杨春；王爱玲；余元勋；徐岩；冯俊；史学功
目的 探索兔脂肪间充质干细胞体外分离培养的方法及生物学特性,并探讨5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU) 标记脂肪间充质干细胞的效果.方法 取兔颈后脂肪采用胶原酶消化方法分离培养干细胞,诱导培养基定向成脂、成骨细胞诱导及组织化学鉴定.采用BrdU法标记干细胞, 免疫组化法鉴定其体外标记情况.结果 兔脂肪组织中可以分离培养出生长旺盛的干细胞,定向诱导后表现出成脂,成骨细胞的特性.BrdU可标记干细胞的核,体外标记率达95%.结论 兔脂肪干细胞易于体外分离培养,具有较强的自我更新能力及多向分化的潜能.BrdU对脂肪干细胞的标记效果满意,操作简单易行.
作者：谢娟；汪春兰；赵宇；程文丹；胡勇 刊期： 2008年第03期
目的 探讨上腔静脉综合征(SVCS)的手术方法,总结外科诊治经验.方法 手术治疗13例上腔静脉综合征患者,其中肺癌6例,恶性纵隔肿瘤6例,SVCS狭窄1例.11例采用人工血管置换上腔静脉或补片扩大;2例采用人工血管转流.结果 全组患者无手术死亡, 术后上腔静脉梗阻症状均明显改善.1例术后人造血管血栓形成,经溶栓治疗后痊愈.全组患者术后存活时间为6～30个月.结论 上腔静脉综合征采用原发病灶切除加人造血管置换手术治疗能够在短期内显著缓解临床症状,提高生存质量,效果确切.
作者：柯立；范军；徐美清；马冬春；魏大中；朱晓枫；田界勇 刊期： 2008年第03期
目的 检测不同肿瘤及其癌旁正常组织中hHBrk1基因的差异表达,为进一步研究hHBrk1基因对肿瘤生物学过程的影响提供线索.方法 以154对正常及肿瘤组织(19种不同人体组织)和10种肿瘤细胞株的cDNA的肿瘤谱阵列芯片(Cancer profiling array Ⅱ)为研究材料,采用Northern杂交方法分析目的 基因表达水平的差异.根据阳性结果收集临床肿瘤组织样本,用RT-PCR检测hHBrk1基因表达,以验证芯片结果的可靠性.结果 154对组织及10个肿瘤细胞株均表达hHBrk1基因.其中肺肿瘤组织高表达hHBrk1基因,与正常配对肺组织表达丰度差异有显著性(P<0.01);在肾癌组织中的hHBrk1基因表达丰度低于配对肾组织(P<0.01).RT-PCR证实8临床肺肿瘤组织中5例高表达hHBrk1基因.结论 肿瘤谱阵列芯片技术能够快速检测hHBrk1基因在不同组织中的表达差异,hHBrk1基因可能与肺癌及肾癌的发生、发展有关.
作者：祝敏；虞红珍；周平坤；隋建丽；王豫；徐勤枝；汪思应 刊期： 2008年第03期
目的 探讨A771726大鼠在体各肠段的吸收动力学特征.方法 采用大鼠在体小肠回流装置,以UV法和HPLC法分别测定酚红和A771726的含量.结果 大鼠十二指肠﹑空肠﹑回肠﹑结肠2 h后对A771726的吸收百分率分别为36.0%±2.1%、27.5%±4.2%、38.1%±5.1%、22.5%±2.3%,吸收速率常数分别为0.232±0.023、0.172±0.042、0.261±0.044、0.122±0.011(1/h).在低、中、高3种不同浓度下,A771726全肠段的吸收速率常数分别为0.712±0.094、0.719±0.106、0.703±0.143 (1/h),差异无显著性.结论 A771726在大鼠各肠段均有吸收,其吸收机制为被动扩散,吸收动力学为一级吸收.
作者：朱熙；李俊；金涌；李淑娟 刊期： 2008年第03期
目的 探讨宫颈鳞状上皮异常的诊治结局,为临床正确处理提供借鉴.方法 对资料完整的11 746例宫颈液基薄层细胞学(TCT)示宫颈鳞状上皮异常的893例诊治结果进行分析.结果 宫颈鳞状上皮异常的发生率为7.60%,其中非典型鳞状细胞为5.82%,轻度鳞状上皮内病变为1.26%,重度鳞状上皮内病变为0.47%,原位癌为0.026%;轻度鳞状上皮内病变的病理符合率为49.67%,重度鳞状上皮内病变的病理符合率为81.82%,非典型鳞状细胞病理检查结果分布广泛,高级别病变的发生率达31.87%;细胞学级别高,高级别病变的发生率明显增加(P<0.01);不典型增生(CIN)发病年轻化,在31～40岁年龄段占60%左右;病理的符合率仅36.11%;CIN Ⅰ的微波(破坏)治疗和CIN切除治疗,治愈率为99.52%,残留率为0.47%,复发率为0.71%.结论 非典型鳞状细胞临床上应高度重视,在没有HPV检测分流的情况下,及时行阴道镜检查是必须的;CIN发病有明显年轻化趋势,应加强对年轻妇女宫颈疾病的筛查工作;细胞学技术的改进,使异常宫颈细胞学与病理结果有较好的一致性;阴道镜点活切在宫颈疾病诊断方面有一定的局限性,宫颈锥切有不可替代的诊断和治疗作用;足够范围的切除治疗CINⅢ具有可行的近期效果.
作者：谢云；周家德 刊期： 2008年第03期
目的 观察小鼠血吸虫病肝组织中内皮细胞特异性分子-1(ESM-1)的变化及黄芪总苷(AST)对其影响.方法 ICR小鼠120只随机分为AST高剂量(20mg/kg·d-1)组, AST低剂量(10 mg/kg·d-1)组, 阳性药(护肝片,540 mg/kg·d-1)组、模型对照组,每只实验小鼠感染血吸虫尾蚴30条,均于感染40 d后以吡喹酮(500 mg/kg·d-1)治疗2d.同时设30只小鼠为正常对照组.分别于感染后6、10和14周末,每组随机处死10只小鼠,取肝脏组织作常规病理学检测并制作组织芯片,采用免疫组织化学和原位分子杂交技术检测ESM-1 mRNA及蛋白.结果 ①抗ESM-1蛋白抗体在血吸虫肝病组织中的炎细胞、成纤维细胞、胆管上皮细胞、血管内皮细胞、肝细胞均呈不同程度的阳性反应,ESM-1 mRNA主要在炎细胞、胆管上皮细胞、血管内皮细胞和肝细胞表达,成纤维细胞未检测出ESM-1 mRNA;② 10周和14周末AST两个剂量组ESM-1的蛋白水平低于模型组(P<0.01),10周末 AST高、低剂量组ESM-1 mRNA阳性细胞计数低于模型组(P<0.01).结论 小鼠血吸虫病肝组织中,炎细胞可产生ESM-1,成纤维细胞可能存在ESM-1受体.ESM-1可能通过旁分泌作用参与血吸虫肝纤维化过程,黄芪总苷对ESM-1的抑制作用可能是其抗纤维化的机制之一.
作者：张岩平；吴强；丁向东；左莉；张晴；王红群；汪渊 刊期： 2008年第03期
目的 构建pEGFP-C1-PEX真核表达载体并转染大鼠骨髓间质干细胞(MSCs),观察其在MSCs内的表达.方法 用RT -PCR法从大鼠C6胶质瘤细胞中扩增出带有XhoI、BamHI酶切位点的PEX基因片段,将PEX基因片段克隆到增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因真核表达载体pEGFP-C1上 ,通过脂质体将pEGFP-C1-PEX转染入大鼠MSCs.结果 pEGFP-C1-PEX真核表达载体构建成功,荧光显微镜下观察,pEGFP-C1-PEX表达载体转染到MSCs 24 h后可见PEX融合蛋白表达.结论 pEGFP-C1-PEX真核表达载体能够在大鼠MSCs中表达PEX融合蛋白.
作者：高歌；牛朝诗；董永飞；何国平；丁宛海；傅先明 刊期： 2008年第03期
目的 探讨鼻息肉中嗜酸粒细胞趋化因子(Eotaxin)的表达与嗜酸粒细胞(Eos)活化的关系;糖皮质激素对其抑制作用.方法 设置三组分别为鼻息肉组、鼻息肉地塞米松治疗组及正常鼻黏膜对照组;其中鼻息肉地塞米松治疗组入院后,术前接受地塞米松20 mg,静脉滴注,qd×5.Pharmacia CAP系统测定样本血清中ECP的水平;HE染色、免疫组织化学技术观察Eos和Eotaxin在标本黏膜中的表达;分别行统计学分析.结果 与地塞米松治疗组、正常对照组比较,鼻息肉组血清中ECP水平(16.47±5.38 μg/L)及组织中Eotaxin(50.85±32.22)表达明显增强(P<0.05),Eos活化增多;ECP水平与Eotaxin表达相互间呈正相关性(r=0.647);糖皮质激素对鼻息肉血清中ECP水平(6.26±3.13 μg/L)及组织中Eotaxin(15.21±11.32)表达有显著的抑制作用(P<0.05);正常对照组血清中ECP水平(3.57±1.49 μg/L)及组织中Eotaxin(13.08±10.62)表达水平低;鼻息肉地塞米松治疗组及正常黏膜对照组之间差异无显著性(P>0.05).结论 鼻息肉血清中ECP水平升高,组织中Eotaxin表达增强,且相互之间呈正相关.糖皮质激素能抑制外周血中Eos、组织中Eotaxin表达和Eos活化.
作者：高潮兵；方平；里晓红；杨克林 刊期： 2008年第03期
先天性主动脉窦瘤较少见,约占先天性心脏病(先心病)的0.31%～3.56%[1].我院于2001年7月～2007年7月间共手术治疗先天性主动脉窦瘤48例,手术效果满意,现报道如下.
作者：宣海洋；葛建军；周正春 刊期： 2008年第03期
目的 评价T型锁定加压钢板(T-LCP)经掌侧植入治疗桡骨远端骨折的疗效.方法 采用随机对照方法,将58例需要手术治疗的桡骨远端骨折患者分为治疗组和对照组,治疗组用T-LCP,对照组用普通T型钢板,两组均采用经掌侧入路植入,术后6个月对患者进行临床疗效评定.结果 术后6个月腕关节功能评分,治疗组优良率为96.43%,对照组优良率为76.67%,差异有显著性(P<0.05);治疗组内固定松动、肌腱磨损、骨折复位丢失等并发症为两例(7.14%),对照组并发症为11例(36.67%),差异亦有显著性(P<0.05).结论 T-LCP掌侧入路固定治疗桡骨远端骨折具有创伤小、并发症少、固定牢固、骨折愈合快等优点.
作者：张军；尹宗生 刊期： 2008年第03期
目的 应用固相微萃取-气相色谱/质谱技术对正常人及早期肺癌患者呼出气体中挥发性有机化合物成分进行定量检测并建立其技术平台.方法 用Tedlar采样袋收集正常人和Ⅰ期肺癌患者呼气样品各10份,经固相微萃取浓缩后上样气相色谱/质谱进行定量检测,以标准品为对照,检测结果用Wilicoxon秩和检验统计.结果 在呼气样品中可检测出74～114种挥发性有机化合物,其中24种化合物在所有样品中都被稳定检测并进行定量.在10 份肺癌患者呼气样品中,正丁醇的浓度范围为3.71～25.99 ng/L, 3-羟基-2-丁酮的浓度范围为3.81～25.67 ng/L,均明显高于对照组的浓度(P<0.05).结论 正丁醇和3-羟基-2-丁酮可能是鉴别早期肺癌有效的肿瘤标志物,固相微萃取-气相色谱/质谱法对于呼气中痕量挥发性有机化合物成分的成功定量分析为今后的肿瘤呼气诊断分析奠定了方法学基础.
作者：宋耕；秦涛；刘虎；徐国兵；熊福星；孙国平；顾康生；陈振东 刊期： 2008年第03期
目的 探讨经腹全胃切除术后并发症的发生及防治.方法 回顾性分析我院1 538例经腹全胃切除术的临床资料,采用Logistic多因素回归分析研究影响手术后并发症及死亡率的危险因素.结果全组患者术后并发症发生率和死亡率分别是9.49%和1.23%,D0/D1和D2/D32组的术后并发症发生率分别为10.60%和8.80%(P>0.05).2组手术死亡率分别为1.26%和1.18%(P>0.05).术后常见的并发症是肺部感染(20.54%,30/146),影响手术并发症和死亡率的主要因素是肿瘤Ⅳ期、术前合并症、姑息性切除、联合脏器切除(P<0.05).Logistic多元回归分析显示淋巴结清除范围不是影响手术并发症和死亡率的主要因素(P>0.05).结论 胃癌晚期患者手术并发症发生率高,对胃癌Ⅳ期患者行姑息性手术时应避免施行广泛性淋巴结清除及联合脏器切除术.
作者：金小顺；耿小平；朱立新；熊奇如；候辉；刘念；王国斌 刊期： 2008年第03期
目的 比较三种肠聚集性大肠埃希菌、小肠结肠炎耶尔森菌和鼠疫耶尔森菌HPI毒力岛核心区ybtE基因的同源性.方法 PCR扩增肠聚集性大肠埃希菌(EAEC)17-2 ybtE基因的完整序列,克隆后测序.用ABIPRISM软件对该ybtE基因序列与已知的鼠疫耶尔森菌HPI的ybtE基因以及小肠结肠炎耶尔森菌HPI的irp5基因进行核苷酸序列和推导氨基酸序列比较.结果 核苷酸序列,EAEC17-2与鼠疫耶尔森菌及小肠结肠炎耶尔森菌之间的同源性分别为99.8%和98.2%,鼠疫耶尔森菌与小肠结肠炎耶尔森菌之间的同源性为98.2%;推导氨基酸序列,EAEC17-2与鼠疫耶尔森菌及小肠结肠炎耶尔森菌之间的同源性分别为99.8%和97.6%,鼠疫耶尔森菌与小肠结肠炎耶尔森菌之间的同源性为97.8%.结论 ybtE基因作为HPI的功能基因高度保守,EAEC中的HPI可能来源于Yps HPI.
作者：张冬梅；王斌 刊期： 2008年第03期
目的 检测大鼠退变颈椎间盘内白细胞介素(IL)-1β、IL-6、肿瘤坏死因子(TNF)α含量, 探讨淫羊藿防治颈椎病的作用.方法 选用6月龄SD大鼠,体重(220±20) g,♀♂不拘,通过切除动物C2-C7棘上韧带、棘间韧带和分离椎旁两侧肌肉,建立颈椎退行性改变动物模型.在1、3月两个时间点摄颈椎X线片,证实模型成立后,分为淫羊藿模型组10只,生理盐水模型组10只,分别喂服淫羊藿水提液和生理盐水2个月,假手术对照组喂服生理盐水.取各组大鼠颈椎间盘用放射免疫分析法分别检测标本中的IL1-β、IL-6和TNF-α的含量.结果 生理盐水模型组颈椎间盘组织中IL-1β、IL-6、TNF-α的含量与假手术对照组相比较明显升高(P<0.01);淫羊藿模型组颈椎间盘组织中IL-1β、IL-6、TNF-α的含量与生理盐水模型组相比较明显降低(P<0.01).结论 退变椎间盘中释放的细胞因子可加速椎间盘的退变;淫羊藿能下调退变颈椎间盘中细胞因子的含量,其具有阻止炎性反应和减缓椎间盘退变的作用.
作者：赵凯；徐胜春；吴建贤；王斌；梁维龙 刊期： 2008年第03期
目的 观察褪黑素对人早幼粒细胞白血病细胞株NB4凋亡、分化及细胞周期的影响.方法 以不同浓度的褪黑素(0.1、0.5、1 mmol/L)加入NB4细胞中,继续培养24、48、72 h,利用流式细胞术检测细胞凋亡率,细胞膜表面抗原CD33和CD11b的表达阳性率,及细胞周期的变化情况.结果 MLT有促进NB4细胞凋亡的作用,且呈时间和浓度依赖性增加(P<0.05);CD33的细胞阳性率没有变化(P>0.05),CD11b的细胞阳性率在浓度为1 mmol/L,48 h和72 h有轻度增加(P<0.05);细胞周期检测则显示随着浓度和时间的增加, G1期细胞增多,S期细胞减少(P<0.05).结论 褪黑素有促进NB4细胞凋亡,影响细胞生长周期的作用,诱导分化作用则不明显.
作者：曾庆曙；刘沁华；夏瑞祥；李嘉嘉 刊期： 2008年第03期
目的 探讨人3号染色体短臂(3p)等位基因位点杂合性缺失(LOH)多区域联合检测的意义.方法 采用实时荧光定量PCR方法分别对32例非小细胞肺癌患者及8例非恶性肿瘤患者外周血有核细胞进行3p位点LOH检测,对试验结果统计学分析.结果 32例非小细胞肺癌外周血有核细胞LOH联合检出率为65.625%,各目的 基因检出率分别为18.75%(3p25)、31.25%(3p14)、50%(3p21.3),相比对照组检测结果差异具有显著性,联合检出率高于各位点单纯检出率,差别具有显著性.结论 非小细胞肺癌外周血有核细胞3p位点LOH检测对于肺癌的无创诊断有意义,且多区域联合检测有助于提高检测的敏感性.
作者：梅新宇；孙余婕；马冬春；徐美青；魏大中；田界勇；任自学 刊期： 2008年第03期
目的 建立前列腺癌转移小鼠模型,筛选同一标本来源的转移性和非转移性前列腺癌.方法 采用皮下注射DU145细胞悬液、肾包膜下组织块移植、原位细胞悬液注射法对BNX小鼠接种(或注射)组织块(或细胞悬液),观察各种方法所致的成瘤及转移情况,并采用RT-PCR初步对比分析MAPK4、SELM、IL-6、Stanniocalcin 2、Serpin1、Caveline-1、Laminin4、AL793338在小鼠体内的转移性和非转移性前列腺癌的表达情况.结果 ①皮下注射DU145细胞悬液的BNX小鼠均成瘤,但未发现明确转移;肾包膜下组织块移植小鼠均成瘤,肠系膜淋巴结均发生转移;而原位细胞悬液注射法小鼠均成瘤,并都伴有肠系膜、腹股沟淋巴结,3只小鼠发现肝、肺转移.② RT-PCR结果示MAPK4、SELM、IL-6、Stanniocalcin 2、Serpin1、Laminin4的目的条带在前列腺转移癌中与原位癌中有差异.结论 原位注射细胞悬液可能是有效的前列腺癌转移模型制作方法,采用该法在小鼠中获得转移性和非转移性前列腺癌的成功率较高.RT-PCR结果分析证实,转移灶的IL-6、MAPK4、SELM表达量与原位灶相比表达降低,Stanniocalcin 2、Serpin1和Laminin4表达量相对增加.
作者：朱秀；翟羽佳；徐凌；谭晓洁；张玉侠；曹广文；邓松华 刊期： 2008年第03期
目的 通过内皮抑素对裸鼠乳腺癌细胞Bcl-2、Bax表达影响的实验研究,探讨内皮抑素可能的作用机制.方法 建立人乳腺癌裸鼠模型.接种乳腺癌细胞悬液后第1周于种植部位皮下注射内皮抑素,隔天1次,共用7周.第8周颈椎脱位处死裸鼠,完整剥离肿瘤,检测肿瘤细胞Bcl-2表达、Bax表达.结果 对照组、治疗Ⅰ组、治疗Ⅱ组肿瘤细胞的Bcl-2表达度分别为(0.90±0.10)、(0.70±0.21)、(0.41±0.09),以上各项数据,组间差异有显著性(P<0.05);Bax表达度分别为(0.51±0.10)、(0.53±0.10)、(0.55±0.09),组间数据无统计学意义(P>0.05).从以上数据看出内皮抑素下调裸鼠乳腺癌细胞Bcl-2表达,对Bax表达无影响,从而改变凋亡调节蛋白Bcl-2、Bax在肿瘤细胞的比例促进肿瘤细胞凋亡.结论 内皮抑素促进乳腺癌细胞凋亡的分子机制之一是下调肿瘤细胞抗凋亡蛋白Bcl-2的表达.
作者：李勇；余昌俊；宋海屏 刊期： 2008年第03期
目的 构建乳铁蛋白抗菌肽(Lfcin B)与免疫调节肽(PGPIPN)融合肽表达质粒,并在大肠杆菌BL21中表达及纯化.方法 采用重叠延伸PCR技术获得融合肽基因片段,并构建到原核表达载体pGEX-KG中,挑选阳性重组子,经限制性内切酶鉴定后转化到大肠杆菌BL21,然后用IPTG诱导表达,通过SDS-PAGE及Western-blot方法鉴定表达的融合蛋白.用Glutathione Sepharose 4B亲和层析方法纯化融合蛋白.结果 成功构建原核表达质粒pGEX-KG-FP,并在大肠杆菌BL21中诱导其高表达.SDS-PAGE及Western-blot分析显示,特异性的抗GST单克隆抗体所识别的融合蛋白分子量与理论值相近.经Glutathione Sepharose 4B纯化后,得到较纯的GST-FP融合蛋白.结论 构建了原核表达的融合蛋白质粒,并高效表达和纯化了该融合蛋白.
作者：江良梁；秦宜德；周艳；王超；刘滋康 刊期： 2008年第03期
目的 探讨分离人增生性瘢痕组织中肥大细胞(MC)所用的I型胶原酶和透明质酸酶的佳浓度;获取MC,用于瘢痕瘙痒研究.方法 用不同浓度的I型胶原酶和透明质酸酶消化分离MC;甲苯胺蓝染色和番红复染,鉴定并计数MC.结果 MC体积大、核呈蓝色,胞浆内含紫红色分泌颗粒.当透明质酸酶浓度为1 mg/ml时,与I型胶原酶浓度为1、2 mg/ml组比较,Ⅰ型胶原酶浓度为3、4 mg/ml组分离出的MC占有核细胞的百分比明显增加,差异均有显著性(P<0.01);但3 mg/ml组与4 mg/ml组之间的差异不明显(P>0.05).当Ⅰ型胶原酶浓度为3 mg/ml时,与透明质酸酶浓度为0.5 mg/ml组比较,透明质酸酶浓度为1、2 mg/ml组分离出的MC占有核细胞的百分比明显增加,差异均有显著性(P<0.01);但1 mg/ml与2 mg/ml组之间的差异不明显(P>0.05).培养12 h的细胞悬液中大部分黏附能力强的细胞已贴壁、溶解,而MC黏附性较差,轻轻摇动就可重新悬浮于培养液中.结论 用Ⅰ型胶原酶和透质酸酶可以成功分离出人增生性瘢痕组织中的MC,佳浓度分别为3、1 mg/ml.分离的MC存活时间较长,可满足实验需求.
作者：赵李平；利天增；王明刚 刊期： 2008年第03期
安徽医科大学学报杂志
主管:安徽省教育厅
主办：安徽医科大学
