党珏;李燕;刘美辰;罗林;龚小红;周忆梦;汤韵秋;郑立;全云云;李芸霞;彭成
目的:观察川楝素对乳腺癌糖酵解的干预及糖酵解相关酶的影响.方法:采用人乳腺癌细胞株MDA-MB-231,MCF-7;通过噻唑蓝(MTT)比色法考察川楝素(0,2.5,5,10,20,40,60,80 μmol·L-)对乳腺癌细胞增殖的抑制作用,检测10,20,40 μmol·L-1川楝素干预后乳腺癌细胞中葡萄糖消耗,乳酸含量,评价川楝素对乳腺癌细胞糖酵解的干预作用;检测乳腺癌细胞中三磷酸腺苷(ATP)及烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD+)/还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADH)水平,评价乳腺癌细胞能量供应水平;检测己糖激酶2及丙酮酸激酶活性,考察川楝素对糖酵解相关酶活性影响.蛋白免疫印迹法检测川楝素对乳腺癌细胞中丙酮酸激酶M2蛋白表达的调控作用.结果:川楝素对人乳腺癌MDA-MB-231,MCF-7细胞增殖具有明显抑制作用(P<0.05),并呈浓度依赖性;川楝素可以明显降低不同乳腺癌细胞株中葡萄糖消耗及乳酸含量(P<0.05),并降低细胞ATP含量(P<0.05),升高NAD+/NADH含量(P<0.05),抑制肿瘤细胞糖酵解水平.此外川楝素可抑制丙酮酸激酶活性,但对己糖激酶2活性无影响,蛋白检测结果表明,川楝素可以下调丙酮酸激酶M2蛋白表达水平(P<0.05).结论:川楝素可以明显抑制乳腺癌细胞增殖,并影响乳腺癌细胞糖酵解水平,其机制与其干预乳腺癌细胞中丙酮酸激酶M2的表达相关.
作者:王红磊;肖奕;武力;马大昌 刊期: 2018年第07期
目的:探究化瘀祛痰方对动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)家兔肝脏线粒体呼吸链酶复合物的影响,并探讨其相关的作用机制.方法:健康SPF级雄性新西兰白兔90只,随机分为正常组、模型组、化瘀祛痰方高、中、低剂量组(4,8,16 g·kg-1),辛伐他汀组(1.4 mg·kg-1),每组15只.正常组给予基础饲料喂养,其他组采用高脂饲料喂养,建立动脉粥样硬化模型,造模8周后,化瘀祛痰方高、中、低剂量组与辛伐他汀组给予相应药物溶液,正常组和模型组给予等量生理盐水,4周后,全自动生物化学分析仪检测血清甘油三酯(triglyceride,TC),胆固醇(cholesterol,TC),高密度脂蛋白(high-densitylipoprotein cholesterol,HDL-C),低密度脂蛋白(low-density lipoprotein cholesterol,LDL-C)的含量;苏木素-伊红(HE)和油红O染色观察肝组织形态学改变;分光光度计法检测家兔肝脏线粒体呼吸链酶复合物活性;Blue-Native-Page技术检测线粒体呼吸链酶复合物含量.结果:与正常组比较,模型组家兔血清中TC,TG,LDL-C显著升高,HDL-C显著降低;与模型组比较,化瘀祛痰方高、中、低剂量组与辛伐他汀组家兔血清中TC,TG,LDL-C显著降低,HDL-C显著升高(P <0.05,P<0.01),其中化瘀祛痰方中以高剂量效果为显著.HE及油红0染色结果显示模型组较正常组比较家兔肝组织肿胀明显、脂肪空泡清晰可见,胞浆内脂滴蓄积明显;与模型组比较,化瘀祛痰高、中、低剂量组及辛伐他丁组脂肪空泡明显减少或消失,肝组织形态恢复或部分恢复正常,其中化瘀祛痰方中以高剂量效果为显著.与正常组比较,模型组肝脏线粒体呼吸链酶复合物Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ,Ⅳ,Ⅴ活性及含量显著降低(P<0.01);与模型组比较,化瘀祛痰方高剂量组与辛伐他汀组肝脏线粒体呼吸链酶复合物Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ,Ⅳ,Ⅴ活性和含量明显升高(P <0.05,P<0.01).结论:化瘀祛痰方可能是通过影响线粒体呼吸链酶复合物的活性及含量减少脂质沉积,防治动脉粥样硬化.
作者:陈宁;宋囡;贾连群;陈丝;王健;王群;杨关林 刊期: 2018年第07期
目的:检测骨髓增生异常综合征(MDS)患者骨髓单个核细胞(BMMNCs)红系转录因子(GATA-1),组蛋白去乙酰化酶(HDAC1)的表达水平,分析经HDAC抑制剂(HDACI)伏立诺他(SAHA)、扶正、祛邪中药复方对不同证型MDS患者BMMNCs干预后的HDAC1,GATA-1表达变化,探讨MDS红系转录与表观遗传学组蛋白去乙酰化的可能关联性,以及扶正、祛邪中药对其干预的作用机制.方法:收集确诊MDS患者正虚组10例,瘀毒组5例以及正常组3例BMMNCs进行体外培养.采用实时荧光定量多聚核苷酸链式反应(Real-time PCR)和蛋白免疫印迹法(Western blot)分别检测扶正、祛邪药物及SAHA干预前后HDAC1和GATA-1 mRNA和蛋白水平.结果:MDS患者GATA-1 mRNA和蛋白水平均低于正常人(P<0.05),HDAC1mRNA和蛋白水平均高于正常人(P<0.05),正虚型患者与瘀毒型患者间未发现明显差异;经HDACI(SAHA)干预后HADC1水平下降,同时GATA-1水平显著上升(P<0.01),扶正、祛邪中药能上调各组GATA-1表达水平,下调HADC1表达水平(P<0.01).结论:表观遗传学组蛋白乙酰化与红系转录水平异常与MDS发病有关,扶正、祛邪中药对正虚、瘀毒型MDS患者BMMNCs的组蛋白乙酰化和GATA-1表达水平均具有调控作用.在MDS患者的BMMNCs中,HDAC1与GATA-1表达呈负相关趋势,可能存在经HDAC调控红系转录的信号通路,中药具有HDACI类似的干预作用,但扶正、祛邪中药间尚未发现明显差异.
作者:许鸣;郭元成;任建业;徐白雪;曾庆;胡琦;陆嘉惠 刊期: 2018年第07期
目的:制备连翘标准汤剂并进行其质量标准研究.方法:根据标准汤剂的制备要求,制备16批连翘标准汤剂,以连翘苷、连翘酯苷A作为定量检测指标,计算指标成分转移率与出膏率,建立其HPLC指纹图谱分析方法.结果:通过对16批连翘标准汤剂进行测定,建议连翘标准汤剂出膏率范围13.61% ~25.27%;连翘苷转移率范围58.61% ~100.00%;连翘酯苷A转移率范围27.88% ~51.78%.利用“中药色谱指纹图谱相似度评价系统”(2012版)软件进行指纹图谱分析,标定了共有峰10个,分析确认了6个色谱峰,分别为forsythenside F(3号峰),连翘酯苷Ⅰ(4号峰),(+)松脂醇4-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(5号峰),连翘酯苷A(6号峰),连翘苷(7号峰)和连翘脂素(10号峰).采用特征峰评价模式,以峰7作为S峰,规定上述6个特征峰与S峰的相对保留时间分别为0.47,0.52,0.67,0.71,1.00,1.27.结论:本研究成功建立了连翘标准汤剂的质量评价方法,该方法准确、重复性好、特征性强,可为连翘配方颗粒的质量控制提供参考.
作者:曹静亚;李晓;宋梦娇;魏悦;张丽先;李智宁;李自红;陈玲 刊期: 2018年第07期
目的:系统开展血人参乙酸乙酯部位保肝活性化学成分的研究工作.方法:将血人参的乙醇提取浸膏,依次进行萃取得到乙酸乙酯、正丁醇部位.开展在小鼠体内的保肝活性筛选试验,设立正常组、四氯化碳模型组、联苯双酯组、乙酸乙酯灌胃组和皮下组、正丁醇灌胃组和皮下组,检测不同组小鼠血清中谷丙转氨酶(ALT)活性,评价待测药物保肝活性.针对保肝活性部位,利用硅胶柱,Sephadex LH-20,反相C18色谱柱等手段进行活性单体化合物的分离,并进行结构鉴定.在四氯化碳诱导人肝HL-7702细胞株损伤模型下,对分离出来的化合物进行体外保肝活性筛选.结果:皮下给予血人参乙酸乙酯提取物对四氯化碳造成的小鼠肝损伤具有显著保护作用(P<0.05).从血人参乙酸乙酯部分分离得到了11个化合物,经结构鉴定,确定为豆甾醇(化合物1),L-高丽槐素(化合物2),medicarpin(化合物3),豆甾4-烯-3-酮(化合物4),豆甾烷-3-酮(化合物5),3-hydroxy-8,9-dimethoxypterocarpan(化合物6),表儿茶素(化合物7),2α,3α-epoxyflavan-5,7,3',4-tetraol-(4β→8)-flavan-5(化合物8),2α,3α-epoxy-5,7,3',4'-tetrahydroxyflavan-(4β→8)-epicatechin(化合物9),表儿茶素(化合物10)和schizandriside (化合物11).其中化合物2首次从血人参中分离得到,化合物3,化合物6首次从木蓝属植物中分离得到.化合物8,化合物9和化合物11对四氯化碳诱导的人肝HL-7702细胞损伤有一定程度的保护作用(P<0.05),HL-7702细胞存活率明显升高,提示化合物8,化合物9和化合物11在体外对肝细胞损伤有保护作用.结论:该研究确定血人参乙酸乙酯部位是该药材保肝活性的主要部位,而从中分离出的化合物8,化合物9和化合物11是血人参保肝活性的有效化合物.
作者:雷钟;朱新宇;杨宇莎;周威;梁妍;郝小燕 刊期: 2018年第07期
目的:探讨金铁锁(PR)及其总皂苷(PRTS)的抗炎镇痛作用,并探讨其抗炎机制.方法:实验动物随机分为空白组(大鼠),模型组(大鼠、小鼠),阳性药组(小鼠:吲哚美辛,元胡止痛胶囊0.585 g·kg-1),金铁锁75%乙醇提取物(PR)高、中、低剂量组(小鼠:0.651 1,0.217,0.072 35 g·kg-1,大鼠:0.450 8,0.150 3,0.050 08 g·kg-1),金铁锁总皂苷(PRTS)高、低剂量组(小鼠:0.233 4,0.025 94 g·kg-1,大鼠:0.161 6,0.017 96 g·kg-1).采用醋酸诱导扭体实验和热板实验来评价镇痛作用;采用二甲苯诱导小鼠耳肿胀实验,脂多糖(LPS)诱导大鼠腹膜炎来评价抗炎作用,通过苏木素-伊红(HE)染色观察大鼠腹膜组织的病理变化,酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清中的炎症因子白细胞介素(IL)-6,IL-10.探寻潜在机制,通过大鼠肠系膜组织免疫组化观察肿瘤坏死因子(TNF)-α,IL-1β,核转录因子-κB(NF-κB) p65的表达.结果:与空白组比较,PR及PRTS各剂量组减轻小鼠耳肿胀(P<0.01),减少小鼠化学致痛扭体次数(P<0.05,P<0.01);PRTS高剂量组能提高小鼠痛阈值(P<0.05,P<0.01);与模型组比较,PR及PRTS各剂量组对急性腹膜炎大鼠腹膜组织病变有所改善,能降低炎症因子IL-6含量(P<0.01),同时降低TNF-α,IL-1β,NF-κB p65在肠系膜组织的表达,PR高剂量及PRTS高剂量组能降低IL-10含量(P<0.05).结论:金铁锁及总皂苷具有一定的镇痛抗炎作用,其机制可能与下调炎症因子的释放与表达,抑制NF-κB信号通道有关.
作者:邓祎;钱子刚;刘武林;丁雄;陈海丰 刊期: 2018年第07期
目的:对2015年版《中国药典》收载的中药王不留行的对照品王不留行黄酮苷的化学结构进行修正.方法:采用大孔吸附树脂及硅胶柱色谱对王不留行药材进行化学成分分离,得到化合物1,运用化学方法、高效液相色谱法及紫外光谱、红外光谱、核磁共振波谱、质谱等波谱方法进行结构鉴定.并且将该化合物与王不留行黄酮苷对照品(购于中国食品药品检定研究院)进行薄层、高效液相、核磁(一维及二维)和红外等方法进行数据比对分析,结果两者均一致.结果:原王不留行黄酮苷的黄酮母核4'位上连接的葡萄糖,正确连接位置应该在7位上,王不留行黄酮苷的化学结构应该是芹菜素-6-C-[α-L-阿拉伯糖-(1'''→2'')--β-D-葡萄糖]-7-O-β-D-葡萄糖苷.结论:王不留行黄酮苷的化学结构应修改为芹菜素-6-C-[α-L-阿拉伯糖-(1'''→2'')β-D-葡萄糖]-7-O-β-D-葡萄糖苷.该化合物鉴定的关键是4'-OH的信号,在核磁共振氢谱和HMBC谱中是较难得到的,如果要得到明显信号,需要在实验中选择较低的样品浓度,并且以DMSO-d6为溶剂.根据2015年版《中国药典》,王不留行黄酮苷是王不留行药材质量标准的定量成分,所以它的化学结构准确性对于国家法典的权威性而言有较大意义.
作者:周国洪;许梦莹;张晓;郭日新;于现阔;唐力英;王祝举 刊期: 2018年第07期
目的:探讨中药复方芪玉三龙汤(Qinyu Sanlong decoction)对Wnt(Wingless,Int1的合称)信号通路拮抗基因分泌型Frizzled相关蛋白(SFRP)-2的影响.方法:基于前期研究基础,采用LLC细胞培养移植法,构建小鼠移植肺癌模型,将荷瘤小鼠随机分为模型组、芪玉三龙汤组(低、中、高剂量组)、化疗组、联合组、芪玉三龙汤组,小鼠分别按20.12,40.24,80.48 g·kg-1 ·d-灌胃给药,化疗组以顺铂0.4 mL腹腔注射给药(1次/周),联合组以芪玉三龙汤80.48 g·kg-1 ·d-1灌胃和腹腔注射顺铂联合给药,模型组以等体积0.9%氯化钠溶液灌胃,1次/d,连续给药21 d;称取瘤质量,计算抑瘤率;透射电镜观察肿瘤细胞超微结构;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测肿瘤组织β-链蛋白(β-catenin),SFRP-2蛋白表达.结果:与模型组相比,各用药组均可下调β-catenin蛋白表达(P<0.01);与芪玉三龙汤20.12 g·kg-1 ·d-1组比较,其他各用药组亦可下调β-catenin蛋白表达(P<0.01);与化疗组比较,芪玉三龙汤40.24,80.48 g·kg-1d-1组、联合组下调较明显(P <0.05,P<0.01).与模型组相比,芪玉三龙汤40.24,80.48 g·kg-1 ·d-1组均可促进SFRP-2蛋白表达(P <0.05,P<0.01);与芪玉三龙汤20.12 g·kg-1 ·d-1组比较,其他各用药组亦可上调SFRP-2蛋白表达水平(P<0.01);与化疗组比较,芪玉三龙汤40.24,80.48 g·kg-1 ·d-1组均可促进SFRP-2蛋白表达(P <0.05,P<0.01).用药组电镜下可见凋亡现象,以芪玉三龙汤80.48 g·kg-1 ·d-组、化疗组及联合组明显.结论:芪玉三龙汤可一定程度抑制肺癌生长,诱导其镜下凋亡,促进SFRP-2表达,从而抑制Wnt/β-catenin信号通路.
作者:张星星;李泽庚;曾时杰;张至强;胡健 刊期: 2018年第07期
目的:研究不同氮浓度对羌活幼苗的生长发育及抗氧化酶系统的影响,为羌活人工栽培的科学施肥提供理论依据.方法:基于室内水培实验,采用酶标仪动态监测不同N浓度(0,10,15,20,40 mmol·L-1)处理下,羌活根茎抗氧化酶[超氧化物歧化酶(SOD),过氧化物酶(POD),过氧化氢酶(CAT),抗坏血酸过氧化物酶(APX)]活性的变化规律.结果:氮浓度介于15~20 mmol· L-1时,可有效促进羌活地上部分和地下部分生长;氮浓度超过20 mmol·L-1时,羌活地上部分生长受到明显抑制.随着氮浓度的增加,羌活根茎的SOD和POD活性呈现“V”型变化规律.即低N(10 mmol·L-1)和高N(40 mmol·L-1)处理下SOD和POD活性较高,中N(15 mmol·L-1)处理的小.对于CAT和APX,培养初期各处理间酶活性无显著性差异,但培养至42 d,高N处理下酶活性高且显著高于中N处理的对应值.结论:羌活对氮素营养状况存在剂量-效应关系,即低浓度和高浓度N都不利于羌活植株的生长,且高N环境下羌活植株抗氧化酶系活性显著高于其他浓度较低处理.
作者:张燕;王红兰;蒋舜媛;孙辉;杨萍;杜玖珍;孙洪兵;周毅 刊期: 2018年第07期
目的:研究龙胆泻肝汤对多囊卵巢综合征(PCOS)模型大鼠药效观察及机制,为龙胆泻肝汤临床PCOS的应用提供初步实验依据.方法:将SD大鼠50只,随机分为2组,即正常组10只、模型制备组40只,采用胰岛素(INS)联合人绒毛膜促性腺激素(HCG)法复制大鼠PCOS模型,造模成功的大鼠分为模型组、达英-35(0.21 g·kg-1)及龙胆泻肝汤高、低剂量组(29.6,7.4 g·kg-1),除正常组外,其余各组连续灌胃给药15 d;动物处理后测量卵巢质量及体积大小,检测各组大鼠血清中促黄体生成素(LH)/卵泡刺激素(FSH),睾酮(T),空腹血糖,空腹胰岛素(INS)激素水平及炎症因子白细胞介素-2(IL-2),IL-4,IL-6,IL-10水平;蛋白免疫印迹法(Western blot)分析各组卵巢组织中JAK2,STAT3,p-STAT3和IL-6蛋白的表达量.结果:与正常组比较,模型组卵巢质量及体积明显升高,血清LH/FSH,T,空腹血糖及INS均明显升高,IL-2,IL-6,IL-10水平明显升高,JAK2,STAT3和IL-6蛋白的表达量明显升高(P<0.05);与模型组比较,龙胆泻肝汤高、低剂量组明显降低卵巢质量及体积,血清LH/FSH,T,空腹血糖及INS,IL-2,IL-6,IL-10水平,升高JAK2,STAT3蛋白的表达量,降低p-STAT3和IL-6蛋白的表达量(P<0.05).结论:龙胆泻肝汤对PCOS大鼠具有明显疗效,主要通过降低激素水平和抑制炎症反应;且其机制可能与JAK2/STAT3通路相关.
作者:李俊波;邓芳;李霄汉;许丽绵 刊期: 2018年第07期
目的:探究麻元通便止痛汤对慢传输型便秘(STC)大鼠肠道功能、排便量、肠神经递质及水通道蛋白(AQP)的影响,并探讨其可能的作用机制.方法:雄性SD大鼠60只,随机分为正常组、模型组、麻元通便止痛汤低、中、高剂量组(6,12,18 mg·kg-1)及莫沙必利组;模型组、麻元通便止痛汤组及莫沙必利组采用复方地芬诺酯混悬液10 mg·kg-1 ·d-1灌胃,连续给药14 d,建立STC模型;模型建立后,给药组分别给予相应药物,正常组及模型组给予等体积0.9% NaCl溶液灌胃,连续给药14 d.检测各组大鼠造模前、造模期及治疗期粪便数量及含水量;计算各组大鼠碳末推进率;酶联免疫吸附法(ELISA)检测各组大鼠结肠组织一氧化氮(NO)及一氧化氮合酶(NOS)含量;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测各组大鼠结肠组织水通道蛋白1,3,4,8(AQP1,3,4,8)表达.结果:与正常组比较,模型组大鼠碳末推进率、排便量及粪便含水量降低(P<0.05),与模型组比较,麻元通便止痛汤组及莫沙必利组大鼠碳末推进率、排便量及粪便含水量升高,且呈剂量依赖型(P<0.05);与正常组比较,模型组大鼠结肠NO,NOS含量升高(P<0.05),与模型组比较,麻元通便止痛汤组及莫沙必利组结肠NO,NOS含量降低,且呈剂量依赖型(P<0.05);与正常组比较,模型组大鼠结肠AQP1,3,4,8表达升高(P<0.05),与模型组比较,麻元通便止痛汤组及莫沙必利组结肠AQP1,3,4,8表达降低,且呈剂量依赖型(P<0.05).结论:麻元通便止痛汤可改善STC大鼠肠道功能、排便数量及粪便含水量,其机制可能与减少结肠NO,NOS含量及AQP1,3,4,8表达有关.
作者:谢昌营;吴成成;肖慧荣 刊期: 2018年第07期
目的:通过建立糖氧剥夺(OGD)诱导的人脑微血管内皮细胞(h-BMECs)损伤模型,观察桃红四物汤对细胞的保护作用及机制.方法:体外建立人脑微血管内皮细胞糖氧剥夺损伤模型,随机分为正常组、模型组、桃红四物汤高、中、低质量浓度组(0.8,0.4,0.2 g·L-1)和阳性药尼莫地平组.噻唑蓝(MTT)比色法检测h-BMECs细胞活性,酶联免疫吸附法(ELISA)测定细胞上清液中乳酸脱氢酶(LDH)水平、细胞中丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性,采用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测内皮细胞血管内皮生长因子(VEGF)和缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)表达水平.结果:桃红四物汤可显著提高拟缺血损伤的人脑微血管内皮细胞活性,降低LDH漏出率(P<0.05,P<0.01),改善细胞形态,降低MDA水平(P<0.05),增强SOD活性(P<0.05,P<0.01).增加内皮细胞VEGF和HIF-α蛋白的表达(P <0.05,P<0.01).结论:桃红四物汤对拟缺血损伤人脑微血管内皮细胞具有保护作用,其机制与增强细胞抗氧化能力,通过HIF-α途径增强VEGF表达有关,显示中药组方可发挥整体调节的治疗优势.
作者:季兆洁;韩岚;吴欢茹;郭栋栋;彭代银 刊期: 2018年第07期
目的:基于黄疸模型比较栀子根与栀子果实的保肝作用,为扩大栀子的药用部位提供药理学依据,为其资源的综合利用提供理论支撑.方法:将KM小鼠随机分为9组,每组10只,分别为正常组,模型组,阳性药联苯双酯组(150 mg·kg-1),栀子果实和根部位不同剂量给药组(各设高、中、低3个剂量),提前灌胃给药5d后采用α-萘异硫氰酸酯(ANIT)复制小鼠黄疸型肝炎模型,继续给药,造模48 h后处理动物测定血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT),天门冬氨酸氨基转移酶(AST),γ-谷氨酰转移酶(γ-GT),总胆红素(TBIL),总胆汁酸(TBA),肝脏中超氧化物歧化酶(SOD),还原型谷胱甘肽(GSH),谷胱甘肽过氧化酶(GSH-Px)水平,苏木素-伊红(HE)染色观察小鼠肝脏组织病理学变化,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术测定肝组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白细胞介素-6(IL-6),转运体胆盐输出泵(BSEP),钠离子-牛磺胆酸协同转运多肽(NTCP)和胆固醇12α羟化酶(Cyp8b1) mRNA的表达.结果:与正常组比较,模型组血清中ALT,AST,γ-GT,TBIL,TBA水平显著升高,组织中SOD,GSH-Px,GSH的活性显著降低,NTCP,Cyp8b1 mRNA的表达显著降低,TNF-α,IL-6,BSEP mRNA的表达显著升高(P<0.01);与模型组比较,栀子果实与根提取物中、高剂量组均能明显降低血清中ALT,AST,γ-GT,TBIL,TBA,明显增强肝组织中SOD,GSH-Px,GSH的活性,对肝脏病理损伤有减轻作用,且能明显增加NTCP,Cyp8b1 mRNA的表达,明显降低TNF-α,IL-6,BSEP mRNA的表达(P <0.05,P<0.01);而低剂量组仅对单项指标或几项指标有一定的改善作用.结论:栀子果实和根部位对ANIT诱导的黄疸模型小鼠有一定的保护作用,2个部位各剂量对不同指标有不同影响,栀子果实保肝机制可能主要与抗氧化作用和抑制炎症反应有关,而栀子根保肝作用可能主要与胆汁酸代谢有关.
作者:肖日传;罗光明;董丽华;张风波;朱继孝;伍珊娜;李波;谢晶 刊期: 2018年第07期
目的:建立同时适用于三七药材及其乙醇提取液、树脂洗脱液、三七二醇皂苷(PDS)的HPLC指纹图谱方法,分析PDS制备的主要工艺环节物质群量值传递情况.方法:采用HPLC,以乙腈-水为流动相进行梯度洗脱,建立了三七药材及其中间产物,PDS的指纹图谱检测方法;采用“中药色谱指纹图谱相似度评价系统”(2012版)软件对制备过程各关键工艺环节多批次样品进行相似度评价,同时进行物质群的量值传递分析.结果:建立的HPLC指纹图谱方法精密度、重复性和稳定性良好,能有效分离三七药材、中间产物及PDS各组分,标定了12批三七药材的16个共有峰,指认了其中5个主要色谱峰;各批次样品与其相应的对照指纹图谱的相似度均≥0.9;工艺过程较好地去除了药材中三七三醇皂苷类成分,而三七二醇皂苷类药效成分完整传递至PDS.结论:建立的指纹图谱方法稳定可靠,能充分展示三七药材、中间产物及PDS物质群变化及其量值传递情况,为中药新药的开发与应用提供了精准工艺及质量控制研究新模式;现有PDS主要工艺流程科学合理.
作者:余佳丽;唐晓章;周菲;林美斯;林大胜;邓义红 刊期: 2018年第07期
目的:探讨参附注射液治疗重症急性胰腺炎模型大鼠心肌的保护作用.方法:选取雄性SD大鼠60只,随机分为6组,分别为假手术组、模型组、乌司他丁组(2×104 U·kg-1)和参附注射液高、中、低剂量组(3,1.5,0.75 g·kg-1).实验采用逆行胆胰管灌注5%牛磺胆酸钠溶液复制重症急性胰腺炎大鼠模型,造模后3h,分别给予尾静脉注射生理盐水、乌司他丁、不同剂量参附注射液.6h后苏木素-伊红(HE)染色法观察各组大鼠胰腺及心肌的病理变化,并检测大鼠心肌细胞Na+-K+-ATP酶活性,实时荧光定量聚合酶链式反应(qPCR)法检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白细胞介素-1β(IL-1β)和白细胞介素-6(IL-6) mRNA表达量.结果:与假手术组比较,模型组的大鼠胰腺、心肌损伤严重,病理评分明显升高(P<0.05),心肌Na+-K+-ATP酶活性明显降低(P<0.05),TNF-α,IL-1β mRNA表达量明显升高(P<0.05);与模型组比较,乌司他丁组、参附注射液组的胰腺和心脏病理评分明显降低(P<0.05),参附注射液组大鼠心肌Na*-K+-ATP酶活性明显增加(P<0.05),TNF-α,IL-1β mRNA表达量明显降低(P<0.05).结论:参附注射液可能通过改善心肌细胞Na+-K+-ATP酶活性,减少心肌组织中TNF-α,IL-1β的表达,对心肌起保护作用.
作者:杨伟钦;李培武;米红;赵迪克;向长勤;陈昫;刘凤斌 刊期: 2018年第07期
目的:探讨十补丸加味治疗脾肾阳虚型卵巢功能早衰(POF)的疗效及对Th17和Treg平衡及其相关细胞因子水平的调整作用.方法:将就诊的POF患者122例,采用区组随机按数字表法分为对照组和观察组各61例.对照组采用雌孕激素序贯疗法,口服戊酸雌二醇片,1 g/次,qd,连续治疗21 d,后10d加黄体酮胶丸,200 mg/次,1次/d.观察组在对照组治疗的基础上内服十补丸加味治疗,1剂/d.两组连续治疗6周.比较两组脾肾阳虚证症状,Kupperman评分、血清中卵泡刺激素(FSH),雌二醇(E2),黄体生成素(LH)水平及临床疗效.检测两组外周血中Treg和Th17及血清中白细胞介素(IL)-6,IL-21,干扰素(IFN)-γ和转化生长因子(TGF)-β1水平.结果:观察组脾肾阳虚证症状各指标评分均明显低于对照组(P<0.01).治疗后3周和6周,观察组Kupperman评分均明显低于对照组(P<0.01).观察组患者血清FSH和LH水平均低于对照组,E2水平高于对照组(P<0.01).观察组患者临床总有效率为88.33%,高于对照组71.19% (P <0.05).治疗后,观察组外周血Treg水平显著高于对照组,Th17低于对照组(P<0.01).观察组治疗后血清中IL-6,IL-21,IFN-γ水平均明显低于对照组,TGF-β1多于对照组(P<0.01).结论:十补丸加味治疗脾肾阳虚型POF可调整患者激素水平,改善临床症状,可能与调整Treg和Th17平衡及其相关细胞因子水平有关.
作者:熊晓莉;王巧英;曾晓霞;李兆艾 刊期: 2018年第07期
目的:观察探讨腰痛六合散熨疗联合针刺治疗腰椎间盘突出症(LDH)血瘀证的疗效,并探讨其可能作用机制.方法:筛选120例收治的血瘀型LDH患者,按数字表法随机分为对照组和治疗组各60例.对照组采用电动牵引床牵引,30 min/次,1次/d;和口服依托考昔片,1片/次,1次/d.治疗组在对照组治疗的基础上给予腰痛六合散熨疗联合针刺疗法.两组疗程均为连续治疗4周.比较两组患者中医血瘀证症状评分,LDH功能障碍,改良日本骨科学会下腰痛评分法(M-JOA)及功能障碍指数问卷表(Oswestry)评分及临床疗效.检测两组患者外周血中Th17水平及血清中白细胞介素(IL)-17,IL-6,肿瘤坏死因子(TNF)-α,IL-1β,血管内皮细胞生长因子(VEGF)水平.检测两组治疗前后血液流变学水平.结果:治疗后,治疗组血瘀证症状积分,M-JOA及Oswestry评分与对照组比较,下降均为明显(P<0.01).治疗组临床总有效率为95%,显著高于对照组80% (P <0.05).治疗组治疗后2周和4周,与对照组比较,外周血Th17下降明显(P<0.01).治疗组治疗后,患者血清中IL-17,IL-6,IL-1β,TNF-α,VEGF水平均下降明显(P<0.01).与对照组相比较,治疗组血液流变学指标水平降低更明显(P<0.01).结论:在常规西医治疗的基础上加用腰痛六合散熨疗联合针刺疗法,血瘀型LDH临床疗效优于单纯西医干预,调节体内Th17,从而减少相关细胞因子水平,改善血液局部血液循环,促进患者康复.
作者:温泽发;牛淑芳;曾令友;潘广华 刊期: 2018年第07期
目的:研究苦碟子注射液(简称苦碟子)对单侧输尿管梗阻大鼠肾间质纤维化的作用及机制.方法:采用单侧输尿管结扎法制备大鼠肾间质纤维化模型,随机分为正常组、假手术组、模型组、缬沙坦(0.01 g·kg-1)组、苦碟子低、高剂量(0.15,0.30 g·kg-1)组.各组大鼠在给药后第7,14天分批次处死,采集血液,肾组织,测定血清肌酐(serum creatinine,SCr),尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)含量;肾组织匀浆检测丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量,超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性;肾脏苏木素-伊红(HE),马松(Masson)染色观察肾脏病理变化;免疫组化法检测各组大鼠肾组织转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1),磷酸化-Smad2/3(phosphorylated Smad2/3,p-Smad2/3),骨形成蛋白-7(bone morphogenetic protein-7,BMP-7)的表达,并行半定量分析;逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测肾组织TGF-β1,Smad2,Smad3,BMP-7及Ⅰ型胶原(Col Ⅰ)mRNA表达.结果:苦碟子能降低肾间质纤维化大鼠血肌酐水平,能减轻肾间质小管损伤,减少肾间质胶原相对面积,MDA含量,下调TGF-β1,p-Smad2/3,Col Ⅰ的表达;增加SOD的活性以及BMP-7表达水平,与苦碟子低剂量组比较,以苦碟子高剂量(0.30 g·kg-1)组效果为显著(P<0.05).结论:苦碟子对大鼠肾间质纤维化的保护作用,可能与其降低大鼠肾组织氧化应激水平、抑制TGF-β1/Smad/ BMP-7信号通路传导,从而抑制细胞外基质增生有关.
作者:林云;曹灵 刊期: 2018年第07期
目的:建立柴胡HPLC-ELSD指纹图谱,分析柴胡主要成分在提取和炮制过程中的变化规律.方法:色谱条件为Phenomenex Kinetex(R) C18色谱柱(4.6mm×250mm,5μm),流动相乙腈(A)-水(B)梯度洗脱(0~60 min,25%~58%A),柱温30℃,流速1.0 mL· min-,进样量10μL,检测器为蒸发光检测器,氮气流速3.0 mL· min-;以此色谱条件分别对4种样品(柴胡水提液、柴胡醇提液、醋柴胡水提液、醋柴胡醇提液)进行指纹图谱研究,并测定柴胡皂苷a,d,b1,b2的含量.结果:得到4种柴胡样品指纹图谱,共指认23个色谱峰,各样品的指纹图谱共有模式图不尽相同,成分色谱峰存在较大差异.柴胡经水提加热回流或醋炙后会使原生皂苷向次生皂苷转化,其中醋柴胡水提液中的原生皂苷含量少,次生皂苷含量多,柴胡醇提液中次生皂苷含量少.结论:所建立的HPLC-ELSD指纹图谱可作为柴胡化学成分分析测定的方法;柴胡经水提或醋炙后化学成分变化较大,含柴胡制剂的临床使用及质量评价应充分考虑到柴胡皂苷类成分的转变情况.
作者:丛梦雨;龚彦溶;梁莎碧;倪洁娜;王术玲 刊期: 2018年第07期
目的:建立芥子、莱菔子炒制前后以及芥子不同品种饮片的UPLC图谱,分析3种中药饮片炒制前后化学成分的变化规律.方法:采用UPLC,ZORBAX Eclipse XDB-C18色谱柱(4.6 mm×50mm,1.8 μm),流动相乙腈(A)-含0.08 mol·L-1甲酸铵的0.1%甲酸水溶液(B)梯度洗脱(0~5 min,5% ~ 20%A;5~7 min,20%A;7~ 25 min,20% ~25% A;25~30 min,25% ~90%A),柱温35℃,进样量10 μL,流速0.3 mL·min-1,检测波长254 nm.结果:白芥子与炒白芥子饮片共检出7个共有峰,白芥子炒制后主要色谱峰的峰面积发生显著变化,新生成1个色谱峰a,但其原有色谱峰8~10均消失.黄芥子生品与炒制品有10个共有峰,黄芥子炒制后部分色谱峰的峰面积显著降低,色谱峰11几乎消失.莱菔子与炒菜菔子有6个共有峰,莱菔子炒制后主要色谱峰的峰面积变化显著,色谱峰a消失,新生成2个色谱峰.通过比较白芥子、黄芥子和莱菔子的UPLC图谱,发现3种中药饮片中均归属出其共性成分芥子碱硫氰酸盐,但在主要色谱峰峰面积及数量方面存在显著差异.结论:UPLC建立芥子不同品种及莱菔子生、炒饮片的图谱能全面反映出饮片的物质基础内涵以及炮制前后物质基础的变化规律,为揭示这3种中药饮片炮制原理和进一步诠释含硫代葡萄糖苷类中药饮片炒制共性原理的科学内涵提供实验依据.
作者:苏慧;岳琳;刘颖;麻印莲;于定荣;霍雨佳;万超;李丽;肖永庆 刊期: 2018年第07期