李长香；程发峰；王雪茜；马重阳；朱文翔；张晓瑜；穆杰；杜欣；王庆国
目的:观察补中益气汤含药血清对转化生长因子-β1 (TGFβ1)介导的人肺腺癌A549细胞上皮间质转化过程中波形蛋白(Vimentin)及谷胱甘肽-S-转移酶π(GST-π)表达的影响.方法:制备不同浓度的补中益气汤含药血清作用于TGF-β1诱导的A549细胞,实验分组为空白血清组,空白血清+TGF-β1组以及高、中、低剂量补中益气汤含药血清+TGF-β1组.采用免疫组化、Western blot和Real-time PCR法分别检测Vimentin及GST-π 的蛋白和mRNA变化.结果:高、中、低剂量的补中益气汤含药血清均能使TGF-β l诱导的上皮间质化的A549细胞中Vimentin和GST-π蛋白表达下降,mRNA表达水平降低,其中高、中剂量组与空白血清组比,差异亦有统计学意义(P＜0.05,P＜0.01).结论:补中益气汤含药血清能抑制TGF-β1介导的A549细胞上皮间质化中Vimentin及GST-π的表达,改善其耐药性.
作者：唐莹；郭倩；于宁；刘春英 刊期： 2016年第05期
目的:探讨疼痛相关脑功能网络层面的偏头痛发病机制及针刺足临泣的穴位特异性效应机制.方法:选择符合标准的偏头痛患者15例和健康受试者13名进行静息态和针刺足临泣状态功能磁共振扫描,分别对比分析偏头痛患者与健康受试者及其针刺前后的疼痛相关脑区之间的功能连接度.结果:针刺前与针刺后,偏头痛患者与健康受试者比较,主要在左侧海马旁回、右侧(双侧)后扣带回及左侧角回的功能连接度均减弱;针刺后较针刺前,健康受试者在左侧海马旁回、缘上回、扣带回中部及岛叶等脑区的功能连接度减弱,而在右侧海马、右侧前扣带回及左侧杏仁核与左侧海马则增强;偏头痛患者针刺后较针刺前,则双侧中央后回、右侧海马旁回,双侧扣带回中部及左侧缘上回等脑区的功能连接度均不同程度增强.结论:偏头痛患者在疼痛相关网络的脑区功能连接度减弱,针刺足临泣后相关脑区功能连接度增强,可能分别为偏头痛的发病机制及针刺足临泣的即刻效应机制.
作者：刘宏伟；李匡时；宁艳哲；韩笑；谭中建；任毅；邹忆怀 刊期： 2016年第05期
目的:观察人参皂苷作用于星形胶质细胞对中风后神经干细胞增殖和分化的影响.方法:孕17d SD大鼠,分离培养NSCs和星形胶质细胞.利用Transwell装置将NSCs和星形胶质细胞共培养.设立正常组、模型组和人参皂苷给药组,于氧糖剥夺模型4h后2h、4h和6h三个时间点分别收集处理星形胶质细胞和共培养液,免疫荧光双标染色分析NSCs的增殖和分化情况,Western blot分析HIF-1 α蛋白表达情况,ELISA检测VEGF含量.结果:与正常组比较,2h、4h和6h模型组BrdU、Tuj-1和Vimentin面密度、光密度、阳性细胞数目均减少(P＜0.05,P＜0.01),人参皂苷给药组可显著增加各时间点BrdU、Tuj-1和Vimentin面密度、光密度、阳性细胞数目(P＜0.05,P＜0.01);与正常组比较,2h、4h和6h模型组HIF-1α蛋白表达均增加(P＜0.05),与模型组比较,人参皂苷给药组可显著增加各时间点HIF-1 α蛋白表达(P＜0.05);与正常组比较,2h、4h和6h模型组VEGF含量均增加(P＜0.05),与模型组比较,人参皂苷给药组可显著增加各时间点VEGF含量(P＜0.05).并且随着2h、4h和6h复氧时间的延长,模型组和给药组HIF-1α蛋白表达及VEGF蛋白含量相比前一时间点也逐渐增加.结论:在中风等脑损伤情况下,人参皂苷能够作用于神经干细胞巢内的星形胶质细胞,使星形胶质细胞HIF-1α表达上调,启动下游VEGF的分泌增加,通过旁分泌的形式作用于NSCs,促进NSCs增殖和分化,从而达到修复脑损伤的目的.
作者：万凤；司银楚；牛欣 刊期： 2016年第05期
“络病”是广泛存在于内伤疑难杂病和外感重症中的病理状态.叶天士极大程度地发展了“络病”理论,建立完善的“络病”诊疗体系,尤其在内伤杂病痹证中得到充分体现.认为从“络病”的视角辨治痹证,须以虚、实为纲,治疗则在攻邪和荣养的基础上,需遵循其“络以通为用”的治“络病”原则.文章通过数则医案,从虚实两个方面,对叶天士治疗痹证的分型、治法、用药规律进行探讨.络实,包括风湿阻络、寒湿阻络、湿热阻络、痰瘀阻络4种证型,由外邪袭络或痰瘀阻络而为痹,治以攻邪通络,选取其常用的相应祛除外邪和通络之药;络虚,包括阴虚,阳虚,肝肾亏虚,气血虚衰4种证型,由络虚不充而为痹,治以扶助正气,荣养脉络兼以通络,除选用补充正气,荣养脉络之药外,加以其常用通络之药.
作者：李长香；程发峰；王雪茜；马重阳；朱文翔；张晓瑜；穆杰；杜欣；王庆国 刊期： 2016年第05期
目的:应用代谢组学方法探讨化浊解毒方改善2型糖尿病大鼠的糖脂代谢机制.方法:高脂饮食加尾静脉小剂量注射链脲佐菌素(28mg/kg)建立2型糖尿病大鼠模型,将造模成功的大鼠随机分为5组:模型组,化浊解毒低(生药1.5g·kg-1·d-1)、中(生药3.0g·kg-1·d-1)、高(生药6.0g·kg-1·d-1)剂量组,吡格列酮组(3.0mg·kg-1·d-1),另取同周龄健康大鼠10只作为空白对照组.给药组每日灌胃给药1次,连续给药4周;模型组和空白对照组给予同体积的0.9％氯化钠溶液灌胃.给药4周后,采用葡萄糖氧化酶法测定大鼠空腹血糖(FBG),放射免疫法测定空腹胰岛素(FINS),全自动生化分析仪检测大鼠的甘油三酯(TC)、总胆固醇(TC)、游离脂肪酸(FFA);采用超高效液相色谱-飞行时间质谱连用技术(UPLC-TOFMS)对大鼠肝脏样本中的内源性物质进行了相对含量测定.结果:化浊解毒方对高脂饮食联合小剂量链脲佐菌素诱导的糖尿病大鼠血糖、血脂紊乱有明显的治疗作用.并通过代谢组学及主成分分析可得出,空白对照组与模型组显著分离,化浊解毒低、中、高剂量组处于空白对照组与模型组之间,且更接近于空白对照组,同时具有剂量依赖差异.通过数据处理发现其改善2型糖尿病大鼠的糖脂代谢与胆汁酸、磷脂等9个代谢物有关.结论:化浊解毒方可明显改善2型糖尿病大鼠的糖脂代谢,其潜在机制与肝脏内胆汁酸、磷脂、视晶酸等代谢具有一定相关性.
作者：何百川；章清华；薛超；吴深涛 刊期： 2016年第05期
目的:建立一种稳定的、可操作性强的病证结合大鼠帕金森病(PD)模型,以满足研究药物对PD治疗评价的需求.方法:采用6-羟基多巴胺脑部立体注射法构建PD动物模型,同时设立正常对照组、假手术组、模型组、药物(复方地黄方)组,从病因、症状、客观指标、药物反证等方面对PD大鼠模型进行综合判断,验证该模型的中医证候属性.结果:模型组大鼠的神经行为学、氧化应激、TH mRNA及蛋白、阳性细胞等指标与正常对照组比较,差异均有统计学意义(P＜0.01).药物组可明显改善大鼠的主观症状和上述客观指标,差异有统计学意义(P＜0.01).结论:6-羟基多巴胺大鼠PD模型的中医证候属性是风阳内动证.
作者：梁建庆；何建成 刊期： 2016年第05期
目的:从疾病和证候两个层面对冠心病复合高血脂状态的大鼠模型进行证候属性的多时间点动态评价.方法:模拟临床冠心病发病特点,采用高脂饮食联合左冠脉结扎术制备模型.术后7、14、28d,动态检测血脂、心电图、超声心动等疾病指标,旷场实验、应激状态下呼吸频率、足底RGB值、体质量、体质量增量、BMI、24h进食量等宏观体征进行证候判定.结果:冠心病复合高血脂状态模型在术后7d心电图检测呈现6-8个病理性Q波纳入研究,术后7、14、28d,TC、TG、LDL-C均显著升高(P＜0.05,P＜0.01).超声心动显示EF值、FS值均显著降低,LVID:d、LVID;s显著升高(P＜0.01),旷场3min自主运动距离显著下降(P＜0.01),应激状态下呼吸频率显著升高(P＜0.05,P＜0.01);足底RGB均值和R值显著降低(P＜0.05,P＜0.01);体质量和进食量先降后升,至术后28d体质量显著升高(P＜0.05,P＜0.01),自术后14d始出现体质量增量和BMI的显著升高(P＜0.05,P＜0.01).结论:冠心病复合高血脂状态大鼠模型在术后7-14d属于气虚血瘀证,14-28d过渡为气虚血瘀兼有痰浊证.
作者：卢令慧；王景；曹愿；张倩；李春；吴晏；曹景琳；夏恺；白睿峰 刊期： 2016年第05期
慢性扁桃腺肿大是上呼吸道系统的多发病,在临床上发病率日渐增高,其中滥用、过用抗生素及大量清热解毒药是常见诱因,严重影响患者的生活质量.从中医角度探讨抗生素及清开灵等中成药的寒凉属性,进而从温病卫气分证的治疗原则探讨误用寒凉引起慢性扁桃体肿大的发病机制.治疗当采用辛凉甘润之法,选用麻杏石甘汤和排脓汤加减,并附临床典型案例加以论证.
作者：柳红良；赵志付 刊期： 2016年第05期
脾主运化理论是脾藏象理论的核心,文章探讨了脾主运化理论的源流与发展,从《黄帝内经》时代开始,至清明时期结束,脾主运化理论从萌芽到初具雏形,再到其产生和不断发展壮大的过程.其不同时期,受到社会及经济、文化等因素的影响,有着各自的特点.从初在运化水谷的过程中脾胃同论,到之后将脾在运化中的功能分离出来,并在理法方药上不断的完善,终形成了完整的脾主运化理论.
作者：杨丽；王彩霞 刊期： 2016年第05期
目的:对粉防己多糖(FDT)与汉中防己多糖(HDT)进行比较研究,明确其化学结构与抗氧化活性的异同.方法:采用比色法和气质联用法,对多糖结构进行研究.通过DPPH自由基、羟自由基、超氧阴离子自由基清除实验,探讨其体外抗氧化作用.通过D-半乳糖诱导小鼠衰老模型,以超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)在血清、肝、脑、心中表达为指标,配合肝脏病理切片探讨体内抗氧化作用.结果:FDT与HDT的组成成分与单糖组成存在差异,体外抗氧化实验FDT强于HDT,体内实验FDT与HDT在血清、脏、脑、心中对SOD、MDA、CAT及GSH-Px具有不同影响(P＜0.01,P＜0.05).结论:FDT与HDT存在结构差异,FDT抗氧化作用强于HDT.
作者：王蒙；魏晴；李静；王秋红；杨炳友；匡海学 刊期： 2016年第05期
目的:基于Calpain/p35-Cdk5/p25通路探究肾脑复元汤联合人脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)干预对缺氧缺糖神经元的保护作用.方法:原代培养神经元,并随机分为正常组、模型组(缺糖缺氧造模,OGD)、中药组(OGD+含中药血清)、干细胞组(OGD+hUC-MSCs共培养)、联合组(OGD+含中药血清+hUC-MSCs共培养)、抑制剂组(OGD+Calpain抑制剂),采用CCK-8法检测神经元活力,AO/EB染色观察细胞形态学变化,流式细胞仪检测各组细胞凋亡率,Werstern blot法检测Cdk5、p25、p35的表达.结果:模型组神经元缺糖缺氧后,突起回缩,轴突网络稀释,细胞核变性、甚至碎裂,与正常组比较,细胞活力明显下降,大量细胞凋亡,Cdk5、p25表达明显上升,p35表达明显下降(P＜0.01);与模型组比较,中药组、干细胞组、联合组及抑制剂组神经元活力升高,凋亡细胞数降低,Cdk5及p25表达下降,p35表达上升(P＜0.05,P＜0.01);与中药组、干细胞组及抑制剂组相比,联合组神经元活力升高、早凋细胞减少(P＜0.05);联合组及抑制剂组CDK5、p25表达较中药组及干细胞组下降,p35表达较中药组及干细胞组上升(P＜0.05).结论:肾脑复元汤联合hUC-MSCs移植能显著改善缺糖缺氧神经元凋亡,其作用机制可能与调控Calpain/p35-Cdk5/p25通路有关.
作者：李映辰；王瑾茜；胡国恒；刘旺华 刊期： 2016年第05期
目的:观察“通督启神”针法对老年痴呆模型小鼠空间学习记忆能力,大脑海马区神经元形态以及Aβ1-42蛋白、TREM2、DAP12的表达情况,探索“通督启神”电针法治疗老年性痴呆的作用机制.方法:将20只SAMP8小鼠随机分为老年痴呆组和“通督启神”电针组,10只同背景SAMR1小鼠作为正常对照组.“通督启神”电针组,穴取“百会”和“印堂”接电针,电针频率为2Hz,留针20min/d,并于电针治疗前点刺“人中”穴;正常对照组与老年痴呆组仅作束缚.治疗15d后,运用Morris水迷宫实验观察各组小鼠行为学变化;运用HE染色方法观察各组小鼠海马区神经元形态;运用免疫组化DAB染色法观察各组小鼠海马区Aβ1-42蛋白与TREM2、DAP12的表达情况;运用Western blot检测各组小鼠海马区TREM2、DAP12的表达含量.结果:“通督启神”针法可显著改善痴呆模型小鼠的空间学习记忆能力(P＜0.05,P＜0.01);可改善海马区神经元形态结构与Aβ1-42蛋白的表达情况(P＜0.01);并可促进TREM2与DAP12在海马区的表达(P＜0.05).结论:“通督启神”针法可提高老年痴呆模型小鼠的空间学习记忆能力,改善海马区神经元形态结构与Aβ1-42蛋白的表达水平,其疗效作用的机制可能是通过提高海马区TREM2与DAP12的表达含量而发挥作用的.
作者：姜婧；刘刚；许安萍；曹瑾；卢梦晗；邵千枫；吕威；景泉凯；王鑫 刊期： 2016年第05期
目的:观察清肝解郁方对肝郁化热证偏头痛患者中医证候的影响.方法:采用随机对照的临床试验设计,将60例患者随机分为治疗组和对照组,每组30例,治疗组服用清肝解郁方免煎颗粒(200mL/次,2次/d,冲服),对照组服用天舒胶囊(4粒/次,3次/d,口服),疗程为4周,治疗结束4周后随访1次.在治疗1周、2周、3周、4周及治疗结束4周时,分别观察两组中医证候的改善情况,并观察治疗4周后两组患者头痛发作次数减半率.结果:研究期间,两组肝郁化热证证候总分基本呈下降趋势,治疗4周后及随访期证候总分组间比较,差异有统计学意义(P＜0.05,P＜0.01);两组不同时点证候总分与基线差值的组间比较,差异均有统计学意义(P＜0.01);治疗后,两组主症积分的组间比较,第4周时差异有统计学意义(P＜0.05);次症积分的组间比较,随访期差异有统计学意义(P＜0.01);治疗前后两组头痛发作次数减半率组间比较,差异有统计学意义(P＜0.05).结论:清肝解郁方可明显改善肝郁化热证偏头痛患者的证候,且对偏头痛的病情改善较为明显.
作者：韩芳；曹克刚；高颖 刊期： 2016年第05期
目的:观察糖痹康对糖尿病大鼠坐骨神经Keapl/Nrf2信号通路的影响,探讨糖痹康防治糖尿病周围神经病变作用机制.方法:雄性SD大鼠,高脂饲料联合小剂量链脲佐菌素诱发糖尿病大鼠模型,造模成功后随机分为模型组、α-硫辛酸(ALA,0.026Sg/kg)组,糖痹康高(2.5g/kg)、中(1.25g/kg)、低(0.625g/kg)剂量组,每组10只,另设10只雄性SD大鼠为正常组.实验中每4周检测大鼠体质量和随机血糖,干预12周后测大鼠右侧坐骨神经传导速度,行坐骨神经HE、Weil's染色,Western blot检测大鼠坐骨神经中Keapl、Nrf2蛋白表达,实时荧光定量PCR检测大鼠坐骨神经Keapl、Nrf2、ARE mRNA的表达.结果:与模型组比较,ALA组、糖痹康高、中剂量组干预8周和12周时大鼠随机血糖显著降低(P＜0.05,P＜0.01);ALA组,糖痹康高、中剂量组干预12周后大鼠坐骨神经传导速度显著升高(P＜0.01,P＜0.05);光镜下显示各药物干预组均有效改善坐骨神经纤维结构.干预后,ALA组、糖痹康高、中剂量组Keapl蛋白及mRNA表达量都明显低于模型组(P＜0.01,P＜0.05),Nrf2的蛋白及mRNA表达量都明显高于模型组(P＜0.01,P＜0.05),ARE的mRNA表达量亦都明显高于模型组(P＜0.01,P＜0.05).结论:糖痹康可能通过调节Keapl/Nrf2信号通路改善糖尿病大鼠坐骨神经损伤.
作者：张岩；穆晓红；孙文；吴丽丽；秦灵灵；樊怡欣；郭璇；许光远；李伟笠 刊期： 2016年第05期
目的:观察黄芪多糖对“轻度氧化修饰低密度脂蛋白(mmLDL)-Toll样受体4(TLR4)-巨噬细胞”途径的干预作用,探讨其稳定动脉粥样硬化(AS)斑块、抑制AS进展的分子机制.方法:将THP-1源性巨噬细胞分为空白组,模型组,黄芪多糖低、中、高剂量.采用免疫印迹法检测脾酪氨酸激酶(Syk)、细胞外信号调节激酶(Erk)、桩蛋白(Paxillin)磷酸化水平随时间变化情况,以及不同剂量黄芪多糖对Syk、Erk、Paxillin蛋白磷酸化水平的影响;采用免疫沉淀联合免疫印迹法检测TLR4蛋白磷酸化水平随时间变化情况,以及不同剂量黄芪多糖对TLR4蛋白磷酸化水平的影响;采用中性红吞噬实验检测黄芪多糖对巨噬细胞吞噬功能的影响.结果:TLR4、Syk、Erk、Paxillin分别于15、10、15、30min达到磷酸化水平高峰;与空白组比较,模型组TLR4、Syk、Erk、Paxillin磷酸化水平升高(P＜0.05)、细胞吞噬功能增强(P＜0.05);与模型组比较,黄芪多糖低、中、高剂量组TLR4、Syk、ERK、Paxillin磷酸化水平降低(P＜0.05)、细胞吞噬功能减弱(P＜0.05);其中,黄芪多糖高剂量组上述改变明显强于黄芪多糖低、中剂量组(P＜0.05).结论:黄芪多糖可能通过“mmLDL-TLR4-巨噬细胞”途径影响巨噬细胞吞噬功能从而具有稳定AS斑块、干预AS作用.
作者：陈蕊；高颖；顾宁 刊期： 2016年第05期
目的:观察新风胶囊对佐剂型关节炎(AA)大鼠肺功能、肺组织氧化应激状态及Keap1-Nrf2/ARE信号通路表达的影响.方法:48只雄性SD大鼠按随机数字表随机分为正常组(NC),模型组(MC),新风胶囊治疗组(XFC),来氟米特对照组(LEF),每组12只.除正常组外,采用右后足跖皮内注射弗氏完全佐剂法制成AA大鼠模型,致炎后第19天开始给药,共给药30d.检测大鼠体质量、足跖肿胀度、关节炎指数;小动物肺功能仪检测大鼠肺功能;免疫组化法检测肺组织ROS、RNS、GSH、TRX;RT-PCR法检测肺组织Keap1、maf、Nrf2mRNA的表达,Western blot法检测肺组织Keap1、maf、Nrf2蛋白表达;ELISA法检测大鼠外周血1L-4、TNF-α.结果:与正常组比较,模型组大鼠体质量与肺功能参数降低;足跖肿胀度、关节炎指数升高;肺组织ROS、RNS蛋白表达升高,GSH、TRX蛋白表达降低;Keap1 mRNA表达增多,Maf,Nrf2 mRNA表达减少,Keap1、maf、Nrf2蛋白表达均升高(P＜0.01,P＜0.05);与模型组比较,各治疗组大鼠体质量、肺功能参数升高;ROS、RNS蛋白表达降低,GSH、TRX蛋白表达升高;Keap1,Maf,Nrf2 mRNA表达升高,Keap1、maf、Nrf2蛋白表达均降低(P＜0.01,P＜0.05);与来氟米特组比较,新风胶囊组肺功能参数FEF50、PEF较高;ROS、RNS明显较低,TRX明显较高;Keap1,Nrf2 mRNA表达较低,maf的mRNA和蛋白表达均较高,Keap1蛋白表达较低(P＜0.01,P＜0.05).相关性分析示,肺功能参数与AI呈负相关,ROS、RNS、TNF-α与AI、足跖肿胀度呈正相关;GSH、TRX、IL-4与AI、足跖肿胀度呈明显负相关(P＜0.01,P＜0.05).结论:AA大鼠除关节滑膜病变还存在肺功能损伤.新风胶囊能够在改善关节病变的同时,改善肺功能,其机制与调节异常激活的Keapl-Nrf2/ARE通路,抑制氧化应激反应有关.
作者：孙玥；刘健；万磊；王芳；齐亚军；郑力 刊期： 2016年第05期
目的:通过关联规则方法对异常黑胆质证的治疗方剂进行分析,研究维吾尔医方剂的药性组合的配伍以及规律.方法:资料来源于《中国医学百科全书》(维吾尔医学分册)和《中药大辞典》(维吾尔药卷),收录方剂91首,涉及维药254味药,药性组合28组,建立数据库,采用统计和关联规则进行数据分析和规则提取.结果:筛选出的药性组合10种,建立治疗异常黑胆质证方剂配伍的药性组合模式.结论:维吾尔医异常黑胆质证方剂药性配伍规律主要涉及干热、湿热、以及辛、苦、甜、烈等药性及其组合,将为临床组方用药及研究提供参考.
作者：何文静；顾浩；麦合苏木·艾克木；乔延江；王耘 刊期： 2016年第05期
证候是中医诊疗的核心内容,也是中医临床疗效评价的特色元素.中医证候的变化规律是证候研究的重要组成部分,常依托于临床观察、试验方法进行,其中合理的设计是有效发掘规律的前提.本研究采用文献调查方法,回顾现有的证候变化规律研究,从发表年份、研究的临床特征、证候的表现形式、研究的设计方法和数据处理方法5个方面,分析证候变化规律的研究现状;在此基础上总结出证候变化规律评价的基本形式,分析证候变化规律研究的设计要素,以期能为相关的中医证候研究提供具有一定适应性的规范化参考.
作者：赵晨；李戈；思金华；高永红；陈建新；卞兆祥；商洪才 刊期： 2016年第05期
目的:探讨健脾清肠方(JQD)对脾虚湿热证型溃疡性结肠炎(UC)患者生活质量的影响.方法:120例脾虚湿热证型活动期UC患者,随机分为试验组(60例)与对照组(60例),分别予以JQD、5-ASA治疗.治疗8周后,评价2组患者在炎症性肠病生活质量问卷(IBDQ)、健康调查简表(SF-36)积分、Sutherand DAI积分、证候与症状疗效方面的差异,并以此来评价患者的生活质量.结果:治疗后,两组的Sutherand DAI积分均有下降(P＜0.01),但两组间比较差异无统计学意义.治疗后两组患者在IBDQ量表的肠道症状、全身症状的维度及总分,SF-36量表的生理机能、躯体疼痛、精力、精神健康4个维度及总分,腹痛、乏力的临床症状改善方面均有显著性差异(P＜0.05,P＜0.01).结论:JQD可以作为一种补充和替代疗法治疗轻-中度活动期脾虚湿热型UC,并可以改善患者的生活质量.
作者：戴彦成；郑烈；张亚利；陈璇；周燕文；方晨晔；叶任昊；唐志鹏 刊期： 2016年第05期
目的:体外研究双氢青蒿素(DHA)对人肝星状细胞(HSCs)坏死性凋亡的影响及机制.方法:HSCs分为对照组以及DHA处理组.应用噻唑蓝(MTT)、细胞计数试剂盒-8(CCK-8)以及亚甲基蓝染色检测HSCs的细胞活力.酶联免疫吸附实验检测HSCs培养基中HMGB1含量.Real-time PCR检测细胞内HMGB1 mRNA水平.细胞Titer-Glo试剂盒检测HSC内ATP含量.LDH试剂盒检测培养基中LDH含量.Real-time PCR和western blot分别检测受体相互作用蛋白1(RIP1)、RIP3和核因子E2相关因子2(Nrf2)的mRNA和蛋白水平.Western blot实验检测MLKL的磷酸化水平免疫荧光实验观察HSC内Nrf2蛋白表达及亚细胞分布.结果:DHA剂量依赖性地降低HSCs的活力.DHA剂量依赖性地促进HSCs释放HMGB1和LDH,升高HSCs内HMGB1的mRNA水平,降低细胞内ATP水平.DHA剂量依赖性地促进RIP1、RIP3的mRNA和蛋白表达,并促进MLKL的磷酸化.DHA以剂量依赖性的方式促进HSCs内Nrf2的mRNA和蛋白表达,并促进Nrf2从细胞质中向细胞核中转移.Nrf2 siRNA转染HSCs后可削弱DHA的上述作用,但Nrf2过表达质粒转染HSCs后可以模拟DHA的作用并与其产生协同效应.结论:结果表明DHA可诱导HSCs的坏死性凋亡这一作用可能与激活HSCs内Nrf2信号分子相关.本研究为DHA抗肝纤维化研究提供了新思路,同时为将DHA开发为坏死性凋亡相关的抗肝纤维化潜在药物提供了坚实的实验基础.
作者：陆春风；许文萱；张峰；郑仕中 刊期： 2016年第05期
中华中医药杂志
主管:中国医药学报
主办：中国科学技术协会
