郑世瑞；李俊；宋珏
目的 建立小鼠巨细胞病毒(MCMV)经鼻腔急性感染同种异型皮肤移植BALB/c小鼠间质性肺炎模型.方法 ① 25只供体C57BL/6雌鼠与100只受体BALB/c雌鼠背部皮肤移植后,每只小鼠腹腔注射环孢素A(CsA,12 mg/kg),连续14 d.② 移植受体小鼠随机分为5组,其中4组每只鼻腔接种30 μl不同剂量MCMV悬液(102、103、104、105 PFU/只),另一组为正常对照组,小鼠鼻腔接种原代小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)悬液30 μl/只.在接种后第5、9、14、21天处死小鼠,无菌取肺组织分别做HE染色、透射电镜、PCR、RT-PCR检测MCMV Smith毒株的即刻早期(IE)和晚期基因糖蛋白B(gB)基因转录产物,并进行原位杂交和免疫组织化学实验.结果 104、105 PFU实验组小鼠肺组织有局灶性的病理损害,并发现感染后第14天肺组织病理改变明显;透射电镜检测到疱疹样病毒颗粒;PCR、RT-PCR检测实验组MCMV IE和gB基因及其转录产物均为阳性;两组原位杂交和免疫组织化学检测均可见肺间质上皮细胞中存在病毒核酸和蛋白;并在感染后的21 d内,105 PFU组小鼠相比对照组有明显的临床表现.结论 成功建立同种异型皮肤移植后MCMV急性感染所致的小鼠间质性肺炎模型.
作者：倪德群；赵纪强；张玮；甘霖；陈敬贤；王明丽 刊期： 2011年第06期
目的 建立同时测定玉屏风汤中黄芪甲苷、白术内酯-Ⅰ和升麻苷含量的高效液相色谱-质谱法(HPLC-MS).方法 采用Hedera ODS-2(2.0 mm×150 mm,5 μm)色谱柱,流动相为甲醇∶水(68:32),流速为0.2 ml/min;电喷雾电离(ESI+),选择性离子监测(SIM)质荷比为807.50、287.05、469.05的离子对,内标为替米沙坦.结果 3种成分含量的线性范围和相关系数分别为:黄芪甲苷0.015 62~0.5 μg/ml(r=0.999 7),白术内酯-Ⅰ0.005 859~0.187 5 μg/ml(r=0.999 7),升麻苷0.031 25~8 μg/ml(r=0.996 5).平均回收率分别为:95.47%、101.94%和103.70%,RSD分别为:2.47%、2.20%和1.64%.结论 本研究建立的HPLC-MS法方便、快捷、稳定,可同时测定玉屏风汤中3种主要成分的含量,结果准确可靠,可为玉屏风汤体内药动学研究提供依据.
作者：郑世瑞；李俊；宋珏 刊期： 2011年第06期
目的 探讨汉族女性围绝经期抑郁症与雌激素受体β(ERβ)基因多态性的相关性.方法 收集围绝经期抑郁症患者62例(抑郁症组)和无抑郁症状的年龄匹配的健康女性72例(对照组),采用PCR-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)法分析ERβ第5外显子Rsa-I酶切多态性和第8外显子Alu-I酶切多态性.结果 两组ERβ第5外显子Rsa-I酶切多态性基因型rr、Rr、RR频率和等位基因r、R频率比较,差异无统计学意义.两组ERβ第8外显子Alu-I酶切多态性基因型aa、Aa、AA频率比较,差异无统计学意义;等位基因A和a频率比较,差异有统计学意义(P<0.05),抑郁症组A等位基因频率高于对照组.结论 ERβ第8外显子Alu-I多态性可能与广州地区汉族女性围绝经期抑郁症的易感性有关,含A等位基因的基因型可能增加患抑郁症的风险;而ERβ第5外显子Rsa-I酶切多态性与广州地区汉族女性围绝经期的抑郁症发病风险无相关性.
作者：胡佳佳；周伯荣；秦媛怡；张慧敏 刊期： 2011年第06期
目的 探讨以骨保护素(OPG)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)为外源基因,构建双表达重组腺病毒载体,结合胶原膜促进牙槽骨骨缺损修复,为牙周病治疗提供新方法和新思路.方法 在6只犬下颌两侧的第3、4前磨牙根分叉造牙槽骨缺损,每只犬的一侧为实验组,另一侧为材料对照组或空白对照组.实验组:翻瓣造牙槽骨缺损,置胶原膜并滴加重组腺病毒,缝合龈瓣,局部注射腺病毒;材料对照组:翻瓣造牙槽骨缺损,置胶原膜,缝合龈瓣;空白对照组:翻瓣造牙槽骨缺损,直接缝合.手术后通过影像学和组织学方法观察骨缺损的再生情况.结果 术后6周,实验组骨缺损区有新骨形成,新生骨充满缺损区;材料对照组骨缺损区有新骨形成,新生骨钙化程度较低;空白对照组骨缺损区基本没有新生骨形成,骨小梁稀疏,主要为疏松结缔组织.术后12周,实验组骨缺损区新生骨量明显增加,新生牙槽骨已充满根分叉区,骨小梁致密;材料对照组骨缺损区新生骨量明显增加,但未达到根分叉顶,骨缺损区有大量新生牙槽骨但未充满根分叉区;空白对照组结果与术后6周类似.结论 以OPG和bFGF为外源基因的双表达重组腺病毒可促进犬牙槽骨缺损的修复.
作者：何世海；曹寅；陈乔尔；苏荣玉；李倩 刊期： 2011年第06期
目的 探讨3.0T MRI肝脏容积加速采集序列(LAVA)在Budd-Chiari综合征(BCS)肝内、外侧支的显示及其分型中的价值.方法 18例经数字减影血管造影(DSA)证实的原发性BCS,均行MRI LAVA扫描,原始图像行多平面重建(MPR)、大密度投影(MIP)和容积再现(VR)方法重建三维图像,分析下腔静脉、肝静脉和肝内、外侧支循环的显示.结果 18例BCS中,下腔静脉阻塞型12例,肝静脉型3例,混合型3例,LAVA清楚显示了全部的下腔静脉和肝静脉改变.肝内见4类侧支:①肝静脉-副肝静脉引流型15例,②肝静脉-(副肝静脉+肝静脉)引流型6例,③肝静脉-肝静脉引流型6 例,④肝包膜下静脉引流型及肝静脉-左膈下静脉型5例.肝外共见5类侧支:①腰静脉-腰升静脉-奇静脉及半奇静脉侧支18例,②左肾静脉-左腰升静脉-半奇静脉通道和左肾静脉-左膈下静脉侧支8例,③肾静脉-肾包膜下静脉-腹壁浅静脉侧支4例,④腹壁浅静脉侧支7例,⑤脊柱静脉丛侧支18例.肝内及肝外门-体交通各1例.结论 LAVA可清楚显示BCS的肝静脉和下腔静脉病变,结合MIP及MPR可以更直观、准确地显示肝内、外侧支循环.
作者：汪卫兵；孟晓梅；钱银锋 刊期： 2011年第06期
目的 探讨活动期溃疡性结肠炎(UC)患者营养风险与临床特征的关系.方法 采用营养风险筛查2002(NRS2002)对54例活动期UC患者进行营养风险筛查,并与临床特征进行分析.结果 54例活动期UC住院患者中,营养风险发生率为37.0% (20/54).存在营养风险的20例UC患者中,初发型2例,慢性复发型14例,慢性持续型3例,急性暴发型1例;活动度轻、中、重度分别为1、8、11例;病变范围中直乙状结肠炎2例、左半结肠炎4例、广泛结肠炎4例、全结肠炎10例,组间比较差异均有统计学意义(P<0.05).营养风险与年龄、性别、肠外表现、并发症、内镜分级等无关.结论 通过NRS2002发现活动期UC患者营养风险发生率较高,且营养风险与临床类型、活动度、病变范围等存在关联.
作者：张爽；梅俏；许建明；陈茉莉；张丽萍；胡乃中；刘晓昌 刊期： 2011年第06期
近年来随着高频电刀的广泛应用及肥胖人数的增多,切口脂肪液化及感染已成为影响切口愈合的常见原因之一.本研究通过对结直肠癌体重超重133例患者行手术切口皮下放置引流管,可有效预防切口脂肪液化及感染,现报道如下.
作者：朱勇；孟翔凌；陈伟；张震 刊期： 2011年第06期
非小细胞肺癌(NSCLC)是危害人类生命常见的恶性肿瘤之一.表皮生长因子受体(EGFR)基因突变及过表达与NSCLC的发生、发展、侵袭等密切相关.EGFR突变是有前途的NSCLC靶向治疗分子机制之一,EGFR检测指导选择合适的患者进行靶向治疗成为靶向治疗成败的关键.本文就EGFR检测方法及其在NSCLC中的应用作一综述.
作者：王继灵 刊期： 2011年第06期
目的 通过构建真核表达pcDNA3.1/ASIC1a质粒,转染佐剂性关节炎(AA)大鼠关节软骨细胞,建立酸敏感通道在关节软骨细胞中过表达的模型,观察ASIC1a mRNA及其蛋白的相对表达.方法 通过PCR扩增目的 基因ASIC1a,并用XbaⅠ和BamHⅠ进行双酶切,同时用这两种酶双酶切质粒pcDNA3.1,将其酶切产物按常规方法连接并转化入大肠杆菌,挑去菌落培养,提取质粒,进行酶切鉴定及测序,然后用Lipofectamine 2 000转染试剂盒将所构建质粒转染入关节软骨细胞,使用荧光定量PCR、RT-PCR和Western blot法检测ASIC1a mRNA和蛋白表达,以鉴定模型建立成功与否.结果 ① 通过对大鼠脑组织RNA的提取及逆转录,获得ASIC1a基因,并与载体连接,通过大肠杆菌培养,获得足够多的实验用转染质粒,经酶切鉴定包含目的 基因,且酶切条带准确清晰.② Lipofectamine 2 000细胞转染后,获得稳定阳性克隆细胞,通过对ASIC1a mRNA及其蛋白相对表达量进行检测,表明转染后细胞mRNA及蛋白量表达均相对上升.结论 成功构建了pcDNA3.1/ASIC1a重组表达载体,并用于观察酸敏感离子通道表达水平对关节软骨细胞代谢的影响.
作者：王念；陈飞虎；江晟；荣超；胡伟；吴繁荣；沈际佳 刊期： 2011年第06期
目的 探讨伊马替尼(IM)血药浓度监测在指导慢性粒细胞白血病(CML)治疗中的意义.方法 利用液相色谱-质谱联用(LC-MS/MS)法对153例正规服用IM治疗CML患者进行IM血浆浓度监测,分析血药浓度与患者一般特征及疗效的关系.结果 ①IM血药浓度水平与患者性别、年龄、身高、体重、体表面积以及服用IM时间无相关性;②111例标准剂量IM治疗CML患者中有86例获得完全细胞遗传学缓解(CCyR),在Q1、Q2~Q3和Q4组分别为18例(67.7%,18/27)、50例(87.7%,50/57)和18例(67.7%,18/27),3组间差异有统计学意义(P<0.05);86例获得CCyR的患者血浆谷浓度水平高于25例未获得CCyR的患者,差异有统计学意义(P<0.05);106例进行分子生物学评估的患者中,63例获得分子生物学缓解(MMR),IM血浆谷浓度水平高于未获得MMR的43例患者,差异有统计学意义(P<0.05).结论 IM血药浓度水平与患者性别、年龄、身高、体重、体表面积等一般特征无关,与临床疗效有一定关系.
作者：朱凌燕；武琳琳；曾庆曙；杨明珍；夏瑞祥 刊期： 2011年第06期
目的 观察盐酸贝那普利对糖尿病大鼠的肾脏保护作用及其可能机制.方法 将SD大鼠随机分为正常对照(NC)组和实验组.实验组通过一次性腹腔注射链脲佐菌素复制糖尿病大鼠模型.造模成功后,随机分为糖尿病(DM)组和贝那普利(DT)组,每周监测各组大鼠尾外周血血糖.4周后,检测糖化血红蛋白(HbA1c)及尿液中胰岛素样生长因子-1(IGF-1)、白蛋白(ALB)及视黄醇结合蛋白(RBP).处死大鼠留取肾脏标本,观察其在电镜下形态学变化,采用免疫组化法检测肾脏组织IGF-1的表达.结果 与NC组比较,DM组血糖、HbA1c、肾脏肥大指数、尿IGF-1/肌酐(Cr)、尿ALB/Cr、尿RBP/Cr均增加,差异有统计学意义(P<0.01),肾组织IGF-1表达增高,差异有统计学意义(P<0.01),电镜下肾组织结构病变明显;与DM组比较,DT组除血糖和HbA1c水平外,其余各项指标均降低,差异有统计学意义(P<0.01),肾组织病理改变亦明显减轻.结论 肾脏IGF-1的过度表达可能是糖尿病肾病(DN)的发生机制之一,贝那普利通过抑制过度表达的IGF-1,对DN发挥保护作用.
作者：陈玉米；任伟；叶山东；邢燕；汪鹏；胡圆圆；胡闻；陈柯；陈燕 刊期： 2011年第06期
目的 检测胃肠道间质瘤(GIST)组织中DOG-1、蛋白激酶C(PKC)-θ的表达情况及CD105标记的微血管密度(MVD),并探讨其临床意义.方法 采用免疫组化法检测DOG-1、PKC-θ及CD105在86例GIST、30例非GIST间叶组织肿瘤及20例对照胃组织中的表达情况并计数MVD值,分析其与GIST临床病理指标的关系.结果 ①86例GIST组织中CD117、DOG-1、PKC-θ的阳性表达率分别为84.9%、93.0%、89.5%,其中DOG-1、PKC-θ在CD117阴性组的表达率分别为61.5%、69.2%,而在非GIST间叶组织肿瘤中DOG-1不表达,PKC-θ表达率为3.3%,对照胃组织中未见阳性表达.CD105标记的MVD值在GIST组织和对照胃组织分别为(6.23±1.72)、(3.56±1.13),差异有统计学意义(P<0.01);②DOG-1与肿瘤的核分裂像、危险度分级呈负相关(P<0.05),PKC-θ与肿瘤的危险度分级呈正相关(P<0.05),MVD值与肿瘤的直径、核分裂像及危险度分级呈正相关(P<0.05),高MVD组与低MVD组术后1、3、5年生存率分别为92.9%、73.8%、45.7%和100%、93.1%、77.9%,差异有统计学意义(P<0.01).DOG-1、PKC-θ阳性组与阴性组术后生存率比较,差异无统计学意义.结论 DOG-1、PKC-θ是GIST敏感且特异性的诊断标记物,特别对于CD117阴性表达GIST有重要诊断意义.DOG-1、PKC-θ表达与GIST预后无关,CD105标记的MVD值与GIST预后有关.
作者：陈立权；刘弋；吴强；葛尔树；姜友 刊期： 2011年第06期
目的 探讨硝苯地平(NF)对人肝星状细胞系(HSC)-LX2细胞的活化及分泌转化生长因子(TGF)-β的影响.方法 体外建立干扰素(IFN)-γ刺激HSC活化的培养体系,设3组:对照组、IFN-γ组和IFN-γ+NF组,对照组仅加入培养基,IFN-γ组加入IFN-γ和培养基,IFN-γ+NF组加入IFN-γ、NF和培养基,于0、1、2、3、5 d观察HSC-LX2活化增殖和分泌细胞因子的能力,采用细胞爬片和免疫组化技术鉴定活化HSC的细胞形态,流式细胞术分析HSC表达α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)水平,ELISA法测定不同组HSC分泌TGF-β的浓度.结果 与对照组比较,IFN-γ组HSC活化和分泌TGF-β的能力较强,差异有统计学意义(P<0.05);与IFN-γ组比较,IFN-γ+NF组HSC活化和分泌TGF-β的能力较弱,差异有统计学意义(P<0.05).结论 NF体外实验中能抑制HSC-LX2的增殖和活化,具有潜在的抗纤维化作用.
作者：戴夫；李海文 刊期： 2011年第06期
目的 了解合肥地区人巨细胞病毒(HCMV)先天性感染率,分析HCMV先天性感染病毒糖蛋白B(gB)基因型别.方法 采用巢式PCR检测160例新生儿脐血白细胞中的HCMV gB基因,利用限制性核酸内切酶 RsaⅠ和HinfⅠ分别对HCMV gB基因进行限制性片段长度多态性分析,进行DNA测序,构建进化树.结果 160例新生儿脐带血白细胞中有40例HCMV gB阳性基因;阳性基因均为gB2型,未见其他型别.结论 160例新生儿脐带血中,HCMV先天性感染率为25.0%,且基因型别均为gB2型,同时发现该基因型已有变异,提示该病毒流行株有较高频率株内基因重组发生.
作者：丁婷婷；陈敬贤；王明丽 刊期： 2011年第06期
目的 观察载脂蛋白E基因敲除(ApoE KO)对小鼠海马神经元内β淀粉样蛋白(Aβ)表达的影响,探讨其与神经退行性疾病的认知功能障碍之间的可能联系.方法 10只正常C57BL/6J小鼠予普通饲料喂养作为对照(C)组,10只ApoE-KO的C57BL/6J小鼠予普通饲料喂养作为KO组,10只ApoE KO的C57BL/6J小鼠予高脂饲料喂养作为KO-HF组.小鼠成模后称重,取血检测血脂,取小鼠脑组织分别进行HE、免疫组化染色,并应用计算机图像分析系统检测小鼠海马神经元内Aβ的表达变化.结果 与C组比较,KO组和KO-HF组体重、总胆固醇、甘油三酯及低密度脂蛋白胆固醇含量明显升高,差异有统计学意义(P<0.05),HE染色结果显示:与C组比较,KO组与KO-HF组小鼠海马神经元结构在光镜下无明显区别;免疫组化染色可见KO组及KO-HF组小鼠海马神经元内有黄色颗粒样Aβ沉淀;与C组比较,KO组平均光密度值升高,差异有统计学意义(P<0.05),与KO组比较,KO-HF组平均光密度值升高,差异有统计学意义(P<0.05).结论 ApoE KO及高脂等因素会导致Aβ的沉积,与ApoE异常导致阿尔茨海默病等神经退行性疾病的认知功能障碍可能有着密切联系.
作者：张宁；倪普；徐凌凡；钱雅琴；汪涛；刘娟；周祎；桂丽；黄大可；汪渊；贾雪梅 刊期： 2011年第06期
目的 分析性别及年龄对脑干听觉诱发电位(BAEP)的影响.方法 对50例健康成人(100耳)进行BAEP检测,线性回归分析各波潜伏期及峰间期与年龄、性别、左右耳的关系.结果 成人BAEP左右耳无差别,Ⅰ、Ⅲ、Ⅴ波潜伏期及Ⅲ-Ⅴ峰间期与年龄呈正相关(P<0.05),Ⅲ、Ⅴ波潜伏期与性别有关(P<0.05),尤其是Ⅴ波潜伏期相关性较高.结论 性别及年龄是影响BAEP的两个主要生理因素,在应用BAEP时需考虑这两个因素的影响.
作者：吕红娟；徐培坤；肖瑾 刊期： 2011年第06期
目的 构建pDsRED2-HMGB1重组质粒,探讨转染高迁移率族蛋白1(HMGB1)基因对奥沙利铂诱导的SGC-7901细胞凋亡的影响.方法 用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)扩增HMGB1 mRNA全编码序列,将PCR产物插入到pDsRED2-N1载体的Xho I和EcoR I位点,构建pDsRED2-HMGB1重组质粒;通过脂质体法转染SGC-7901胃癌细胞,荧光显微镜检测HMGB1红色荧光融合蛋白表达.Western blot鉴定HMGB1蛋白表达.应用流式细胞仪(Annexin-V/PI标记)分析HMGB1过表达对奥沙利铂诱导胃癌细胞凋亡的影响.结果 成功构建真核表达质粒pDsRED2-HMGB1,转染SGC-7901细胞后,荧光显微镜下可见细胞内有HMGB1红色荧光融合蛋白的表达;流式细胞术检测发现转染pDsRED2-HMGB1后SGC-7901细胞凋亡水平较转染pDsRED2-N1组下降22.4%.结论 HMGB1过表达可抑制奥沙利铂诱导的SGC-7901胃癌细胞凋亡.
作者：沈磊；胡梅琮；吴亚欧；张梅；李群；桂丽；胡春松；张林杰；黄保军 刊期： 2011年第06期
宫颈癌是常见的妇科恶性肿瘤之一,严重威胁着女性的生命安全.放射治疗为宫颈癌治疗普遍运用的手段.世界范围内70%以上的宫颈癌患者的治疗措施中包括放射治疗,但其并发症影响患者的生存质量.现对宫颈癌放射治疗的方法及减少并发症的措施进行综述.
作者：吕银 刊期： 2011年第06期
目的 探讨早产儿医院感染的危险因素及预防对策.方法 对新生儿重症监护室660例早产儿医院感染情况进行回顾性调查和分析.结果 660例住院早产儿中有197例发生252次医院感染,医院感染率29.8%,以肺炎为主(30.95%).长期住院、留置胃管、机械通气、喂养不耐受是早产儿发生医院感染的高危因素.结论 早产儿医院感染率高,缩短住院天数,减少侵袭性操作,提高喂养的耐受性,有助于减少早产儿医院感染的发生.
作者：张舒；王琍琍 刊期： 2011年第06期
目的 探讨叶酰聚谷氨酸合成酶(FPGS)在氨甲蝶呤(MTX)对映体[L-(+)-MTX和D-(-)-MTX]耐药A549细胞株中的表达.方法 通过FQ-PCR和Western blot法分别测定肺癌A549细胞株和15μmol/L L-(+)-MTX和D-(-)-MTX两种耐药A549细胞株中FPGS mRNA和蛋白表达.结果 L-(+)-MTX、D-(-)-MTX耐药细胞株中FPGS基因表达的mRNA相对含量分别为肺癌A549细胞株的(0.80±0.09)倍和(2.04±0.34)倍,两组间差异具有统计学意义(P<0.05);L-(+)-MTX、D-(-)-MTX耐药细胞株中FPGS的蛋白表达含量分别为对照组肺癌A549细胞株的(0.85±0.12)倍和(1.62±0.24)倍,两组间差异具有统计学意义(P<0.05).结论 MTX诱导耐药后细胞株中FPGS mRNA和蛋白均发生变化,且在两种对映体细胞株间具有手性差异.
作者：孙利；沈佐君；何晓东；孙余婕；许维东；李道静；张白银；张永娟 刊期： 2011年第06期
安徽医科大学学报杂志
主管:安徽省教育厅
主办：安徽医科大学
