田美荣;马玉燕;王磊一;范月莲;刘振平
目的 探讨人驱动蛋白分子Kif18A的各功能域在真核细胞中的定位.方法 构建驱动蛋白分子Kif18A野生型及各功能域(马达区、杆状区、尾区和马达区含部分杆状区)的绿色荧光蛋白表达质粒,分别转染人乳腺癌细胞MCF7,运用聚丙烯酰胺凝胶电泳和免疫印迹法验证各蛋白的表达,免疫荧光染色法分别对细胞进行微管蛋白和DNA染色,荧光显微镜下观察各绿色荧光融合蛋白的具体亚细胞定位.结果 有丝分裂间期,Kif18A蛋白分子的马达区绿色荧光沿微管分布,尾区在细胞核和微管上均有分布,杆状区则散在分布在胞质中;有丝分裂末期,Kif18A的马达区仍沿微管分布,而马达区含部分杆状区主要集中在中体部位.结论 Kif18A蛋白分子的马达区和尾区与微管共定位;尾区含核定位序列;马达区和杆状区共同作用才能使该蛋白在有丝分裂末期定位于中体.
作者:王东秋;高杰;田明忠;朱长军 刊期: 2010年第05期
目的 探讨CXCR4和MMP-9表达及临床病理因素与结直肠癌根治术后早期复发的关系.方法 应用免疫组化SP法检测同期结直肠癌根治术后早期复发患者40例(复发时间为术后3个月~1年)与3年以上未复发者30例的癌组织中CXCR4和MMP-9表达水平,应用X2检验、logistic回归分析统计学方法分析二者及临床病理因素与结直肠癌早期复发的关系.结果 早期复发组与未复发组结直肠癌组织中CXCR4呈阳性表达率分别为75.0%(30/40)和43.3%(13/30),两组比较差异具统计学意义(P<0.05).早期复发组与未复发组癌组织中MMP-9呈阳性表达率分别为65.0%(26/40)和40.0%(12/30),两组比较差异具统计学意义(P<0.05).结直肠癌患者的肿瘤部位(P=0.004,β为1.957,OR值为7.079)、肠壁浸润深度(P=0.047,β为0.889,OR值为2.434)和CXCR4表达(P=0.008,β为1.855,OR值为6.391)是术后早期复发的危险因素.其中肿瘤部位和CXCR4表达是影响术后早期复发重要因素.而术后辅助化疗(P=0.026,β为-2.440,OR值为0.087)是早期复发的保护性因素.结论 CXCR4的异常表达与结直肠癌根治术后早期复发密切相关,提示其可能对结直肠癌术后早期复发的发生和发展有重要作用.
作者:孙燕来;李增军;郑燕;徐忠法 刊期: 2010年第05期
目的 研究大蒜素与两性霉素B体外联合应用对白色念珠茵茵丝形成的抑制作用,并检测联合应用时细胞毒性的变化.方法 采用微量稀释法测定两类药物联合抗白色念珠茵的作用,采用FICI法对联用结果进行评价.用10%小牛血清RPMI 1640培养基诱导茵丝形成,检测大蒜素与两性霉素B联合应用对白色念珠茵芽管率和茵丝形成的影响.通过对细胞形态的观察及MTT法检测联合用药后对人宫颈上皮细胞H8毒性的变化.结果 两种药物联用对白色念珠茵表现为协同作用,大蒜素能够加强两性霉素B抑制茵丝形成的能力,联合用药后能够显著降低对H8细胞的毒性.结论 大蒜素能够提高两性霉素B抗白色念珠茵的作用,是临床上减少两性霉素B用量,减轻其副作用的佳选择.
作者:王晓燕;齐眉;李玉瑭;孙允东;张晓丽;刘娟;程轶喆;于晗;周亚滨 刊期: 2010年第05期
目的 通过对纵隔淋巴结18F-FDG PET/CT表现的对比分析,探讨纵隔淋巴结老年性非特异性高摄取的PET/CT特点及其与恶性肿瘤(尤其是肺癌)纵隔淋巴结转移的鉴别.方法 回顾性分析有完整临床资料的110例病例,其中老年性非特异性高摄取组55例(组1),转移组53例(组2),两组并存者2例.盲法测量PET/CT图像上高摄取淋巴结的SUVmax和SUVmean、CT图像上淋巴结的长、短径和CT值(平均值和大值).结果 两组数据的SUV max[(3.98±1.48)mm和(7.41±3.69)mm]、SUV mean[(3.37±1.16)mm和(5.88±2.64)mm]、长径[(10.32±3.01)mm和(16.0±5.97)mm]、短径[(7.48±2.29)mm和(11.95±4.78)mm]、平均CT值[(64.16±21.73)Hu和(33.84±8.80)Hu]和大CT值[(111.02±149.41)Hu和(67.93±32.45)Hu]差异有统计学意义(P<0.01);组1的SUV值及长短径均小于组2,而前者CT值大于后者.结论 纵隔淋巴结老年性非特异性高摄取的特点为:多对称分布,SUV值多<5,CT值多>50Hu.SUV值及CT值对于淋巴结良恶性的鉴别有一定的意义,尤其是CT值增高对其与恶性肿瘤,特别是肺癌所致的淋巴结转移的鉴别有重要价值.
作者:凌春香;黄召勤;芮军;刘庆伟 刊期: 2010年第05期
目的 探讨早期妊娠和稽留流产患者外周血CD56brightCD16-NK细胞及蜕膜组织子宫自然杀伤(uNK)细胞中整合素α4(CD49d)和αm(CD11b)的表达.方法 采集18例早期妊娠妇女外周血(其中14例另取蜕膜组织)和9例稽留流产妇女外周血,Ficoll密度梯度离心法分离单个核细胞悬液,流式细胞术检测样本CD56brightCD16-NK细胞中CD49d和CD11b表达.结果 CD49d和CD11b在早期妊娠蜕膜CD56brightCD16-NK细胞表达显著低于早期妊娠妇女外周血CD56brightCD16-NK细胞(P<0.01);稽留流产患者外周血CD56brightCD16-NK细胞的表达较早期妊娠妇女显著降低(P<0.05).结论 CD49d和CD11b可能在妊娠早期uNK细胞的募集中起重要作用,同时也可能参与了正常妊娠的维持.
作者:黄先亮;董白桦;胡微煦;王庆杰;宋丙凤;王春娥;刘佳;孔北华;曲迅 刊期: 2010年第05期
目的 通过检测微管不稳定蛋白(Stathmin)在喉乳头状瘤组织及声带息肉组织中的表达情况,探讨其在喉乳头状瘤发生、发展过程中的作用.方法 采用免疫组织化学技术(PV-9000二步法)检测Stathmin蛋白在60例喉乳头状瘤和15例声带息肉组织中的表达情况,应用Image-ProPlus图像分析软件测定免疫组化图像的平均光密度(MOD),运用SPSS13.0软件进行统计学分析,观察Stathmin蛋白与喉乳头状瘤临床特征之间的关系.结果 Stathmin蛋白在喉乳头状瘤组织的阳性表达率为88.33%,明显高于其在声带息肉组织中的阳性表达率(53.33%),差异有统计学意义(P<0.05).Stathmin蛋白的表达与临床分型、是否复发、患者性别及年龄均无相关性(P>0.05).结论 Stathmin蛋白在喉乳头状瘤组织中高表达,可能与人喉乳头状瘤的发生、发展密切相关.
作者:黄方;朱金枝;黄建强;吴春林 刊期: 2010年第05期
目的 建立魟鱼软骨多糖眼用纳米乳的质量评价方法及纳米乳中多糖的含量测定方法.方法 制备魟鱼软骨多糖纳米乳,观测纳米乳的栽药量、外观形状、pH值、粒径等指标,采用硫酸-咔唑法测定纳米乳中多糖的含量,检测波长为529.0 nm.结果 纳米乳平均粒径为51 mm,澄清度、稳定性良好,无眼刺激性.在8.024~40.120mg/L浓度,A=0.0129c+0.008,r=0.999 9,方法平均回收率为100.2%,RSD为0.92%;纳米乳载药量为50.03g/L.结论 魟鱼软骨多糖眼用纳米乳制剂质量稳定,符合<中国药典>(2005版)关于眼用制剂的标准;硫酸-咔唑法测定多糖含量简单、快速、准确,可用于控制纳米乳制剂质量.
作者:曹见敏;张蕾;郭斌 刊期: 2010年第05期
目的 探讨类风湿关节炎(RA)与肿瘤坏死因子受体Ⅱ196(TNFR Ⅱ196)基因位点多态性的关联情况.方法 检索已发表有关RA和TNFR Ⅱ196基因位点多态性的文献进行Meta分析.结果 有9篇文献入选,共纳入2140例RA患者(RA组)和1297例健康者(健康对照组).综合分析显示RA与TNFR Ⅱ196位点等位基因及TG、GG基因型不存在关联,OR值、95%CI和P值分别为1.11,(0.91,1.34),P=0.32;1.38,(0.97,1.98),P=0.07;1.09,(0.93,1.27),P=0.31.家族性RA与TNFR Ⅱ196位点等位基因及GG基因型存在关联,OR值、95%CI和P值分别为1.43,(1.11,1.86),P=0.006;2.68,(1.39,5.17),P=0.003;家族性RA与TNFR Ⅱ196TG基因型不存在关联,OR=1.00,95%CI(0.71,1.39),P=0.98.散发性RA与TNFR Ⅱ196位点等位基因及GG、TG基因型不存在关联,OR值、95%CI和P值分别为1.13,(0.89,1.44),P=0.32;1.44,(0.75,2.76),P=0.27;1.03,(0.76,1.39),P=0.86.结论 Meta分析显示TNFR Ⅱ196基因位点多态性与RA患者不具有关联,TNFR Ⅱ196位点等位基因及GG基因型可能与家族性RA患者存在关联,与散发性RA无相关性.
作者:葛勇鹏;杨清锐;张源潮 刊期: 2010年第05期
目的 观察细胞因子激活的杀伤细胞(CIK)对卵巢癌患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞及T细胞亚群变化的影响.方法 对30例经病理确诊为卵巢癌的患者,取其自体外周血单个核细胞,通过培养将其诱导为CIK细胞,然后将细胞进行自体回输.2周后采用流式细胞仪检测外周血CD4+CD25+调节性T细胞、T细胞亚群及NK细胞的变化.结果 CIK细胞输注后,患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞减少(P<0.01),CD8+下降(P<0.05),CD3+、CD4+细胞、CD4+/CD8+比值及NK细胞较治疗前显著升高.结论 卵巢癌患者经自体CIK细胞回输治疗后,外周血调节性T细胞的数量降低,T细胞亚群比例失调和功能低下的状况得到不同程度的改善.
作者:于渊;李岩;荣风年;梁婧;刘晓琳;王福立 刊期: 2010年第05期
目的 了解体外循环下冠状动脉旁路术(CCABG)中右冠状动脉(RCA)狭窄程度与大隐静脉(SV)桥血流量的相关性.方法 将行CCABG治疗的89例患者按RCA狭窄程度(<75%、75%~95%、>95%)分为3组,A组15例、B组53例、C组21例,常规用SV与RCA吻合,吻合完毕,得血流动力学稳定后用即时超声血流探测仪直接测量并记录SV桥血流波形、平均流量、搏动指数(PI)及平均动脉压,进行SV血流量的对比研究.结果 C组SV桥平均血流量(43.8±19.1)mL/min,显著高于A组(26.3±12.8)mL/min和B组(35.6±17.0)mL/min(P<0.01);B组SV桥平均血流量大于A组(P<0.01);C组PI值(1.72±0.81)小于其他两组(P<0.01),B组PI值小于A组[(2.9±0.98)vs(3.8±1.4),P<0.05];3组间平均动脉压差异无统计学意义(P>0.05).结论 CCABG中,RCA狭窄程度越高,SV桥血流量越大,PI值越小.
作者:杨列铭;马黎明;武广华 刊期: 2010年第05期
目的 探讨褪黑素(MLT)对过氧化氢诱导大鼠白内障形成的抑制作用.方法 体外取出发育正常的Wistar大鼠晶状体,按随机原则分为3组:A组为空白对照组,B组为过氧化氢(H2O2)处理组,C组为在B组的基础上加入不同浓度的MLT,使MLT终浓度分别为10(C1组)、30(C2组)、50(C3组)、100(C4组)、200(C5组)μmol/L.体外培养24 h后,观察各组晶状体的混浊程度,采用Image-Pro Plus(IPP)6.0软件分析晶状体下黑色条带的平均光密度值;酶标仪测定各组晶状体组织的蛋白含量、还原型谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)、总抗氧化能力(T-AOC)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)含量.结果 裂隙灯下观察可见,各组晶状体混浊程度不同,C组晶状体平均光密度值高于B组(P<0.05),即C组晶状体透明性高于B组.C组晶状体组织中的GSH、T-AOC、SOD及CAT含量高于B组(P<0.05),而MDA含量低于B组(P<0.05).结论 褪黑素可提高氧化损伤晶状体的抗氧化能力,有效抑制体外过氧化氢诱导大鼠白内障的形成.
作者:郭媛媛;蔡可丽;蒋欣桐 刊期: 2010年第05期
目的 探讨腹部外韧带样型纤维瘤的MRI表现.方法 利用MRI平扫和动态增强MRI,对经病理证实的原发腹部外韧带样型纤维瘤病7例进行检查,观察病变位置、大小、边缘、形态、信号特点、强化类型,并绘制病变的时间-信号强度曲线.结果 7例中浸润性生长6例,膨胀性生长1例.MRI信号不均匀,T1WI以等信号为主,T2WI以略高信号为主,各序列均可见肿瘤内存在低信号区域,肿瘤不均匀强化,时间-信号强度曲线呈持续上升形态.结论 MRI检查显示腹部外韧带样型纤维瘤病的形态、信号、强化方式等方面有一定的特征性,具有鉴别诊断价值.
作者:杨辉;杨晨明;于德新;李传福 刊期: 2010年第05期
目的 了解超声造影对氩氦刀治疗VX2兔肝脏肿瘤近期疗效的应用价值.方法 两组实验兔行氩氦刀冷冻治疗,其中荷瘤兔冷冻治疗组(A组)30只,正常肝冷冻对照组(B组)10只,分别于术前、术后1 d、1周、2周采用新型超声造影剂六氟化硫以及造影软件造影多普勒序列(contrast pulse sequencing,CPS)进行实验,观察疗效.结果 ①A组76.7%(23/30)和B组100%(10/10)的消融区,超声造影显示各期均无异常增强,判断肿瘤完全灭活;②A组23.3%(7/30)的消融区.超声造影显示局部有早期增强,提示肿瘤残存;③消融区边缘充血水肿带造影表现为动脉期环状高增强,门脉期及延迟期增强信号与肝实质相似;消融区边缘残留灶的造影与肿瘤病灶治疗前的造影表现一致.结论 超声造影是肝脏肿瘤氩氦刀治疗后近期疗效评价的重要手段.
作者:张风琴;李荔;李嫚;康永军;秦玲 刊期: 2010年第05期
目的 通过动物实验,观察清热滋阴活血中药复方对大鼠糖尿病矛周炎的疗效,并初步探讨其机制.方法 10周龄健康雄性Wistar大鼠随机分为空白对照组(A组)、糖尿病牙周炎生理盐水纽(B组)和中药治疗组(C组),B组与c组建立糖尿痛牙周炎模型后,C组灌胃等效剂量的金银花、北沙参、川芎复方水煎剂,A组与B组灌胃等体积的生理盐水.2个月后,麻醉下方块截取包括实验区磨牙的双侧上颌骨.HE染色后,选择包括牙龈结缔组织及上皮组织的视野计数浸润的炎细胞,测量实验牙近中牙槽嵴顶至釉牙骨质界的距离;腹腔总静脉抽取静脉血,制备血清后用ELISA方法检测IL-1β的含量,应用SPSS10.0软件包时数据进行统计分析.结果 B组与C组牙龈组织的浸润炎细胞数目、牙槽嵴顶至釉牙骨质界的距离较A纽均有增高,且B组高于C组,三组两两比较差异均具有统计学意义(P<0.05);B组外周血IL-1β的含量较A组与c组高,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 清热滋阴活血复方对糖尿病牙周炎有治疗作用.
作者:李雪;林志勇;赵芬;赵民;季梅;于桂娜;牟文丽 刊期: 2010年第05期
目的 观察米非司酮对卵巢癌细胞系SKOV3增殖和癌胚抗原相关黏附分子6(CEACAM6)表达的影响.方法 不同浓度米非司酮(空白对照、1×10-7、1×10-6、1×10-5、5×10-5mol/L)干预卵巢癌细胞系SKOV3 24、48、72 h;四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测米非司酮对SKOV3的抑制作用;逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白印迹(Western blot)检测不同浓度米非司酮干预下CEACAM6 mRNA和蛋白表达水平的差异,并进行半定量分析.结果 与空白对照组比较,1×10-7mol/L和1×10-6mol/L米非司酮对SKOV3的生长没有明显的抑制作用(P>0.05);5×10-5mol/L米非司酮显著抑制SKOV3的生长(P<0.01),并降调SKOV3细胞中CEACAM6 mR-NA和蛋白的表达水平(P<0.05).结论 米非司酮可明显抑制SKOV3的体外增殖,其作用机制可能与抑制CEACAM6的表达有关.
作者:孙颖;郑晓静;李明江;赵兴波 刊期: 2010年第05期
目的 探讨宽恕干预对低宽恕个体的愤怒水平及愤怒控制的影响.方法 根据人际侵犯动机问卷得出225名被试的宽恕水平,从宽恕水平低于其平均数1个标准差以下的被试者中随机抽取26人,将他们随机分为两组,即实验组和对照组各13人.通过让被试回忆近发生的愤怒事件以激活其愤怒情绪,以心率和Speilberger的状态怒分别记录被试愤怒时的生理唤醒和主观体验水平,以Speilberger的愤怒控制问卷测量被试的愤怒控制能力.本研究以利益查找和共情技术为宽恕干预措施,探讨宽恕干预对愤怒体验水平及愤怒控制的影响.结果 对照组与实验组第1次回忆愤怒事件时记录的心率均显著高于身体放松时的;干预后实验组的心率显著低于对照组(P=0.026);干预后实验组的状态怒显著低于对照组(P=0.048);干预后实验组与对照组的愤怒控制无统计学差异(P=0.075).结论 这种利益查找及共情的宽恕干预措施可以缓解大学生的愤怒水平,但其对愤怒控制能力的影响还需进一步研究.
作者:陈翠;张红静;江景华;吴希庆;张李娜 刊期: 2010年第05期
目的 探讨过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)激动剂罗格列酮(ROZ)与顺铂联合应用对子宫内膜癌KLE细胞裸鼠移植瘤的生长抑制作用.方法 构建子宫内膜癌裸鼠模型.成瘤后,将其随机分成6组:生理盐水对照组(A组),顺铂1mg/kg(B组),顺铂3 mg/kg(C组),ROZ 50 mg/kg(D组),顺铂1 mg/kg+ROZ 50 mg/Kg(E组),顺铂3mg/kg+ROZ 50mg/kg(F组).顺铂采取隔天腹腔注射给药,ROZ采取每天灌胃给药.每隔3d测量肿瘤体积,观察药物对肿瘤生长的影响,绘制肿瘤生长曲线.实验第38天处死裸鼠,分离皮下移植瘤并称量其质量计算抑瘤率;免疫组化SP法检测种植瘤组织中核转录因子κB(NF-κB)、人第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源的基因(PTEN)蛋白的表达.结果 B、C、D、E、F组抑瘤率分别为:24.41%、43.34%、49.67%、78.02%、84.78%,与A组比较差异均具有统计学意义(P<0.05).E、F组抑制子宫内膜癌的作用强于B、c、D组.免疫组化结果显示PTEN表达增强,NF-κB表达减弱(P<0.05).结论 ROZ、顺铂可抑制子宫内膜癌移植瘤生长,两者联合应用具有协同作用.
作者:祖增艳;张贵宇;马本红;王红霞 刊期: 2010年第05期
目的 构建靶向抑制脆性组氨酸三联体(FHIT)基因的短发夹双链RNA(shRNA)真核表达质粒,观察FHIT抑制后对胃癌细胞株BGC-823增殖和凋亡的影响.方法 构建FHIT基因特异性的小RNA干扰质粒PGPU6/GFP/Neo-shRNA1、PGPU6/GFP/Neo-shRNA2,利用脂质体LipofactaminerTM2000转染胃癌细胞BGC-823,实验分为未转染组、阴性对照组(转染PGPU6/GFP/Neo-shNC组)及PGPU6/GFP/Neo-shRNA1转染组和PGPU6/GFP/Neo-shRNA2转染组,G418筛选得到稳定表达株,Real-time PCR检测在mRNA水平干扰质粒对FHIT的抑制效应,MTT法、流式细胞术观察转染前后细胞生长特性的变化.结果 与阴性对照组相比,转染shRNA-FHIT重组质粒的BGC-823细胞FHITmRNA表达明显下降(P<0.05).与未转染组和阴性对照组相比,转染干扰质粒组细胞增殖活性增强,凋亡率减低、生长周期出现S期和G2/M期的比例上调(均P<0.05).结论 成功将重组shR-NA-FHIT表达载体转染BGC-823细胞,并筛选出稳定低表达FHIT的细胞.shRNA-FHIT可以促进胃癌细胞增殖、降低凋亡率,并削弱G0/G1期阻滞,为进一步研究FHIT基因在肿瘤中的作用机制奠定了实验基础.
作者:罗琼;许洪伟;郝菁华;刘慧;朱强 刊期: 2010年第05期
目的 研究沉默KIF4A基因对人卵巢癌SKOV3细胞迁移能力的影响.方法 检索针对KIF4A基因的小干扰RNA(siRNA),构建shRNA表达质粒,转染人卵巢癌细胞SKOV3,通过G418筛选建立稳定低表达KIF4A的SKOV3胞株.采用蛋白质免疫印记(Western blot)法检测shRNA对KIF4A蛋白分子的敲除效率.并通过细胞迁移实验评价低表达KIF4A对SKOV3细胞迁移能力的影响.结果 成功筛选出稳定低表达KIF4A的细胞株,选择干扰效率较高的细胞株进行实验.Transwell细胞迁移实验显示,低表达KIF4A的细胞株的迁移率较阴性对照组增长近3倍(P<0.05).结论 KIF4A低表达,可增强人卵巢癌细胞SKOV3的迁移能力.
作者:高杰;王东秋;田明忠;朱长军 刊期: 2010年第05期
目的 制备抗小鼠巨噬细胞移动抑制因子(mMIF)单克隆抗体(McAb)对其进行放射性碘标记,为进一步研究MIF在炎症、肿瘤核素显像中的意义奠定基础.方法 异丙基硫代-β-D-半乳糖(IPTG)诱导pEQ30-mMIF/M15工程茵表达重组mMIF蛋白;采用杂交瘤技术制备单克隆抗体,蛋白质印迹技术(Western blotting)和酶联免疫吸附试验(ELISA)进行特异性鉴定,巨噬细胞移动抑制试验(MMI)鉴定生物学活性.采用二氯二苯基甘脲(Iodogen)法,用Na125 I标记抗mMIF单克隆抗体.结果 成功建立3株稳定高效价分泌抗mMIF单克隆抗体的杂交瘤细胞株,分别命名为5G2D7,5G2C7,5G2E3.经Western blotting、ELISA和MMI鉴定证明抗mMIF单克隆抗体具有良好的抗原特异性和生物学活性;125 I-抗mMIF单克隆抗体的标记率为90.40%,放射化学纯度98.36%,放射性比活度为21.48MBq/μg.结论 成功制备抗栅单克隆抗体和放射性碘标记抗mMIF单克隆抗体,为深入研究MIF相关性疾病和利用MIF进行临床肿瘤及炎症放射免疫显像提供了实验基础.
作者:宋静;张超;梁婷;陈富强;侯桂华 刊期: 2010年第05期