学术投稿

抗端粒酶M1RNA核酶真核表达载体构建及肝癌细胞转染的研究

姜英俊;程广;孔心涓;王培戈;李建国

关键词:M1RNA核酶, 端粒, 末端转移酶, 肝癌细胞, 转染
摘要:目的构建抗人端粒酶RNA(hTR)的M1RNA核酶的真核表达载体,并筛选稳定转染核酶的肝癌细胞株.方法设计并应用PCR技术合成hTR模板的M1RNA核酶,应用pEGFPC1载体构建M1RNA核酶的真核表达质粒,应用脂质体LipofectAMINEAM2000转染肝癌细胞系HepG2,应用G418筛选稳定表达核酶的细胞株.结果测序证实hTR的M1RNA核酶基因被正确克隆入真核表达载体pEGFPC1,应用脂质体成功转染肝癌细胞系HepG2.结论成功构建了hTR的M1RNA核酶,并筛选出了稳定表达核酶的肝癌细胞株.
齐鲁医学杂志相关文献
  • 医院开设非处方药房的优势探讨

    我国已于2000年1月1日起实行处方药与非处方药(OTC)分类管理制度,OTC作为一个崭新的概念逐渐深入我国每个家庭,成为保障人们健康体系的重要组成部分.随着药品分类管理制度的实施,我国OTC市场即将形成,将对药品生产、经营、销售格局产生巨大影响,有利于保护消费者的权利,有利于我国药品管理模式与国际接轨.医院开设OTC药房也是医院服务方式的一项具有现实意义的改革.

    作者:薛学温;宋金明;张宏;王志;任炜 刊期: 2006年第01期

  • 一次性切开引流加挂线治疗肛周脓肿46例临床分析

    2001~2003年,我院对确切找到内口的46例肛周脓肿病人,采用一次性切开引流加挂线治疗,均一次性治愈.现报告如下.

    作者:张洪海;程相钦 刊期: 2006年第01期

  • 黄连素离子透入并药物联合治疗慢性盆腔炎的效果

    慢性盆腔炎是妇科常见病,常为急性盆腔炎未能彻底治疗或病人体质较差病情迁延所致.由于慢性盆腔炎病情较顽固,治疗效果往往不理想.1991~2003年,我科采用黄连素离子透入并药物治疗慢性盆腔炎病人121例,疗效满意.现报告如下.

    作者:方云霞;管东东;杨东昌 刊期: 2006年第01期

  • 多发性神经纤维瘤病家系分析(附2家系报告)

    目的探讨多发性神经纤维瘤病的家族遗传性及诊断治疗的进展.方法对多发性神经纤维瘤病2个家系进行回顾性调查分析.结果 2家系均有家族性,对症治疗取得满意效果.结论神经纤维瘤病是一种遗传性疾病,基因诊断是其早期诊断的发展方向,症状性切除是其治疗的目的.

    作者:郑绪鹏;范基成;秦洪明;牛玉明 刊期: 2006年第01期

  • 阿希米治疗细菌性阴道病40例临床分析

    细菌性阴道病为阴道内正常菌群失调所致的一种混合感染,但临床及病理检查无炎症改变.细菌性阴道病由病人阴道内产生过氧化氢的乳杆菌减少而其他细菌大量繁殖,特别是加德纳菌、多种厌氧菌以及支原体呈优势生长而引起.治疗原则为选用抗厌氧菌药物,主要有甲硝唑、克林霉素,但对支原体效果差[1].2004年6月~11月,我院用阿希米治疗细菌性阴道病40例,取得较好效果,现报告如下.

    作者:郭希娟 刊期: 2006年第01期

  • 肾综合征出血热医院真菌感染35例临床分析

    肾综合征出血热(HFRS)起病急,病情复杂,其病原体汉坦病毒(HV)除侵犯肾脏外,机体多脏器亦可受累,造成机体免疫调节紊乱,易继发院内感染.资料显示,本病病死率随治疗水平的提高已明显下降,但其中死于继发感染者却逐年上升,成为本病的主要死因之一[1].HFRS医院真菌感染状况较少报道.本文对我院及济南市传染病医院1987年7月~2003年10月收治的HFRS病人医院真菌感染情况进行了回顾性调查分析.现报告如下.

    作者:辛崇尚;李梅;代兆举;潘兆随;刘刚 刊期: 2006年第01期

  • 电凝法治疗下肢静脉曲张的效果

    目的评价电凝法治疗下肢静脉曲张的临床效果.方法下肢静脉曲张病人38例,随机分为两组:研究组20例,采用电凝法治疗;对照组18例,采用传统方法(高位结扎+大隐静脉剥脱术)治疗.比较两组手术时间、术中出血量、术后开始下床活动时间、住院时间.结果研究组手术时间、术中出血量、术后下床活动时间及住院时间均小于对照组,差异有显著性(t=2.78~21.48,P<0.01).结论电凝法治疗下肢静脉曲张效果优于传统疗法,值得推广.

    作者:刘贤华;李叶臣;刘青;秦芳 刊期: 2006年第01期

  • 从法律角度谈病案的形成与管理

    病案是医疗机构的医务人员在医疗活动实践中对病人疾病的发生、发展和转归客观、真实、完整的文字记录.它不仅是宝贵的原始资料,当发生医疗纠纷时又是重要的法律依据.因此,病案在医疗活动实践中具有双重作用.为确保发挥病案的有效法律作用,应做好如下工作.

    作者:贺秀林;王弥;张颖 刊期: 2006年第01期

  • 肌苷对大鼠脑缺血再灌注后GAP-43 mRNA表达影响

    目的探讨肌苷对脑缺血再灌注后中枢神经再生的作用.方法线栓法建立大脑中动脉缺血再灌注模型,随机分为治疗组和对照组,每组再随机分为缺血1.5 h再灌注2 h、12 h、1 d、2 d、3 d、7 d、14 d组(n=4),另取4只作假手术组.应用BEDERSON等神经功能评分法评定神经功能,原位杂交技术检测脑缺血再灌注后各时间点脑组织生长相关蛋白基因(GAP-43 mRNA)的表达.结果对照组于再灌注2 h~7 d、治疗组于再灌注12 h~7 d,GAP-43 mRNA表达与假手术组比较明显增多(t=2.70~29.84,P<0.05),治疗组与对照组比较GAP-43mRNA表达于再灌注2 h一过性下降,12 h和7 d明显增高(t=1.97~7.41,P<0.05);治疗组与对照组比较神经功能恢复于再灌注7 d有显著性差异(t=2.31,P<0.05).结论肌苷可促进大鼠脑缺血再灌注后神经功能恢复,其作用机制可能是通过调节与神经轴突再生有关的GAP-43 mRNA表达而实现的.

    作者:刘伯晨;郭云良 刊期: 2006年第01期

  • 角膜缘干细胞移植治疗翼状胬肉89例临床分析

    翼状胬肉是眼科常见病、多发病.此病有很强的加重及复发倾向,药物治疗效果差,以往手术方法很多,如单纯胬肉切除或结膜下转移、胬肉切除并自体球结膜移植、胬肉切除并羊膜移植术等,但术后复发率为20%~30%,多次复发的翼状胬肉造成睑球粘连,甚至影响眼球运动造成复视,影响正常工作、生活.自2001年3月以来,我院采用显微镜下自体角膜缘干细胞移植治疗翼状胬肉取得了非常好的效果,现报告如下.

    作者:侯承花;王学红 刊期: 2006年第01期

  • 胃肠道间质瘤诊断及治疗进展

    胃肠道间质瘤(GISTs)是一组主要发生于胃肠道的含有梭形细胞、上皮样细胞,高表达CD117,可能起源于Cajal间质细胞的肿瘤.GISTs这一名词已得到公认并在临床和病理诊断中应用.以往胃肠道间叶组织起源的梭形细胞肿瘤大多诊断为平滑肌瘤或神经鞘-神经纤维瘤,免疫组化和超微结构的研究显示大部分肿瘤无典型平滑肌和神经细胞特征.为区别平滑肌瘤和许旺细胞瘤而归为GISTs,其涵盖了绝大部分胃肠道原发性间叶原性肿瘤,而真正的胃肠道平滑肌瘤及许旺细胞瘤很少见.这类肿瘤曾经应用过的名称包括恶性潜能不肯定的平滑肌肿瘤,胃肠道自主神经肿瘤,胃肠道起搏细胞肿瘤等[1],此类肿瘤组织来源仍有争议,可分为良性、潜在恶性、恶性.近年来随着病理学、分子生物学的进步,GISTs的诊断、治疗已有很大进展,现综述如下.

    作者:苏海龙;刘昌盛 刊期: 2006年第01期

  • 计算机辅助外科技术在矫形手术中的应用

    20世纪80年代以来,随着计算机技术与医学三维影像技术的迅猛发展并相互渗透,产生了计算机辅助外科(CAS)技术,并迅速应用于临床.在矫形外科领域,CAS技术主要用于骨关节创伤,复杂骨畸形,人工关节假体的选择,骨肿瘤位置、范围和性质的测定,这些技术极大地提高了手术的精确性和可靠性,从而使得传统的矫形外科手术发生了深刻的变革[1].本文主要对CAS技术在矫形手术中的应用作一综述如下.

    作者:尹明杰;唐胜建 刊期: 2006年第01期

  • 对外学术交流性手术的配合体会

    我院是一所集医疗、科研、教学于一体的现代化综合性医院,手术室肩负着配合各临床科室常规及高新手术顺利开展的任务.近年来,随着医疗科研领域双向交流的不断增多与加强,对外学术交流性手术越来越多.因为这类手术具有表演性、示范性及讨论性的特点,所以手术室配合质量的好坏不仅能反映出医院的整体医疗水平,在某种程度上还代表着国内的医疗现状.并且,通过这类手术的开展,还能以直接的方式获得医学领域的新信息.因此,用心研究与总结此类手术的配合要点很有必要.

    作者:王冠容;杨秀芝 刊期: 2006年第01期

  • 血液透析中发生血压异常情况分析

    目的观察不同年龄组血液透析中高血压及低血压的发生率.方法对常规血液透析的42例病人的3 120例次透析情况进行分析.结果老年组高血压发生率低于非老年组,低血压发生率高于非老年组(x2=6.33、45.54,P<0.05、0.01).结论血液透析中老年人易发生低血压,非老年人易发生高血压.

    作者:单文红;郝娟芝;崔秋竹 刊期: 2006年第01期

  • 浆细胞性乳腺炎的超声诊断与鉴别诊断

    目的探讨超声检查对浆细胞性乳腺炎的诊断与鉴别诊断价值.方法回顾性分析23例经病理证实的浆细胞性乳腺炎的超声声像图表现.结果浆细胞性乳腺炎声像图表现大体分两型:低回声实性包块型与囊性包块型,实性病灶边缘不规则,无包膜;囊性病灶壁厚,透声差.病灶多位于乳晕区及乳头深面,内部血流信号不丰富.结论超声检查对浆细胞性乳腺炎的诊断价值较大,但需与乳癌、乳腺囊性增生等疾病鉴别.

    作者:孙咏梅;房世保;赵诚;王建华 刊期: 2006年第01期

  • EB病毒相关胃癌组织中P53及P21蛋白的表达

    目的探讨Epstein-Barr病毒(EBV)感染、P53和P21蛋白表达异常在胃癌发生发展中的作用以及三者相关性.方法应用免疫组化技术检测13例EBV相关胃癌(EBVaGCs)、45例临床指标与之匹配的EBV阴性胃癌(EBVnGCs)以及58例相应癌旁组织中P53和P21蛋白的表达.结果胃癌组织P53蛋白阳性率明显高于癌旁组织,差异有极显著性(x2=50.000,P<0.01).EBVnGCs组织中P53蛋白阳性率与EBVaGCs相比差异无显著性(x2=0.072,P>0.05);但EBVaGCs组织P53蛋白过表达率明显低于EBVnGCs组织,差异有极显著性(x2=7.259,P<0.01).胃癌组织P21蛋白阳性率明显低于癌旁组织,差异有极显著性(x2=12.500,P<0.01).EBVnGCs与EBVaGCs组织P21蛋白阳性率无明显差异(P>0.05).胃癌组织中P21与P53蛋白共同表达率较高,但无显著相关性(x2=1.323,P>0.05,r=0.202 5).结论 P21蛋白表达存在p53依赖性和p53非依赖性两条途径;胃癌组织中EBV感染与P53蛋白的异常表达有关,而与P21蛋白异常表达无显著相关性.

    作者:孙迎娟;孙坚萍;黄葆华;赵鹏;罗兵 刊期: 2006年第01期

  • γ-干扰素对骨吸收及实体瘤骨转移的体外抑制作用

    目的探讨体外实验中γ-干扰素(IFN-γ)对其他细胞因子引起的骨吸收及实体瘤骨转移病人外周血单个核细胞培养上清(PBMCs)促进的骨吸收的抑制作用.方法利用新生鼠头顶骨进行体外骨吸收实验,分别验证细胞因子白细胞介素1(IL-1)、白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子(TNF)、IFN-γ、粒-巨噬细胞生长因子(GM-CSF)在体外对骨吸收的影响.检测8例实体瘤骨转移阴性及11例骨转移阳性病人PBMCs的骨吸收活性(BRA).结果 IL-1、IL-6、TNF、GM-CSF均可促进体外骨吸收,以IL-1作用强.而上述因子联合培养,BRA明显增强.IFN-γ本身对骨吸收作用不明显,但能使IL-1及细胞因子联合培养引起的骨吸收减弱.IFN-γ可使实体瘤骨转移阳性病人PBMCs诱发的BRA增强明显降低(t=2.34,P<0.05).结论 IL-1、IL-6、TNF、GM-CSF在体外对骨吸收有促进作用;IFN-γ在体外可使部分细胞因子及实体瘤骨转移阳性病人PBMCs促进的骨吸收作用减弱,提示γ-干扰素可能存在抑制肿瘤转移作用.

    作者:张明泳;王红梅;孙文欣;唐华平 刊期: 2006年第01期

  • 碳酸氢钠液漱口预防白血病病人化疗后口腔真菌感染的效果

    目的探讨预防白血病病人化疗后口腔真菌感染有效方法.方法随机抽取大剂量化疗后成年白血病住院病人64例,随机分成A、B两组,各32例.A组给予多贝尔液漱口,B组给予多贝尔液及50 g/L碳酸氢钠液交替漱口,每天6次.1、2周后观察两组口腔真菌感染发生情况.结果 A、B两组病人1周后发生口腔真菌感染例数分别为6、0例,2周后分别为8、3例.两组口腔真菌感染发生率比较,差异有显著性(x2=7.48,P<0.05).结论白血病病人大剂量化疗后常规应用50 g/L碳酸氢钠液、多贝尔液交替漱口,可有效预防口腔真菌感染.

    作者:李晓娟;张景莲;曹鹏利 刊期: 2006年第01期

  • 人疱疹病毒6型101K被膜蛋白主要抗原决定簇区原核表达克隆的构建和表达

    目的构建人疱疹病毒6型(HHV-6)101K被膜蛋白的原核高效表达克隆,并进行原核表达.方法PCR扩增HHV-6B 101K被膜蛋白的主要抗原决定簇区(666~834aa)编码基因片段(nt2 347~2 853),并导入T载体进行测序,与GenBank中HHV-6标准毒株序列比较以进一步鉴定.目的基因及表达载体pThioHis A分别经双酶切后连接,转化宿主菌E.coli BL21,应用PCR法及限制性核酸内切酶双重鉴定原核表达质粒,并经测序证实.IPTG诱导蛋白表达,SDS-PAGE电泳鉴定重组蛋白.结果 PCR获得的目的基因序列与GenBank中HHV-6B标准毒株Z29序列一致,重组质粒诱导菌表达产物出现相对分子质量为31 900的融合蛋白条带.结论HHV-6 101K蛋白的原核表达克隆构建和表达成功,为进一步完善HHV-6活动性感染的血清学诊断提供了实验基础.

    作者:阎丽平;王云;王笑峰;罗兵 刊期: 2006年第01期

  • 唑来膦酸联合化疗对多发性骨髓瘤病人骨痛的治疗效果

    目的评价唑来膦酸联合化疗对多发性骨髓瘤病人骨痛的临床疗效.方法选择24例多发性骨髓瘤病人随机分为两组,每组12例,治疗组接受唑来膦酸联合化疗;对照组单用化疗,两组化疗方案相同,比较两组的疗效.结果治疗组显效、有效、无效分别为4、6、2例,对照组分别为1、5、6例,治疗组疗效优于对照组(uc=5.36,P<0.05).在应用唑来膦酸的病人中,除2例出现轻度发热外,余未见明显毒副作用.结论唑来膦酸联合化疗可以显著缓解多发性骨髓瘤病人的骨痛.

    作者:史春雷;王玲;尹刚;袁成录 刊期: 2006年第01期

齐鲁医学杂志

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