学术投稿

猴肾成纤维细胞人胰岛素样生长因子-Ⅰ基因的表达和活性检测

牛嗣云;陈志宏;岳凤鸣;高维娟;高福禄

关键词:人胰岛素样生长因子-Ⅰ, 克隆, 表达, 生物活性
摘要:目的:将构建的真核表达载体 pCI-neo/hIGF-Ⅰ进行表达及活性检测,为胰岛素样生长因子-Ⅰ(IGF-Ⅰ)基因治疗糖尿病奠定基础.方法:将构建的真核表达载体 pCI-neo/hlGF-Ⅰ转染猴肾成纤维细胞系 COS-7,用原位杂交和免疫细胞化学检测表达,收集培养上清以胰岛素刺激释放实验进行活性测定.结果:IGF-Ⅰ在 COS-7细胞得到了表达,并具有刺激胰岛素分泌的活性.结论:新构建的载体 pCI-neo/hIGF-Ⅰ能在 COS-7 细胞中表达、分泌,且所分泌 IGF-Ⅰ具有生物活性.
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    <人体胚胎学>是<胚胎学>的一个重要分支,至今已有几百年历史.它是从研究人卵受精、胚胎发育以至胎儿诞生的一门科学.一个受精卵在短短的260多天内快速、有序地变成多种细胞王国(约210多种),再形成4种基本组织、10大器官系统复杂的人体.

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    作者:张晓丽;高英茂;赵舒武;邴鲁军 刊期: 2008年第06期

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  • 胸椎棘突的倾斜度

    胸椎棘突呈矢状位后伸向下倾斜,检索有关资料,未见胸椎棘突倾斜度的相关报道,为探讨胸椎棘突倾斜度的几何模型,为人类学、影像学和临床胸椎管穿刺提供依据,对胸椎棘突的倾斜角(棘突上缘与椎体上水平面正中矢状轴的夹角)进行观测.

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  • 面神经局部缺血对其超微结构的影响

    目的:观察面神经局部缺血对其超微结构的影响,为临床腮腺切除术提供参考资料.方法:选用家兔,采用同体对照的方法,模拟人腮腺切除手术.实验侧于手术显微镜下,游离面神经并破坏其外血管系,切除腮腺.术后2、3、4周分别取双侧面神经透射电镜下观察.结果:实验侧早期2周轴索内微丝呈增生性改变;中期3周以轴索内微丝破坏、线粒体肿胀变性为主;晚期4周变性轴索溶解.结论:为切除腮腺,游离面神经破坏其外血管系,可导致面神经纤维轴索变性;提示临床腮腺切除时,应尽可能保护面神经外血管系,以减少面瘫的发生.

    作者:薛景凤;李健;王笑茹 刊期: 2008年第06期

  • 脑缺血再灌注后大脑皮质环氧化酶-2 的表达及川芎嗪的干预作用

    目的:探讨环氧化酶-2(COX-2)在脑缺血再灌注损伤后的表达及其作用,为治疗缺血性脑病提供实验依据.方法:以线栓法制作大鼠大脑中动脉阻塞的局灶性脑缺血再灌注模型,采用免疫组织化学和神经行为相结合的方法,观测缺血再灌注侧大脑皮质内 COX-2 表达和神经功能的变化.结果:脑缺血再灌注组 COX-2 免疫阳性神经元在再灌注6 h后较假手术组明显增多,并随着再灌注时间的延长逐渐增加,再灌注24 h后达高峰;与模型组比较,川芎嗪治疗组 COX-2 的表达明显减少.结论:脑缺血再灌注后 COX-2 的表达较正常明显增多,是导致脑缺血再灌注损伤的因素之一,川芎嗪对大鼠脑缺血再灌注损伤有保护作用.

    作者:任占川;郭俊仙;杨迎春;梁永刚 刊期: 2008年第06期

  • 核因子-κB 激活与一氧化氮合酶 mRNA 表达在重症急性胰腺炎肺损伤中的作用

    目的:探讨重症急性胰腺炎(SAP)大鼠肺组织核因子-κB(NF-κB)活化及诱导型一氧化氮合酶 mRNA 表达与肺损伤的关系.方法:SD 大鼠随机分为对照组、SAP 组、二硫代氨基甲酸吡咯烷(PDTC)预处理组.建立各组模型后取肺组织行病理学观察,免疫组织化学法观察 NF-κB 的表达,实时荧光定量 PCR 法检测 iNOS mRNA 表达.结果:对照组仅极少量NF-κB 活化,iNOS mRNA 呈低水平表达.SAP 组NF-κB 出表达明显增加,并呈动态变化,6 h达高峰,主要表达于中性粒细胞、单核/巨噬细胞、支气管黏膜七皮细胞、肺泡上皮细胞的胞质和胞核内,iNOS mRNA 表达明显上调.PDTC 预处理组NF-κB 表达明显减少,iNOS mRNA 表达亦下调,但仍高于对照组.结论:SAP 时肺组织NF-κB 活化并通过调控 iNOS mRNA 的表达参与肺损伤.PDTC 可能通过抑制 NF-κB 出活性进而下调 iNOS mRNA 的表达,减轻肺损伤.

    作者:阚氏海;余崇林;黄飞 刊期: 2008年第06期

  • 表皮生长因子对小鼠肾小管发育中细胞增殖的影响

    目的:观察小鼠肾小管发育中细胞增殖和表皮生长因子(EGF)的表达特征,探讨 EGF 对小鼠肾小管发育中细胞增殖的影响.方法:应用 5-溴-2-脱氧尿嘧啶(BrdU)标记增殖细胞.应用免疫组织化学、免疫荧光、免疫印迹技术并结合体视学方法检测生后 1、3、5、6、7、14、21、28、40 d 小鼠肾小管 BrdU 阳性细胞和 EGF 的表达.结果:EGF 于生后6 d表达在肾小管上皮细胞,之后随着日龄的增加表达渐增;BrdU 阳性细胞于生后1 d表达,14 d达高峰,之后随着日龄增加而逐渐减少;生后14 d之后 EGF 与细胞增殖表达趋势完全相反.结论:推测 EGF 在生后小鼠肾发育中对肾小管的分化和成熟起重要作用,但并不促进细胞增殖.

    作者:李晓明;马云胜;奥瑞芳;郭敏 刊期: 2008年第06期

  • 解剖学学习中常见错误浅谈

    解剖学是一门重要的医学基础课,是所有医学生的必修课,本课程学习的好坏,知识点掌握的正确与否,都直接关系到以后的学习.

    作者:沈建军;杜佳彦;吴江东;唐祺 刊期: 2008年第06期

  • 猪心窦房结的形态学特点

    目的:通过光、电镜观测猪心窦房结组织形态学结构特点.方法:通过心内多电极电生理标测等方法初步定位猪窭房结位置,取新鲜猪心窦房结组织,切片、染色后光镜下观察.确定窦房结位置后,再次取材、脱水、固定后超薄切片,并用透射电镜观察并拍照.结果:猪心窦房结位于上腔静脉和右心房交界处的界沟上端,起搏细胞、移行细胞等都有其特有的形态和分布.结论:猪心窦房结有着不同于其他心肌组织的形态和结构,其细胞组成和功能与窦房结本身功能相一致.

    作者:段炼;宋智钢;徐志云;张浩;姚颖龙 刊期: 2008年第06期

  • 左侧肾动脉变异一例

    在解剖1成年女性尸体时,发现其左肾肾动脉变异,现报道如下.左肾形态正常,从腹主动脉由上向下发出2支左肾动脉,分别称左肾上动脉和左肾下动脉,两者间距3.5 cm.

    作者:周聪发;易智华;潘爱华 刊期: 2008年第06期

  • 雌激素对大鼠腺垂体中瘦素长型受体表达的影响

    目的:研究雌激素对卵巢摘除后大鼠腺垂体中瘦素长型受体的调节作用.方法:建立卵巢摘除大鼠模型,用半定量RT-PCR 和免疫印迹技术,检测腺垂体中瘦素长型受体 mRNA 和蛋白表达的变化.结果:注射17β-雌激素组和假手术组中瘦素长型受体 mRNA 和蛋白表达显著高于注射花生油组.结论:雌激素可调节腺垂体中瘦素长型受体的表达,提示雌激素对腺垂体的调节,可能与瘦素相关.

    作者:陈红平;张垒;康路妹;曾慧红 刊期: 2008年第06期

  • hPH-20 DNA 疫苗对雌性小鼠生育的影响

    目的:观察 pcDNA3.1(+)-hPH-20 基因疫苗经基因枪介导肌肉接种后在小鼠体内的表达及对小鼠受孕率的影响.方法:以小鼠为实验材料,将实验组经后腿股内侧肌以基因枪多点注射重组质粒 pcDNA3.1(+)-hPH-20 5μg,空载体对照组注射 pcDNA3.1(+)5μg,空白对照组注射生理盐水 200μl,于接种后取股内侧肌检测 hPH-20 mRNA 和蛋白的表达.采集抗血清做人精子穿去透明带仓鼠卵细胞实验,动物合笼观察受孕情况,持续 4 个月后进行基因疫苗的安全性检测.结果:注射部佗肌肉检测到目的条带;原位杂交在肌细胞膜、胞质和部分肌细胞核可见到蓝紫色颗粒;免疫组织化学显色在肌细胞膜和胞质可见到棕褐色颗粒;实验组小鼠受孕率和对照组相比下降77.78%,同时用鼠抗 hPH-20 血清能明显降低精子穿卵率;外源性基因没有整合至宿主染色体.结论:hPH-20 基因疫苗经基因枪介导肌内接种有一定的免疫避孕效果.

    作者:陈雪梅;刘晓东;任秀花;臧卫东 刊期: 2008年第06期

  • 股静脉瓣膜的临床应用解剖

    目的:为原发性股静脉瓣膜功能不全的诊治和构建组织工程静脉瓣膜提供形态学基础.方法:26例(52侧)成人尸体的股静脉标本等分为远侧、中间、近侧1/3段,在手术显微镜下解剖观察和测量相关数据,并对股静脉瓣膜进行 Masson三色改良染色和 H-E染色.结果:股静脉瓣膜数为(3.81±1.44)个,瓣膜以半月形双叶瓣为主,瓣膜方位除近段以前后位为主外,其余两段无显著性差异.瓣膜腔面和窦面均覆着一层内皮细胞,在两层内皮细胞之间为大量的胶原纤维,腔面内皮下覆着一弹力纤维带.结论:在临床行静脉瓣膜成形术时,应保证瓣叶的形态规则和闭合严密,以维持其正常的血流动力学;在构建组织工程瓣膜时,半月形双叶瓣或三叶瓣为佳形态.

    作者:聂兵;温昱;党瑞山;黄会龙;王栋;张志英;张传森 刊期: 2008年第06期

  • 组织蛋白酶S和组织蛋白酶K在人曲张大隐静脉平滑肌细胞中的表达

    目的:探讨组织蛋向酶 S(Cat S)、组织蛋白酶 K(Cat K)在曲张大隐静脉平滑肌细胞(SMC)中的表达变化.方法:术中收集曲张及正常大隐静脉标本,采用免疫组织化学显色方法、免疫印迹法检测 Cat S、Cat K 存曲张和正常大隐静脉管壁的表达.结果:Cat S 和 Cat K 在曲张大隐静脉中免疫反应阳性,阳性细胞主要位于 SMC 胞质,曲张组 SMC 中 Cat S 和 Cat K 阳性细胞平均光密度值较正常组明显增高,其蛋白表达明显高于正常组,免疫荧光显色可见Cat S、Cat K 与曲张大隐静脉 SMC 共定位.结论:Cat S 和 Cat K 在曲张大隐静脉 SMC 中表达明显增高,表明两者可能参与了静脉曲张的发生,并可能作为该疾病的生物学标志.

    作者:张媛媛;韩卉 刊期: 2008年第06期

  • 双峰驼泪腺的解剖学与组织化学特点

    目的:探究双峰驼泪腺(主泪腺、第三眼睑上腺和哈氏腺)的解剖学、组织学及组织化学特点,为研究双峰驼泪腺的生理机能提供形态学依据.方法:健康无眼疾双峰驼 5 峰,对泪腺、第三眼睑上腺、哈氏腺进行大体解剖学、组织学和组织化学研究.结果:双峰驼主泪腺位于眼球背外侧,呈灰白色不规则三角形,腺单位为管泡状,呈 PAS 阳性、阿利新蓝阳性.第三眼睑上腺位于眼球前内侧面,包裹第三眼睑软骨,呈卵圆形,管泡状腺泡,主要呈 PAS 阳性.哈氏腺位于第眼三睑上腺底部,腺单位有管泡状腺泡和大管腔腺泡,主要呈 PAS 阳性.结论:双峰驼泪腺的位置与其他动物相似,而形态学特点有差异,这可能与其生活环境有一定关系;组织化学分析结果表明双峰驼主泪腺为混合性腺,第三眼睑上腺和哈氏腺主要为浆液腺.

    作者:高承娟;马景红;俞诗源;王建林 刊期: 2008年第06期

  • 人体解剖学教学中的哲学思维

    医学的对象是人,是自然属性、社会属性和心理属性的辩证统一,而这三大属性也就决定了医学的哲学属性,决定了哲学对于提高医务人员的人文素质和分析思维能力,推动现代医学的发展具有不可替代的作用[1].

    作者:杨晓煜;郑鸣 刊期: 2008年第06期

  • 中国数字化可视人脑基底核团的三维立体解剖与可视化

    目的:建立基底核团的三维数字化可视模型,为该区域疾病的影像学诊断和神经外科手术尤其是立体定向手术治疗提供解剖学依据.方法:从中国数字化可视人体数据集中选取与基底核有关的横断面图像,对基底核团进行半自动分割,并采用面绘制的方法进行三维重建.用 Amira 软件,对基底核团进行绘制重建,然后进行冠状、矢状重采样.从横、冠、矢3个方位对基底核团进行立体解剖及可视化研究.结果:获得同一基底核团横、冠、矢3个方位的连续薄层断面数据集,对豆状核、尾状核、杏仁核等结构进行了三维重建.重建结构可多结构、多色彩模式显示,可在三维空间绕任意轴旋转.结论:为基底核团的研究提供了一种新的方法.重建的基底核团真实、清晰,再现了各结构的自然形态及在空间中的确切位置,提供了一个初步的基底核的数字解剖学模型.

    作者:李七渝;张绍祥;林支付;谭立文 刊期: 2008年第06期

  • 无血清培养条件下神经元前体细胞的增殖

    目的:建立新生大鼠大脑皮层细胞原代培养体系并进行神经元前体细胞的增殖研究.方法:原代混合培养新生大鼠大脑皮层细胞;混合培养体系用血清培养基培养6 d后换用无血清培养基培养,免疫细胞化学显色鉴定此培养过程中不同时间点的细胞类型,并在不同时间段加入 BrdU,用于分析神经元前体细胞的增殖状况.结果:换用无血清培养基培养后,出现明显的细胞分层现象;神经元及其前体细胞的比例逐渐上升,而神经干细胞和星形胶质细胞的比例缓慢下降;增殖细胞的比例在0~24 h、24~48 h、48~72 h时间段里逐渐增加,而在72~96 h、96~120 h时间段里逐渐减少.结论:新生大鼠大脑皮层细胞混合培养体系在无血清培养条件下促进神经元前体细胞的增殖.

    作者:周俊松;董运海;宋雪慧;辛莲;张焕相 刊期: 2008年第06期

  • 全脏器反位一例

    内脏反位是一种少见的先天性畸形.在解剖学教学过程中发现胸、腹腔脏器全反位1例,现报道如下.男性尸体,年龄30岁左右,身长约170 cm.

    作者:马建敏;鲁纯纠 刊期: 2008年第06期

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