学术投稿

RNA干扰抑制端粒酶反转录酶对晶状体上皮细胞增殖的影响

蒋永祥;吴新华;卢奕

关键词:端粒酶反转录酶, RNA干扰, 晶状体, 上皮细胞
摘要:目的 探讨RNA干扰(RNAi)抑制端粒酶反转录酶(TERT)对晶状体上皮细胞(LEC)增殖的影响.方法 收集培养的LEC和视网膜色素上皮细胞(RPEC),用半定量反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测二者内源性TERT的表达差异;人工合成TERT小分子干扰RNA(siRNA)片段,用LipofectamineTM2000转染LEC,实时PCR检测TERT基因表达的变化.LipofectamineTM 2000 TERT siRNAi持续转染LEC和RPEC 96 h,细胞计数试剂盒8(CCK-8)检测TERT siRNAi对LEC和RPEC增殖的影响.结果 RPEC中未见TERT表达,LEC中有低水平TERT表达.TERT siRNA转染LEC 48 h后,siRNA组TERT相对表达水平(0.20±0.01)与阴性对照组(1.00±0.03)相比,差异有统计学意义(P<0.05).TERT siRNA转染LEC和RPEC 96 h后,CCK-8试剂盒检测细胞的增殖抑制情况显示:LEC siRNA组LEC活性(0.55±0.04)与LEC阴性对照组(0.79±0.02)相比,差异有统计学意义(P<0.05);转染的RPEC siRNA组RPEC活性(1.13±0.04)与阴性对照组RPEC活性(1.16±0.01)相比,差异无统计学意义(P>0.05).结论 较长时间RNAi TERT能有效抑制LEC增殖,但对RPEC无明显抑制作用.
中国眼耳鼻喉科杂志相关文献
  • 玻璃体晶状体切除保留前囊膜治疗复杂性眼外伤的疗效观察

    复杂性眼外伤不仅导致眼前段结构紊乱,如角膜、巩膜裂伤,晶状体损伤或脱位,还常常伴有后段损伤,如玻璃体积血、眼内异物或合并视网膜脱离.随着玻璃体手术的进展,玻璃体视网膜手术联合晶状体切除术已成为复杂眼外伤治疗的常规手术[1].2005年6月以来,我们对30例眼外伤需行晶状体和玻璃体切除的患者,在术中保留晶状体前囊膜,为植入后房型人工晶状体(intraocular lens,IOL)创造条件,现将结果报告如下.

    作者:王晓敏;卢奕;姜春晖 刊期: 2012年第03期

  • 试题与答案

    下列哪一项不是目前广泛认可的增生性玻璃体视网膜病变(PVR)的独立危险因素:A.应用玻璃体切除术治疗视网膜脱离;B.术前存在孕灾砸;C.前有脉络膜脱离;D.巨大视网膜裂孔;E.应用冷凝黏结术处理了一大片视网膜区域.

    作者:沈旭中;江睿;褚仁远 刊期: 2012年第03期

  • 介入治疗在头颈部恶性肿瘤治疗中的应用

    介入治疗是在20世纪中后期发展起来的新兴学科,与肿瘤诊疗联系密切.目前介入治疗在肝脏恶性肿瘤的治疗上获得巨大发展.头颈部肿瘤介入化疗起源较早,由于头面部区域的供血动脉相对固定,加上头面部肿瘤血供丰富,因此头面部恶性肿瘤适合介入治疗.目前头颈部介入治疗可用于手术前的辅助治疗、晚期肿瘤出血的对症治疗、复发/转移性头颈部肿瘤的姑息治疗,对于以功能保存为目的的晚期头颈部癌,超选择动脉给药具有一定前景.

    作者:丁浩 刊期: 2012年第03期

  • 白内障超声乳化术中切口下皮质的处理

    目的 寻找一种安全、简便的完全清除白内障超声乳化术中切口下皮质的方法.方法 在本科白内障超声乳化术中用常规I/A直头注吸皮质,切口下皮质清除不完全的47例,按手术奇偶数顺序改用带角度的超声乳化注吸头注吸24例,用自制钝弯针头干吸23例,观察皮质清出效果.结果 23例用钝弯针头干吸患者皮质全部清除干净.用带角度超声乳化注吸头组中3例患者切口下残余皮质注吸干净,其余21例改用钝弯针头干吸,皮质清除干净.钝弯针头干吸均在2 min内完成,2例囊袋裂开,1例后囊膜破裂,均一期植入人工晶状体.结论 白内障超声乳化手术中切口下皮质的处理,带角度的注吸头与直头相比无明显优势,用钝弯针头干吸效果明显、安全,可以作为有益补充.

    作者:成仲夏;段灵 刊期: 2012年第03期

  • RNA干扰抑制端粒酶反转录酶对晶状体上皮细胞增殖的影响

    目的 探讨RNA干扰(RNAi)抑制端粒酶反转录酶(TERT)对晶状体上皮细胞(LEC)增殖的影响.方法 收集培养的LEC和视网膜色素上皮细胞(RPEC),用半定量反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测二者内源性TERT的表达差异;人工合成TERT小分子干扰RNA(siRNA)片段,用LipofectamineTM2000转染LEC,实时PCR检测TERT基因表达的变化.LipofectamineTM 2000 TERT siRNAi持续转染LEC和RPEC 96 h,细胞计数试剂盒8(CCK-8)检测TERT siRNAi对LEC和RPEC增殖的影响.结果 RPEC中未见TERT表达,LEC中有低水平TERT表达.TERT siRNA转染LEC 48 h后,siRNA组TERT相对表达水平(0.20±0.01)与阴性对照组(1.00±0.03)相比,差异有统计学意义(P<0.05).TERT siRNA转染LEC和RPEC 96 h后,CCK-8试剂盒检测细胞的增殖抑制情况显示:LEC siRNA组LEC活性(0.55±0.04)与LEC阴性对照组(0.79±0.02)相比,差异有统计学意义(P<0.05);转染的RPEC siRNA组RPEC活性(1.13±0.04)与阴性对照组RPEC活性(1.16±0.01)相比,差异无统计学意义(P>0.05).结论 较长时间RNAi TERT能有效抑制LEC增殖,但对RPEC无明显抑制作用.

    作者:蒋永祥;吴新华;卢奕 刊期: 2012年第03期

  • 小儿呼吸道特殊异物治疗体会

    小儿呼吸道特殊异物取出术难度高、风险大,且并发症多,死亡率高,故气管切开术的应用率较高.本文总结了本科收治的31例小儿呼吸道特殊异物的取出经验,认为手术宜在全身麻醉下进行,并尽量避免气管切开,以减少患儿痛苦或并发症的发生,报告如下.

    作者:王小妹 刊期: 2012年第03期

  • 耳内镜下Nd:YAG激光鼓膜造孔治疗分泌性中耳炎76例

    分泌性中耳炎(secretory otitis media,SOM)是以鼓室积液和听力下降为主要临床特征的中耳非化脓性炎症,治疗不当可遗留听力障碍.本科自2007年10月起,采用耳内镜下Nd:YAG激光鼓膜造孔术治疗SOM 76例,取得较好疗效,报告如下.

    作者:孙伟忠;赖余胜 刊期: 2012年第03期

  • 两种光学生物测量仪测算人工晶状体度数的比较研究

    目的 比较光学低相干反射仪LENSTAR和光学相干生物测量仪IOL Master测算人工晶状体(IOL)度数的差异,分析两者的精确性和一致性.方法 72例(122眼)自内障患者术前分别用LENSTAR和IOL Master两种光学生物测量仪测量眼轴长度(AL)、角膜屈光度(K1和K2)和前房深度(ACD),并分别应用SRK Ⅱ、SRK/T、Hoffer Q、Holladay和Haigis公式计算拟植入AcrySof SA60AT IOL的度数,术后目标屈光度为正视.结果 两种测量仪所得参数:AL差异为(0.02±0.10)mm,ACD差异为(-0.02±0.17)mm,差异均无统计学意义(P>0.05);K1、K2和(K1+K2)/2差异分别为(-0.05±0.21)D、(-0.12±0.20)D和(-0.08±0.14)D,差异有统计学意义(P<0.05).两种测量仪测量的参数AL、K1、K2和ACD的Pearson r值分别是0.999、0.991、0.992和0.927,具有良好的相关性.应用5种IOL度数计算公式得出的IOL度数在两种测量仪之间,差异无统计学意义,有良好的一致性.结论 LENSTAR和IOL Master测量仪在测量结果和计算IOL度数方面有良好的相关性和一致性,均可用于白内障手术前精确的IOL度数测算.

    作者:生晖;卢奕 刊期: 2012年第03期

  • 现代视功能检查在微创白内障手术中的应用意义

    随着微创白内障手术的发展和日趋增多的新型人工晶状体(IOL)的临床应用,患者的功能性视力得到越来越大的提高.以往临床上一直作为评价术后疗效的主要指标--裸眼及佳矫正视力,已很难涵盖视觉质量的全部内容.本文介绍功能性视力、波前像差、视网膜散射光、点扩散函数、调制传递函数、对比敏感度等现代视功能检查及其在白内障手术中的应用原理和临床意义.这些检查不仅对白内障的早期诊断、手术适应证把握、手术并发症处理、个性化IOL选择及植入术后视觉质量的评价有重要指导意义,而且有助于客观分析白内障术后患者主观视觉质量差的原因并加以处理.熟悉围术期视觉质量评价的内容和意义,有助于提高白内障的手术水平,使患者获得更好的术后视觉质量.

    作者:蒋永祥;卢奕 刊期: 2012年第03期

  • 角膜曲率计引导下透明角膜切口矫正白内障合并角膜散光的临床观察

    年龄相关性白内障患者常合并不同程度的角膜散光,而术后角膜散光是影响白内障术后视功能恢复的主要因素之一.因此,探索白内障手术同时如何安全有效、简便易行矫正术前已存在的角膜散光方法非常必要.本科自2010年1月起,采用角膜曲率计引导下3.2 mm透明角膜大曲率子午线轴向切口,矫正白内障合并低度角膜散光,通过3个月随访观察,取得了较为满意效果,现报告如下.

    作者:陶静;周伟 刊期: 2012年第03期

  • 深海盐水鼻腔灌洗在慢性鼻窦炎治疗中的临床应用价值评估

    目的 探讨深海盐水鼻腔灌洗在慢性鼻窦炎治疗中的临床应用价值.方法 对96例慢性鼻窦炎患者行深海盐水鼻腔灌洗,比较治疗前后的鼻腔环境及症状情况.结果 96例患者经深海盐水鼻腔灌洗治疗,治愈62例(64.58%)、显效15例(15.63%)、有效8例(8.33%)、无效11例(11.46%),总有效率为88.54%(85/96).患者鼻塞、流脓涕和鼻源性头痛等症状均有不同程度改善.结论 深海盐水鼻腔灌洗具有疗效确切、操作简便、安全、价廉、患者易接受等优点,值得临床推广.

    作者:渠晨晖;寿建伟;郭艳;余晓旭;吴跃煌 刊期: 2012年第03期

  • 角膜地形图仪评价白内障患者术前泪膜分布特征的研究

    目的 初步阐述年龄相关性白内障患者术前泪膜的分布特征及破裂规律.方法 选取于本院白内障专科门诊就诊的年龄相关性白内障患者82例(150眼),检测泪膜破裂时间、基础泪液分泌试验及角结膜荧光素染色,行四代角膜地形图仪泪膜分析系统检测.结果 以60岁及75岁为分段点,各年龄组之间干眼患病率,差异无统计学意义(χ2=1.017,P=0.601);所有参评眼的泪膜首次破裂位点均集中于下方泪膜,且干眼者的泪膜首次破裂位点分布区域明显大于非干眼者.结论 四代角膜地形图仪能够非侵入式精确地评估白内障患者术前泪膜首次破裂的位置及泪膜的动态变化,为白内障围术期干眼的预防和控制提供了有效的依据.

    作者:叶鸿飞;蒋永祥;卢奕 刊期: 2012年第03期

  • 人晶状体细胞膜衰老模型的建立

    目的 建立人晶状体细胞膜年龄相关性改变的体外实验模型.方法 取3对完整晶状体(30、41、63岁),将每对中的1个晶状体经50℃加热20 h,与对侧未加热的晶状体均行冷冻切片.将上述切片行6-酰基-2-二甲氨基萘染色,然后在双光子共聚焦显微镜下观察.测量距晶状体中心处不同位点的总极化图像灰度(即总极化值),以评估相应位点细胞膜流动性的变化.另取2个晶状体(28、47岁)的冷冻切片,将切片于50℃加热20 h,观察加热与未加热切片的细胞膜流动性改变情况.结果 完整晶状体经加热后,中央区域的细胞膜流动性较对侧未加热晶状体明显增加,加热后的晶状体切片较加热前细胞膜流动性亦明显增加.结论 晶状体50℃加热是模拟晶状体细胞膜流动性年龄相关性改变的有效模型,可用于晶状体细胞膜流动性方面的研究.

    作者:竺向佳;叶鸿飞;卢奕 刊期: 2012年第03期

  • 变应性鼻炎特异性免疫治疗近期疗效及安全性分析

    目的 探讨单一屋尘螨变应原特异性免疫治疗(SIT)对变应性鼻炎(AR)的近期疗效及安全性.方法 将65例常年性AR患者分为SIT组和药物治疗组.SIT组30例,根据皮肤点刺试验分为SIT-1组(仅对屋尘螨过敏)和SIT-2组(对包括屋尘螨在内的2种或以上变应原过敏),均接受皮下注射屋尘螨变应原进行SIT;药物治疗组35例,按变应性鼻炎及其对哮喘的影响指南给予抗组胺药及糖皮质激素等规范药物治疗.记录所有患者治疗前及开始治疗至疗程达1年后的症状评分和药物评分;以及治疗期间的不良反应发生情况.结果 治疗1年后,SIT组症状及药物评分均较治疗前明显减少(P<0.01),但SIT-1组和SIT-2组间疗效未见明显差异(P>0.05);SIT组的症状及药物评分均明显低于药物治疗组(P<0.01).治疗过程中未发生严重不良反应.结论 单一屋尘螨变应原SIT对AR短期是安全、有效的.

    作者:王金辉;申慧梅;赵长青 刊期: 2012年第03期

  • 以睡觉憋气为表现的咽旁神经母细胞瘤1例

    资料患儿女性,5个月14 d.因睡觉伴憋气20余天入院.患儿20余天前无明显诱因出现睡觉憋气,有吸气性喉喘鸣;近3 d出现发热,伴声嘶.无吞咽困难,无昏迷、呕吐.入院时体格检查:体温36.9℃,脉搏137次/min,呼吸30次/min;皮肤灰白,精神状态较差;咽部红,右侧咽后壁彭隆,少许声嘶,喉鸣,Ⅲ度喉梗阻;双肺呼吸音粗,心音有力、律齐.外院CT扫描:颈部类圆形软组织密度影,考虑炎性病变.入院诊断:颈部间隙感染可能.当天在直接喉镜下行右侧咽后壁膨隆处穿刺,未抽出液体,取少许组织行活组织检查,报告示纤维组织.颈部CT扫描:左颈部咽侧占位性病变.患者在清醒安静状态、未吸氧时的血氧饱和度为80%~95%,睡觉、吸氧状态下的血氧饱和度为60%~90%.因患儿家属不同意气管切开,遂予静脉滴注抗生素及雾化治疗.

    作者:高映勤;马静;林垦 刊期: 2012年第03期

  • 慢性鼻-鼻窦炎鼻内镜鼻窦手术疗效的主客观评估应用

    随着内镜鼻窦手术的技术日臻完善,针对术后临床结局的主客观评估方法得到了发展.主客观评估有助于医务人员对慢性鼻-鼻窦炎患者病情及生活质量进行评估和诊治,本文就主客观评估的临床应用作一综述.

    作者:王安琪;王士礼;蔡昌枰 刊期: 2012年第03期

  • 糖皮质激素局部应用方法对鼻内镜术后疗效的影响

    慢性鼻-鼻窦炎是耳鼻咽喉头颈外科常见病和多发病,鼻内镜手术的开展大大提高了该病的治愈率.近年来,越来越多的临床研究认为,鼻内镜术后糖皮质激素的局部应用对于加快术腔恢复,防止疾病复发有明显的积极作用.临床常用的给药方法为鼻喷剂喷鼻.本科在鼻内镜术后以鼻腔雾化方式应用糖皮质激素,并对术腔黏膜的转归进行了观察,报告如下.

    作者:张大弓;高艺玲;肖柳 刊期: 2012年第03期

  • 改良超声乳化联合小梁切除术的临床应用

    目的 探讨改良超声乳化联合小梁切除术治疗青光眼合并白内障的可行性及临床效果.方法 对21例(21眼)青光眼合并白内障患者施行改良白内障超声乳化联合巩膜隧道切口内的小梁切除术,术后随访观察视力、眼压、滤过泡、人工晶状体位置等情况.结果 术后平均随访1年,18眼术后视力均有不同程度提高.指数者2眼,<0.1者1眼,0.1~0.3者5眼,0.3以上者13眼,术后眼压均在正常范围,平均眼压为(12.32±4.06)mm Hg(1 mm Hg=0.133 kPa).结论 改良白内障超声乳化及人工晶状体植入联合巩膜隧道内小梁切除术,可达到降眼压和提高视力的双重效果,是青光眼合并白内障较好的手术方法之一.

    作者:黄文丽;吕志刚 刊期: 2012年第03期

  • 两种多焦点人工晶状体植入术后视功能的比较研究

    目的 比较双眼植入ReSTOR+3 D非球面多焦点人工晶状体(MIOL)与ReSTOR+4 D球面MIOL后的术后视功能.方法 收集18例(36眼)植入ReSTOR+3 D MIOL(SN6AD1),15例(30眼)植入ReSTOR+4 D MIOL(SA6OD3)的病例.术后第2眼为标准,随访1年.检测两组患者的远、中、近视力及近立体视锐度,并进行相应统计学分析.结果 术后裸眼及佳远视力、近矫正视力两组差异无统计学意义(P>0.05).植入SN6AD1组患者的中距离视力(60 cm)好于植入SA60D3组患者(P<0.05).焦深曲线提示,SN6AD1组患者40~70 cm的中距离视力优于SA6OD3组,而SA6OD3的28 cm近视力优于SN6AD1组,两组裸眼近立体视锐度及矫正近视力后的立体视觉,差异均无统计学意义(P>0.05).结论 两种不同近附加度数的ReSTOR MIOL植入术后,均可获得良好的远、近视力及近立体视锐度;低度数附加的ReSTOR MIOL具有更为理想的全程视力,尤其在中距离视力上表现良好.

    作者:汤坚岑;张忆;蔡季平 刊期: 2012年第03期

  • 在高频喷射全身麻醉下用内镜取出小儿气管异物34例

    本科在电视监控鼻内镜全身麻醉下取小儿气管、支气管异物34例,效果良好,报告如下.1 资料与方法1.1 资料 2007年8月~2011年10月,本科收治的小儿气管、支气管异物患者34例,其中男性21例、女性13例.年龄5个月~14岁,平均30.8个月;其中1岁以下3例,1~2岁19例,2~14岁12例.病程1 h~50 d,平均6.28 d.异物部位:声门2例、气管8例、右主支气管17例、左主支气管5例、左下肺叶气管1例、右中下肺叶气管1例.异物种类:红瓜子12例,葵花籽4例,花生9例,花生壳1例,猪骨片3例,鸡爪骨头1例,软糖1例,塑料哨子3例.术前CT或胸部X线片示肺气肿7例,肺部感染10例.

    作者:邓碧凡;时培才;卢木娣;廖敏;邱荣敏;刘勇军;徐名开 刊期: 2012年第03期

中国眼耳鼻喉科杂志

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主管:中华人民共和国教育部

主办:复旦大学附属眼耳鼻喉科医院