祝双华;刘晓群;姜怀德;郑超然;詹宇婷;梁尚栋;李桂林
目的 以投影寻踪模型建立当归药材的质量评价方法.方法 以甘肃及云南产75批当归为样本集,当归中的阿魏酸、正丁基苯酞、正丁烯基苯酞、Z-藁本内酯、亚油酸、挥发油、醇浸出物,以及Fe、Zn、Mn、Mg、Ca、Na和K等元素的质量分数为指标集,采用DPS V 7.0.5数学软件构建投影寻踪评价模型.结果 各评价指标对当归质量的贡献程度为挥发油>醇溶性浸出物>Z-藁本内酯>阿魏酸>正丁烯基苯酞>正丁基苯酞>Fe>亚油酸> Ca> Zn>Mn>Mg>K>Na.结论 基于投影寻踪模型得到的当归药材质量评价结果与实际情况较为相符.
作者:顾志荣;张亚亚;王亚丽;孙宇靖 刊期: 2015年第05期
目的 优选当归欧盟注册的标准方法.方法 对比《中国药典》2010年版一部和《欧洲药典》7.5增补版中当归质控的实验方法,对不相同的质控指标进行对比实验.结果 两部药典方法均能有效控制当归质量,但部分方法有所差异.通过实验,我们认为欧洲药典针对当归的薄层色谱和阿魏酸定量测定方法更优,而《中国药典》针对当归的水分测定方法更优.结论 根据两部药典方法的对比,结合两部药典的长处,制定我们自己的注册标准.
作者:袁宇鹏;杨玉华;王莲萍;孙裕 刊期: 2015年第05期
目的 探讨连花清瘟胶囊对经气管内滴注脂多糖(LPS)致小鼠急性肺损伤引起的肺组织炎症因子和IKK/IκB/NF-κB信号通路的蛋白表达的影响.方法 将急性肺损伤的100只SPF级18 ~20 g雄性KM小鼠随机均分为5组,LPS组,地塞米松组,连花清瘟胶囊高、中、低剂量组,另设正常对照组(n=20).光镜下观察实验小鼠肺组织病理变化,流式细胞术检测外周血中白介素-6 (IL-6)的阳性表达率,RT-PCR法检测肺组织中单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1) mRNA表达,Western blot检测肺组织中中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)、NF-κB、IκBα、IKKβ的蛋白表达.结果 与正常对照组相比,LPS组小鼠肺组织中有大量炎性细胞渗出,外周血中IL-6,肺组织中MCP-1 mRNA,NE、NF-κB、IκBα、IKKβ的蛋白表达均明显升高;与脂多糖组相比,外周血中IL-6的阳性表达率用药组均有所下降,肺组织中MCP-1 mRNA表达用药组均改善明显,肺组织中NE、NF-κB、IκBα、IKKβ的蛋白表达为地塞米松组与高剂量组改善较明显,连花清瘟中、低剂量组也有不同程度改善.结论 连花清瘟胶囊能够通过降低IKK/IκB/NF-κB信号通路的表达来减轻肺内炎症反应程度.
作者:崔雯雯;金鑫;张彦芬;常丽萍;王宏涛 刊期: 2015年第05期
目的 考察醋延胡索与赤芍、当归、漏芦合提对延胡索乙素含有量的影响.方法 制备醋延胡索与赤芍、当归、漏芦合提水提液,采用高效液相色谱(HPLC)法测定各提取液或者浓缩液中延胡索乙素质量浓度并计算提取率或转移率,采用pH计测量各提取液pH值.结果 醋延胡索与赤芍、当归合提均会降低延胡索乙素提取率,其中赤芍影响较大;配伍导致的pH值的改变对提取率无影响;常压浓缩和减压浓缩过程会损失少量延胡索乙素.结论 碱性的延胡索乙素与合提药物中酸性的鞣质反应生成沉淀是合提液中延胡索乙素质量浓度较低的主要原因.
作者:郭志烨;韩丽;杨明;刘李梅;何婧;邹文铨 刊期: 2015年第05期
目的 建立以橙皮苷为内标的一测多评法,测定健脾丸(党参、白术、陈皮、枳实、山楂、麦芽)中4种黄酮类成分(芸香柚皮苷、柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷).方法 来自10个企业的健脾丸(浓缩丸和大蜜丸)以甲醇乙酸提取,HPLC分析采用依利特C18柱(4.6 mm ×250mm,5μm);流动相为甲醇-5.7%醋酸水(31∶69);体积流量为1.0 mL/min,检测波长283 nm.结果 4种黄酮类成分在各自进样量范围内呈良好的线性关系,在岛津LC 10-AT、Waters 2695-2996和Angilent 1260液相色谱系统的相对校正因子重现性良好(RSD<5%).以橙皮苷为内标的测定结果与外标法测定结果相对误差<3%.结论 以橙皮苷为内标建立的一测多评法可用于健脾丸中4种成分的定量分析和对其进行质量评价.
作者:刘圆;魏惠珍;龚建平;俞冰荟;金浩鑫;杨世林;饶毅 刊期: 2015年第05期
目的 建立HPLC法同时测定安神解虑颗粒中紫丁香苷、栀子苷、刺五加苷E、迷迭香酸4种有效成分.方法 安神解虑颗粒75%甲醇提取液的分析采用Welch XtimateTM C18色谱柱(4.6mm×250 mm,5μm);以乙腈-0.1%磷酸水溶液为流动相,梯度洗脱;体积流量1.0 mL/min;柱温30℃;检测波长分别为265 nm (0~ 25 min),238 nm(25~35 min),220 nm (35~58 min)和330nm (58~88min).结果 紫丁香苷、栀子苷、刺五加苷E、迷迭香酸的进样量分别在0.022 8 ~0.285 μg(r=0.999 5)、0.564~7.050μg(r=0.999 7)、0.074 ~0.925 μg(r=0.999 1)、0.053 ~0.663 μg(r=0.999 2)范围内线性关系良好,平均加样回收率分别为97.6%、97.4%、97.9%、97.3%,RSD分别为0.7%、0.8%、0.9%、1.1%.结论 本方法简便、准确、重复性好,可为安神解虑颗粒的质量标准研究提供参考.
作者:王瑞娜;孙耀志;高松;杨玲;赵卫云;冯德文 刊期: 2015年第05期
目的 探讨芪白平肺胶囊对慢性阻塞性肺疾病(COPD)痰瘀阻肺证模型大鼠肺动脉Rock-1表达的影响.方法 复制COPD痰瘀阻肺证大鼠模型,给予芪白平肺胶囊、法舒地尔干预,Western blot检测大鼠肺动脉Rock-1及磷酸化MYPT-1蛋白表达.结果 模型组、芪白平肺胶囊低剂量组Rock-1、P-MYPT-1积分光密度值较正常组显著增高(P<0.01);与模型组相比,芪白平肺胶囊高剂量组、法舒地尔组Rock-1、P-MYPT-1积分光密度值较模型组显著降低(P<0.01);芪白平肺胶囊低剂量组Rock-1积分光密度值较模型组显著降低(P<0.01);芪白平肺胶囊低剂量组P-MYPT-1积分光密度值较模型组降低(P<0.05);芪白平肺胶囊高剂量组与法舒地尔组Rock-1、P-MYPT-1积分光密度值比较差异无统计学意义(P>0.05).结论 芪白平肺胶囊可降低COPD痰瘀阻肺证模型大鼠Rock-1、P-MYPT-1表达,减轻肺血管重构.
作者:王传博;方莉;王婕琼;尹婷婷;童佳兵;杨程;李泽庚 刊期: 2015年第05期
目的 研究五子衍宗方对环磷酰胺(CTX)诱导的小鼠肝脏细胞DNA损伤的保护作用.方法 将BALB/c小鼠随机分为正常对照组,模型组,五子衍宗方低、高剂量组,每组10只.五子衍宗方组预给药一周之后,除正常对照组之外,其余各组注射CTX(100 mg/kg)隔天给药共3次,末次注射CTX 12 h后处死小鼠.检测小鼠的肝脏指数,血清中丙氨酸转氨酶(ALT)和天冬氨酸转氨酶(AST)活力.硫代巴比妥酸法检测肝脏中丙二醛(MDA)的量,ELISA检测肝脏中8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)的量,单细胞凝胶电泳技术检测肝脏细胞的DNA损伤.结果 五子衍宗方能够升高小鼠的肝脏指数,降低ALT、AST的活力,降低肝脏中的8-OHdG、MDA的量,五子衍宗方组均可以使小鼠Olive尾矩、尾长、尾距和尾部DNA%降低.结论 五子衍宗方能拮抗CTX造成的小鼠肝脏细胞的DNA损伤,提高肝脏的抗氧化能力.
作者:黄威峰;刘苗苗;袁丁;彭奔;张长城 刊期: 2015年第05期
目的 基于核转录因子kappaB(nuclear transcription factor-kappaB,NF-κB)信号通路探讨脂多糖(lipopolysac-chandes,LPS)刺激大鼠肝细胞及Kupffer细胞炎症损伤以及疏肝健脾含药血清的保护作用.方法 通过体外培养以及免疫荧光鉴定SD大鼠肝细胞及Kupffer细胞,利用LPS刺激大鼠肝细胞及Kupffer细胞产生炎症反应,酶联免疫法检测肝细胞及Kupffer细胞培养上清液中白介素-1(interleukin-1,IL-1)、人血清淀粉样蛋白(serum amyloid A,SSA)的表达,Western blot法检测大鼠肝细胞及Kupffer细胞NF-κB通路相关蛋白的表达.结果 每只大鼠通过纯化后获得肝细胞数量1.5×108 ~2.0×108个,Kupffer细胞数量0.5×107~1.0×107个,Typan blue染色测定肝细胞及Kupffer细胞活力均可达到95%以上.LPS组肝细胞及Kupffer细胞较空白血清组IL-1、SSA水平均有显著升高(P<0.01).而与LPS组比较,药物干预组可显著降低(P<0.01).肝细胞、Kupffer细胞的蛋白表明,与空白血清组比较,LPS组肝细胞及Kupffer细胞NF-κB、IκB及磷酸化IKKβ蛋白表达均有显著升高(P<0.01);与LPS组比较,疏肝健脾方药含药血清能显著下调肝细胞IκB及p-IKKβ蛋白的蛋白表达水平(P<0.01),但NF-κB蛋白表达水平无显著差异(P>0.05),疏肝健脾含药血清能下调Kupffer细胞NF-κB、IκB及p-IKKβ蛋白表达(P<0.01).结论 疏肝健脾含药血清能够对LPS刺激大鼠肝细胞、Kupffer细胞炎症损伤产生保护作用,其机制可能与NF-κB信号通路相关.
作者:韩莉;龚享文;杨钦河;闫海震;张玉佩;李媛媛;徐拥建;张金文;林春梅 刊期: 2015年第05期
目的 分离并筛选解毒活血滋阴方对系统性红斑狼疮免疫抑制作用的有效部位.方法 制备解毒活血滋阴方水溶性部位、乙醚部位、乙酸乙酯部位、正丁醇部位、乙醇部位的提取物.在体内研究中,采用小鼠迟发型超敏反应模型和鸡红细胞诱导的小鼠血清溶血素生成模型,观察解毒活血滋阴方不同提取部位对细胞免疫和体液免疫的影响;体外研究检测解毒活血滋阴方不同提取部位对ConA及LPS诱导的小鼠T、B淋巴细胞增殖的影响.结果 解毒活血滋阴方水溶性部位和乙酸乙酯部位能够明显减轻小鼠迟发型超敏反应小鼠耳肿胀、降低小鼠的脾指数和胸腺指数,对鸡红细胞诱导的小鼠血清溶血素生成具有抑制作用.同时解毒活血滋阴方水溶性部位和乙酸乙酯部位各剂量组均可抑制T、B淋巴细胞增殖,且呈一定剂量依赖性.结论 解毒活血滋阴方治疗系统性红斑狼疮免疫抑制作用的有效部位可能是水溶性部位和乙酸乙酯部位.
作者:卞华;郝鹏飞;吕芹;山书玲;付卫云;张瓅方 刊期: 2015年第05期
目的 研究蛇床子素对高糖诱导原代培养人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)炎症的保护作用.方法 将HUVEC细胞分为对照组、高糖组、对照+蛇床子素组和高糖+蛇床子素组.培养5d后,采用硝酸还原酶法测定细胞上清液中一氧化氮(NO),荧光酶标仪测定细胞内活性氧(ROS),并通过real-time PCR和Western blot法检测趋化因子CCL5及其受体CCR5 mRNA和蛋白的表达.结果 高糖明显降低对照组细胞上清液中NO水平同时升高ROS,蛇床子素能增加高糖组细胞上清液中NO水平同时降低高糖组细胞内ROS;real-time PCR和Western blot结果显示蛇床子素可以降低高糖组细胞CCL5及其受体CCR5mRNA和蛋白的表达量.结论 蛇床子素对高糖诱导的人脐静脉血管内皮细胞的损害具有保护作用是与其抗氧化应激及抗炎作用有关.
作者:祝双华;刘晓群;姜怀德;郑超然;詹宇婷;梁尚栋;李桂林 刊期: 2015年第05期
目的 以下丘脑-垂体-性腺轴为基础,探究金匮肾气丸对肾阳虚大鼠的药理作用,探讨其温补肾阳的作用机制.方法 用氢化可的松建立肾阳虚模型大鼠,60只,随机分为6组,造模后连续灌喂给药30 d;分别于给药第15天、第30天进行强迫负重游泳实验;第30天,眼球取血,放射免疫分析法检测血清睾酮(T)、雌二醇(E2)的水平;采用RT-PCR法检测各组大鼠下丘脑、垂体和靶腺(睾丸)钙调蛋白(CaM) mRNA的表达.结果 与模型组比,金匮肾气丸可明显提高肾阳虚模型大鼠的负重游泳时长(P<0.05),给药20d后其体能趋于正常;金匮肾气丸可明显降低血清中雌二醇水平及升高睾酮水平(P<0.05);金匮肾气丸可明显降低下丘脑、垂体、睾丸中CaM RNA的表达(P<0.05).结论 金匮肾气丸具有明显的温补肾阳作用,可通过调节机体下丘脑-垂体-性腺轴中钙调蛋白基因表达,改善肾阳虚大鼠激素水平,逆转肾阳虚状态.
作者:付正丰;龚明;苗家伟;岳秀永;陈春梅;严磊;陈华 刊期: 2015年第05期
目的 研究地奥心血康(黄山药、穿龙薯蓣)的抗炎镇痛作用.方法 采用福尔马林致小鼠疼痛反应模型、二甲苯致小鼠耳肿胀模型、醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性增高模型、棉球致小鼠肉芽肿模型和角叉菜胶致小鼠气囊炎症模型观察地奥心血康的抗炎镇痛作用;采用酶联免疫吸附法(ELISA)硝酸还原法测定气囊炎症模型小鼠气囊灌洗液中肿瘤坏死因子(TNF-α)和一氧化氮(NO)水平,采用硫代巴比妥酸(TBA)法和水溶性的四唑盐法(WST-1)测定模型小鼠血清中丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)水平,分析其可能的抗炎机制.结果 地奥心血康80 mg/kg、60 mg/kg能显著减少福尔马林致痛模型小鼠15 ~ 35 min的舔后足累计时间(P<0.05),能明显抑制二甲苯致小鼠耳肿胀、醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性增高、棉球致小鼠肉芽组织增生以及角叉菜胶致气囊炎症模型小鼠的炎症反应(P<0.01或P<0.05);并能降低气囊炎症模型小鼠炎性渗出液中NO、TNF-α水平,减少血清中MDA水平,提高SOD活力(P<0.01或P<0.05).结论 地奥心血康的抗炎作用可能与抑制炎性因子NO、TNF-α及抗氧化有关.
作者:李翔;于娅;黄飞鸿;熊晏;李奇娟;瞿礼萍;邹文俊 刊期: 2015年第05期
目的 通过溶解度比较考察天山雪莲提取物磷脂复合物稳定性.方法 分别测定天山雪莲提取物和天山雪莲提取物磷脂复合物在水和不同pH的缓冲溶液中平衡溶解度,不同pH的饱和正辛醇/水中表观油水分配系数,和强光照射、高温、高湿环境下,考察天山雪莲提取物磷脂复合物的质量及其有效成分(绿原酸和芦丁)的质量分数变化.结果 磷脂复合物可明显提高天山雪莲提取物中活性成分(绿原酸和芦丁)平衡溶解度和表观油水分配系数,而且具有一定的抗光照性,但高温下,磷脂复合物稳定性较差,易吸湿.结论 本研究将天山雪莲提取物磷脂复合物能不同程度改善天山雪莲提取物中活性成分的水溶性和脂溶性,同时以固体形式保存其稳定性较好.
作者:欧燕;周俊;张雪峰;邢建国 刊期: 2015年第05期
目的 比较研究不同产地海螵蛸的指纹图谱,并测定其中核苷类成分的含有量.方法 海螵蛸NaCl水溶液采用高效液相色谱法,色谱柱为资生堂PAK-C18 (4.6 mm ×250 mm,5μm),流动相为0.01 mol/L磷酸二氢钾水溶液,等度洗脱,检测波长254 nm,柱温25℃.用相似度评价系统软件计算得到各批药材的相似度.结果 海螵蛸中的尿嘧啶、次黄嘌呤和黄嘌呤分离度良好,线性范围分别为1.25 ~ 12.50μg/mL、1.28~12.80 μg/mL和5.05 ~ 50.50μg/mL.25批样品(来自浙江、辽宁、云南、山东、广西、福建)相似度均大于0.9;广东的样品相似度在0.97~0.78,差异较大;海南的样品相似度均为0.88左右.结论 本研究建立的HPLC指纹图谱方法可有效地区分海螵蛸及其他贝壳类海洋药材.
作者:顾青青;安叡;张艺竹;于静;刘自华;王新宏 刊期: 2015年第05期
目的 观察健脾化痰方对胰岛素抵抗3T3-L1脂肪细胞NF-κB表达和脂联素、抵抗素分泌的影响,探讨其改善胰岛素抵抗(IR)的机制.方法 采用细胞培养技术,将3T3-L1小鼠前脂肪细胞诱导分化为成熟脂肪细胞,通过地塞米松诱导建立IR细胞模型,将脂肪细胞分为正常组(基础培养液加10%空白组血清培养正常脂肪细胞)、模型组(基础培养液加10%空白组血清培养IR脂肪细胞)、健脾化痰组(基础培养液加10%健脾化痰组血清培养IR脂肪细胞)和吡格列酮组(基础培养液加10%吡格列酮组血清培养IR脂肪细胞),培养48 h,葡萄糖氧化酶法检测细胞培养上清液中葡萄糖浓度,ELISA法检测细胞培养上清液中脂联素和抵抗素量,RT-qPCR检测NF-κB表达.结果 与正常组比较,模型组葡萄糖消耗量和脂联素含有量显著降低(P<0.05),抵抗素含有量显著升高(P<0.05),NF-κB表达明显上调(P<0.05);与模型组比较,健脾化痰组和吡格列酮组葡萄糖消耗量和脂联素含有量明显升高(P<0.05),抵抗素含有量显著降低(P<0.05),NF-κB表达下调(P<0.05).结论 NF-κB、脂联素和抵抗素参与IR发生,健脾化痰方可能通过抑制IR脂肪细胞NF-κB异常表达,增加脂联素分泌、减少抵抗素分泌,改善IR.
作者:李保良;张琪;林冠凯;费建平;居凌云 刊期: 2015年第05期
目的 建立复方药物复方丹参滴丸(CDDP)的生物活性检测方法;将细胞指数值(CI)与主要活性成分含有量进行相关性分析,为其质量控制提供研究基础.方法 采用实时细胞电子分析技术(RTCA),测定样本对不同细胞株的IC50值,筛选出对复方丹参滴丸有特定依赖性的细胞株,对不同批次复方丹参滴丸建立时间剂量依赖性细胞反应曲线(TCRPs),以细胞指数值(CI)为考察指标,比较各批次药物的生物活性;测定复方丹参滴丸主要活性成分含有量,并与生物活性进行相关性分析.结果 复方丹参滴丸在一定浓度范围内与空白相比对A549细胞株的增殖有明显的抑制作用(P<0.05),并有明显的量效关系(r>0.9);由TCRPs反映各批次滴丸质量稳定,但在特定时间点特定的浓度仍有一定差异,今后可用于同种药物不同批次间的稳定性研究;相关性结果表明复方丹参滴丸生物活性与丹参素含有量有显著性相关(P<0.05).结论 说明本技术能反映复方丹参滴丸生物活性,可与化学成分分析方法结合共同把关中药质量.
作者:雷飞飞;王建春;张咏梅;孙成祥;潘金火 刊期: 2015年第05期
目的 以丁苯酞为内标一测多评法测定都梁滴丸、白带丸、血府逐瘀胶囊中洋川芎内酯A和藁本内酯.方法 待测药物以甲醇提取,HPLC分析采用的色谱柱为Agilent Eclipse XDB-C18(4.6 mm×150 mm,5μm),流动相为甲醇-水(52∶48).测定洋川芎内酯A和藁本内酯的相对校正因子,考察其校正因子的重现性,并与外标法进行比较.结果 都梁滴丸和血府逐瘀胶囊能同时检测出洋川芎内酯A和藁本内酯,而白带丸仅检测出藁本内酯.在Agilent Eclipse XDB-C18、Phenomenex Luna C18和Agilent Zorbax SB-C18色谱柱上测定的相对校正因子重现性好,与外标法实测值无显著差异.结论 本法可用于川芎、当归的质量控制,解决了洋川芎内酯A和藁本内酯对照品不稳定的难题.
作者:杨艳;易进海;刘云华;黄志芳;刘玉红;陈燕 刊期: 2015年第05期
目的 分析云南省临沧市永德县10年树龄赤桉、蓝桉和大叶桉的叶片提取物中挥发性成分的含有量变化情况,并研究其抑菌作用.方法 连续12个月采摘3种桉叶片,阴干后分别用二氯甲烷和无水乙醇超声提取,对两提取物进行GC/MS分析,并用琼脂平板扩散法测定其抑菌活性.结果 蓝桉含挥发性成分量高,赤桉低.无水乙醇桉叶提取物的抗菌活性均强于二氯甲烷桉叶提取物,对革兰氏阳性菌的抑制作用均强于对革兰氏阴性菌,但桉叶的主要成分1,8-桉叶油素抑菌活性很弱.结论 同一月份3种桉叶提取物以及同一种桉叶不同月份提取物的挥发性成分含有量和抗菌活性均有差异,而且其抑菌成分可能与1,8-桉叶油素相关不大,需作进一步研究.
作者:陶奕;殷梦;张皓冰 刊期: 2015年第05期
探讨中医药治疗非酒精性脂肪肝(non-alcoholic fatty liver diseases,NAFLD)的研究进展.总结分析中国期刊全文数据库中医药治疗NAFLD临床及实验研究文献在NAFLD病情发展的不同阶段,中医药常采用疏肝健脾、清热祛湿化痰、活血通络、化痰散结等方法加以治疗.与西医药学比较,中医药对NAFLD的治疗方法及药物选择多样,具有多靶点作用机制、价格便宜、不良反应少等特点.
作者:吴丽;张峰;郑仕中;陈志鹏;蔡宝昌 刊期: 2015年第05期