柯立;范军;徐美清;马冬春;魏大中;朱晓枫;田界勇
目的 观察骨保护素(OPG)基因修饰的骨髓基质细胞(BMSCs)复合PLGA材料移植对牙周骨缺损的修复作用.方法 4只成年Beagle犬,选其24颗前牙丝线结扎饲以高糖饮食构建牙周病模型.翻瓣检查修整近中牙槽骨缺损至3 mm,实验牙分为3组:实验组(缺损处植入OPG基因修饰的BMSCs复合PLGA)、阴性对照组(缺损处植入BMSCs复合PLGA)、空白对照组( 常规牙周翻瓣治疗).6周后临床、X线片观察,切片组织学观察,统计学分析相关数据.结果 OPG基因修饰的BMSCs明显促进骨缺损的修复,组织学评分与两对照组相比差异有显著性(P<0.01).结论 OPG能有效促进犬牙周骨缺损的骨组织再生.
作者:张嘉;梅陵宣 刊期: 2008年第03期
目的 研究对人类免疫缺陷病毒Ⅰ型HXB2株调控蛋白Tat原核表达产生影响的区域和Tat蛋白重要的抗原表位.方法 用PCR方法获得Tat(1-48aa)、Tat(22-72aa)和Tat(38-101aa)DNA片段,构建其原核表达质粒pET32a-Tat(1-48aa)、pET32a-Tat(22-72aa)和pET32a-Tat(38-101aa),并转入E.coli BL21(DE3)中进行诱导表达及纯化,SDS-PAGE鉴定表达及纯化产物.采用间接ELISA方法用兔抗pET32a-Tat抗血清对三种肽段进行免疫原性分析.结果成功构建了pET32a-Tat(1-48aa)、pET32a-Tat(22-72aa)和pET32a-Tat(38-101aa)质粒,分别表达出相对分子质量(Mr)为23×103、23×103和25×103的融合肽段,其浓度分别为4.26、3.35和5.11mg/ml.间接ELISA结果表明三种融合肽段与兔抗pET32a-Tat抗血清均呈特异性结合反应,其抗体滴度分别为1:128 000、1:32 000、1:64 000,而抗血清与pET32a蛋白仅有较弱结合.结论半胱氨酸富集区(22-37位氨基酸)对Tat蛋白的原核表达有较显著影响;Tat蛋白的N端区、碱性区和C端区是其重要的抗原表位,其中N端区的免疫原性强.
作者:陈璐;潘卫;曹洁;卢海妹;何俊;蒋少华;唐萍;李存枚;廖文婷;邓松华 刊期: 2008年第03期
目的 检测不同肿瘤及其癌旁正常组织中hHBrk1基因的差异表达,为进一步研究hHBrk1基因对肿瘤生物学过程的影响提供线索.方法 以154对正常及肿瘤组织(19种不同人体组织)和10种肿瘤细胞株的cDNA的肿瘤谱阵列芯片(Cancer profiling array Ⅱ)为研究材料,采用Northern杂交方法分析目的 基因表达水平的差异.根据阳性结果收集临床肿瘤组织样本,用RT-PCR检测hHBrk1基因表达,以验证芯片结果的可靠性.结果 154对组织及10个肿瘤细胞株均表达hHBrk1基因.其中肺肿瘤组织高表达hHBrk1基因,与正常配对肺组织表达丰度差异有显著性(P<0.01);在肾癌组织中的hHBrk1基因表达丰度低于配对肾组织(P<0.01).RT-PCR证实8临床肺肿瘤组织中5例高表达hHBrk1基因.结论 肿瘤谱阵列芯片技术能够快速检测hHBrk1基因在不同组织中的表达差异,hHBrk1基因可能与肺癌及肾癌的发生、发展有关.
作者:祝敏;虞红珍;周平坤;隋建丽;王豫;徐勤枝;汪思应 刊期: 2008年第03期
目的 比较三种肠聚集性大肠埃希菌、小肠结肠炎耶尔森菌和鼠疫耶尔森菌HPI毒力岛核心区ybtE基因的同源性.方法 PCR扩增肠聚集性大肠埃希菌(EAEC)17-2 ybtE基因的完整序列,克隆后测序.用ABIPRISM软件对该ybtE基因序列与已知的鼠疫耶尔森菌HPI的ybtE基因以及小肠结肠炎耶尔森菌HPI的irp5基因进行核苷酸序列和推导氨基酸序列比较.结果 核苷酸序列,EAEC17-2与鼠疫耶尔森菌及小肠结肠炎耶尔森菌之间的同源性分别为99.8%和98.2%,鼠疫耶尔森菌与小肠结肠炎耶尔森菌之间的同源性为98.2%;推导氨基酸序列,EAEC17-2与鼠疫耶尔森菌及小肠结肠炎耶尔森菌之间的同源性分别为99.8%和97.6%,鼠疫耶尔森菌与小肠结肠炎耶尔森菌之间的同源性为97.8%.结论 ybtE基因作为HPI的功能基因高度保守,EAEC中的HPI可能来源于Yps HPI.
作者:张冬梅;王斌 刊期: 2008年第03期
目的 分析儿童口腔卫生习惯等因素与乳牙龋的相互关系.方法 整群抽取遵义市两所幼儿园进行患龋情况检查,并随机对其中200名儿童父母进行儿童口腔卫生习惯的问卷调查,将儿童口腔卫生习惯与乳牙患龋之间进行单因素和多因素的相关分析.结果 乳牙龋的相关因素分析表明,儿童使用含氟牙膏、每日零食次数减少与乳牙龋发病呈负相关,而幼儿经常喝果汁类饮料是致龋的危险因素(P<0.05).结论 幼儿患龋受多因素影响, 以饮食方面影响为主.
作者:阳宏林;张绍伟;张剑 刊期: 2008年第03期
目的 研究中国汉族人群家族性肥厚型心肌病的致病相关基因,寻求新突变位点,并分析基因型与表型的关系.方法 对3个无血缘关系的汉族家族性肥厚型心肌病家系先证者的β肌球蛋白重链(MYH7)基因,聚合酶链反应扩增其外显子片段,双脱氧末端终止法直接测序,克隆测序法确证,并分析各突变患者相应临床表型特点.结果 在一家系中发现MYH7基因nt2013c缺失、nt2025C插入,为一国内罕见移码突变,其为该家系患者间遗传相关的致病相关基因突变.结论 MYH7基因突变是我国汉族家族性肥厚型心肌病相关病因之一,其某些突变可在同一家系内遗传并致病,所致肥厚型心肌病外显率较低、临床症状出现较晚、进展较慢.同一突变携带者的临床表型存在异质性提示多因素参与了肥厚型心肌病的发生和发展.
作者:杨春;王爱玲;余元勋;徐岩;冯俊;史学功 刊期: 2008年第03期
目的 检测大鼠退变颈椎间盘内白细胞介素(IL)-1β、IL-6、肿瘤坏死因子(TNF)α含量, 探讨淫羊藿防治颈椎病的作用.方法 选用6月龄SD大鼠,体重(220±20) g,♀♂不拘,通过切除动物C2-C7棘上韧带、棘间韧带和分离椎旁两侧肌肉,建立颈椎退行性改变动物模型.在1、3月两个时间点摄颈椎X线片,证实模型成立后,分为淫羊藿模型组10只,生理盐水模型组10只,分别喂服淫羊藿水提液和生理盐水2个月,假手术对照组喂服生理盐水.取各组大鼠颈椎间盘用放射免疫分析法分别检测标本中的IL1-β、IL-6和TNF-α的含量.结果 生理盐水模型组颈椎间盘组织中IL-1β、IL-6、TNF-α的含量与假手术对照组相比较明显升高(P<0.01);淫羊藿模型组颈椎间盘组织中IL-1β、IL-6、TNF-α的含量与生理盐水模型组相比较明显降低(P<0.01).结论 退变椎间盘中释放的细胞因子可加速椎间盘的退变;淫羊藿能下调退变颈椎间盘中细胞因子的含量,其具有阻止炎性反应和减缓椎间盘退变的作用.
作者:赵凯;徐胜春;吴建贤;王斌;梁维龙 刊期: 2008年第03期
目的 构建pEGFP-C1-PEX真核表达载体并转染大鼠骨髓间质干细胞(MSCs),观察其在MSCs内的表达.方法 用RT -PCR法从大鼠C6胶质瘤细胞中扩增出带有XhoI、BamHI酶切位点的PEX基因片段,将PEX基因片段克隆到增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因真核表达载体pEGFP-C1上 ,通过脂质体将pEGFP-C1-PEX转染入大鼠MSCs.结果 pEGFP-C1-PEX真核表达载体构建成功,荧光显微镜下观察,pEGFP-C1-PEX表达载体转染到MSCs 24 h后可见PEX融合蛋白表达.结论 pEGFP-C1-PEX真核表达载体能够在大鼠MSCs中表达PEX融合蛋白.
作者:高歌;牛朝诗;董永飞;何国平;丁宛海;傅先明 刊期: 2008年第03期
目的 探讨鼻息肉中嗜酸粒细胞趋化因子(Eotaxin)的表达与嗜酸粒细胞(Eos)活化的关系;糖皮质激素对其抑制作用.方法 设置三组分别为鼻息肉组、鼻息肉地塞米松治疗组及正常鼻黏膜对照组;其中鼻息肉地塞米松治疗组入院后,术前接受地塞米松20 mg,静脉滴注,qd×5.Pharmacia CAP系统测定样本血清中ECP的水平;HE染色、免疫组织化学技术观察Eos和Eotaxin在标本黏膜中的表达;分别行统计学分析.结果 与地塞米松治疗组、正常对照组比较,鼻息肉组血清中ECP水平(16.47±5.38 μg/L)及组织中Eotaxin(50.85±32.22)表达明显增强(P<0.05),Eos活化增多;ECP水平与Eotaxin表达相互间呈正相关性(r=0.647);糖皮质激素对鼻息肉血清中ECP水平(6.26±3.13 μg/L)及组织中Eotaxin(15.21±11.32)表达有显著的抑制作用(P<0.05);正常对照组血清中ECP水平(3.57±1.49 μg/L)及组织中Eotaxin(13.08±10.62)表达水平低;鼻息肉地塞米松治疗组及正常黏膜对照组之间差异无显著性(P>0.05).结论 鼻息肉血清中ECP水平升高,组织中Eotaxin表达增强,且相互之间呈正相关.糖皮质激素能抑制外周血中Eos、组织中Eotaxin表达和Eos活化.
作者:高潮兵;方平;里晓红;杨克林 刊期: 2008年第03期
目的 探讨宫颈鳞状上皮异常的诊治结局,为临床正确处理提供借鉴.方法 对资料完整的11 746例宫颈液基薄层细胞学(TCT)示宫颈鳞状上皮异常的893例诊治结果进行分析.结果 宫颈鳞状上皮异常的发生率为7.60%,其中非典型鳞状细胞为5.82%,轻度鳞状上皮内病变为1.26%,重度鳞状上皮内病变为0.47%,原位癌为0.026%;轻度鳞状上皮内病变的病理符合率为49.67%,重度鳞状上皮内病变的病理符合率为81.82%,非典型鳞状细胞病理检查结果分布广泛,高级别病变的发生率达31.87%;细胞学级别高,高级别病变的发生率明显增加(P<0.01);不典型增生(CIN)发病年轻化,在31~40岁年龄段占60%左右;病理的符合率仅36.11%;CIN Ⅰ的微波(破坏)治疗和CIN切除治疗,治愈率为99.52%,残留率为0.47%,复发率为0.71%.结论 非典型鳞状细胞临床上应高度重视,在没有HPV检测分流的情况下,及时行阴道镜检查是必须的;CIN发病有明显年轻化趋势,应加强对年轻妇女宫颈疾病的筛查工作;细胞学技术的改进,使异常宫颈细胞学与病理结果有较好的一致性;阴道镜点活切在宫颈疾病诊断方面有一定的局限性,宫颈锥切有不可替代的诊断和治疗作用;足够范围的切除治疗CINⅢ具有可行的近期效果.
作者:谢云;周家德 刊期: 2008年第03期
目的 评估聚酸改性复合树脂与传统的玻璃离子水门汀和聚羧酸锌水门汀共3种材料在不同pH值溶液中的溶解性,探讨溶液pH值的不同对材料溶解性的影响.方法 将玻璃离子水门汀、聚羧酸锌水门汀和聚酸改性复合树脂样品分别置于2种浸泡液(乳酸pH 4.0和蒸馏水pH 7.0)中7d,Paffenbarger重量法测定各组前后重量改变.结果 浸泡7 d后,3种材料在乳酸中的溶解率均高于在蒸馏水中的溶解率,聚酸改性复合树脂的溶解率明显小于其它两种水门汀(P<0.05).结论 聚酸改性复合树脂在乳酸和水中的溶解率较玻璃离子和聚羧酸锌水门汀小、稳定性好,是口腔修复黏结的良好选择.
作者:韩骁;周健;唐旭炎;唐丽丽 刊期: 2008年第03期
目的 探讨上腔静脉综合征(SVCS)的手术方法,总结外科诊治经验.方法 手术治疗13例上腔静脉综合征患者,其中肺癌6例,恶性纵隔肿瘤6例,SVCS狭窄1例.11例采用人工血管置换上腔静脉或补片扩大;2例采用人工血管转流.结果 全组患者无手术死亡, 术后上腔静脉梗阻症状均明显改善.1例术后人造血管血栓形成,经溶栓治疗后痊愈.全组患者术后存活时间为6~30个月.结论 上腔静脉综合征采用原发病灶切除加人造血管置换手术治疗能够在短期内显著缓解临床症状,提高生存质量,效果确切.
作者:柯立;范军;徐美清;马冬春;魏大中;朱晓枫;田界勇 刊期: 2008年第03期
目的 探讨A771726大鼠在体各肠段的吸收动力学特征.方法 采用大鼠在体小肠回流装置,以UV法和HPLC法分别测定酚红和A771726的含量.结果 大鼠十二指肠﹑空肠﹑回肠﹑结肠2 h后对A771726的吸收百分率分别为36.0%±2.1%、27.5%±4.2%、38.1%±5.1%、22.5%±2.3%,吸收速率常数分别为0.232±0.023、0.172±0.042、0.261±0.044、0.122±0.011(1/h).在低、中、高3种不同浓度下,A771726全肠段的吸收速率常数分别为0.712±0.094、0.719±0.106、0.703±0.143 (1/h),差异无显著性.结论 A771726在大鼠各肠段均有吸收,其吸收机制为被动扩散,吸收动力学为一级吸收.
作者:朱熙;李俊;金涌;李淑娟 刊期: 2008年第03期
目的 建立前列腺癌转移小鼠模型,筛选同一标本来源的转移性和非转移性前列腺癌.方法 采用皮下注射DU145细胞悬液、肾包膜下组织块移植、原位细胞悬液注射法对BNX小鼠接种(或注射)组织块(或细胞悬液),观察各种方法所致的成瘤及转移情况,并采用RT-PCR初步对比分析MAPK4、SELM、IL-6、Stanniocalcin 2、Serpin1、Caveline-1、Laminin4、AL793338在小鼠体内的转移性和非转移性前列腺癌的表达情况.结果 ①皮下注射DU145细胞悬液的BNX小鼠均成瘤,但未发现明确转移;肾包膜下组织块移植小鼠均成瘤,肠系膜淋巴结均发生转移;而原位细胞悬液注射法小鼠均成瘤,并都伴有肠系膜、腹股沟淋巴结,3只小鼠发现肝、肺转移.② RT-PCR结果示MAPK4、SELM、IL-6、Stanniocalcin 2、Serpin1、Laminin4的目的条带在前列腺转移癌中与原位癌中有差异.结论 原位注射细胞悬液可能是有效的前列腺癌转移模型制作方法,采用该法在小鼠中获得转移性和非转移性前列腺癌的成功率较高.RT-PCR结果分析证实,转移灶的IL-6、MAPK4、SELM表达量与原位灶相比表达降低,Stanniocalcin 2、Serpin1和Laminin4表达量相对增加.
作者:朱秀;翟羽佳;徐凌;谭晓洁;张玉侠;曹广文;邓松华 刊期: 2008年第03期
目的 探讨urantide对心肌细胞急性缺血及缺氧再给氧损伤的保护作用.方法 采用皮下注射(sc)异丙肾上腺素(Iso)诱导小鼠急性心肌缺血,测定小鼠心肌组织及血清中肌酸激酶(CK)、超氧化物歧化酶(SOD)的活性以及丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)的含量,计算心肌含水量(MWC) 及心肌指数(MI).建立乳鼠原代心肌细胞缺氧再复氧模型,观察细胞存活情况并检测urantide对细胞培养上清液中CK活性和MDA含量的影响.结果 10、30 μg/kg urantide可显著降低小鼠心肌组织及血清中CK活性,明显升高NO含量;3~30 μg/kg urantide可呈浓度依赖性降低小鼠血清及心肌组织中MDA含量,升高SOD活性.同时,urantide 10、30 μg/kg剂量组可显著降低小鼠的MWC,显著抑制其MI的升高.在乳鼠原代心肌细胞缺氧再复氧模型中,10-6和10-7 mol/L的urantide能明显增加细胞存活率,urantide在10-6~10-10 mol/L浓度范围内能呈剂量依赖性抑制细胞培养上清液中CK活性和MDA含量的增高.结论 实验表明urantide对心肌缺血损伤具有一定的保护作用,其作用机制可能与改善低灌流、清除氧自由基及抗脂质过氧化有关.
作者:姚华;陈志武 刊期: 2008年第03期
目的 探讨人3号染色体短臂(3p)等位基因位点杂合性缺失(LOH)多区域联合检测的意义.方法 采用实时荧光定量PCR方法分别对32例非小细胞肺癌患者及8例非恶性肿瘤患者外周血有核细胞进行3p位点LOH检测,对试验结果统计学分析.结果 32例非小细胞肺癌外周血有核细胞LOH联合检出率为65.625%,各目的 基因检出率分别为18.75%(3p25)、31.25%(3p14)、50%(3p21.3),相比对照组检测结果差异具有显著性,联合检出率高于各位点单纯检出率,差别具有显著性.结论 非小细胞肺癌外周血有核细胞3p位点LOH检测对于肺癌的无创诊断有意义,且多区域联合检测有助于提高检测的敏感性.
作者:梅新宇;孙余婕;马冬春;徐美青;魏大中;田界勇;任自学 刊期: 2008年第03期
目的 研究口腔鳞状细胞癌肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)Fas/FasL的表达及其临床病理学意义.方法 采用免疫组织化学方法和脱氧核糖核酸末端转移酶(TDT)介导的原位末端标记(TUNEL)技术,对38例口腔鳞癌TIL的Fas/FasL表达及TIL和癌细胞的凋亡进行检测,观察TIL的Fas/FasL表达与TIL和癌细胞凋亡的关系.结果 TIL的Fas和FasL均有广泛的表达,TIL Fas表达阳性组的TIL凋亡指数(AI)明显高于Fas表达阴性组(P<0.05),TIL FasL表达阳性组的癌细胞凋亡指数与FasL表达阴性组差异无显著性(P>0.05).结论 口腔鳞癌TIL的Fas阳性表达与其凋亡有密切关系,而FasL的阳性表达则与癌细胞凋亡无关.癌细胞可能通过Fas凋亡系统诱导TIL的凋亡并通过某种机制逃避TIL的杀伤.
作者:孙麟;陈乔尔;何志良;胡芳芳;祖谷 刊期: 2008年第03期
目的 探讨影响大学生网络成瘾的相关因素,为大学生网络成瘾的干预提供依据.方法 采用网络成瘾量表、网络使用情况调查问卷、流调中心用抑郁量表、UCLA孤独量表、自尊量表、社会支持评定量表、幸福感指数问卷、人际信任量表和交往焦虑量表对合肥6所高校705名大学生进行了现况调查.结果 28名大学生网络成瘾,成瘾率为4.0%;性别、年级、专业兴趣、学习成绩、每周上网时间,网上游戏、抑郁、影响(P<0.05);非条件Logistic回归显示:年级、每周上网时间、网上游戏、抑郁和交往焦虑是网络成瘾的危险因素.结论 影响大学生网络成瘾的因素是多方面的,针对相关因素采取积极有效的预防和控制措施是有必要的.
作者:陈军;樊嘉禄 刊期: 2008年第03期
目的 探讨分离人增生性瘢痕组织中肥大细胞(MC)所用的I型胶原酶和透明质酸酶的佳浓度;获取MC,用于瘢痕瘙痒研究.方法 用不同浓度的I型胶原酶和透明质酸酶消化分离MC;甲苯胺蓝染色和番红复染,鉴定并计数MC.结果 MC体积大、核呈蓝色,胞浆内含紫红色分泌颗粒.当透明质酸酶浓度为1 mg/ml时,与I型胶原酶浓度为1、2 mg/ml组比较,Ⅰ型胶原酶浓度为3、4 mg/ml组分离出的MC占有核细胞的百分比明显增加,差异均有显著性(P<0.01);但3 mg/ml组与4 mg/ml组之间的差异不明显(P>0.05).当Ⅰ型胶原酶浓度为3 mg/ml时,与透明质酸酶浓度为0.5 mg/ml组比较,透明质酸酶浓度为1、2 mg/ml组分离出的MC占有核细胞的百分比明显增加,差异均有显著性(P<0.01);但1 mg/ml与2 mg/ml组之间的差异不明显(P>0.05).培养12 h的细胞悬液中大部分黏附能力强的细胞已贴壁、溶解,而MC黏附性较差,轻轻摇动就可重新悬浮于培养液中.结论 用Ⅰ型胶原酶和透质酸酶可以成功分离出人增生性瘢痕组织中的MC,佳浓度分别为3、1 mg/ml.分离的MC存活时间较长,可满足实验需求.
作者:赵李平;利天增;王明刚 刊期: 2008年第03期
目的 探索肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)在系统性红斑狼疮(SLE)细胞凋亡、自身抗体产生和疾病活动中作用.方法 60例SLE患者及20名健康对照,反转录聚合酶链反应(RT-PCR)半定量分析外周血单个核细胞(PBMC)的TRAIL mRNA表达;比色法测定PBMC内Caspase-3活性表达;酶联免疫法(ELISA)测定PBMC内核小体水平、血清中可溶性TRAIL(sTRAIL)和抗核小体抗体(AnuA)浓度.结果 狼疮活动组与稳定组及健康对照组相比,TRAIL mRNA平均表达水平(0.82±0.07)vs(0.77±0.06)vs(0.75±0.05)、Caspase-3活性(0.53±0.27)vs(0.39±0.23)vs(0.35±0.18)、核小体浓度(U/ml)((3.09)vs(0.53)vs(0.77)及血清sTRAIL水平(μg/L)(0.88±0.74)vs(0.58±0.32)vs(0.48±0.28),差异均有显著性(P<0.05).SLE患者TRAILmRNA平均表达水平与sTRAIL、Caspase-3活性及Caspase-3活性与核小体水平均呈显著正相关(P<0.05).SLE患者TRAILmRNA表达水平与SLE疾病活动指数(SLEDAI)积分数、抗dsDNA抗体、ESR、AnuA浓度呈正相关,与淋巴细胞计数及补体C4呈负相关;sTRAIL浓度与SLEDAI积分数呈正相关,与淋巴细胞计数呈负相关.核小体浓度与SLEDAI积分数、抗dsDNA抗体、AnuA浓度均呈显著正相关,与补体C3、C4水平呈负相关.结论 SLE活动患者PBMC的TRAIL表达水平及血清sTRAIL水平增高,凋亡酶Caspase-3的活性增高,可能介导PBMC异常凋亡,使核小体释放增加,自身抗体水平增加,参与疾病活动.
作者:盛君;汪国生;李向培;徐修才;张宏 刊期: 2008年第03期