学术投稿

土壤杆菌重组合成透明质酸

Mao Z;Chen R R;陈祥娥

关键词:土壤杆菌, 重组, 合成, 多杀性巴氏杆菌, 生物医学领域, 葡糖醛酸, 糖聚合物, 骨关节炎治疗, 表达载体, 应用, 眼科手术, 透明质酸, 生产菌株, 凝胶多糖, 合酶基因, 工程技术, 大肠杆菌, 成功开发, 氨基葡糖, 微生物
摘要:透明质酸(hyaluronan,HA)是β1-3 D-N-乙酰氨基葡糖(GlcNAc)和β1-4 D-葡糖醛酸(GlcA)二糖重复单位组成的糖聚合物.HA在生物医学领域中具有广泛应用,如应用于眼科手术和骨关节炎治疗等.到目前为止,商品化HA仅来源于鸡冠提取或病原性链球菌发酵.本研究证实采用代谢工程技术可通过安全微生物重组合成HA.土壤杆菌(Agrobacterium sp.)ATCC 31749是一种食品聚合物凝胶多糖(curdlan)的商业化生产菌株.已成功开发出一种广谱宿主性表达载体,这种载体可表达多杀性巴氏杆菌(Pasteurella multocida)的3 kb HA合酶基因和大肠杆菌(Escherichia coli)K5菌株的编码UDP-葡糖脱氢酶的kfiD基因.这两种异源酶的共表达使土壤杆菌合成HA成为可能.
食品与药品杂志相关文献
  • 苦菊提取物的肝保护作用研究

    目的 研究苦菊提取物在体内外的肝保护作用.方法 苦菊经95%乙醇加热回流、石油醚脱脂、乙酸乙酯提取、大孔树脂20%乙醇洗脱获得提取物.通过检测其对HepG2细胞的氧化损伤模型及氧化剂叔丁基过氧化氢(tert-buty1hydroperoxide,t-BHP)诱导的体内小鼠肝损伤模型的影响,评价其对肝脏的保护作用.结果 苦菊提取物能够有效抑制细胞氧化损伤导致的死亡,对细胞产生的炎症因子也有很好的抑制作用.体内试验结果表明,该提取物也对t-BHP诱导的小鼠肝损伤有一定的保护作用.结论 体外和体内试验均表明,苦菊提取物具有很好的肝保护作用,可作为食品和药品进行开发利用.

    作者:王福鑫;林铌;邓安珺;秦海林;王爱平 刊期: 2013年第03期

  • 吡格列酮对KKAy小鼠肠道菌群的影响

    目的 研究2型糖尿病动物模型KKAy小鼠与正常C57BL/6J小鼠肠道微生物的差异和降糖药物吡格列酮对KKAy小鼠肠道菌群结构的影响,阐明宿主基因型对肠道菌群的影响及吡格列酮、肠道菌群和2型糖尿病之间的内在联系,为研究和治疗2型糖尿病提供新思路.方法 将KKAy小鼠分为药物组和模型对照组,C57BL/6J小鼠为正常对照组,定期收集小鼠粪便样品,提取其中微生物的总DNA,PCR扩增16S rDNA V3区,用DGGE(变性梯度凝胶电泳)技术分离扩增片段,结合DGGE图谱的数字化分析和特异条带克隆测序等分子生物学方法分析肠道微生物群落结构.结果 KKAy小鼠与C57BL/6J小鼠的DGGE图谱有明显差异,正常对照组小鼠肠道菌群多样性保持稳定,而模型对照组和药物组肠道菌群的多样性随时间延长逐渐下降,药物组下降趋势略大于模型对照组.主成分分析结果显示,喂药前KKAy小鼠(包括模型对照组和药物组)和C57BL/6J小鼠沿PC1方向分别聚为2类,随着实验的延续,药物组逐渐靠近正常对照组,并且喂药70 d后沿PC1方向,药物组与正常对照组聚在一起,而模型对照组另聚一类.结论 肠道微生物群落结构与宿主的基因型有明显的相关性;吡格列酮抑制某些细菌生长,降低了肠道菌群的多样性,同时能够改善肠道中主要微生物的菌群结构.

    作者:韩亮;许明;李艳琴;郭俊杰;冯玛莉;王晓炯 刊期: 2013年第03期

  • 噻吩吡啶类抗血栓药物的结构改进专利分析和发展趋势

    心血管疾病已严重危害人类健康,血小板抑制剂可有效改善和预防心血管疾病.噻吩吡啶类药物具有较好的抗血小板凝集的效果,并降低副作用,因此噻吩吡啶类药物抑制剂的研究已成为心血管疾病治疗的热点.本文分析了专利中噻吩吡啶类抗血栓药物的结构改进方向,希望为国内的制药行业在研发方向以及立项过程提供帮助.

    作者:孙文倩;龙巧云;李强;韩涛;康蕾;张雨 刊期: 2013年第03期

  • 雷贝拉唑钠冻干粉针的研制

    目的 制备雷贝拉唑钠冻干粉针.方法 选用单因素筛选冻干粉针的支架种类,采用高效液相色谱法测定主药的含量.结果 选用右旋糖酐40作为支架剂,氢氧化钠调节pH,雷贝拉唑钠含量测定表明雷贝拉唑钠进样量在47.87~71.81 μg/mL范围内与吸收峰面积呈良好的线性关系(r=0.9999).平均回收率为100.77%,RSD=0.78%(n=9).结论 制备工艺合理,质量检测方法简便、准确、重现性良好.

    作者:郭绍梅 刊期: 2013年第03期

  • 裙带菜的生理作用及药用价值研究进展

    裙带菜(Undaria pinnatifida)属大型海洋褐藻,在我国北方海域有着广泛的地理分布.目前国内外关于裙带菜的研究主要集中于其养殖的育种、育苗及与其生物性状相关的生理生化和发育研究.更多的研究集中在如何改良养殖品种从而提高其产量和品质,使之适应更严酷的生长环境等方面.这些研究均源于裙带菜具有丰富的营养价值、广泛的生理药理作用及广阔的市场经济前景.本文将近年有关裙带菜的生理作用及药用价值方面的研究做一综述.

    作者:石颖;侯和胜 刊期: 2013年第03期

  • HPLC测定注射用盐酸表柔比星的含量

    目的 建立HPLC测定注射用盐酸表柔比星的含量.方法 三甲基硅烷键合硅胶柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相:乙腈-水-甲醇-85%磷酸溶液(290∶540∶170∶1)并含0.2%十二烷基硫酸钠,流速1.0 mL/min,检测波长254 nm,柱温35℃,进样量20 μL.结果 盐酸表柔比星在0.0518~0.1554 mg/ml的浓度范围内有良好的线性关系(r=0.9999),平均回收率为99.64%(RSD =0.71%).结论 此法是一种简便,快速,准确的分析方法,专属性强,能有效地控制盐酸表柔比星的含量.

    作者:邢来全;孙晓圆;张丽 刊期: 2013年第03期

  • 我国药品数据保护制度研究及发展建议

    创新药物研发与人类健康息息相关,科学有效地保护创新药物研发过程中的数据信息已成为政府部门重点研究的课题.文中介绍了美国、欧盟、日本在药品数据保护方面相关立法,并分析我国药品数据保护制度的现状及不足,提出一些建议以供参考.

    作者:皋婷婷;袁红梅 刊期: 2013年第03期

  • 喜读《硫酸软骨素》

    由凌沛学研究员和何兆雄高级工程师合作主编的《硫酸软骨素》一书于2012年5月问世了.该书是继2000年出版凌沛学主编的《透明质酸》之后,在糖胺聚糖药物领域又一高水平的专著.硫酸软骨素作为一种重要的糖胺聚糖,自19世纪60年代被首次发现并提取分离后,由于其特殊的理化性质和多方面的药理活性,它的分离制备、结构解析与应用等方面的研究一直备受关注.尤其是进入21世纪以来,硫酸软骨素先后被美国药典、欧洲药典、英国药典和中国药典等收载,更证明了其在医药健康领域的广泛认知和普及应用.硫酸软骨素在国内外被广泛用于防治心血管疾病如高脂血症、眼科疾病如干眼症、眼科手术辅助剂和骨科疾病如骨关节炎等,剂型包括片剂、胶囊、注射剂、滴眼剂等.在美国被批准为膳食补充剂用于改善关节疾病.除此已被多年临床应用证实明确的功效外,硫酸软骨素在抗肿瘤及组织工程等领域的应用潜能也得到了众多研究者的证实和认可.

    作者:田景振 刊期: 2013年第03期

  • 蒽酮-硫酸比色法测定三角帆蚌软体组织多糖含量

    目的 测定三角帆蚌动物多糖的含量,为三角帆蚌质量控制及资源开发提供科学依据.方法 以葡萄糖为对照品,采用硫酸-蒽酮比色法测定三角帆蚌多糖的含量.结果 在580 nm波长处有大吸收峰,葡萄糖在0.02~0.10 mg/mL范围内线性关系良好,r=0.9997,回收率100.02%,RSD为0.29%.结论 该方法快速准确重现性好,可用于三角帆蚌多糖的含量测定.

    作者:徐英军;于燕燕 刊期: 2013年第03期

  • 消瘀散贴膏治疗膝骨关节炎的临床疗效研究

    目的 观察消瘀散贴膏治疗膝骨关节炎的临床疗效及安全性.方法 将符合纳入标准的膝骨关节炎患者40例,按就诊顺序随机分为两组,治疗组26例,给予消瘀散贴膏外敷治疗;对照组14例,给予扶他林胶剂治疗,疗程为6周.疼痛评分和关节功能用视觉模拟量表(VAS)量表和WOMAC指数;通过ELISA试验测血清中软骨代谢指标人软骨寡聚基质蛋白(COMP)和Ⅱ型胶原C端肽(CTX-Ⅱ)的浓度.结果 治疗组治疗前后VAS (t=11.7,P<0.001)、WOMAC (t=6.1,P<0.001)、COMP(t=7.2,P<0.001)、CTX-Ⅱ(t=1.2,P=0.24);对照组治疗前后VAS (t=7.3,P<0.001)、WOMAC (t=5.1,P<0.001)、COMP(t=8.8,P<0.001)、CTX-Ⅱ (t=0.82,P=0.43).两组治疗前后疼痛和关节功能均明显改善,VAS、WOMAC、CTX-Ⅱ两组间比较差异无统计学意义,COMP两组间比较差异有统计学意义(t=2.3,P=0.03).治疗过程中两例出现皮疹,未见其他不良反应.结论 消瘀散贴膏能够明显改善膝骨关节炎患者的临床症状和关节功能,且无严重的不良反应,有一定的临床应用价值.

    作者:滕蔚然;金立伦;王乐杨;刘秀丽 刊期: 2013年第03期

  • HPLC测定氟他胺有关物质

    目的 建立高效液相色谱法(HPLC)测定氟他胺中有关物质的含量.方法 采用HPLC,用Diamonsil C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:甲醇-水(60∶40);检测波长:230 nm;进样量:20 μL;流速:1.0 mL/min;柱温:25℃.结果 氟他胺与各杂质能得到有效分离,各杂质在0.04~2.0 μg/mL范围内线性良好.结论 本测定方法操作方便,灵敏度高,准确可靠,可用于氟他胺中有关物质的测定.

    作者:崔正华 刊期: 2013年第03期

  • 土壤杆菌重组合成透明质酸

    透明质酸(hyaluronan,HA)是β1-3 D-N-乙酰氨基葡糖(GlcNAc)和β1-4 D-葡糖醛酸(GlcA)二糖重复单位组成的糖聚合物.HA在生物医学领域中具有广泛应用,如应用于眼科手术和骨关节炎治疗等.到目前为止,商品化HA仅来源于鸡冠提取或病原性链球菌发酵.本研究证实采用代谢工程技术可通过安全微生物重组合成HA.土壤杆菌(Agrobacterium sp.)ATCC 31749是一种食品聚合物凝胶多糖(curdlan)的商业化生产菌株.已成功开发出一种广谱宿主性表达载体,这种载体可表达多杀性巴氏杆菌(Pasteurella multocida)的3 kb HA合酶基因和大肠杆菌(Escherichia coli)K5菌株的编码UDP-葡糖脱氢酶的kfiD基因.这两种异源酶的共表达使土壤杆菌合成HA成为可能.

    作者:Mao Z;Chen R R;陈祥娥 刊期: 2013年第03期

  • 羧甲基壳聚糖的生物特性及其在医药领域的应用

    羧甲基壳聚糖是壳聚糖经羧甲基化而得的一种水溶性多糖,与壳聚糖相比,羧甲基壳聚糖的水溶性提高,具有比壳聚糖更广泛的应用范围.本文综述了羧甲基壳聚糖的抑菌、抗氧化、止血、抑制肿瘤细胞生长等生理活性,并对其在药物载体、医用材料等医药领域应用的研究进展做一综述.

    作者:吴迪;刘辉;浦金辉;张婧;邹萍 刊期: 2013年第03期

  • 糖尿病大鼠红细胞山梨醇浓度与肾脏损害的相关性

    目的 研究糖尿病大鼠红细胞山梨醇浓度与肾脏损害的相关性.方法 链脲佐菌素52 mg/kg一次性腹腔注射大鼠,造模,于不同的时间点测定糖尿病大鼠红细胞内山梨醇、血肌酐、24 h尿量、尿素氮、及尿肌酐,并计算肌酐清除率,观察肾脏的病理改变,研究红细胞山梨醇浓度与肾脏损害的相关性.结果 糖尿病大鼠红细胞内山梨醇由第3周开始浓度显著升高,第6周后趋于稳定;肾功能和肾脏的病理改变则在第6周后变化明显.结论 糖尿病大鼠红细胞内山梨醇聚集达一定浓度,并持续一段时间后糖尿病大鼠出现肾脏损害,红细胞内山梨醇浓度可作为肾脏损害前的预警指标.

    作者:田恩圣;贾雷 刊期: 2013年第03期

  • 桑叶黄酮与鬼针草黄酮组分配伍抗氧化协同作用研究

    目的 比较两种不同组合方式所得粗提物的抗氧化活性,探讨不同总黄酮组分组合对抗氧化活性影响.方法 分别采用先提取后组合和药材混合提取的方式制备总黄酮,采用比色法测定总黄酮含量,以Fenton反应-比色法,测定羟自由基清除率.结果 在总黄酮量相同的情况下,提取后组合的羟自由基清除效果优于混合提取.结论 中药有效部位组合可以体现中药的协同作用.

    作者:马燕妮;张清华;刘玉红;张玲;蒋海强 刊期: 2013年第03期

  • 分析我国现行化妆品微生物检验方法存在的问题和改进建议

    目的 通过对我国现行化妆品微生物检验方法的总结,为将来完善化妆品微生物检验方法研究提供思路.方法 分析总结我国现行化妆品微生物检验方法存在的问题,详细概括了化妆品微生物检验研究情况.结果 化妆品微生物检验的规范化和标准化得以提高.结论 方法学验证试验的引入,为将来化妆品微生物检验提供了方向.

    作者:胡文红;刘广桢;徐晓洁;王德利 刊期: 2013年第03期

  • 补血养生口服液的质量标准研究

    目的 建立补血养生口服液的质量标准.方法 采用薄层法定性鉴别制剂中丹参,采用高效液相色谱法测定淫羊藿苷含量.结果 在薄层色谱中能检出丹参,淫羊藿苷在0.029~0.174 μg范围内有良好线性关系,回归系数r=0.9996,平均回收率为95.94%,RSD为1.54%.结论 本方法简便易行,专属性强,重复性好,可用于补血养生口服液的质量检测.

    作者:王俊香;杨巧凤 刊期: 2013年第03期

  • 柱前衍生化法测定莫西沙星小环的对映异构体

    目的 建立柱前衍生化法测定莫西沙星小环对映异构体的方法.方法 采用Symmetry C18 (4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,流动相为甲醇-水(60∶40),柱温为35℃;衍生试剂为2,3,4,6-四乙酰基-β-D-吡喃葡萄糖基异硫氰酸酯,检测波长为252 nm.结果 莫西沙星小环对映体衍生物获得了基线分离,并确认了R,R-衍生物的色谱峰;浓度1.44~72 mg/L范围内与峰面积呈线性关系,回归方程为A=34 801C-6472 (r=0.9999).结论 所建方法简便、快速,可用于莫西沙星小环对映异构体的拆分.

    作者:刘彩霞;孙利民;屈爱存;杨海霞;邢玉仁 刊期: 2013年第03期

  • 高效液相色谱法测定氯雷他定片溶出度

    目的 采用高效液相色谱法(HPLC)测定氯雷他定片的溶出度.方法 色谱柱:Agilent C18柱(4.6 mm× 150 mm,5 μm)色谱柱;流动相:磷酸盐缓冲液(取磷酸氢二钾2.28 g,加水800 mL溶解,磷酸调pH6.0,加水至1000 mL)-甲醇(20∶80);检测波长247 nm;流速1.0 mL/min;进样量20μL.结果 氯雷他定在0.1~10 μg/mL浓度范围内呈良好的线性关系(R=0.9998),平均回收率99.09%,RSD=0.4%(n=6).结论 此法可排除辅料对溶出度的影响,可用于该制剂的质量控制.

    作者:刘伶;王云;郭娜 刊期: 2013年第03期

  • 信息视角下医药信息行为对医患关系的影响

    目的 研究信息视角下医药信息行为对医患关系的影响.方法 采用立意抽样法对医师及患者(门诊及住院患者及家属)进行问卷调查,以医患双方对医药信息的获取途径及合理应用为指标,分析医患双方医药信息行为的作用.结果 医患双方对三方面问题的回答存在明显差异,同时慢性病患者与非慢性病患者之间也存在较大差异,表明医师未能将医药信息完全传达给患者并得到患者的肯定.因此,医师的医药信息行为未能取得大多数患者的信任,使医患关系受到损害.结论 医药信息行为在构建和谐医患关系中起到重要作用.

    作者:李艳;罗集 刊期: 2013年第03期

食品与药品杂志

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主管:山东省药学科学院

主办:山东省生物药物研究院