学术投稿

间日疟原虫醛缩酶的克隆、表达与初步鉴定

高迎;陶志勇;夏惠;陈勇;王雪梅;方强

关键词:间日疟原虫, 醛缩酶, 原核表达, 纯化, 亲和层析
摘要:目的:克隆间日疟原虫醛缩酶(Plasmodium vivax aldolase,PvALD)基因,体外表达和鉴定重组PvALD蛋白.方法:PCR法从间日疟患者血液DNA样品中扩增PvALD基因,构建pET32c-PvALD重组表达质粒,转化大肠埃希菌(E.coli) BL21(DE3+),诱导表达带有His标签的重组蛋白,并对PvALD在E.coli中表达进行优化,观察诱导时间、诱导剂浓度、培养基种类对该蛋白原核表达的影响.采用镍柱亲和层析纯化重组蛋白,相应表达物分别采用SDS-PAGE电泳和Western blot进行分析鉴定.结果:PvALD的PCR产物分子量为1.1 kb,重组质粒pET32c-PvALD经测序验证,其插入片段序列与GenBank参考序列相似性为100%,转化E.coli所表达的重组蛋白分子量约为60 kD.PvALD在LB中1 mmol/L IPTG诱导6 h条件下获得佳的表达效果.亲和层析纯化后的PvALD经SDS-PAGE电泳检测,呈现单一条带,Western blot分析结果显示,该重组蛋白只能被间日疟患者血清特异性识别,而不能被恶性疟患者血清识别.结论:成功克隆了PvALD基因,表达了重组PvALD蛋白,为以PvALD作为靶标的间日疟快速诊断方法提供了基础.
蚌埠医学院学报杂志相关文献
  • 脑梗死患者溶栓治疗转归及其效果分析

    目的:探讨脑梗死患者溶栓治疗转归及其效果.方法:选取脑梗死患者210例,其中97例接受溶栓治疗(溶栓组),另113例接受传统常规治疗(常规组).结果:溶栓组治疗后各阶段的神经功能缺损积分评分差异均有统计学意义(P<0.01);溶栓组和常规组治疗90 d后 Barthel指数差异有统计学意义(P<0.01).溶栓组治疗总有效率为90.72%,明显高于对照组的73.45%(P<0.01).结论:溶栓治疗对脑梗死患者术后生活质量的影响很大,能够明显改善神经功能,恢复生活能力,提高生活质量.

    作者:沈露 刊期: 2013年第07期

  • 高位推举胎头法在胎头深嵌伴第二产程停滞或延长剖宫产术中的应用

    目的:探讨高位推举胎头法在胎头深嵌伴第二产程停滞或延长的剖宫产术中的应用价值.方法:将因胎头深嵌伴第二产程停滞或延长需剖宫产术者116例随机分为2组,其中对照组58例采用常规手术法(经阴道将胎头推至胎头松动),观察组58例术中应用高位推举胎头法,比较2组子宫切口撕裂、子宫动脉损伤、术中出血量、手术时间、新生儿窒息率和住院时间.结果:观察组在子宫切口撕裂、子宫动脉损伤、术中出血量、手术时间、新生儿窒息率和住院时间等均少于对照组(P<0.01).结论:在胎头深嵌伴第二产程停滞或延长的剖宫产术中应用高位推举胎头法效果良好.

    作者:武心荣 刊期: 2013年第07期

  • 医学影像检查技术学实验课程的改革与创新

    目的:探索医学影像专业医学影像检查技术学实验课程的改革.方法:在改革教学理念的前提下,对现有实验教学资源优化以及运用计算机仿真技术,创建了具有自主知识产权、特色鲜明、高效的数字化实验室和多功能实验室,在此基础上进行实验课目的设计和实验模式的改革.结果:提高了专业教学质量,促进了对学生实践能力的培养.结论:改革实验教学模式,建设创新性实验室,完善实验课程体系,不仅是医学影像专业课程建设和人才培养的需要,也是未来医学影像诊断专业长学制和研究生培养的需要.

    作者:汪百真;俞曼华;张俊祥;曹明娜 刊期: 2013年第07期

  • 尼莫地平辅助治疗难治性癫痫的疗效及其对认知功能的影响

    目的:探讨尼莫地平辅助治疗难治性癫痫的疗效及其对患者认知功能的影响.方法:将84例难治性癫痫患者随机分为治疗组与对照组,2组患者均给予常规抗癫痫药物治疗;治疗组加用静脉输注尼莫地平注射液治疗,连续用药2周后,口服尼莫地平维持治疗6个月.比较2组患者治疗前后癫痫发作频率,并利用成人智力量表和记忆量表对其认知功能进行评估.结果:治疗组治疗总有效率为90.5%,对照组为78.6%,差异无统计学意义(P>0.05);治疗组治疗后总智商、操作智商、言语智商、记忆智商改善较对照组更为显著(P<0.05).结论:尼莫地平对难治性癫痫有较好的辅助治疗作用,并能改善患者的认知功能,可作为难治性癫痫的辅助治疗药物.

    作者:孙俊岩;温玉梅;王飞凤;高晓玲;王文琴 刊期: 2013年第07期

  • 颅内血管母细胞瘤MRI表现

    目的:探讨颅内不同生长部位的血管母细胞瘤MRI表现.方法:对手术及病理证实的16例颅内不同生长部位的血管母细胞瘤MRI表现进行回顾性分析.结果:肿瘤发生于额叶4例,左侧桥小脑角区1例,延髓2例,小脑半球9例;其中12例呈大囊小结节,4例呈实质型;额叶病灶呈大囊小结节型,可见流空血管影,实性成分呈等T1、等T2信号,明显强化;桥小脑角区肿瘤呈不规则的囊状,内有扭曲血管影及不规则的实性成分,呈不规则较明显强化;延髓肿瘤,呈类椭圆形的大囊小结节,内有分隔,实性部分呈明显强化;小脑半球肿瘤呈大囊小结节或实质型,实性部分呈等T1、等T2信号,均见流空血管影,实性部分呈明显强化.结论:颅内不同生长部位的血管母细胞瘤MRI表现均有一定特点,而肿瘤实性成分中的流空血管影是该病较具特征性的MRI征象.

    作者:曾艳;徐茂盛;周永生;殷亮;苏锦权;张佳文 刊期: 2013年第07期

  • 阿立哌唑与利培酮治疗双相障碍躁狂发作的疗效比较

    目的:比较阿立哌唑与利培酮分别联合碳酸锂治疗双相障碍躁狂发作的疗效与不良反应.方法:将符合ICD-10双向障碍躁狂发作诊断标准的60例患者随机均分为2组,分别使用阿立哌唑联合碳酸锂(阿立哌唑组)和利培酮联合碳酸锂(利培酮组)治疗6周.采用躁狂量表(BRMS)评定疗效,不良反应量表(TESS)评定不良反应.结果:2组治疗后1~6周BRMS评分均较治疗前显著下降(P<0.01),但阿立哌唑组于治疗1周时BRMS评分低于利培酮组(P<0.05).2组不良反应差异无统计学意义(P>0.05).结论:阿立哌唑联合碳酸锂与利培酮联合碳酸锂治疗双向障碍疗效相当.

    作者:陈智敏;冯竹娥;王兴生 刊期: 2013年第07期

  • 老年人急性非静脉曲张性上消化道出血病因及相关因素分析

    目的:探讨老年人急性非静脉曲张性上消化道出血病因及相关因素.方法:对104例经胃镜确诊的老年人急性非静脉曲张性上消化道出血患者(观察组)的临床资料进行回顾性分析,并将104例经胃镜确诊的中青年急性非静脉曲张性上消化道出血患者设为对照组.比较2组患者的病因、失血性周围循环衰竭发生率、住院时间、诱因、合并症、再出血率(住院期间再出血发生率)及病死率.结果:2组患者的病因以消化性溃疡为主,病因构成差异无统计学意义(P>0.05).观察组主要诱因为幽门螺杆菌感染及非甾体抗炎药应用,而对照组以幽门螺杆菌感染及饮酒为主.观察组失血性周围循环衰竭发生率、合并症、住院时间、再出血率、病死率均较对照组高(P<0.05~P<0.01).结论:老年人急性非静脉曲张性上消化道出血一旦发生,应尽早明确病因及诱因,合理治疗可降低病死及再出血率.

    作者:闻静;邵明;孙娟 刊期: 2013年第07期

  • 白血病合并侵袭性肺真菌病的外科诊疗探讨

    目的:探讨白血病并发侵袭性肺真菌病(IPFI)的诊断、外科治疗方法.方法:11例白血病并发IPFI患者均行手术治疗,肺楔形切除5例,肺叶切除6例.术前术后抗真菌治疗2~12周,并随访8~46个月.结果:11例无一例围手术期死亡,术后病理组织检查曲霉菌感染7例,毛霉菌2例,隐球菌1例,曲霉菌和念珠菌混合感染1例.3例死于白血病复发,无真菌病复发.结论:外科切除持续存在的局限IPFI可以减少白血病患者化疗期间的真菌病复发.

    作者:汪礼旭;黄望香;李志华;李绍鹏;罗红鹤 刊期: 2013年第07期

  • 间日疟原虫醛缩酶的克隆、表达与初步鉴定

    目的:克隆间日疟原虫醛缩酶(Plasmodium vivax aldolase,PvALD)基因,体外表达和鉴定重组PvALD蛋白.方法:PCR法从间日疟患者血液DNA样品中扩增PvALD基因,构建pET32c-PvALD重组表达质粒,转化大肠埃希菌(E.coli) BL21(DE3+),诱导表达带有His标签的重组蛋白,并对PvALD在E.coli中表达进行优化,观察诱导时间、诱导剂浓度、培养基种类对该蛋白原核表达的影响.采用镍柱亲和层析纯化重组蛋白,相应表达物分别采用SDS-PAGE电泳和Western blot进行分析鉴定.结果:PvALD的PCR产物分子量为1.1 kb,重组质粒pET32c-PvALD经测序验证,其插入片段序列与GenBank参考序列相似性为100%,转化E.coli所表达的重组蛋白分子量约为60 kD.PvALD在LB中1 mmol/L IPTG诱导6 h条件下获得佳的表达效果.亲和层析纯化后的PvALD经SDS-PAGE电泳检测,呈现单一条带,Western blot分析结果显示,该重组蛋白只能被间日疟患者血清特异性识别,而不能被恶性疟患者血清识别.结论:成功克隆了PvALD基因,表达了重组PvALD蛋白,为以PvALD作为靶标的间日疟快速诊断方法提供了基础.

    作者:高迎;陶志勇;夏惠;陈勇;王雪梅;方强 刊期: 2013年第07期

  • 视黄醇结合蛋白4与老年2型糖尿病视网膜病变的相关性研究

    目的:探讨视黄醇结合蛋白4(RBP4)与老年2 型糖尿病视网膜病变(DR)发生的相关性.方法:选择 60 岁及以上2型糖尿病患者210例,其中不伴视网膜病变的2型糖尿病108例为对照组(T2DM组),102例视网膜病变的患者为观察组(DR组).根据眼底病变程度将DR组分为非增殖期组69例(NPDR组)和增殖期组33例(PDR组),分别比较T2DM组与DR组、NPDR组与PDR组的临床参数及生化指标,进一步行logistic回归分析以明确DR的独立危险因素.结果:与T2DM组比较,DR组的病程明显延长,空腹血糖、糖化血红蛋白(HbA1C)及RBP4水平明显增高(P<0.01).与NPDR组比较,DR组的病程延长,空腹血糖、HbA1C及RBP4水平亦增高(P<0.05).logistic回归分析示糖尿病病程、HbA1C、RBP4均为DR的独立危险因素(P<0.01).结论:糖尿病病程、HbA1C、RBP4均为DR发生的危险因素.

    作者:周海艳;岳晓丽;石建华 刊期: 2013年第07期

  • 新生儿缺氧缺血性脑病采用护理康复路径的临床效果

    目的:探讨护理康复路径在新生儿缺氧缺血性脑病(HIE)中的应用效果.方法:将HIE患儿122例随机分为对照组58例和观察组64例.对照组采取常规护理方式至出院,治疗组在对照组基础上采用护理康复路径进行住院期间.治疗前及治疗后1、3、6个月分别对2组患儿进行神经行为、运动及智力发育指数测定.结果:2组治疗后神经行为、运动发育指数、智力发育指数1、3、6个月较治疗前均有显著改善(P<0.01),观察组治疗后1、3、6个月均较对照组改善显著(P<0.01).结论:护理康复路径可有效促进HIE患儿脑神经的恢复,并对运动功能恢复及智力发育有积极作用.

    作者:孔蔚毅;高春荣;王阿静 刊期: 2013年第07期

  • 铸造金属桩在上颌前牙唇倾畸形修复中的应用

    目的:探讨铸造金属桩烤瓷冠修复上颌前牙唇倾畸形的临床效果.方法:对20例因上颌前牙唇倾影响美观且不愿接受正畸治疗的患者,共62颗患牙进行常规根管治疗,铸造金属桩改向后烤瓷冠修复.结果:随访2~3.5年,1例患者(3颗患牙)失访,其余患者中有2颗患牙发生根折,1颗患牙发生冠脱落,2颗患牙发生牙龈变色.结论:对于不愿接受正畸治疗的上颌前牙唇倾患者,铸造桩改向修复是一种有效的治疗方法.

    作者:谢小飞;王德顺;高益林;田瑞雪;黄永松 刊期: 2013年第07期

  • 奥曲肽对人前列腺癌细胞生长周期的作用

    目的:探讨奥曲肽(OCT)作用下激素抵抗型前列腺癌细胞生长及周期的变化.方法:选择梯度浓度的OCT作用于人前列腺癌PC-3细胞株,观察浓度依赖性生长曲线;同时运用流式细胞术检测前列腺癌PC-3细胞周期在OCT作用下的变化.结果:随OCT浓度的递增前列腺癌PC-3细胞的生长逐步受到抑制,与对照组差异均有统计学意义(P<0.05~P<0.01),OCT作用后前列腺癌细胞周期停滞G0/G1期.结论:OCT能够抑制前列腺癌PC-3细胞的生长,为激素抵抗型前列腺癌的治疗提供新思路.

    作者:刘峰;刘辉;郝继东;王伟峰;万建省 刊期: 2013年第07期

  • 埃兹蛋白在乳腺癌中的表达及意义

    目的:探讨埃兹蛋白(Ezrin)在乳腺癌中的表达及其临床病理意义.方法:用免疫组织化学法(SP法)检测90例乳腺癌及10例乳腺腺病组织和10例乳腺导管内乳头状瘤组织Ezrin的表达情况.结果:Ezrin在乳腺癌、乳腺腺病、乳腺导管内乳头状瘤中的强阳性率分别为58.9%、10.0%和20.0%,差异有统计学意义(P<0.01).肿瘤淋巴结转移者Ezrin强阳性率高于无转移者(P<0.01),在肿瘤大小、TNM分期、年龄间的表达差异均无统计学意义(P>0.05).免疫组织化学显示Ezrin在乳腺癌中大部分表达定位于细胞质(62.2%),部分表达定位于整个细胞膜(22.0%)与细胞膜顶端(15.8%),而在乳腺腺病和乳腺导管内乳头状瘤中则主要表达定位于细胞膜顶端(7/9和6/9),3组Ezrin表达定位差异有统计学意义(P<0.01).乳腺癌中Ezrin细胞膜顶端表达定位与淋巴结无转移、低级别分化、激素受体阳性均有一定关系(P<0.05~P<0.01);Ezrin细胞质表达定位与淋巴结转移、高级别分化、激素受体阴性亦均有一定关系(P<0.05~P<0.01);Ezrin细胞膜表达定位在人类表皮生长因子受体2阴阳性表达间差异有统计学意义(P<0.05).结论:Ezrin的表达增高和表达部位的变化在乳腺癌的发生、发展和转移过程中发挥着调控作用,可作为判断乳腺癌转移和预后的重要生物学指标.

    作者:王明喜;郑荣生;承泽农;汪子书;高振远;韩正全 刊期: 2013年第07期

  • 氯吡格雷联合阿司匹林治疗进展型脑梗死的疗效及对神经和凝血功能的影响

    目的:探讨硫酸氢氯吡格雷联合阿司匹林治疗进展型脑梗死的临床疗效及对神经功能缺损和凝血功能的影响.方法:将92例进展型脑梗死患者随机分为2组,对照组46例口服阿司匹林50~150 mg,每天1次;观察组46例口服阿司匹林加氯吡格雷75 mg,每天1次.2组患者均用20 d为1个疗程.对比2组患者的疗效、神经功能缺损程度评分以及凝血功能的改善情况.结果:观察组总有效率91.3%,对照组80.4%,2组差异无统计学意义(P>0.05);观察组患者神经功能缺损程度评分显著低于对照组(P<0.01);观察组患者纤维蛋白原含量、血浆黏度及红细胞聚集指数均低于对照组(P<0.05~P<0.01).结论:氯吡格雷联合阿司匹林治疗进展型脑梗死临床疗效肯定,且能有效改善患者的神经功能和凝血功能.

    作者:韦宁 刊期: 2013年第07期

  • 肥胖对经皮肾镜取石术临床疗效的影响

    目的:探讨肥胖对经皮肾镜取石术临床疗效的影响.方法:对经皮肾镜取石术患者98例,根据患者的体质量指数分为正常组和肥胖组,比较2组患者的临床疗效.结果:正常组和肥胖组患者性别、年龄、术中出血量、结石位置、住院时间、术后并发症及术后止血药使用方面差异均无统计学意义(P>0.05);肥胖组的手术时间(82.46±12.79)min长于对照组(73.54±8.26) min(P<0.01),术后结石清除率62.0%低于对照组81.3%(P<0.05).结论:肥胖患者经皮肾镜取石术是一种安全、可行的处理方法,但是术中应注意加强监护及术后残留结石的处理.

    作者:梁建奇;林灼怡 刊期: 2013年第07期

  • 星点设计-效应面法优化及制备安妥沙星眼用温度敏感原位凝胶

    目的:探讨星点设计-效应面法优化安妥沙星眼用温度敏感原位凝胶处方.方法:以泊洛沙姆407与泊洛沙姆188为材料,以模拟泪液稀释前后的溶液-凝胶相转变温度为考察指标,采用二项式模型描述各因素与指标间的数学关系,根据二项式模型绘制效应面图及等高线图,通过重叠等高线图确定优化处方并进行验证.结果:安妥沙星眼用温度敏感原位凝胶优化后的处方为22.5%泊洛沙姆407与1.0%泊洛沙姆188;优化处方在室温下是自由流动的液体,经泪液稀释后能发生相转变形成凝胶.结论:安妥沙星眼用温度敏感原位凝胶符合眼部用药要求,具有实际的临床意义和应用价值.

    作者:孙思雨;马涛;王清清 刊期: 2013年第07期

  • 幽门螺杆菌诱导大鼠胃上皮细胞凋亡与一氧化氮相关性研究

    目的:研究幽门螺杆菌(Hp)感染诱导大鼠胃上皮细胞凋亡与一氧化氮(NO)的关系.方法:将60 只Wistar大鼠随机分成正常对照组、Hp感染组和Hp根除组,每组20只.正常对照组正常喂养;Hp感染组大鼠按潘氏方法复制慢性胃炎模型,并参照陈氏方法感染Hp;Hp根除组大鼠感染Hp后采用四联疗法治疗.采用切口末端标记法(TUNEL)检测各组大鼠胃黏膜上皮细胞凋亡情况,硝酸还原酶法检测各组血清NO水平.结果:正常对照组、Hp根除组、Hp感染组的细胞凋亡指数和血清NO水平依次升高,且差异均有统计学意义(P<0.01); Hp感染组和Hp根除组胃上皮细胞凋亡指数与NO水平呈正相关关系(P<0.05).结论:Hp感染可促进胃上皮细胞凋亡,促进NO生成可能是Hp促进细胞凋亡的机制之一.

    作者:赵莉萍;胡咏梅 刊期: 2013年第07期

  • 蚌埠市学龄前儿童膳食营养健康教育效果评价

    目的:了解蚌埠市学龄前儿童膳食营养健康教育的效果,为提出有效的营养干预模式提供依据.方法:以随机整群抽取的2~6岁幼儿园儿童879名作为调查对象(干预组496名,对照组383名),干预组实施为期1年的营养健康教育,并于干预前后分别进行身体指标测量和其父母的营养相关知信行调查.结果:干预组的儿童生长发育水平均高于干预前和对照组(P<0.01);干预组家长的营养知识知晓率均显著高于干预前和对照组(P<0.01),每天吃早餐、喝牛奶的人数明显增多,偏食及吃西式快餐的人数明显减少,差异均有统计学意义(P<0.01).结论:营养健康教育对提高家长营养知识、纠正学龄前期儿童不良饮食行为习惯切实有效.

    作者:韩慧;董素华;汤建军;张勤 刊期: 2013年第07期

  • 超声在胎儿胆囊结石中的诊断价值

    目的:总结超声在胎儿胆囊结石中的诊断价值.方法:对我院21 020例孕妇行产前常规超声检查,对胎儿胆囊结石15例进行总结分析.结果:胎儿胆囊内强回声呈颗粒状、团块状、条带状,偶有后方回声增强.12例于出生2周后消失,3例于出生半年后消失.结论:超声可明确诊断胎儿胆囊内强回声,对疑似胎儿胆囊结石的确诊有重要价值.

    作者:罗显文 刊期: 2013年第07期

蚌埠医学院学报杂志

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主管:安徽省教育厅

主办:蚌埠医学院