学术投稿

褪黑素对NB4细胞作用的研究

曾庆曙;刘沁华;夏瑞祥;李嘉嘉

关键词:褪黑激素/药理学, 白血病, 早幼粒细胞, 急性/药物疗法, 细胞凋亡/药物作用, 细胞分化/药物作用, 细胞周期
摘要:目的 观察褪黑素对人早幼粒细胞白血病细胞株NB4凋亡、分化及细胞周期的影响.方法 以不同浓度的褪黑素(0.1、0.5、1 mmol/L)加入NB4细胞中,继续培养24、48、72 h,利用流式细胞术检测细胞凋亡率,细胞膜表面抗原CD33和CD11b的表达阳性率,及细胞周期的变化情况.结果 MLT有促进NB4细胞凋亡的作用,且呈时间和浓度依赖性增加(P<0.05);CD33的细胞阳性率没有变化(P>0.05),CD11b的细胞阳性率在浓度为1 mmol/L,48 h和72 h有轻度增加(P<0.05);细胞周期检测则显示随着浓度和时间的增加, G1期细胞增多,S期细胞减少(P<0.05).结论 褪黑素有促进NB4细胞凋亡,影响细胞生长周期的作用,诱导分化作用则不明显.
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    目的 应用固相微萃取-气相色谱/质谱技术对正常人及早期肺癌患者呼出气体中挥发性有机化合物成分进行定量检测并建立其技术平台.方法 用Tedlar采样袋收集正常人和Ⅰ期肺癌患者呼气样品各10份,经固相微萃取浓缩后上样气相色谱/质谱进行定量检测,以标准品为对照,检测结果用Wilicoxon秩和检验统计.结果 在呼气样品中可检测出74~114种挥发性有机化合物,其中24种化合物在所有样品中都被稳定检测并进行定量.在10 份肺癌患者呼气样品中,正丁醇的浓度范围为3.71~25.99 ng/L, 3-羟基-2-丁酮的浓度范围为3.81~25.67 ng/L,均明显高于对照组的浓度(P<0.05).结论 正丁醇和3-羟基-2-丁酮可能是鉴别早期肺癌有效的肿瘤标志物,固相微萃取-气相色谱/质谱法对于呼气中痕量挥发性有机化合物成分的成功定量分析为今后的肿瘤呼气诊断分析奠定了方法学基础.

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    作者:姚华;陈志武 刊期: 2008年第03期

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    作者:韩骁;周健;唐旭炎;唐丽丽 刊期: 2008年第03期

  • 宫颈鳞状上皮异常诊治结果分析

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    作者:谢云;周家德 刊期: 2008年第03期

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    作者:孙麟;陈乔尔;何志良;胡芳芳;祖谷 刊期: 2008年第03期

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    目的 探讨人3号染色体短臂(3p)等位基因位点杂合性缺失(LOH)多区域联合检测的意义.方法 采用实时荧光定量PCR方法分别对32例非小细胞肺癌患者及8例非恶性肿瘤患者外周血有核细胞进行3p位点LOH检测,对试验结果统计学分析.结果 32例非小细胞肺癌外周血有核细胞LOH联合检出率为65.625%,各目的 基因检出率分别为18.75%(3p25)、31.25%(3p14)、50%(3p21.3),相比对照组检测结果差异具有显著性,联合检出率高于各位点单纯检出率,差别具有显著性.结论 非小细胞肺癌外周血有核细胞3p位点LOH检测对于肺癌的无创诊断有意义,且多区域联合检测有助于提高检测的敏感性.

    作者:梅新宇;孙余婕;马冬春;徐美青;魏大中;田界勇;任自学 刊期: 2008年第03期

  • 肿瘤谱阵列芯片技术分析人体不同癌组织hHBrk1基因的差异表达

    目的 检测不同肿瘤及其癌旁正常组织中hHBrk1基因的差异表达,为进一步研究hHBrk1基因对肿瘤生物学过程的影响提供线索.方法 以154对正常及肿瘤组织(19种不同人体组织)和10种肿瘤细胞株的cDNA的肿瘤谱阵列芯片(Cancer profiling array Ⅱ)为研究材料,采用Northern杂交方法分析目的 基因表达水平的差异.根据阳性结果收集临床肿瘤组织样本,用RT-PCR检测hHBrk1基因表达,以验证芯片结果的可靠性.结果 154对组织及10个肿瘤细胞株均表达hHBrk1基因.其中肺肿瘤组织高表达hHBrk1基因,与正常配对肺组织表达丰度差异有显著性(P<0.01);在肾癌组织中的hHBrk1基因表达丰度低于配对肾组织(P<0.01).RT-PCR证实8临床肺肿瘤组织中5例高表达hHBrk1基因.结论 肿瘤谱阵列芯片技术能够快速检测hHBrk1基因在不同组织中的表达差异,hHBrk1基因可能与肺癌及肾癌的发生、发展有关.

    作者:祝敏;虞红珍;周平坤;隋建丽;王豫;徐勤枝;汪思应 刊期: 2008年第03期

  • 阴道超声下卵巢呈多囊性改变52例临床观察

    目的 分析在阴道超声下表现为多囊卵巢患者的临床特点.方法 对我院妇科52例在阴道超声下卵巢呈多囊性改变患者的临床资料进行分析,并根据是否合并长期无排卵或雄激素升高的临床和(或)生化依据分为多囊卵巢综合征(PCOS)组及非PCOS组,比较两组间卵巢形态学特征及代谢变化.结果 52例患者中PCOS组33例,占63.5% ;非PCOS组19例,占36.5%,其中高催乳素血症(HPRL)3例(5.8%),甲状腺功能减退2例(3.8%),单纯性肥胖3例(5.8%),卵巢肿瘤2例(3.8%),妊娠2例(3.8%),特发性血小板减少1例(1.9%),正常妇女6例(11.5%),其中4例3个月内曾服用过口服避孕药.PCOS组的双侧卵巢体积、卵泡数及体质指数(BMI)均大于非PCOS组,但两者相比差异无显著性;而PCOS组睾酮水平、黄体生成素/卵泡刺激素均明显高于非PCOS组,差异有显著性.结论 引起卵巢呈多囊性改变的原因有多种,其中PCOS为主要原因,卵巢多囊性改变是机体多种功能性紊乱的终结果,而不是中枢或局部的特异性疾病.

    作者:夏晓平;曹云霞 刊期: 2008年第03期

  • 死亡相关蛋白11对染色质形态的影响

    目的 研究死亡相关蛋白11(THAP11)对染色质形态的影响.方法 将THAP11与pRC-lac载体上lac的阻遏物融合表达于AO3-1细胞中,然后利用染色质形态检测技术检测THAP11对染色质形态的影响.结果 与对照组比较,THAP11能使染色质更加浓缩.结论 THAP11可能具有转录抑制功能和作为白血病的抑癌因子,为进一步研究THAP11功能提供了线索.

    作者:李扬;朱晨雁;翟倩;丁丽华;叶棋浓;李长燕;詹轶群;杨晓明;汪思应 刊期: 2008年第03期

  • 内皮抑素对裸鼠乳腺癌细胞Bcl-2、Bax表达的影响

    目的 通过内皮抑素对裸鼠乳腺癌细胞Bcl-2、Bax表达影响的实验研究,探讨内皮抑素可能的作用机制.方法 建立人乳腺癌裸鼠模型.接种乳腺癌细胞悬液后第1周于种植部位皮下注射内皮抑素,隔天1次,共用7周.第8周颈椎脱位处死裸鼠,完整剥离肿瘤,检测肿瘤细胞Bcl-2表达、Bax表达.结果 对照组、治疗Ⅰ组、治疗Ⅱ组肿瘤细胞的Bcl-2表达度分别为(0.90±0.10)、(0.70±0.21)、(0.41±0.09),以上各项数据,组间差异有显著性(P<0.05);Bax表达度分别为(0.51±0.10)、(0.53±0.10)、(0.55±0.09),组间数据无统计学意义(P>0.05).从以上数据看出内皮抑素下调裸鼠乳腺癌细胞Bcl-2表达,对Bax表达无影响,从而改变凋亡调节蛋白Bcl-2、Bax在肿瘤细胞的比例促进肿瘤细胞凋亡.结论 内皮抑素促进乳腺癌细胞凋亡的分子机制之一是下调肿瘤细胞抗凋亡蛋白Bcl-2的表达.

    作者:李勇;余昌俊;宋海屏 刊期: 2008年第03期

  • 人增生性瘢痕组织中肥大细胞分离的条件优化

    目的 探讨分离人增生性瘢痕组织中肥大细胞(MC)所用的I型胶原酶和透明质酸酶的佳浓度;获取MC,用于瘢痕瘙痒研究.方法 用不同浓度的I型胶原酶和透明质酸酶消化分离MC;甲苯胺蓝染色和番红复染,鉴定并计数MC.结果 MC体积大、核呈蓝色,胞浆内含紫红色分泌颗粒.当透明质酸酶浓度为1 mg/ml时,与I型胶原酶浓度为1、2 mg/ml组比较,Ⅰ型胶原酶浓度为3、4 mg/ml组分离出的MC占有核细胞的百分比明显增加,差异均有显著性(P<0.01);但3 mg/ml组与4 mg/ml组之间的差异不明显(P>0.05).当Ⅰ型胶原酶浓度为3 mg/ml时,与透明质酸酶浓度为0.5 mg/ml组比较,透明质酸酶浓度为1、2 mg/ml组分离出的MC占有核细胞的百分比明显增加,差异均有显著性(P<0.01);但1 mg/ml与2 mg/ml组之间的差异不明显(P>0.05).培养12 h的细胞悬液中大部分黏附能力强的细胞已贴壁、溶解,而MC黏附性较差,轻轻摇动就可重新悬浮于培养液中.结论 用Ⅰ型胶原酶和透质酸酶可以成功分离出人增生性瘢痕组织中的MC,佳浓度分别为3、1 mg/ml.分离的MC存活时间较长,可满足实验需求.

    作者:赵李平;利天增;王明刚 刊期: 2008年第03期

  • 三种细菌HPI核心区ybtE基因核苷酸序列及推导氨基酸序列的比较研究

    目的 比较三种肠聚集性大肠埃希菌、小肠结肠炎耶尔森菌和鼠疫耶尔森菌HPI毒力岛核心区ybtE基因的同源性.方法 PCR扩增肠聚集性大肠埃希菌(EAEC)17-2 ybtE基因的完整序列,克隆后测序.用ABIPRISM软件对该ybtE基因序列与已知的鼠疫耶尔森菌HPI的ybtE基因以及小肠结肠炎耶尔森菌HPI的irp5基因进行核苷酸序列和推导氨基酸序列比较.结果 核苷酸序列,EAEC17-2与鼠疫耶尔森菌及小肠结肠炎耶尔森菌之间的同源性分别为99.8%和98.2%,鼠疫耶尔森菌与小肠结肠炎耶尔森菌之间的同源性为98.2%;推导氨基酸序列,EAEC17-2与鼠疫耶尔森菌及小肠结肠炎耶尔森菌之间的同源性分别为99.8%和97.6%,鼠疫耶尔森菌与小肠结肠炎耶尔森菌之间的同源性为97.8%.结论 ybtE基因作为HPI的功能基因高度保守,EAEC中的HPI可能来源于Yps HPI.

    作者:张冬梅;王斌 刊期: 2008年第03期

  • HIV-1 HXB2株Tat蛋白在大肠杆菌中的分段表达及免疫原性分析

    目的 研究对人类免疫缺陷病毒Ⅰ型HXB2株调控蛋白Tat原核表达产生影响的区域和Tat蛋白重要的抗原表位.方法 用PCR方法获得Tat(1-48aa)、Tat(22-72aa)和Tat(38-101aa)DNA片段,构建其原核表达质粒pET32a-Tat(1-48aa)、pET32a-Tat(22-72aa)和pET32a-Tat(38-101aa),并转入E.coli BL21(DE3)中进行诱导表达及纯化,SDS-PAGE鉴定表达及纯化产物.采用间接ELISA方法用兔抗pET32a-Tat抗血清对三种肽段进行免疫原性分析.结果成功构建了pET32a-Tat(1-48aa)、pET32a-Tat(22-72aa)和pET32a-Tat(38-101aa)质粒,分别表达出相对分子质量(Mr)为23×103、23×103和25×103的融合肽段,其浓度分别为4.26、3.35和5.11mg/ml.间接ELISA结果表明三种融合肽段与兔抗pET32a-Tat抗血清均呈特异性结合反应,其抗体滴度分别为1:128 000、1:32 000、1:64 000,而抗血清与pET32a蛋白仅有较弱结合.结论半胱氨酸富集区(22-37位氨基酸)对Tat蛋白的原核表达有较显著影响;Tat蛋白的N端区、碱性区和C端区是其重要的抗原表位,其中N端区的免疫原性强.

    作者:陈璐;潘卫;曹洁;卢海妹;何俊;蒋少华;唐萍;李存枚;廖文婷;邓松华 刊期: 2008年第03期

  • 雷帕霉素对人肝癌裸鼠皮下移植瘤生长的影响

    目的 探讨雷帕霉素对人肝癌裸鼠皮下移植瘤生长的影响及可能机制.方法 建立人肝癌裸鼠皮下移植瘤模型,随机分组后给予雷帕霉素常规剂量(1.5 mg/kg·d-1)、低剂量(0.15 mg/kg·d-1)、高剂量(4.5 mg/kg·d-1)腹腔注射,对照组给予相同体积生理盐水.用药21 d后处死动物,称量鼠重、瘤重,计算抑瘤率;CD34标记血管内皮细胞后行肿瘤微血管密度(MVD)计数;ELISA法检测血清中血管内皮细胞生长因子(VEGF)表达水平.结果 与对照组比较,常规剂量雷帕霉素明显抑制了肿瘤生长,并降低了肿瘤MVD及血清VEGF水平(P<0.05),低剂量、高剂量组皮下移植瘤、MVD、VEGF水平均受到一定程度抑制,但是无统计学意义(P>0.05),实验中还发现高剂量组裸鼠体重明显下降(P<0.05).结论 常规剂量雷帕霉素可抑制肿瘤血管生成,从而抑制肿瘤生长,这为肝癌肝移植术后免疫抑制剂选择提供实验依据.

    作者:任传增;许戈良;荚卫东;李建生;马金良;葛勇胜;余继海;吴光杨;王伟 刊期: 2008年第03期

  • ICP患者蜕膜NK细胞表型及杀伤活性的研究

    目的 探讨妊娠期肝内胆汁淤积症(ICP)患者蜕膜自然杀伤(NK)细胞的数量、表型特征及杀伤活性,探讨其在ICP发病中的作用.方法 选取确定ICP患者15例,正常晚期妊娠妇女15例,用流式细胞仪检测两组蜕膜组织中NK细胞数量及表型,用LDH法测定NK细胞杀伤活性.结果 ①正常晚期妊娠蜕膜组织中CD56+CD3- NK细胞占蜕膜单个核细胞(DMC)7.82%±3.3%,ICP患者蜕膜中CD56+CD3-NK细胞含量为38.15%±5.1%(P<0.05);②正常晚期妊娠蜕膜组织中CD56+CD16-、CD56+CD16+NK亚群含量明显低于ICP组,差异有显著性(P<0.05);③ ICP组蜕膜组织中NK细胞杀伤活性高于正常晚期妊娠蜕膜组,差异有显著性(P<0.05).结论 NK细胞是妊娠晚期蜕膜组织中的主要淋巴细胞,其亚群失衡及功能异常可能是ICP发病的重要原因.

    作者:肖敏;凌斌;周颖;赵卫东;冯定庆;高宗侠;程志祥 刊期: 2008年第03期

  • T-LCP经掌侧植入治疗桡骨远端骨折的临床观察

    目的 评价T型锁定加压钢板(T-LCP)经掌侧植入治疗桡骨远端骨折的疗效.方法 采用随机对照方法,将58例需要手术治疗的桡骨远端骨折患者分为治疗组和对照组,治疗组用T-LCP,对照组用普通T型钢板,两组均采用经掌侧入路植入,术后6个月对患者进行临床疗效评定.结果 术后6个月腕关节功能评分,治疗组优良率为96.43%,对照组优良率为76.67%,差异有显著性(P<0.05);治疗组内固定松动、肌腱磨损、骨折复位丢失等并发症为两例(7.14%),对照组并发症为11例(36.67%),差异亦有显著性(P<0.05).结论 T-LCP掌侧入路固定治疗桡骨远端骨折具有创伤小、并发症少、固定牢固、骨折愈合快等优点.

    作者:张军;尹宗生 刊期: 2008年第03期

  • 上腔静脉综合征的外科治疗

    目的 探讨上腔静脉综合征(SVCS)的手术方法,总结外科诊治经验.方法 手术治疗13例上腔静脉综合征患者,其中肺癌6例,恶性纵隔肿瘤6例,SVCS狭窄1例.11例采用人工血管置换上腔静脉或补片扩大;2例采用人工血管转流.结果 全组患者无手术死亡, 术后上腔静脉梗阻症状均明显改善.1例术后人造血管血栓形成,经溶栓治疗后痊愈.全组患者术后存活时间为6~30个月.结论 上腔静脉综合征采用原发病灶切除加人造血管置换手术治疗能够在短期内显著缓解临床症状,提高生存质量,效果确切.

    作者:柯立;范军;徐美清;马冬春;魏大中;朱晓枫;田界勇 刊期: 2008年第03期

  • 骨保护素基因修饰的Beagle犬骨髓基质细胞在牙周组织再生中的作用

    目的 观察骨保护素(OPG)基因修饰的骨髓基质细胞(BMSCs)复合PLGA材料移植对牙周骨缺损的修复作用.方法 4只成年Beagle犬,选其24颗前牙丝线结扎饲以高糖饮食构建牙周病模型.翻瓣检查修整近中牙槽骨缺损至3 mm,实验牙分为3组:实验组(缺损处植入OPG基因修饰的BMSCs复合PLGA)、阴性对照组(缺损处植入BMSCs复合PLGA)、空白对照组( 常规牙周翻瓣治疗).6周后临床、X线片观察,切片组织学观察,统计学分析相关数据.结果 OPG基因修饰的BMSCs明显促进骨缺损的修复,组织学评分与两对照组相比差异有显著性(P<0.01).结论 OPG能有效促进犬牙周骨缺损的骨组织再生.

    作者:张嘉;梅陵宣 刊期: 2008年第03期

  • 鼻息肉中嗜酸粒细胞趋化因子的表达与嗜酸粒细胞活化相关研究

    目的 探讨鼻息肉中嗜酸粒细胞趋化因子(Eotaxin)的表达与嗜酸粒细胞(Eos)活化的关系;糖皮质激素对其抑制作用.方法 设置三组分别为鼻息肉组、鼻息肉地塞米松治疗组及正常鼻黏膜对照组;其中鼻息肉地塞米松治疗组入院后,术前接受地塞米松20 mg,静脉滴注,qd×5.Pharmacia CAP系统测定样本血清中ECP的水平;HE染色、免疫组织化学技术观察Eos和Eotaxin在标本黏膜中的表达;分别行统计学分析.结果 与地塞米松治疗组、正常对照组比较,鼻息肉组血清中ECP水平(16.47±5.38 μg/L)及组织中Eotaxin(50.85±32.22)表达明显增强(P<0.05),Eos活化增多;ECP水平与Eotaxin表达相互间呈正相关性(r=0.647);糖皮质激素对鼻息肉血清中ECP水平(6.26±3.13 μg/L)及组织中Eotaxin(15.21±11.32)表达有显著的抑制作用(P<0.05);正常对照组血清中ECP水平(3.57±1.49 μg/L)及组织中Eotaxin(13.08±10.62)表达水平低;鼻息肉地塞米松治疗组及正常黏膜对照组之间差异无显著性(P>0.05).结论 鼻息肉血清中ECP水平升高,组织中Eotaxin表达增强,且相互之间呈正相关.糖皮质激素能抑制外周血中Eos、组织中Eotaxin表达和Eos活化.

    作者:高潮兵;方平;里晓红;杨克林 刊期: 2008年第03期

  • 褪黑素对NB4细胞作用的研究

    目的 观察褪黑素对人早幼粒细胞白血病细胞株NB4凋亡、分化及细胞周期的影响.方法 以不同浓度的褪黑素(0.1、0.5、1 mmol/L)加入NB4细胞中,继续培养24、48、72 h,利用流式细胞术检测细胞凋亡率,细胞膜表面抗原CD33和CD11b的表达阳性率,及细胞周期的变化情况.结果 MLT有促进NB4细胞凋亡的作用,且呈时间和浓度依赖性增加(P<0.05);CD33的细胞阳性率没有变化(P>0.05),CD11b的细胞阳性率在浓度为1 mmol/L,48 h和72 h有轻度增加(P<0.05);细胞周期检测则显示随着浓度和时间的增加, G1期细胞增多,S期细胞减少(P<0.05).结论 褪黑素有促进NB4细胞凋亡,影响细胞生长周期的作用,诱导分化作用则不明显.

    作者:曾庆曙;刘沁华;夏瑞祥;李嘉嘉 刊期: 2008年第03期

安徽医科大学学报杂志

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