科手术的患者90例,ASA Ⅰ或Ⅱ级,随机平均分为3组:对照组(C组)、帕瑞昔布钠20 mg组(P1组)、帕瑞昔布钠40 mg组(P2组),采用咪唑安定-依托咪酯-舒芬太尼-罗库溴铵全麻诱导,七氟醚-舒芬太尼-顺式阿曲库铵维持.手术结束后采用舒芬太尼2 μg/kg行患者静脉自控镇痛(PCIA).分别于术后1(T1)、4(T2)、8(T3)、12(T4)、24(T5)、48 h(T6)时,采用视觉模拟评分(VAS)评分评价患者疼痛程度;记录上述各时间点患者自控镇痛(PCA)总次数、总有效次数;上述各时间点舒芬太尼用量;并记录术后48 h内恶心、呕吐、皮肤瘙痒、呼吸抑制和循环抑制的发生情况.结果 与C组相比,P1组T2、T3时VAS评分降低,P2组T2~T6时VAS评分降低(P<0.05),P1组T2、T3时患者PCA总次数、总有效次数减少,P2组T2~T6时PCA总次数、总有效次数减少(P<0.05),P1组T2、T3时舒芬太尼用量减少,P2组T2~T6舒芬太尼用量减少(P<0.05).与P1组比较,P2组T2-T6时VAS评分降低(P<0.05),T2~T6时患者PCA总次数、总有效次数减少(P<0.05),T2~T6舒芬太尼用量减少(P<0.05).P2组较C组和P1组恶心、呕吐发生例数减少(P<0.05).结论 切皮前静脉给予帕瑞昔布钠40 mg能明显减少术后舒芬太尼的用量,术后镇痛效果满意.

    作者:胡宪文;张野;谢春林;吴云;翁立军;蒋玲玲;陈齐;李云 刊期: 2012年第04期

安徽医科大学学报杂志

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