吉兴照；唐璐；侯雪新；孙丽娜；韦超；徐帅；司晨琛；李振军
目的 了解小肠结肠炎耶尔森菌在达乌尔黄鼠鼠疫疫源地动物中的种间带菌分布情况及其特征,为我国小肠结肠炎耶尔森菌的研究提供科学的参考数据.方法 在达乌尔黄鼠鼠疫疫源地内选择牧区、半农半牧区和农区3个不同生态环境,分别采集鼠类、家畜家禽动物的粪便、舌根、咽拭子及肠道内容物等样本,进行小肠结肠炎耶尔森菌的分离、鉴定和毒力基因检测.结果 共检测各类样本3 260份,检出小肠结肠炎耶尔森菌65株,总检出率为1.99％;猪的带菌率高,其携带O∶3/3、O∶5/1A、O∶4/4 3个血清生物型;其中O∶3/3型致病性菌株携带ail、ystA、yadA、VirF、rfbc毒力基因;且在牧区、半农半牧区、农区的样本均可检出阳性菌,以农区高,检出率为9.95％.结论 小肠结肠炎耶尔森菌在内蒙古达乌尔黄鼠鼠疫疫源地中分布较广,以农区为重;猪是致病性小肠结肠炎耶尔森菌的主要携带者.
作者：董丽；于慧霞；陈彩玉；王立新；王化彬；景怀琦；王鑫 刊期： 2017年第03期
目的 总结分析成都市首例人感染H9N2禽流感病例流行病学调查结果,为今后科学应对类似疾病提供参考.方法 采用现场流行病学和实验室检测相结合的方法,收集病例临床和流行病学资料,采集并检测病例、相关环境等标本,分析可能的感染来源、流行病学特征和临床特征.结果 病例发病前10天内有禽类接触史,其标本经检测为H9N2禽流感病毒阳性;病例长期患有慢性疾病,此次发病后进展较快,经积极治疗无效后死亡;其居住环境、家中剩余鸡肉和周边市场检出H9禽流感阳性.结论 该病例感染来源为周边市场感染H9N2禽流感病毒的鸡;对严重基础疾病者,感染H9N2禽流感病毒可导致重症或诱发死亡.
作者：杨磊；杜训波；张晓春；岳勇；翁贵武；昝宇；韩德琳 刊期： 2017年第03期
目的 了解2014年长沙市禽类场所环境中H9N2亚型禽流感病毒(Avian influenza virus,AIV)血凝素(Hemag-glutinin,HA)、神经氨酸酶(Neuraminidase,NA)和非结构蛋白(ron-structural,NS)基因的分子进化特征,为人感染H9N2亚型AIV防控提供实验室科学证据支持.方法 对2014年长沙市禽类场所中采集的501份环境标本(禽类饮水263份,污水221份,其他标本17份)利用real-time PCR方法进行A型、H5、H7和H9亚型流感病毒核酸检测,然后对单独H9阳性标本利用HA和NA基因通用引物进行RT-PCR扩增和核苷酸测序,病毒HA、NA及NS基因测序结果在线BLAST分析,利用Bioedit和Mega5软件进行氨基酸比对和进化树构建.结果 从501份环境标本中检出A型AIV核酸阳性标本350份,H9亚型核酸阳性标本191份,占总标本数量的38.12％,H5亚型核酸阳性标本177份(35.33％),H7亚型核酸阳性11份(2.20％),H5和H9亚型混合核酸阳性标本68份(13.57％).部分单独H9亚型核酸阳性标本经RT-PCR和核苷酸测序鉴定出阳性H9N2亚型病毒核酸标本23份,分子进化分析表明2014年长沙市禽类场所环境中的绝大部分H9N2亚型AIVHA、NA、NS基因来源于A/Chicken/Shanghai/F/98 (F98)类似株病毒,属于新的S基因型,HA蛋白受体结合位点(Receptorbinding site,RBS)第235位(对应H3流感第226位)氨基酸为Leu (L),表现为特异性结合人流感病毒受体特征,病毒HA、NA及NS蛋白关键分子位点表现为低致病性的分子特征.结论 2014年长沙市禽类场所环境中H9亚型AIV核酸阳性率高,H9N2亚型AIV的HA、NA和NS基因表现为低致病性的分子特征,但具有容易感染人类的特征,需要迸一步加强监测.
作者：张如胜；姚栋；叶文；陈静芳；黄政；刘晓蕾；陈田木；欧新华；孙边成 刊期： 2017年第03期
目的 分析浙江省杭州市萧山区2013-2016年人感染H7N9禽流感病例的流行病学特征.方法 收集现住址位于萧山区的人感染H7N9禽流感确诊病例流行病学资料,通过SPSS 16.0软件,采用t检验、x2检验、秩和检验等方法分析死亡和存活病例的流行病学特征;同时分析外环境监测结果的流行病学特征.结果 2013-2016年萧山区共确诊22例人感染H7N9禽流感病例,死亡12例(病死率54.55％).发病集中在冬春季节,多数病例有禽类暴露史,以既往有慢性基础性疾病的老年人为主,x2检验发现死亡组中有慢性基础性疾病的病例所占比例要高于存活组(P=0.01);外环境监测阳性率也呈现冬春高夏秋低的季节性消长.结论 外环境监测阳性率与发病趋势基本吻合,由于外环境监测阳性率又有抬头趋势,须警惕新病例的发生,尤其是在农村地区以及职业暴露人群,也需要进一步提高基层的识别和诊治等防控能力.
作者：王富良；孙向珏；蔡维未；李骏；来芬华 刊期： 2017年第03期
目的 对云南省流感监测中发现的首例人感染H9N2禽流感病例进行调查分析,为进一步防治人禽流感疫情提供科学依据.方法 对患者、密切接触者和活禽市场开展流行病学调查,并采集病例呼吸道标本和外环境标本进行实验室检测分析.结果 病例有活禽市场暴露史,标本禽流感病毒核酸阳性结果表明,该病例为人感染H9N2禽流感确诊病例,未出现二代病例.病例暴露的活禽市场环境中存在大量禽流感病毒.结论 医疗机构加强流感样病例监测和不明原因肺炎监测是及时发现人禽流感病例的重要手段.活禽交易市场定期消毒与休市是降低感染率的关键措施.
作者：罗春蕊；赵晓南；宁德明；李多；徐闻 刊期： 2017年第03期
目的 制备2型猪链球菌丝状温度敏感蛋白(Filamentous temperature-sensitive protein Z,FtsZ)重组蛋白并测定其水解三磷酸鸟苷(GTP)的酶活性.方法 从2型猪链球菌中国强毒株05ZYH33基因组中PCR扩增目的基因sz,构建重组表达质粒pET28a-ftsz,转化E.coli BL21(DE3)感受态细胞,筛选阳性转化子进行IPTG诱导表达,SDS-PAGE鉴定表达产物,Ni2+亲和层析柱纯化重组蛋白,Western blot分析.重组蛋白免疫新西兰兔后收集多抗血清,间接ELISA法检测抗体效价,用孔雀绿-磷酸检测法测定FtsZ重组蛋白的GTP酶活性.结果 成功构建pET28a-ftsz重组表达质粒;纯化获得大量纯度较高的FtsZ重组蛋白;ELISA检测兔多抗血清效价达1∶13 107 200;Western blot显示FtsZ重组蛋白能够与His-Tag单抗和兔多抗血清发生反应;以GTP为底物检测重组蛋白具有GTP酶活性.结论 成功制备了具有GTP酶活性的2型猪链球菌FtsZ重组蛋白并以重组蛋白为抗原制备出高效价的多抗血清,为进一步研究2型猪链球菌FtsZ在细胞分裂调控过程中的作用奠定基础.
作者：范伟伟；倪华；孙卫平；张剑；李超龙；吴倩倩；王长军；潘秀珍 刊期： 2017年第03期
流感是由流感病毒引起的一种严重危害公众健康的呼吸道传染病,已引起全球的高度关注,接种疫苗是预防流感有效的措施.当前,建立快速流感疫苗研发生产平台对于流感的预防与控制至关重要.以病毒为载体的活疫苗为感染性疾病的防控提供了新的手段.改良型痘苗病毒安卡拉株(Modified Vaccinia virus Ankara,MVA)是一种复制缺陷型病毒载体.MVA能够同时容纳并表达多个外源抗原、诱导较好的体液和细胞免疫应答并具备良好的安全性,具有成为理想疫苗载体的潜力.本文就MVA载体在流感疫苗研究中的应用做一综述.
作者：尹元；王伟灵 刊期： 2017年第03期
目的 调查分析既往及正在执行的厄尔尼诺-南方涛动现象(El Niio-Southern Oscillation,ENSO)与流行性感冒关联的相关研究,并评价ENSO对流行性感冒相关指标(如流感流行高峰的出现时间、流感样病例报告人数等)的影响,为进一步开展天气及气象因素影响流感病毒传播研究提供依据和建议.方法 计算机检索MEDLINE,EMBASE,Science Di-rect,HEED、中国生物医学文献数据库(CBMdisc)、万方学位论文全文数据库,查找1988～2016年10月已发表的关于ENSO与流行性感冒联系的文献,并运用循证医学方法进行文献数据提取和分析.结果 共检索到78篇文献,其中符合纳入标准的已发表文献10篇.二次文献研究显示,出现ENSO与流感大流行的发生,流感高峰的出现时间,流感样病例就诊数及重症死亡数都有较大关联,且El Niio和La Niia现象对流感相关指标的影响也不尽相同.结论 从纳入研究的已发表文献分析结果来看,ENSO与流行性感冒相关指标之间有较强的相关性.
作者：陈涛；肖梦；杨静；秦宇；王大燕；舒跃龙 刊期： 2017年第03期
目的 为确诊导致一只6岁左右的雌性小熊猫死亡的病因.方法 无菌采集死亡小熊猫的心、肝、脾、肺等样品并进行病原学检查.通过对多个内脏样本进行细菌平行分离鉴定(形态特征、生化特性和16S rDNA分析),对分离得到的一株优势菌(R1)进行小鼠人工感染及药敏试验.结果 R1被鉴定为肺炎克雷伯氏菌,且未检测到别的细菌;R1对小鼠具有较强致病力,LD50为6.5×104 CFU/mL,且死亡小鼠与该小熊猫具有一致临床表现和病理剖解症状;R1对头孢噻肟等药物敏感,对丁胺卡那等药物敏感性为中介,对青霉素等耐药.结论 该小熊猫死于肺炎克雷伯氏菌感染.该菌对青霉素类抗生素耐药较强,且耐药谱较广,对大环内酯类、多肽类抗生素均有耐受作用,对头孢菌素类和氨基糖苷类抗生素敏感.
作者：杨锐；文继锋；龚永平；王承东；邓林华；黄杰；任露；颜其贵 刊期： 2017年第03期
2016年10月起至今发生的第5波人感染H7N9禽流感疫情比前4波严重,截止至2017年3月8日,本波疫情感染者数量已达历年累积报告数的40.00％.病原学研究发现近广东分离的两株H7N9病毒在HA的链接肽位置发生插入性变异导致对禽致病性有所增强,但绝大多数分离株与前4波疫情中H7N9病毒病原学特征无明显区别;流行病学调查研究显示,除有3起可能人传人事件外,与前4波比较,患者之间也没有明显的流行病学关联.因此,基于疫情分析及风险评估认为H7N9禽流感仍会扩散传播并继续发生新发病例,但流行病学和病原学分析认为该病毒在人际间持续传播的可能性低.本综述认为加强H7N9禽流感病原学与流行病学的研究具有重要的公共卫生意义.
作者：林丹；谢剑锋；严延生 刊期： 2017年第03期
目的 构建巴西诺卡菌P61基因原核重组表达载体,在大肠杆菌中表达具有生物活性的P61蛋白,为P61蛋白的进一步相关研究提供实验基础.方法 通过基因合成的方法合成P61基因,将其插入到质粒pET30a(+)载体并导入BL21大肠杆菌,应用IPTG进行诱导表达.通过Western Blot对表达产物进行分析.应用过氧化氢酶检测试剂盒检测其过氧化氢酶活性.结果 P61蛋白在大肠杆菌中可溶性表达,且具有较高的过氧化氢酶活性,能被感染巴西诺卡菌的小鼠血清识别.结论 成功构建了巴西诺卡菌P61蛋白的原核表达质粒,并能在原核表达宿主E.coli BL21中进行高效表达,且表达产物具有过氧化氢酶活性.
作者：吉兴照；唐璐；侯雪新；孙丽娜；韦超；徐帅；司晨琛；李振军 刊期： 2017年第03期
链球菌溶血素S(Streptolysin S,SLS)是链球菌产生的重要毒力因子之一.化脓链球菌、海豚链球菌、咽峡炎链球菌等多种人和动物致病性链球菌均含有该毒力因子,化脓链球菌是人类主要的病原菌,其致病机制备受关注.SLS是一个由sagA-sagⅠ9个连续基因编码修饰的多肽性细胞溶素,具有帮助致病菌渗透上皮屏障、造成组织损伤、抵抗宿主免疫细胞吞噬、与其他毒力因子相互作用的功能;SLS可作为细胞群体感应的信号分子,参与调节其他毒力因子的表达.本文对SLS的结构和在致病过程中的生物学功能作一综述.
作者：王虹；彭爽；陈德芳 刊期： 2017年第03期
目的 了解海南省不明原因发热病人中钩端螺旋体病的感染情况.方法 分别用钩端螺旋体显微镜凝集试验(MAT)、酶联免疫试验(ELISA)和聚合酶链反应(PCR)法,检测海南省2015年全省不明原因发热病人的血标本.结果 共检测标本179份,其中显微镜凝集试验检出阳性标本40份,感染率为22.35％,男性感染率为21.65％(21/97),女性感染率为23.17％(19/82);菌群中有7个群能检出,分别是问号钩端螺旋体黄疸出血群、拜伦群、秋季热群、波摩那群、流感伤寒群、赛罗群、塔拉索夫群;酶联免疫试验检测阳性38份,阳性率为21.23％,其中IgM阳性6份,检出率为3.35％,IgG阳性32份,检测率为17.88％;血清学检测结果一致.PCR法检测结果均为阴性.结论 海南省不明原因发热病人中存在钩端螺旋体的感染,主要型别以黄疸出血群为主.
作者：吴捷；王丹；王少玲；陈莉；叶浩然；杜中华；华德；李丹丹；蒋秀高 刊期： 2017年第03期
目的 了解广东省肇庆市2014-2016年人感染H7N9禽流感病毒基因进化特征.方法 对肇庆市17例H7N9患者咽拭核酸直接进行8节段基因序列扩增与测定,用BioEdit5.0、MEGA6.0进行同源性和重要氨基酸位点分析,采用Neighbor-Joining法构建进化树,参比序列从GenBank下载.结果 7份H7N9病例标本获得8节段全基因序列,HA与A/chicken/Dongguan/695/2014 (H7N9)相似度高,NA与A/ chicken/Dongguan/1075/2014 (H7N9)相似度高;内部基因与2013-2014年广东东莞、深圳禽源H7N9及H9N2相似度较高.HA和NA基因与广东省东莞、广州、深圳等地市的H7N9序列同处于珠三角进化分支,与安徽、浙江、江苏等长三角分支的序列相似性低.HA蛋白受体结合位点发生G186V、Q226L变异,裂解位点序列均为PEIPKGR↓ GLF,含有2个碱性氨基酸;M2蛋白上发现耐药位点S31N,PB2蛋白上发现E627K突变,NA蛋白上未发现耐神经氨酸酶的位点变异.结论 肇庆市人感染H7N9病毒株可能来源于2013 2014年广东省珠三角地区禽源H7N9和H9N2,G186V、Q226L和E627K位点变异增强了对人的易感性.
作者：谭翰清；程洁萍；谭海芳；朱颖梅；林凤；梁晓晴；陈捷；麦炜 刊期： 2017年第03期
目的 了解1例不明原因肺炎病例中甲型H1N1流感病毒的生物学特性和变异情况,为临床治疗与疫情防控提供依据.方法 利用MDCK细胞分离不明原因肺炎病例中的甲型H1N1流感病毒,分离的毒株经全基因组测序后分析其抗原性、致病性和耐药性等特征.结果 从该病例的咽拭子标本中分离得到1株甲型H1N1流感病毒并命名为A/FujianGulou/SWL64/2016 (H1N1),其8个节段的核苷酸和氨基酸序列与A/California/07/2009(H1N1)疫苗株的相似性分别为96.9％～98.9％和96.7％～99.5％.氨基酸序列分析显示HA蛋白共有18个位点发生突变,其中K163Q、S185T、S203T和D222N变异涉及到3个不同的抗原位点,提示病毒发生抗原漂移;与受体结合位点相关的D222N突变还提示病毒感染下呼吸道的能力增强.耐药性分析显示该病毒对金刚烷胺耐药,对达菲仍然敏感.结论 本次研究的甲型H1N1流感病毒具有抗原漂移现象,且具备引发重症肺炎的分子特征,应进一步加强监测,为疫情防控奠定基础.
作者：张炎华；翁育伟；张建明；修文琼；陈宏彬；赵琳；何文祥；朱颖；谢剑锋；郑奎城 刊期： 2017年第03期
禽流感病毒H6N1亚型广泛存在于水禽和陆禽,是常分离到的甲型流感病毒亚型,遗传分析表明该病毒可能是高致病禽流感病毒H5N1的前体.随着病毒基因的持续进化,H6N1可跨种间屏障传播至哺乳动物,其对于哺乳动物小鼠、猪和雪貂已经具有较强感染能力.血清流行病学调查结果显示少数人H6禽流感病毒抗体阳性,2013年5月,我国台湾出现全球首例人类感染H6N1亚型流感病毒.因此,H6N1病毒宿主范围不断扩大,在这些宿主内可发生病毒基因突变、基因重配,进而演变为具有感染人类潜能的新变异株的可能.本文从病原学、流行病学、病毒感染哺乳动物和人类等方面对H6N1亚型禽流感病毒的研究进展进行综述,以期为H6N1禽流感病毒的防控提供参考.
作者：孙增辉；朱银川；王熹婧；蒙远雁；张增峰 刊期： 2017年第03期
规律成簇间隔短回文重复序列(Clustered regularly interspaced short palindromic repeats,CRISPR)广泛存在于古细菌及细菌中是细菌在长期进化过程中形成的一种获得性免疫系统.近年来以该系统为基础,经过人工改造形成的一种新型基因编辑技术—CRISPR/Cas9在基因工程领域的应用越发广泛;该技术与前两代编辑技术相比,具有结构简单、成本低廉、实用价值较高等优点.自2012年在基因研究领域成功应用后,已成为当前关注度较高的基因编辑工具;该技术在多种真核生物的基因修饰中已得到成功应用,但在病原微生物上却报道较少.本文将从CRISPR/Cas9系统的结构、作用机制及其在病原微生物基因功能研究中的应用等几个方面进行综述为其深入研究奠定基础.
作者：安鼎杰；康元环；陈龙；张海月；张冬星；田佳鑫；贾俊鹏；孙武文；单晓枫；钱爱东 刊期： 2017年第03期
目的 研究杭州地区单核细胞增生李斯特菌(Listeria monoc ytogenes)食品分离株的分子分型情况,了解当地流行株的型别特征.方法 用脉冲场凝胶电泳(PFGE)和多位点序列分型(MLST)的方法对单核细胞增生李斯特菌进行分子分型.PFGE结果进行聚类分析,并绘制MLST数据的小生成树.结果 6个血清型组成的133株杭州食品分离株共获得19个MLST型别,并发现1个新的ST型ST767.ST9和ST121是数量多的型别.用AscⅠ和ApaⅠ酶切分别获得33和45个PFGE带型.结论 杭州地区单核细胞增生李斯特菌食品分离株分子型别分布广泛,大部分菌株是可引起人李斯特菌病的Lineage Ⅰ和Lineage Ⅱ菌株.食品中单核细胞增生李斯特菌的污染比较严重,应加强监测与管理以防食源性疾病的发生.
作者：俞骅；潘劲草；汪皓秋；斯国静；刘涛；楼秀芹；张蔚；严杰 刊期： 2017年第03期
中国人兽共患病学报杂志
主管:中国科学技术协会
主办：中国微生物学会
