学术投稿

人顶体蛋白酶原基因片段的克隆及与β-半乳糖苷酶基因(LacZ)的融合基因载体的构建

盛毅;纪亚忠;张其;赵亚南;李建秀;傅继梁

关键词:人顶体蛋白酶原基因, 报告基因, 载体构建
摘要:为确定人顶体蛋白酶原基因特异的基因表达调控和蛋白分选的序列,从血白细胞中抽提人基因组,聚合酶链式反应(PCR)扩增该基因5'侧翼序列和第1外显子.将扩增获得的1 3 Kb片段克隆到pGEM-T中,经酶切鉴定和DNA序列测定确定为人顶体蛋白酶基因片段.将上述基因片段克隆到pGEM-4Z中,适当酶切后与pSV-β-Galactosidase中经酶切去除SV40早期启动子的两片段连接,终获得人顶体蛋白酶基因的5'侧翼序列和第1外显子与LacZ的融合基因载体,以及人顶体蛋白酶原基因5'侧翼序列与LacZ的融合基因载体.
中国男科学杂志相关文献
  • 人顶体蛋白酶原基因片段的克隆及与β-半乳糖苷酶基因(LacZ)的融合基因载体的构建

    为确定人顶体蛋白酶原基因特异的基因表达调控和蛋白分选的序列,从血白细胞中抽提人基因组,聚合酶链式反应(PCR)扩增该基因5'侧翼序列和第1外显子.将扩增获得的1 3 Kb片段克隆到pGEM-T中,经酶切鉴定和DNA序列测定确定为人顶体蛋白酶基因片段.将上述基因片段克隆到pGEM-4Z中,适当酶切后与pSV-β-Galactosidase中经酶切去除SV40早期启动子的两片段连接,终获得人顶体蛋白酶基因的5'侧翼序列和第1外显子与LacZ的融合基因载体,以及人顶体蛋白酶原基因5'侧翼序列与LacZ的融合基因载体.

    作者:盛毅;纪亚忠;张其;赵亚南;李建秀;傅继梁 刊期: 2000年第01期

  • 输精管穿刺治疗固定钳

    输精管穿刺术常用于精道造影、注射药物及节育术等,因具微创、痛苦小、并发症少的优点,已被广泛用于临床.因阴囊组织疏松,输精管走行迂曲,管壁韧而光滑的解剖特点,在穿刺操作时,刺入输精管内的针尖在前进时易刺破管壁穿孔;或因移动而退出;甚至因血肿致治疗失败.

    作者:肖新民 刊期: 2000年第01期

  • 前列腺液430株葡萄球菌药敏结果

    葡萄球菌是各种感染性疾病中常见的病原菌,近年来有资料报道,引起慢性前列腺炎的各种病原微生物中,葡萄球菌所占比例仍为第一.

    作者:但世铮;范虹;徐险峰;罗骏 刊期: 2000年第01期

  • 尿道灌注Linsidomin提高阴茎勃起障碍负压治疗效果

    负压助勃装置已被广泛用于阴茎勃起障碍(ED)患者的治疗,但效果往往不甚理想,勃起不够坚挺,有悬垂感.我院采用一氧化氮供体Linsidomin尿道灌注辅助负压装置治疗ED患者41例,结果报告如下:

    作者:高保华;王瑞臣;刘中国 刊期: 2000年第01期

  • 包皮环套术的临床应用(附580例报告)

    我院在门诊应用包皮环套术治疗包皮过长、包茎580例,对大部分患儿进行随访,取得良好的治疗效果,报告如下.

    作者:陈晓峰;詹河涓;李德超 刊期: 2000年第01期

  • 黄体酮对精液质量的影响

    临床上应用黄体酮治疗肾输尿管结石已有较多报道,我院自1986年10月~1997年11月在使用此药物治疗的患者中筛选出男性自愿者28例,对其治疗前后精液质量进行统计分析,现报告如下.

    作者:吴云;邓建兴;虞晓明;吴爱斌 刊期: 2000年第01期

  • 抗精子抗体对男子生育有何影响

    人精子是在睾丸的曲细精管内产生的.曲细精管由界膜围绕,管壁上皮是由两类形态和功能不同的生精细胞和支持细胞组成.

    作者:高绍新 刊期: 2000年第01期

  • 48例睾丸肿瘤的诊治分析

    睾丸肿瘤多发于青壮年,其发生率在泌尿系统肿瘤中居第4位.我院自1987年以来共收治48例睾丸肿瘤病人,现就有关问题进行探讨.

    作者:雷樟铭 刊期: 2000年第01期

  • 妇舒宁抗勃起作用的临床观察

    我院1997年始应用妇舒宁治疗成人包皮环切术后勃起,并将其对照于己烯雌酚,发现妇舒宁比己烯雌酚有较好的抗勃起作用,且副作用少.现报道如下.

    作者:张大宏;李新德 刊期: 2000年第01期

  • 膀胱、尿道异物45例报告

    我们于1984年~1998年共收治膀胱、尿道异物45例,经过膀胱镜取异物或手术治疗均全部治愈,现报告如下

    作者:朱国熙;张雪莲 刊期: 2000年第01期

  • 510例男性未婚青年性心理和性行为的调查报告

    本调查分析是从初婚男性婚前性心理、性行为及性教育等因素着手,探索如何引导和教育未婚青年正确认识性心理的变化及婚前性行为的危害,为青春期宣传教育工作提供依据.

    作者:邹晓平;苏再天 刊期: 2000年第01期

  • 阴茎勃起的神经介质调控

    阴茎勃起是一个极为复杂的过程,它既和阴茎海绵体内勃起组织的结构相关,又牵涉到有关的神经支配.Lue等于1992年对阴茎海绵体内的神经调控进行了精辟的论述,指出阴茎勃起神经支配的双重性,即由中枢神经系统和周围神经系统共同构成的,而神经的支配作用是通过各自产生的神经介质(neurotransmitter)发挥效应[1].

    作者:傅强;姚德鸿 刊期: 2000年第01期

  • 高功率YAG激光输精管凝堵法研究

    选用20条薪鲜离体家兔输精管,用高功率Nd:YAG激光机,将光纤插入输精管腔内,以35~45 W 6种不同功率/时间凝堵试验.病理检查确定有效凝堵阈值为40 W/0.5~1 s.继而对150只家兔进行输精管穿刺激光凝堵试验.功率40 W组术后7~14 d为脱落组织阻塞,30 d炎性细胞增生,3月时管腔完全闭塞,呈3 mm小结节,病检为纤维组织增生,管周血管无病理损伤.作者认为用高功率Nd:YAG激光瞬间照射法,亦可用于输精管凝堵术,且具有效果确切,处理时间短等优点.

    作者:肖新民;赵启华;金国辉;王圣诺;罗顺文;罗光明;饶植谋 刊期: 2000年第01期

  • 精子活力低下的临床分析

    精子活力是反映精子质量的重要参数.临床治疗精子活力低下的前提应建立在精子活力低下病因诊断上.我们从1992~1995年来院就诊的不育症病人中,抽出有完整临床资料者共1409例,对其中386例(占21.5%)精子活力低下病人的病因及分类作一分析和探讨.

    作者:陈群;陈惠珍 刊期: 2000年第01期

  • 介绍美国国立卫生研究院慢性前列腺炎症状积分指数(NIH-CPSI)

    众所周知,慢性前列腺炎是困扰泌尿男科医生和广大患者的一种疾病,它可以发生在男性的各个年龄段,临床上以30~50岁的男性多见.

    作者:戴继灿 刊期: 2000年第01期

  • 电刀包皮环切术

    包皮环切术是一种常见的小手术,按常规使用的手术方法,病人对术中的出血,术后血肿及拆线时的疼痛有诸多埋怨.本组从93年4月~97年5月改良使用电刀切割及肠线缝合手术共96例,病人反应良好,效果满意.

    作者:许新民;王锦宏 刊期: 2000年第01期

  • 人精子膜甘露糖结合蛋白的研究--蛋白的定位

    作者运用生物素标记的山羊抗人巨噬细胞甘露糖受体(Goat Anti-human Macrophage MannoseReceptor,AMMR)IgG对人获能精子膜上的甘露糖结合蛋白进行定位,经激光共聚焦显微镜分析结果显示:AMMRIgG组阳性率显著高于运用正常山羊(Normal Goat,NG)IgG的对照组:AMMR IgG组的阳性率大约在70%(69.41%)左右,而NG IgG组小于10%(9.24%).AMMR IgG组中,荧光结合部位主要在精子的顶体后区、赤道区及颈部,而NG IgG对照组中除少量精子显微弱的荧光外,绝大多数呈阴性结果.精子膜上甘露糖结合蛋白的定位研究可能对受精过程中精卵识别机制的了解具有重要意义.

    作者:丁之德;Hansen S;Thiel S;Hjort T;Jensenius JC 刊期: 2000年第01期

  • 大鼠阴茎组织中NOS表达及增龄的影响

    为探讨大鼠阴茎组织中一氧化氮合酶(Nitric Oxide Synthase,NOS)分布及增龄对其的影响.本文采用NADPHd组化对不同月龄大鼠(2、8、16、24月)阴茎组织进行染色.结果显示NOS主要分布于大鼠阴茎组织平滑肌细胞,而内皮细胞和神经纤维含量较少;随年龄增加,阴茎组织中NOS表达逐渐减弱,各月龄组间差别明显.结论认为大鼠阴茎组织中NOS主要存在于平滑肌细胞,增龄使NOS明显减少,表明NOS减少可能与勃起障碍的年龄依赖性相关.

    作者:吴晓军;张家华;金锡御 刊期: 2000年第01期

  • 阴茎根部包皮环切术78例报告

    1994年6月至1998年6月,我们采用阴茎根部包皮环切术治疗包皮过长78例,效果满意,报告如下:

    作者:张先志;汪志应;金成道 刊期: 2000年第01期

  • 保留阴茎的阴茎癌光敏动力疗法配合Na:YAG激光治疗

    本文总结光敏动力疗法配合Na:YAG激光治疗阴茎癌的体会,对本院1987年7月~1997年7月收治的16例阴茎癌进行回顾性分析.16例均经病理证实为鳞状上皮细胞癌,静滴HPD后48 h,先以Na:YAG激光切割凝固汽化肿瘤,再用氩离子泵染料激光辐射.结果全部病例呈完全效应,肿瘤完全消失,随访中Ⅱ级和Ⅲ级各2例一年内复发,再次PDT配合Na:YAG治疗,其中Ⅲ级2例,因反复发作转手术治疗.光敏动力疗法配合Na:YAG激光治疗Ⅰ、Ⅱ级阴茎癌效果满意,方法简便,免去手术给病人带来的痛苦和诸多不便.

    作者:张锦瑜 刊期: 2000年第01期

中国男科学杂志

中国男科学杂志

主管:中华人民共和国国家计划生育委员会

主办:上海交通大学医学院,国家人口和计划生育委员会科学技术研究所