陈文雪；吴小华；田素美；李芹
目的p55γ是磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)的调节亚单位之一,在调节PI3K活性上具有重要的作用,本研究旨在观察p55γN末端24个氨基酸对胃癌细胞增殖的影响.方法用脂质体介导将表达质粒pEGFPC1和pEGFPC24转染MGC-803细胞,通过荧光显微镜鉴定转染基因的蛋白表达;MTT法观察转染细胞的生长情况;软琼脂集落形成实验确定单个细胞的增殖力;后用流式细胞仪分析细胞周期时相的变化.结果(1)建立了稳定表达GFP和GFP-N24的MGC-803细胞系,分别命名为C1/803和C24/803.(2)与对照组C1/803相比,C24/803细胞生长速度减慢,其在软琼脂中集落形成率下降了86.8%.(3)C1/803和C24/803细胞周期G0/G1期百分率分别为52.5%和59.5%,两者相比差异有显著性(P＜0.05).结论p55γN末端24个氨基酸能够抑制胃癌细胞的生长和增殖,引起细胞周期G1/S期延长,提示N24p55γ可能成为治疗胃癌的潜在的分子药物.
作者：孙晓杰；赵玫；袁兴华；王晓霞；马萍；孙跃民；黄常志 刊期： 2005年第01期
目的构建特异性抑制信号转导与转录激活因子3(STAT3)的小干扰RNA(siRNA)表达载体并检测其对STAT3表达及PC-3细胞增殖的抑制作用.方法设计、合成STAT3特异性的短链寡核苷酸,经退火形成双链DNA片段,克隆到pSilen-cerTM2.1-U6载体中,构建STAT3特异siRNA的表达载体,Hind Ⅲ和BamH Ⅰ双酶切及测序鉴定重组体,并转染PC-3细胞,G418筛选出稳定表达细胞株,半定量反转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法和免疫印迹法检测STAT3 mRNA和蛋白的表达水平,四甲基偶氮唑蓝(MTT)检测细胞增殖活性.结果经双酶切与测序鉴定成功构建STAT3-siRNA表达载体,转染前列腺癌细胞株PC-3可显著抑制细胞中STAT3 mRNA和蛋白的表达水平(抑制率分别为52.4%及50.5%),且细胞增殖活性亦较未转染PC-3细胞显著降低(p＜0.05).结论运用pSilencerTM2.1-U6载体构建的STAT3-siRNA表达载体可有效抑制STAT3的表达及前列腺癌细胞的增殖.
作者：吴健；王方金；何蕴韶 刊期： 2005年第01期
目的研究转移相关基因VEGF-C在非小细胞肺癌中的表达及其临床意义.方法应用免疫组化方法检测76例非小细胞肺癌中的VEGF-C的表达情况.结果VEGF-C在肺癌的不同组织类型之间无明显差异;在高分化组与低分化组之间无统计学意义;但晚期病例VEGF-C表达高于早期病例(P＞0.05);VEGF-C的阳性率在淋巴结转移组明显高于无淋巴结转移组.VEGF-C阳性组术后4年生存率显著低于阴性组(P＜0.05).结论VEGF-C与非小细胞肺癌的淋巴结转移密切相关,与肿瘤恶性程度、预后有一定的关系.
作者：陈敏；唐建武 刊期： 2005年第01期
目的分析吲哚美辛(indomethacin,IN)对人结肠癌细胞系HCT116蛋白质表达谱的影响,为研究IN抗结肠癌作用的相关蛋白提供新的方法.方法应用固相pH梯度(immobilized pH gradient,IPG)双向凝胶电泳技术(two-dimensional gel electrophoresis,2-DE)分离IN-处理组和未处理组HCT116细胞的总蛋白,银染显色,ImageMaster 2D图像分析软件比较分析IN-处理组和未处理组HCT116细胞系的双向凝胶电泳图谱并识别差异表达的蛋白质.结果获得了背景清晰、分辨率高、重复性好的HCT116细胞系的双向凝胶电泳图谱,IN-未处理组与处理组蛋白质点数为:1256±50,1169±36;匹配率为:93.0%,90.6%.IN-未处理组的3块胶在蛋白质点位置上有较好的重复性,不同胶间蛋白质点在等电聚焦(isoelectric focusing,IEF)方向的偏差是0.896±0.177 mm,在十二烷基磺酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodiumdo-decylsufate-polyacrylamide gelelectrophoresis,SDS-PAGE)方向的偏差为1.106±0.289 mm.比较分析IN-处理组和未处理组HCT116细胞的双向凝胶电泳图谱,发现IN-处理组和未处理组共有45个差异点,IN-处理组有9个蛋白质点表达上调,34个蛋白质点表达下调,2个蛋白质点仅在IN-未处理组表达.结论首次建立了IN-处理和未处理HCT116细胞的双向凝胶电泳图谱,识别了45个差异表达的蛋白质点,对这些差异蛋白质点的鉴定将为揭示IN抗结肠癌作用的机理提供实验依据.
作者：程艳丽；张桂英；肖志强 刊期： 2005年第01期
目的以急性T淋巴细胞白血病细胞株MOLT-4为模型,探讨作用于细胞周期相同或不同时相的放疗/化疗药物联合应用时是否具有抗癌增效作用、引起细胞凋亡的周期时相性是否发生改变及对细胞周期检测点(ckeckpoint)的影响.方法分别将作用于G1期的X-ray(10 Gy)及药物金克(JinKe)(2.0 g/L);S期的喜树碱(CPT)(0.25μmol/L)及阿糖胞苷(Ara-C)(1.00μmol/L);G2/M期的药物威猛(Vm-26)(0.5μg/mL)及长春花碱(Vinblastine,Vin)(0.05μg/mL)分别联合分组应用对其进行不同时间段的培养,采用流式细胞术中的API法对凋亡细胞进行定量并对凋亡细胞的周期时相性进行定位检测.结果G1期的药物JinKe和X-ray(10 Gy)联合应用时,具有协同作用,其作用点仍以G1期细胞为主.S期的两种药物CPT和Ara-C联合应用时,两者也具有协同作用,其细胞周期作用点仍以S期为主.作用于G2/M期的两种药物VM-26和Vin联合应用时,两者还是具有协同作用,但其细胞周期作用点几乎发生在细胞周期的所有时相.作用于G1期的药物JinKe和作用于S期的药物CPT联合应用,具有增强效应,联合应用时其细胞周期作用点以G1期和S期细胞为主.作用于G1期的药物金克和作用于G2/M期的药物VM-26联合应用,两者具有增强效应.作用于G2/M期的Vin和作用于S期的药物CPT联合应用,两者具有增强效应.联合应用时其细胞周期作用点主要以S期细胞为主,并有少量的G2/M期细胞.结论作用于细胞周期同一时相的药物联合应用时,可在各自的检测点发挥协同作用;不同时相的药物联合应用时,均在各自的检测点发挥增强效应.
作者：喻春钊；陶德定；冯永东；余源；吴剑宏；龚建平 刊期： 2005年第01期
目的探讨后纵隔哑铃状神经源性肿瘤的切除方法.方法1994年6月～2003年5月经胸联合后正中径路切除后纵隔哑铃状神经源性肿瘤4例,其中神经纤维瘤3例,神经鞘瘤1例.全部病人均选择经胸联合后正中径路切除肿瘤.结果4例肿瘤均全部切除,症状均有不同程度改善,术后病人均能正常生活,未见肿瘤复发.结论经胸联合后正中径路一期切除后纵隔哑铃状神经源性肿瘤是安全可靠的手术方式.
作者：陈和忠；邹良建；徐志云；梅举；张宝仁；赵杰；王家林；侯铁胜 刊期： 2005年第01期
目的探讨人肺癌细胞及胚肺细胞对氨基硅烷纳米Fe3O4颗粒的吞噬行为的生物学特性及二者之间吞噬特性的差异.方法分别培养肺腺癌细胞株SPC-A1及人胚肺细胞株WI-38至对数生长期,更换为分散有氨基硅烷纳米Fe3O4颗粒的培养液,经培养1、3、6 h,分别取所培养的细胞进行超微结构观察.另取培养6 h的部分SPC-A1细胞传代培养,并对每一代细胞作超微结构观察.结果培养1 h氨基硅烷纳米Fe3O4颗粒即已能进入癌细胞SPC-A1的细胞质,培养至6 h已见有大量颗粒成簇进入细胞质内.然而,在同一的条件下,培养6 h后仍未观察到氨基硅烷纳米Fe3O4颗粒进入WI-38细胞.经吞噬了氨基硅烷纳米Fe3O4颗粒的SPC-A1肺癌细胞传至10代后仍生长良好,且在第7代仍然能观察到细胞内存在纳米颗粒并且未出现团聚现象.结论在同一细胞培养的条件下,肺癌细胞SPC-A1明显地比胚肺细胞WI-38更易吞噬氨基硅烷纳米Fe3O4颗粒,且前6h内未观察到纳米颗粒进入WI-38细胞.凡进入癌细胞内的纳米Fe3O4颗粒具有良好的生物相容性并在细胞中停留数代之久且保持良好的分散状态.根据本实验研究的结果进一步提示采用Fe3O4纳米颗粒将开拓一条颇有潜在性价值的纳米颗粒对肿瘤治疗的临床应用途径.
作者：马勇杰；李红；许凯黎；古宏晨 刊期： 2005年第01期
目的了解中国人hMLH1基因T1151A多态与胃肠道肿瘤的遗传易感性.方法采用病例对照研究设计,提取233例大肠癌(结,直肠癌)患者,273例胃癌患者和268例健康人外周血细胞的基因组DNA.PCR扩增hMLH1基因T1151A多态所在第12外显子的部分DNA片段(217 bp),变性高效液相色谱(DHPLC)检测,DNA测序验证,比较分析T1151A基因型在胃肠道肿瘤的分布.结果正常人群中T1151A多态T/A基因型频率为6.34%,其等位基因A频率为3.28%,在大肠癌患者和胃癌患者中T/A基因型频率与正常人群相比存在显著性差异,分别为11.6%(P=0.039)和12.1%(P=0.021),尤其在＜45岁的大肠癌患者和＜50岁的胃癌患者中,等位基因A频率与正常人群相比差异更为显著,分别为10.66%(P=0.002)和11.27%(P=0.001).结论T1151A作为中国人hMLH1基因上的一个多态位点,可能是中国人大肠癌和胃癌遗传易感因素,可作为中国人胃及大肠肿瘤、尤其是低龄胃及大肠肿瘤高危人群筛选的侯选指标.
作者：张晓梅；吴晓柳；李金田；王亚平 刊期： 2005年第01期
目的MRP-1/CD9是穿膜四超家族成员之一,具有抑制细胞移动的功能,本研究旨在探讨其在肺癌组织中的表达情况及与病理分级、临床分期、转移与预后的关系.方法应用组织芯片技术,采用免疫组化S-P方法检测54例肺癌组织和10例同期正常肺组织中MRP-1/CD9的表达.统计学方法采用x2检验,检验水准为a=0.05.结果MRP-1/CD9在肺癌组织中阳性率为42.60%,与正常肺组织相比表达下调,统计学上具有显著性差异(P＜0.05);其蛋白表达情况与患者的年龄、性别、肿瘤肉眼类型无关,而与肿瘤的组织学类型、临床分期、分化程度、淋巴结转移有关.其中非小细胞肺癌(NSCLC)组表达显著高于小细胞肺癌(SCLC)组;高-中分化组高于低-未分化组;早期(Ⅰ+Ⅱ)组高于中晚期(Ⅲ+Ⅳ)组;无淋巴结转移组高于有淋巴结转移组,均具有显著性意义(P＜0.05).结论肺癌的进展可能与MRP-1/CD9的表达下调密切相关,尤其小细胞肺癌MRP-1/CD9的表达缺失更具有重要意义;MRP-1/CD9的表达降低促进了肿瘤的淋巴结转移,此指标有望成为判断肿瘤预后的新标志.
作者：王新允；刘婷；郑海燕；朱丛中；李艳；孙锐 刊期： 2005年第01期
目的比较药物大剂量冲击法和浓度梯度递增法建立的人肝癌多药耐药模型的生物学特性.方法分别采用药物大剂量冲击法和浓度梯度递增法建立人肝癌阿霉素(adriamycin,ADM)多药耐药细胞亚系HepG2/ADMs和HepG2/ADMi.MTT法检测两种细胞对多种化疗药的敏感性,细胞计数法绘制生长曲线并用公式法计算倍增时间,流式细胞术检测细胞周期以及细胞对药物的摄入和外排.并将细胞接种于裸鼠,观察成瘤率及瘤体大小.结果以含1μg/mL ADM的培养液进行筛选,3个月共筛选4次,所得细胞亚系命名为HepG2/ADMs,其对ADM的耐药指数为30.5.浓度梯度递增法诱导3个月后,细胞可以在含0.4 μg/mL ADM的培养液中正常生长增殖,对ADM的耐药指数为51,将该细胞亚系命名为HepG2/AD-Mi;MTT法检测显示,两种细胞系不仅对ADM耐药,而且对其它化疗药也有抗性,呈现多药耐药特性,但HepG2/ADMs对药物的敏感性普遍高于HepG2/ADMi.与HepG2/ADMi相比,HepG2/ADMs的倍增时间相对较短,G0/G1期细胞相对较少,G2/M期细胞相对较多,细胞对ADM的摄入较多,外排较少,表现为药物的滞留率较高.动物实验发现HepG2/ADMs的成瘤率明显高于HepG2/ADMi(90%vs 3.33%),且肿瘤生长速度较快,体积较大.结论药物大剂量冲击法和浓度梯度递增法建立的多药耐药模型有很大差异,前者更接近临床耐药现象.
作者：邵泽勇；沈鼎明；伍烽；翟宝进；王智彪 刊期： 2005年第01期
目的探讨肝动脉插管灌注化疗栓塞与高聚生素联合治疗中晚期肝癌的效果.方法对32例中晚期原发性肝癌采用经肝动脉插管灌注化疗栓塞(TACE)联合高聚生素进行治疗(A组);同时对32例对照患者单纯进行肝动脉插管灌注化疗栓塞治疗(B组).结果①A组部分缓解率为71.8%(23/32),高于B组部分缓解率50.0%(16/32)两组比较有差异(P＜0.05)②A组中位生存期为22.3月,B组为15.7月,两组比较有显著差异(P＜0.01).1年、2年生存率A组分别为68.8%(22/32)和53.1%(17/32);均高于B组的46.9%(15/32)和31.2%(10/32)两组比较有差异(P＜0.05)③A组CD3、CD4、CD4/CD8比值均有不同程度升高,sIL-2R水平下降,而B组则相反.结论TACE与高聚生素有协同治疗中晚期肝癌的作用,不但显著提高治疗效果,而且明显提高患者的免疫功能.
作者：蒙志斌；马亦龙；康平；李志坤；欧盛秋 刊期： 2005年第01期
白喉毒素(Diphtheria toxin,DT)是白喉杆菌产生的细菌外毒素,它可以使机体产生严重的中毒反应,1～2个分子就可以杀灭一个细胞.随着医学科学的进展,目前对白喉毒素的结构和性质都已经很清楚,并且正在利用其毒性反应进行抗肿瘤治疗.本文对近年来这方面的进展进行简单的综述.
作者：冯岗；赵忠全；王东林 刊期： 2005年第01期
目的检测胰腺癌中p33ING1b蛋白表达及基因变化情况,以了解p33ING1b在肿瘤发生过程中的作用.方法采用免疫组化、聚合酶链反应单链构象多态性技术(PCR-SSCP)和杂合型缺失(LOH)技术,检测胰腺癌中p33ING1b表达及p33ING1b基因变化情况.结果ING1b蛋白的阳性表达率为85%(34/40),SSCP显示在40例病例中仅1例突变,LOH率为60.9%(14/23).结论突变与缺失表达并不是p33ING1b的主要失活形式,染色体改变可能导致p33ING1b功能下降,从而引发肿瘤发生.
作者：于观贞；朱明华；祝峙；倪灿荣；陈颖；李芳梅 刊期： 2005年第01期
畸胎瘤是卵巢常见的肿瘤之一,其中97%为成熟畸胎瘤(成熟性囊性畸胎瘤),3%为未成熟畸胎瘤.发生于任何年龄,以20～40岁居多,多为单侧,双侧占10%～17%,成熟囊性畸胎瘤恶变率为2%～4%.
作者：陈文雪；吴小华；田素美；李芹 刊期： 2005年第01期
目的研究温郁金对人胃癌裸鼠移植瘤生长的抑制作用和对血管内皮生长因子(VEGF)的表达和微血管密度(MVD)的影响.方法采用人胃癌SGC7901细胞株种植裸小鼠皮下建立胃癌移植瘤模型.自肿瘤种植后,待肿瘤生长到2 mm时开始给药,每日2次,连续7周,每周测量瘤体的大小.第7周处死动物,测定肿瘤重量,免疫组化ElivisionTM plus法测定VEGF及肿瘤内MVD.结果温郁金治疗组瘤重和体积明显低于对照组,VEGF表达的程度和MVD计数明显低于对照组.结论温郁金对人胃癌裸鼠移植瘤的生长具有明显的抑制作用,可下调瘤灶中VEGF的表达,减少肿瘤灶内的MVD.
作者：王佳林；吕宾；倪桂宝；麻林爱；徐毅 刊期： 2005年第01期
目的探讨Fas相关磷酸酯酶-1(FAP-1)对卵巢癌细胞株SKOV3凋亡的影响.方法采用免疫印记法(Western blot)和逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)方法,检测了经FAP-1反义寡核苷酸(FAP-1ASODN)封闭前后FAP-1蛋白与核酸在卵巢癌细胞株SKOV3中的表达水平;应用四唑盐比色法(MTT法)和流式细胞术(FCM)检测了经抗Fas激活性抗体DX2诱导凋亡后FAP-1分子对SKOV3细胞凋亡行为的影响.结果FAP-1蛋白与mRNA在卵巢癌细胞株SKOV3中均有明显表达.当用DX2以不同时间和不同浓度诱导凋亡后,DX2+FAP-1ASODN组在12、24、48和72 h的细胞抑制率约为DX2组的1～2倍,细胞凋亡率约为后者的2～4倍,差异有显著性(P＜0.05,P＜0.01);在DX2低、中、高3个浓度时,DX2+FAP-1ASODN组的细胞抑制率为(20.94±1.15)%、(34.70±1.24)%、(45.45±2.80)%,DX2组分别为(11.42±0.38)%、(18.33±1.29)%、(28.75±1.81)%,差异有显著性(P＜0.05,P＜0.01);而在DX2组与DX2+FAP-1SODN组间无显著性差异(P＞0.05).结论FAP-1分子在卵巢癌细胞SKOV3中有明显表达,且具有抵抗Fas介导凋亡的功能,而FAP-1ASODN可以明显提高卵巢癌细胞对凋亡的敏感性,可能对卵巢癌的发病与治疗具有重要意义.
作者：王滨；郑维国；辛晓燕；齐荣义；于月成；曹云新 刊期： 2005年第01期
目的研究喉癌组织中环氧化酶-2(COX-2)的表达与临床病理参数及VEGF、MVD的关系,并探讨其临床价值.方法采用免疫组化技术检测40例喉癌组织中COX-2、VEGF的表达情况,用CD34标记新生血管内皮细胞,在显微镜下观察微血管密度.结果喉癌组织中COX-2、VEGF的阳性表达率分别为67.5%(27/40)和80%(32/40),MVD平均为52.46±16.96条/200倍视野.与声带息肉及癌周正常组织相比,肿瘤组织中COX-2、VEGF表达及MVD明显增加,COX-2表达与肿瘤临床分期有关.COX-2表达与VEGF有显著相关性,且COX-2、VEGF表达阳性者MVD明显增加.结论喉癌组织中存在COX-2的高表达.COX-2与肿瘤新生血管形成有关,它可通过增加VEGF的表达促进肿瘤血管形成,从而促进喉癌的生长和转移.
作者：姜振华；潘新良；栾信庸；贺勇 刊期： 2005年第01期
目的神经干细胞分化障碍是否是神经胶质瘤发生的原因尚未定论,主要是分子变化规律还未阐明.本研究旨在探讨神经干细胞与神经节细胞胶质瘤分化的相关基因,为阐明胶质瘤起源的细胞分子病因创造条件.方法对自建的神经节细胞胶质瘤恶变为多形性胶质母细胞瘤基因表达谱中的分化发育相关基因进行生物信息学聚类筛选,所得基因用RT-PCR方法检测其在体外培养神经干细胞分化过程中的表达变化.结果基因谱中的CXCR4、TN-C、GLT1、IL1-RI、EGFR-8、CDC2、Ndr3和MAPKK4共8条基因的表达变化与神经干细胞分化相关,其中GLT1、CDC2和MAPKK4基因随神经干细胞分化而表达量下降,随神经节细胞胶质瘤恶性进展而表达量增高.结论源于神经干细胞分化障碍所致的神经节细胞胶质瘤的进一步恶变(去分化)与神经干细胞分化过程中的基因GLT1、CDC2和MAPKK4等表达量呈负相关,在延伸研究中可作为胶质瘤起源细胞的分子病因的目标基因作诸如RNA干扰、基因转染或敲除等功能研究.
作者：黄强；王爱东；董军；王飞；孙继勇；兰青 刊期： 2005年第01期
食管鳞状上皮不典型增生(dysplasia)包括轻度、中度和重度三个级别.本文报告82例重度不典型增生(SD)的6年随访结果.
作者：陈志峰；王国清；侯浚；宋国辉；李绍森；乔翠云；张健慧 刊期： 2005年第01期
目的探讨WT1(17AA+/-)剪接变异体表达的改变与NB4细胞诱导分化的关系.方法建立了实时定量RT-PCR方法检测看家基因GAPDH、WT1基因及其WT1(17AA+)剪接变异体的表达水平,以同一份标本(WT1拷贝数/GAPDH拷贝数)×104来计算WT1表达水平,定义为WT1N(normalized WT1 expressionlevel),同样定义WT1(17AA+)N,并用流式细胞仪检测NB4细胞表面抗原CD11b的变化.结果随着NB4细胞向粒系终末分化WT1基因及其WT1(17AA+)剪接变异体的表达水平迅速下降,全反式维甲酸(ATRA)作用0,6,12,18,24,48,72 h后WT1N的平均表达水平分别为191.11,121.17,66.72,43.47,18.29,4.04和3.79,WT1(17AA+)N剪接变异体的表达水平分别为105.12,46.89,20.50,10.38,8.85,2.16和1.92,两者均与CD11b的变化呈负相关(r=-0.65,P＜0.01;r=-0.77,P＜0.01),而且值得注意的是在AT-RA作用后开始的18 h内,WT1(17AA+)N/WT1N比值逐渐下降,24 h后与药物作用前水平无统计学差异,表明在ATRA诱导NB4细胞分化早期以WT1(17AA+)剪接变异体表达下降为主.结论WTl基因高表达与NB4白血病细胞分化阻滞有关,WT1(17AA+)剪接变异体可能在分化阻滞中起主要作用.
作者：顾伟英；陈子兴；胡绍燕；朱江；董选；沈慧玲；盛立霞 刊期： 2005年第01期
肿瘤杂志
主管:中华人民共和国教育部
主办：上海市肿瘤研究所 上海交通大学医学院附属仁济医院
