王音；陶国伟；耿群；王茜；马喆；刘韶平；李扬；潘秋丽
目的 探讨原代小鼠神经干细胞(NSCs)的培养方法及骨形态发生蛋白-2(BMP-2)对NSCs增殖和分化的影响.方法 采用机械吹打结合尼龙膜滤过的方法,从胚胎12.5d的S129小鼠大脑分离NSCs并培养;用巢蛋白(nestin)免疫荧光染色鉴定NSCs;将NSCs分为对照组和BMP-2处理组(BMP-2终浓度10 ng/mL),培养后进行BrdU染色和微管相关蛋白2(MAP2)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)免疫荧光染色.结果 ①镜下观察原代培养的NSCs,胞体圆形,单个或成对存在,3～5d后形成神经球,神经球90％以上细胞为nestin阳性,台盼蓝染色表明活细胞数大于95％.②BMP-2处理组BrdU阳性细胞比率明显低于对照组(P＜0.05).③BMP-2处理组MAP2阳性细胞比率显著低于对照组(P＜0.05),而GFAP阳性细胞比率显著高于对照组(P＜0.05).结论 ①运用机械吹打结合尼龙膜滤过的方法可以得到存活率高的原代NSCs;②10 ng/mL BMP-2可抑制NSCs增殖及其向神经元方向分化,促进其向神经胶质细胞方向分化.
作者：包丹丹；李平；褚宏尚；刘慧娟 刊期： 2014年第01期
目的 初步验证化学偶联法合成的EGFR/CD3双功能抗体在体外对胰腺癌细胞的杀伤作用.方法 在前期化学偶联法合成EGFR/CD3双功能抗体的基础上,进行效应细胞及靶细胞结合率检测及51Cr杀伤实验检测,探讨其影响效应细胞与胰腺癌细胞结合及杀伤能力的作用,并与EGFR单抗比较.采用流式细胞仪检测处理后肿瘤细胞周期与凋亡情况变化.结果 EGFR/CD3双功能抗体与效应细胞(PBLS细胞)及胰腺癌细胞株SW1990结合率较高,可满足治疗需求;EGFR/CD3双功能抗体联合效应细胞对胰腺癌细胞株SW1990杀伤率显著高于各对照组(P＜0.05).EGFR/CD3双功能抗体联合效应细胞处理后肿瘤细胞凋亡率上升.结论 EGFR/CD3双功能抗体可有效增强免疫效应细胞对胰腺癌的杀伤作用,具有潜在的临床应用价值.
作者：张林；侯艳红；张健；胡静；张静 刊期： 2014年第01期
目的 探讨强直性脊柱炎(AS)与ERAP1基因多态性关联的Meta分析.方法 检索已发表的有关AS与ERAP1基因多态性的文献,进行Meta分析,采用Reveman 5.0统计学软件对结果进行分析.结果 17篇文献共纳入AS患者11 411例和正常对照者16 511例.Meta分析显示,ERAP1基因rs27044、rs30187、rs10050860、rs2287987、rs17482078、rs27434和rs27037位点的罕见等位基因频率在两组间差异有统计学意义(P＜0.05).进一步分析显示,以上7个位点包含罕见等位基因的基因型频率分布在两组间差异有统计学意义(P＜0.05).结论 Meta分析显示ERAP1基因多态性与AS存在关联.
作者：杨杏林；杨丽娟 刊期： 2014年第01期
目的 探讨临床表型分类系统(UPOINT)在慢性前列腺炎/慢性盆腔疼痛综合征(CP/CPPS)患者中的应用.方法 2012年2月至10月收治241例CP/CPPS患者.采用UPOINT表型分类方法对患者进行分类,同时运用慢性前列腺炎症状指数表(NIH-CPSI)和国际前列腺症状评分(IPSS)评估患者症状.结果 241例患者CPSI总分为20.78±5.89,患者生活质量得分8.94±2.26,IPSS得分8.08±4.85.UPOINT各因子所占比例分别为58.9％、60.2％、86.3％、26.6％、26.1％、39.8％.具有1个因子的患者占9.5％,2个因子占29.9％,3个因子占27％,4个因子占21.6％,5个以上因子占12％.患者所具因子数目与NIH-CPSI、IPSS症状严重程度相关(r1=0.61,r2=0.45; P＜0.01),慢性前列腺炎症状指数表中生活质量得分(CPSI QoL)与因子数目呈正相关(r=0.48,P＜0.01).结论 UPOINT临床表型分类方法对CP/CPPS患者临床症状进行分类,不仅提高诊断率,同时为患者提供个性化治疗方案,提高患者生活质量.
作者：郭晓宇；高艳秋；刘照旭 刊期： 2014年第01期
目的 探讨大鼠创伤性股骨头坏死进程中活性转录因子4(ATF4)与G蛋白偶联受体48(GPR48)的表达方式及其相关性,研究两者在坏死进程中的联控效应.方法 6月龄SD大鼠36只,随机分为实验组(n=24)和对照组(n=12).实验组采用圆韧带离断结合骨膜翻转术,对照组采用假手术作为对照.术后1、2、4周收集双侧股骨头,采用组织学、免疫组织化学、RT-PCR、Western blotting等方法检测股骨头坏死变化、ATF4动态表达变化及其与GPR48表达的相关性.结果 ①组织学观察显示,股骨头坏死为渐进性发展,实验组1、2周股骨头关节软骨表面略显粗糙,4周时关节软骨出现不同程度的虫蚀样破损;②免疫组化显示,实验组ATF4、GPR48和PCNA表达量在3个不同时间点逐渐增加,但均低于对照组(P＜0.05);③RT-PCR结果显示,ATF4和GPR48在3个不同时间点逐渐增加(P＜0.05).④Western blotting分析显示,实验组ATF4和GPR48在3个不同时间点逐渐增加,但均低于对照组(P＜0.05).⑤Pearson相关性分析显示,ATF4与GPR48在不同时间点呈正相关(r=0.659,P＜0.01).结论 创伤性股骨头坏死发展进程中,初期ATF4和GPR48表达下降,但随坏死进程而逐渐增加,两者表达呈正相关,可能与坏死所伴随的局部修复有关.
作者：宋会平；王志强；毕若杰；李琪佳 刊期： 2014年第01期
目的 探讨双侧大脑镰旁脑膜瘤的临床分型与手术方案.方法 回顾性分析31例经手术治疗的双侧大脑镰旁脑膜瘤患者的临床资料,根据两侧肿瘤的基底、对称性及基底间距情况提出一分型并确定手术方案.结果 Simpson Ⅰ～Ⅱ级切除27例,Ⅲ级切除4例.围手术期无手术死亡,无恶性脑膜瘤.31例经术后3个月～3年随访,未见肿瘤复发.结论 该分型对于指导手术方案、提高手术疗效具有一定参考价值.
作者：蒋亦林；刘玉光 刊期： 2014年第01期
目的 分析山东省长寿地区百岁老人的生活方式与慢性病的关系.方法 选取平邑县、青岛城阳区、单县、乳山市、费县5个长寿之乡的1 340名60岁以上老人作为研究对象,其中年轻老人(60 ～ 79岁)896名,高龄老人(80 ～ 99岁)189名,百岁老人(≥100岁)255名.调查他们的基本信息、家庭环境、经济状况、生活习惯以及慢性病的患病情况.结果 百岁老人慢性病总患病率为68.63％(175/255),其中患1种慢性病的占47.45％(121/255),患2种慢性病的占17.25％ (44/255),患3种及以上慢性病的占3.92％(10/255);百岁老人运动系统疾病、消化系统疾病、眼部疾病、听力障碍与年轻老人、高龄老人相比,差异均有统计学意义(P＜0.05);多因素非条件Logistic回归表明,影响老年人慢性病患病的因素有年龄、饮酒、吸烟、性格.结论 百岁老人有吸烟率低、饮酒率低、性格缓慢的生活特点;不同人群慢性病患病情况存在差异,应考虑疾病谱特点,开展针对性服务,提高老年人的生活质量.
作者：国凯；尹志娟；周成超；刘海杰；陈志军；段辉；吴波；沈春色；高希宝 刊期： 2014年第01期
目的 探讨肿瘤坏死因子α诱导蛋白8样因子2(TIPE2)是否通过结合caspase-8抑制toll样受体4(TLR4)通路参与结肠癌发展.方法 Si-RNA转染降低HT-29中TIPE2表达,采用实时定量PCR验证.用浓度为1 μg/mL脂多糖(LPS)激活TLR4通路,在TIPE2降低组、TLR4激活组、TIPE2降低且TLR4激活组及野生型细胞组中检测caspase-8活性.结果 实时定量PCR检测到TIPE2-siRNA成功降低了TIPE2的表达.在TIPE2降低组和TLR4激活组中caspase-8活性高于野生型细胞组(P＜0.05),TIPE2降低且TLR4激活组高于TLR4激活组(P＜0.05).结论 TIPE2可以抑制结肠癌细胞中caspase-8活性,并通过结合caspase-8抑制TLR4通路参与结肠癌发展.
作者：李雪梅；颜世平；宿敬然；程兆令；朱强 刊期： 2014年第01期
目的 评价剖宫产术后子宫瘢痕处妊娠的处理方式.方法 回顾分析2006年1月至2012年2月山东大学齐鲁医院确诊的剖宫产术后子宫瘢痕处妊娠患者102例.分为甲氨蝶呤(MTX)肌内+宫腔注射组(A组)、MTX肌内+宫腔注射+超声引导下清宫组(B组)和子宫动脉灌注化疗栓塞+超声引导吸宫组(C组).结果 A、B、C3组患者血绒毛膜促性腺激素(β-hCG)恢复至正常时间、瘢痕部位包块消失时间、阴道流血时间、住院时间、住院费用相比较差异有统计学意义(P＜0.05).A、B、C3组患者治疗成功率分别为92.86％、88.52％、84.62％(P＞0.05).结论 3组方法均可达到较高的治愈率,但MTX肌内+宫腔注射方法简单,花费少,避免侵入性操作.
作者：赵真；董白桦；苏士利 刊期： 2014年第01期
目的 探讨乙肝肝硬化相关的单发小肝癌患者经皮微波固化治疗(PMCT)后影响复发及生存时间的高危因素.方法 回顾分析130例患者3年的病例资料.1年内复发为早期复发组,2～3年复发为晚期复发组,无复发情况的作为无复发组.采用x2检验,Logistic回归筛选复发高危因素;Cox比例风险模式筛选影响生存时间的高危因素.结果 ①130例患者3年内有81例复发(65.85％),早期复发组50例(39.06％),晚期复发组31例(25.20％).②肿瘤边界不规整、肿瘤距大血管≤1 cm与早期复发相关;血清HBV-DNA≥105 copies/mL与晚期复发相关.肿瘤边界不规整、肿瘤距大血管≤1 cm、复发时间≤12个月与生存时间相关.结论 PMCT后,肿瘤边界规整性差、肿瘤距大血管近是乙肝肝硬化相关的单发小肝癌患者早期复发的危险因素,血清HBV-DNA含量高是晚期复发的危险因素;肿瘤边界规整性、肿瘤距大血管距离及复发时间可显著影响患者的术后生存时间.
作者：杨洋；杜文军；史兆章；郑昭敏；陈士俊 刊期： 2014年第01期
目的 分析山东省烟台市汉族女性亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR) C677T、A1298C及甲硫氨酸合成酶还原酶(MTRR)A66G单核苷酸多态性的分布特征.方法 以烟台市2 670例汉族女性为研究对象,采集口腔黏膜上皮细胞,提取基因组DNA,通过荧光定量PCR方法进行MTHFR和MTRR基因多态性检测.统计分析该地区基因多态性的分布特征,并与其他地区已报道的数据进行比较.结果 烟台市汉族女性的MTHFR C677T位点CC、CT、TT基因型的频率分别是18.6％、49.2％、32.2％,其中TT基因型的分布频率低于潍坊市、淄博市、郑州市,高于镇江市、武汉市、德阳市、昆明市、广州市和琼海市,且与以上城市的基因多态性分布存在统计学差异(P＜0.05).MTHFR A1298C位点AA、AC、CC基因型的频率分别为72.5％、25.7％、1.8％,其中CC基因型的分布频率与潍坊市、淄博市、临沂市、镇江市、武汉市、德阳市、昆明市、广州市和琼海市间的差异均有统计学意义(P＜0.05).MTRR A66G位点AA、AG、GG基因型的频率分别为54.6％、38.1％、7.2％,其中GG基因型的分布频率仅与潍坊市、淄博市和琼海市间的差异有统计学意义(P＜0.05).结论 烟台市汉族女性MTHFR和MTRR基因多态性分布情况不同于其他地区,具有地域特异性.
作者：严倩；鲁衍强；李瑛；石春红；姜凌；于传亭 刊期： 2014年第01期
目的 探讨瞬时弹性波检测(Fibroscan,FS)对慢性乙型肝炎患者疾病进展的评价作用及影响因素.方法 收集660例FS检测的慢性乙型肝炎患者临床资料和其中96进行肝组织活检的病理结果,分析各临床指标对FS值(硬度值)的影响.根据肝脏病理纤维化分期进行分类,绘制不同纤维化分期FS值的受试者工作特征曲线(ROC),计算曲线下面积(AUC).结果 不同性别、年龄、PLT、PTA、ALT、TBIL、ALB、门脉内径和脾脏厚度水平的FS值有差异(P＜0.05).多元线性逐步回归分析显示,ALT、PTA、ALB、脾脏厚度、门静脉内径、PLT、TBIL与FS值相关,其对FS值的影响依次减弱.肝纤维化轻度(S1)18例、中度(S2)39例、重度(S3)12例和肝硬化(S4)27例的AUC分别为0.724、0.832、0.836和0.798,诊断的界值分别为9.8、10.5、12.3和14.8 kPa.结论 FS与肝脏病理纤维化分期符合率高,是评估慢性乙型肝炎疾病进展有价值的无创检查方法.
作者：刘伟；丁艾昆；李程；单容；王昌源 刊期： 2014年第01期
目的 探讨促凋亡基因Bax启动子区G(-248)A单核苷酸多态性(SNP)与乳腺癌患者临床病理特点的关系.方法 采用聚合酶链反应-限制性酶切片段长度多态性分析(PCR-RFLP)方法检测113例乳腺癌患者Bax G(-248)A SNP的3个基因型(AA、AG和GG基因型),并与临床病理学指标相关联,比较各组间基因型频率的分布.结果 AG +AA型在肿瘤大小T＞2cm、临床分期Ⅱ～Ⅲ期、淋巴结转移阳性、C-erbB2蛋白阳性表达组中的比率均低于GG型,差异有统计学意义(P＜0.05);在病理类型、组织学分级和雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)蛋白表达水平组进行分层分析,AG +AA型和GG型的分布比率差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 AG+AA基因型可能与乳腺癌肿瘤较小、临床分期较早、淋巴结转移率较低和C-erbB2蛋白阴性表达相关.
作者：白杨；崔国忠；戴殿禄；桑梅香；耿翠芝 刊期： 2014年第01期
目的 制备人肿瘤坏死因子-α诱导蛋白8样蛋白3(TIPE3)的特异性抗体,分析将其用于Westem blotting 和免疫组化检测TIPE3蛋白表达的可行性和特异性.方法 利用人TIPE3抗原制备兔抗人TIPE3多克隆抗体;构建人TIPE3真核表达载体;采用Westem blotting方法检测抗体的特异性、TIPE3在肿瘤细胞系中的表达并用免疫组化方法检测人TIPE3蛋白在组织中的表达.结果 制备的兔抗人TIPE3多克隆抗体的滴度为1∶400,该抗体可特异性地检测细胞中的TIPE3蛋白,与TIPE2无交叉反应;发现人肺腺癌细胞系H1975、肝癌细胞系HepG2高表达TIPE3,但其在宫颈癌细胞系Hela低表达;用于免疫组织化学检测,可检测到TIPE3在肺癌组织中高表达于细胞浆和细胞膜,在癌旁组织和正常肺组织未见表达.结论 成功制备了人TIPF3多克隆抗体,特异性高,可用于TIPE3的Western blotting和免疫组化检测.
作者：孙越；刘香岚；王群；郭春；石永玉；张利宁 刊期： 2014年第01期
目的 通过检测大学生考试前后唾液中黏膜相关上皮趋化因子(mucosa-associated epithelia chemokine,CCL28/MEC)与分泌型免疫球蛋白A(secretory immunoglobin A,sIgA)含量的变化,探讨考试应激对口腔黏膜免疫功能的影响.方法 收集37名大学生(17名大二女生,10名大三男生和10名大三女生,后两者分别设为男生组和女生组)考试前后的非刺激性全唾液,采用酶联免疫吸附试验检测唾液中CCL28与sIgA水平的变化.结果 考后37名学生唾液中CCL28与sIgA的吸光度值低于考前水平,差异有统计学意义(P＜0.05);女生组比男生组的考试前后唾液CCL28水平的变化更显著(P＜0.05);女生组考试前后唾液中CCL28水平的变化比sIgA更为明显(P＜0.05),而男生组考试前后唾液中两指标间变化的差异不明显.结论 考试应激能促进唾液中sIgA与CCL28水平的升高,女性比男性更容易受考试应激的影响.
作者：戴美璐；肖孟；赵兵杰；张蒙蒙；姜广水 刊期： 2014年第01期
目的 探讨胎儿大脑皮层发育异常的产前影像学表现.方法 回顾性分析2012年8月至2013年8月接受超声及MRI检查的胎儿280例.结果 ①280例中诊断为大脑皮层发育异常胎儿12例;②大脑皮层发育异常胎儿中,超声提示诊断经MRI证实8例(小头畸形4例、灰质异位3例、半侧巨脑症1例);超声漏诊后经MRI证实4例(脑裂畸形2例、结节性硬化1例、颞叶发育不良1例);③妊娠进展随访情况为:10例孕妇选择终止妊娠,2例孕妇选择继续妊娠.结论 大脑皮层发育异常产前影像表现具有特征性,超声联合MRI对该类疾病产前诊断具有重要作用.
作者：王音；陶国伟；耿群；王茜；马喆；刘韶平；李扬；潘秋丽 刊期： 2014年第01期
目的 研究骨髓间充质干细胞(BMSCs)移植对脊髓损伤大鼠Toll样受体4(TLR4)表达的影响,探讨BMSCs移植治疗脊髓损伤的机制.方法 取4周龄雄性Wistar大鼠骨髓分离培养BMSCs,对第3代BMSCs进行免疫细胞化学法鉴定,收集备用.取8周龄雄性Wistar大鼠90只,随机分为假手术对照组、脊髓损伤组和细胞移植组,每组30只,脊髓损伤组建立大鼠Allen's脊髓损伤模型,细胞移植组建立大鼠Allen's脊髓损伤模型后行BMSCs静脉移植.分别于术后24 h、72 h、7d处死大鼠,取损伤中心1 cm脊髓,应用免疫组织化学法、实时荧光定量PCR (RT-qPCR)法分别检测TLR4的表达.结果 脊髓损伤处TLR4表达脊髓损伤组比假手术对照组增加(P＜0.01),细胞移植组比脊髓损伤组降低(P＜0.01).结论 BMSCs可能通过降低TLR4的表达抑制脊髓炎症反应.
作者：牟乐明；孙占胜；王伯珉；高平；初向全 刊期： 2014年第01期
目的 探讨CD40siRNA对EAM大鼠的治疗作用及对CD4+ CD25+ Treg的影响.方法 40只雄性Lewis 大鼠随机分成4组,正常组、EAM模型组、CD40siRNA治疗组和siRNA治疗组,每组10只.于实验第1天、第8天正常组大鼠双后肢足垫区皮下注射PBS缓冲液,0.2 mL/只;另3组大鼠双后肢足垫区皮下注射充分混合的猪心肌球蛋白,0.2 mL/只.第8天CD40siRNA治疗组尾静脉注射25 μL CD40siRNA慢病毒表达载体;siRNA治疗组尾静脉注射25 μL siRNA慢病毒表达载体.第21天处死所有大鼠,用光学显微镜观测心肌病理积分;流式细胞仪分析大鼠脾脏中CD4+CD25+Treg的表达.结果 各组大鼠均无死亡,心肌组织病理积分CD40siRNA治疗组(11.70±2.95)明显低于EAM模型组(17.00±1.76)(P＜0.05),CD4+ CD25+ Treg的表达较EAM模型组明显上调[(40.7±4.0)％ vs(12.2±1.1)％,P＜0.05].结论 CD40siRNA可减轻EAM大鼠的心肌炎症,其机制可能与上调CD4+ CD25+ Treg的表达有关.
作者：王介忠；韩波；高聆；杨文巍；刘奉琴；吕建利；赵立健 刊期： 2014年第01期
目的 构建人肠三叶因子(hITF)原核表达载体,表达重组hITF,并考察其生物学活性.方法 通过RT-PCR获得hITF cDNA片段,将目的基因插入原核表达载体pET32a,得到重组载体pET32a-hITF,优化表达条件获得大表达产量,Ni-NTA亲和层析一步法纯化重组蛋白,SDS-PAGE、Western blotting及N端测序鉴定重组蛋白,细胞重建模型验证其功能.结果 经PCR及测序证实,hITF cDNA准确插入原核表达载体pET32a中,诱导表达后,SDS-PAGE分析证明hITF的分子量约为32kD,Western blotting分析表明,表达蛋白具有良好的抗原性和特异性;N端15个氨基酸测序证明其序列正确性;体外实验证实其具有细胞促迁移能力.结论 成功构建出原核表达载体pET32a-hITF,获得重组hITF.
作者：孙勇；王良喜；孙曙光；毛学飞；邓向东；潘晓峰；张方 刊期： 2014年第01期
目的 探讨持续非卧床腹膜透析(CAPD)患者低T3综合征与大动脉僵硬度的关系.方法 采用横断面研究,选取129例CAPD患者为研究对象.根据甲状腺功能分为低T3综合征组和甲状腺功能正常组.常规标准测量甲状腺功能和其他生化指标,自动PWV分析仪检测颈-股动脉脉搏波传导速度(C-F PWV),以评估大动脉僵硬度.结果 低T3综合征患者与甲状腺功能正常组相比年龄偏大(P ＜0.001),女性患者比例偏大(P=0.044),脉搏波传导速度明显增快(P ＜0.001).PWV与糖尿病(P ＜0.001)、年龄(P=0.001)、收缩压(P =0.038)、舒张压(P=0.045)、甲状腺功能(P＜0.001)、血浆白蛋白(P =0.007)、KT/V(残肾)(P=0.018)呈统计学相关.多元回归分析结果显示,游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)、糖尿病状态、年龄是PWV变化的独立危险因素.结论 CAPD患者低T3综合征与脉搏波传导速度密切相关,即慢性腹膜透析合并低T3综合征患者大动脉僵硬度增加.
作者：梁素忍；郭志玲；胡昭 刊期： 2014年第01期
山东大学学报（医学版）杂志
主管:中华人民共和国教育部
主办：山东大学
