化范例;谢彦晖
目的 研究阿霉素诱导肿瘤细胞凋亡的机制.方法 不同时间和不同剂量的阿霉素处理SMMC-7721细胞.以RT-PCR和Western blot法分别分析阿霉素处理后各分子的mRNA和蛋白表达的变化.结果 阿霉素处理可以明显抑制细胞生长;使细胞呈明显凋亡改变;诱导多聚(ADP-核糖)聚合酶[poly(ADP-ribose)polymerase,PARP]水解;诱导caspase-3和caspase-9的转录水平上调.阿霉素处理可诱导人第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源的基因(phosphatase and tensin homologue deleted on chromosome 10,PTEN)的转录和蛋白水平升高,可能使细胞进入凋亡过程.一旦细胞发生凋亡,PTEN转录和蛋白水平下降;随之诱导FAK转录和蛋白表达水平降低.结论 阿霉素可以通过涉及caspase-3的途径诱导SMMC-7721肝癌细胞凋亡.阿霉素诱导的凋亡对PTEN、局部黏着斑激酶(focal adhesion kinase,FAK)表达及FAK磷酸化均有明显影响.
作者:周密;李增霞;查锡良 刊期: 2008年第06期
目的 构建携带人lipocalin 2基因且删除E1855基因的溶瘤腺病毒,研究其体外对胰腺癌细胞生长的抑制作用.方法 利用RT-PCR技术获得lipocalin 2基因并克隆至pCA13质粒,构建pCA13-lipocalin 2.用Bgl Ⅱ从pCA13-lipocalin 2酶切出包含CMV启动子及lipocalin 2的表达框,将该表达框亚克隆入质粒pZD55,获得pZD55-lipocalin 2.将pZD55-lipocalin 2与pBHGE3共转染293个细胞,重组产生携带lipocalin 2的溶瘤腺病毒ZD55-lipocalin 2.经PCR和Western blot鉴定正确后,体外采用结晶紫染色和MTT法,观察其对胰腺癌细胞生长的抑制作用.结果 ZD55-lipocalin 2能在PANC-1细胞中增殖复制并表达lipoealin 2蛋白,结晶紫染色和MTT法观察到该溶瘤腺病毒能明显抑制PANC-1细胞生长.结论 成功构建了携带入lipocalin 2的溶瘤腺病毒,其能明显抑制胰腺癌细胞生长,为胰腺癌治疗提供新策略.
作者:徐彬;靳大勇;王单松;刘新垣;秦新裕 刊期: 2008年第06期
自噬作用是一种细胞自我降解的过程,以清除受损或多余的蛋白质和细胞器.当细胞代谢能量不足时,细胞依靠自噬作用实现细胞内成份的循环利用,从而维持自我稳态和生存.近期的研究发现.自噬作用在肿瘤的形成中亦起着重要作用.具有凋亡缺陷的肿瘤细胞可以凭借自噬作用减少坏死和炎症反应,以减轻代谢压力下的基因损伤,维持长久生存.但另一方面,自噬作用的缺陷与肿瘤的增长亦相关.对于自噬作用的研究进一步揭示了肿瘤发生、发展的潜在机制,也为肿瘤的治疗和预防提供了新的思路.
作者:王树彦;周易明;陈宗祐 刊期: 2008年第06期
目的 观察肝移植术后1月内血糖变化,以探讨肝移植术后血楮变化规律以及肝移植术后糖尿病的相关危险因素.方法 本文收集中山医院2001年3月至2007年2月共514例肝移植患者临床资料,排除资料不完整及术前使用糖皮质激素的患者,共有324例患者进入本组分析,其中男性263例,女性61例,年龄3~81岁,平均48.9岁.根据术前空腹血糖将患者分为糖尿病组(diabetes mellitus,DM)、空腹血糖受损组(impaired fasting glucose,IFG)及空腹血糖正常组(normal fasting glucose,NFG),根据患者术后使用的免疫抑制剂类型将患者分为FK506组及环孢霉素组.采用重复测量的方差分析观察手术前后糖代谢变化情况.通过分析术前与术后4周(取术前及术后1,3,7,14,21,28 d)各组患者空腹血糖资料,得出各组术前及术后4周内的空腹血糖变化趋势,计算术后高血糖状态患病百分比,并分析术后高血糖状态的术前危险因素与药物影响.结果 肝移植术后4周内DM,IFG,NFG 3组空腹血糖均呈先升高后降低的变化趋势,空腹血糖以DM组高,IFG组次之,NFG组低,3组之间变化趋势两两比较均有统计学差异(P值均<0.000 1);术前非糖尿病组患者术后1月内高血糖状态患病百分比为:术后1 d为100%,之后逐渐降低.至术后28 d为73.6%;术前空腹血糖及年龄对术后7 d空腹血糖有明显影响;FK506组和环孢霉素组之间术后4周内空腹血糖变化无明显差异.结论 肝移植术后早期DM,IFG,NFG 3组空腹血糖均较术前有明显升高;术前非糖尿病组患者术后1月内高血精状态患病百分比由100%逐渐降至73.6%;FK506组和环孢霉素组之间术后1月内空腹血糖变化趋势无明显差异.
作者:于明香;王飞龙;周俭;高键;高鑫 刊期: 2008年第06期
目的 研究供体内皮祖细胞(endotherial progenitor cell,EPC)灌注供心对同种异体心脏移植物生存时间的影响.方法 获取Sprague Dawley(SD)大鼠的骨髓细胞,通过密度梯度离心法分离培养单个核细胞,取贴壁细胞选择性诱导培养2周以上,获取内皮祖细胞(EPC).以Dil-ac-LDL、FITC-UEA-1双荧光染色法鉴定EPC.20只体重200~250 g的雄性SD大鼠为供体,20只体重200~250 g的雌性Wistar大鼠为受体.分为4组.每组5对.组Ⅰ:术后不使用环孢霉素;组Ⅱ:术后7 d每天使用环孢霉素5 mg/kg;组Ⅲ:术中供心经冠脉灌注内皮祖细胞1×106个,术后不使用环孢霉素;组Ⅳ:术中供心经冠脉灌注内皮祖细胞,术后7 d每天使用环孢霉素5 mg/kg.观察各组供心存活时间.结果 贴壁细胞经诱导培养后3 d开始伸展,5 d形成集落,7~10 d增殖加速并出现条索状结构,2周大部分细胞呈多角形.Dil-ac-LDL、FITC-UEA-1双染,免疫荧光染色阳性率大于70%.组Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ各组供心平均存活时间分别为(6.2±0.8)、(11.6±1.1)、(9.4±1.1)和(18.8±1.6)d.组Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ移植物的平均存活时间较组Ⅰ显著延长(P<0.05).结论 内皮祖细胞灌注合并环孢霉素运用可以延长大鼠心脏移植物的存活时间.
作者:夏利民;孙勇新;赵强 刊期: 2008年第06期
目的 研究婴幼儿早期血浆磷脂脂肪酸水平对于18月内体质指数的影响作用.方法 常州地区母亲及配对婴儿作为研究对象.分别采集脐血,5 d、42 d及1岁时婴儿静脉血样本,采用高效毛细液气相色谱分析技术检测血浆磷脂脂肪酸含量.在婴儿出生,42 d,2、4、6、12及18月时对小儿进行体重、身长等体格生长指标的测量,计算体质指数(body mass index,BMI)及其Z分值.结果 6、12及18月龄婴幼儿BMI Z分值与脐血n-6/n-3多不饱和脂肪酸(polyunsaturated fatty acids,PUFAs)比例呈正相关而与n-3 PUFAs及二十二碳六烯酸(docosahexaenoic acid,DHA)含量呈负相关(P<0.05;P<0.01;P<0.01);12月龄BMI Z分值与5 d血n-6/n-3PUFAs比例呈正相关而与n-3 PUFAs及DHA含量呈负相关(P均<0.01);2、4,6、12及18月龄BMI Z分值与42 d血n-6/n-3 PUFAs比例呈正相关而与n-3 PUFAs(P<0.01;P<0.01;P<0.01;P<0.01;P<0.05)及DHA含量(P均<0.01)呈负相关.结论 婴幼儿早期血浆磷脂n-3 PUFAs水平可能对婴幼儿晚期生长具有显著影响:n-3 PUFAs(主要DHA)水平越高而n-6/n-3比例越低.则在婴儿晚期可以得到更为理想的体质指数.
作者:王琴;周婷婷;张婷艳;Strandvik B;Zetterstr(o)m R;彭咏梅 刊期: 2008年第06期
目的 初步观察重组腺病毒rAd-MK-TNFα对乳腺癌细胞的抑制作用.方法 体外转染系列重组腺病毒,观察rAd-MK-TNFα在乳腺癌细胞Bcap37中TNFα的表达以及其对乳腺癌细胞的生长抑制作用,并比较其与对照病毒对乳腺癌细胞及人成纤维细胞生长的抑制作用的不同.结果 rAd-MK-TNFα感染Bcap37细胞后.可检测到TNFα的表达;rAd-MK-TNFα对Bcap37乳腺癌细胞存在生长抑制作用.且与其病毒浓度呈正相关;rAd-MK-TNFα对人成纤维细胞的抑制作用小于非靶向腺病毒(rAd-CMV-TNFa).结论 rAd-MK-TNFα可能通过靶向表达TNFα对乳腺癌细胞产生抑制细胞生长的作用.
作者:陆巍;童汉兴;叶景佳;陆维祺;郑树 刊期: 2008年第06期
目的 观察高葡萄糖对与内皮细胞(endothelial cells,EC)共培养的雪旺细胞(Schwann cells,SC)的损伤情况.方法 建立大鼠SC与EC的共培养模型,根据形态学和MTT选定25 mmol/L高葡萄糖浓度和48 h作用时间.将细胞分为正常葡萄糖SC与EC共培养组、高葡萄糖SC与EC共培养组及高葡萄糖SC组,通过形态学和MTT、凋亡率(流式细胞仪)和Casepase-3 mRNA表达(Real time PCR)观察细胞损伤.结果 形态学及MTT显示,与EC共培养的SC在高葡萄糖条件下,比正常葡萄糖共培养以及高葡萄糖单培养的SC存活率明显下降;SC凋亡率比正常葡萄糖共培养及高葡萄糖单培养的SC明显增高;Casepase-3 mRNA表达较正常葡萄糖共培养组明显升高,但与高葡萄糖单培养组相比其增高尚无统计学显著性意义.结论 在高葡萄糖环境下,与EC共培养的SC损伤更明显,可能与两种细胞相互作用加重SC损伤有关.
作者:张云云;刘笑迎;孙爱军;程峥青;王欣;张捷青 刊期: 2008年第06期
目的 制备具有凝血活性的重组人组织因子(recombinant tissue factor,r-TF)用于构建PT试剂盒.方法 将人组织因子胞外区编码基因与酵母表达载体重组,构建酵母表达质粒pPIC9K-TF,利用电穿孔法转化宿主菌Pichia pastoris GS115,转化子经G418抗性筛选后,获得高表达克隆.工程菌在摇瓶中经甲醇诱导,表达r-TF,表达产物经纯化后,鉴定生物活性.结果 SDS-PAGE证实表达产物的分子量为37 000~45 000,Western blot证明其为人组织因子衍生物,纯化后,r-TF经脂化后,具有促凝血活性,为研制凝血活酶时间测定试剂盒及研究TF的构效关系创造条件.结论 用毕赤酵母高效表达具有活性的rTF,表达量达到182 mg/L.纯化工艺简便易行,蛋白回收率高,纯化后的rTF可用于组装PT测定试剂盒.
作者:王羽雄;于敏;顾银良;宋后燕 刊期: 2008年第06期
目的 评价卡泊芬净(caspofungin)静脉注射后口服伏立康唑(voriconazole)序贯治疗与伊曲康唑(itraconazole)完整疗程两种不间经验性抗真菌治疗方法在恶性血液病患者中的疗效及安全性.方法 回顾性分析无锡市人民医院2005年1月至2008年4月间52例恶性血液病继发侵袭性真菌感染患者,根据不同抗真菌治疗方法分成两组,A组(22例)采用卡泊芬净静注后伏立康唑口服序贯疗法;B组(30例)采用伊曲康唑完整疗程治疗.观察两组患者的疗效和不良反应.结果 A组的总有效率为81.8%(18/22),药物相关的不良反应发生率9.1%(2/22).B组的总有效率63.3%(19/30),不良反应发生率16.7%(5/30).两组总有效率均较高,但有显著性差异(P<0.05),A组不良反应率显著低于B组.结论 两种方案对恶性血液病继发侵袭性真菌感染的患者均有效.卡泊芬净联合伏立康唑疗法比伊曲康唑完整疗程疗法更具有疗效优势,且安全性好,不良事件发生率低.
作者:钱锡峰;沈云峰;蒋元强;庄芸;杨国华;周新;毛玉文 刊期: 2008年第06期
目的 探讨细胞毒性T淋巴细胞相关抗原-4(cytotoxic T lymphocyte-associated antigen 4,CTLA-4)基因启动子区多态性与系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)表型间的相关性.方法 采用单纯病例研究,按临床表型和基因型、单倍型对120例女性SLE病人分组,分析基因与表型的相关性.结果 -1722T>C位点、-318C>T位点及单倍型与SLE各器官损害无关(P>0.05).在抗SSA抗体阳性患者中,-1722T>C位点TT基因型的频率升高(P=0.020,OR=5.26,95%CI:1.30~21.32).抗RNP抗体阳性患者中,-318C>T位点CT与TT合并基因型的频率降低(P=0.016,OR=0.16,95%CI:0.04~0.71).两位点等位基因间存在连锁不平衡(P<0.05),且在抗SSA抗体阳性患者中,T-C单倍型频率升高(P=0.014,OR=1.90,95%CI:1.14~3.18),C-C单倍型频率降低(P=0.028,OR=0.55,95%CI:0.32~0.94);而在抗RNP抗体阳性患者中,T-T单倍型频率降低(P=0.029,OR=0.20,95%CI:0.05~0.85).结论 在江南地区汉族人群中,CTLA-4基因一1722T>C位点与抗SSA抗体的产生相关,=318C>T位点与抗RNP抗体的产生相关.
作者:齐媛媛;杨晓惠;孔令杰;高淑娜;江峰;付朝伟;王宝涛;许爱娥;孟炜 刊期: 2008年第06期
乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)感染引起多种抑癌基因启动子甲基化已有广泛的研究和报道,本文从体内和体外研究总结了目前与HBV感染相关的抑癌基因甲基化研究现状及HBV引起抑癌基因甲基化的新机制,为未来研究提供思路.
作者:高雪;朱荣 刊期: 2008年第06期
目的 观察健脾益气方改善脾气虚型更年期综合征(climactericsyndrome,CS)症状及调节内分泌代谢的临床疗效.方法 取脾气虚型的更年期综合征患者30例作为病例组,另取年龄匹配的无明显更年期综合征症状的更年期女性20例作为对照组.检测两组血清瘦素(leptin)、胰岛素(insulin,INS)、睾酮(testosterone,T),胆固醇(total cholesterol,TC)、三酰甘油(triglycerides,TG)、低密度脂蛋白(low density lipoprotein,LDL)、高密度脂蛋白(high density lipoprotein,HDL)、空腹血糖(Blood glucose,BG)、餐后2 h血糖(2hBG)、胰岛素敏感指数(Insulin sensitivity index,ISI)、卵泡刺激素(follicle stimulating hormone,FSH)、黄体生成素(luteinizinghormone,LH)和雌二醇(estradiol,E2),测量两组腰围(waist circle,WC)、体重指数(Body mass index,BMI)和腰臀比(waist hip ratio,WHR),以及对病例组进行Kupperman评分、中医脾气虚证候评分,比较病例组与对照组检测指标的组间差异;病例组中24例作为中药组,采用健脾益气方治疗4周,比较治疗前后Kupperman评分、中医脾气虚证候评分及WC、BMI、WHR、Leptin、INS、T、ISI、BG、2hBG、TC、TG、HDL、LDL、E2、LH、FSH.结果 病例组和对照组E2、T、FSH、LH水平无显著性差异(P>0.05);病例组和对照组WC、BMI、WHR及BG、INS、ISI、Leptin比较病例组高于对照组,差异有统计学显著意义(P<0.05);病例组和对照组TC、TG、HDL、LDL比较虽无显著性差异(P>0.05),但病例组血脂水平均高于对照组;中药组治疗前后T、E2、FSH、LH无显著性差异(P>0.05);治疗后BG、血脂有下降趋势;血INS,Leptin下降而ISI增高有统计学差异(P<0.05);治疗后Kupperman评分和脾气虚评分均显著下降有统计学差异(P<0.01).结论 脾虚型更年期综合征患者存在能量物质的代谢障碍;雌激素水平低下可能并不是引起脾气虚型更年期综合征症状以及糖脂代谢异常的唯一因素;INS、Leptin分泌异常可能是脾气虚型更年期综合征发病以及导致糖脂代谢异常的不可忽略的因素;健脾益气方能有效改善脾气虚型更年期综合征症状及调节INS、Leptin的异常.
作者:王静;王兴娟 刊期: 2008年第06期
目的 总结Stanford B型主动脉夹层的腔内手术治疗经验.方法 收集2000年至2007年70例Stanford B型主动脉夹层腔内治疗病人的临床资料,通过对其回顾性研究,结合术前影像学、术中数字减影动脉造影术(digital subtraction angiography,DSA)、术后门诊影像学随访资料.观察夹层病变的急性期解剖学数据,在随后的随访过程中观察有无内漏、移位和人工血管内支架塌陷等术后并发症,寻找并发症出现的一些高危因素.结果 70例患者平均有2.66个破口,第一破口平均距离左锁骨下动脉27.61 mm.3例同期进行左颈总、左锁骨下动脉以及2例二期进行肠系膜上动脉、肾动脉旁路术.16例支架型人工血管一期覆盖左锁骨下动脉而未做血管旁路手术.70例患者即刻Ⅰ型内漏发生率为14.3%(10/70).无移植物错放、移位、瘤体破裂和中转手术等并发症,本组技术成功率为85.7%(60/70).随访2周~72个月后,5例发生Ⅰ型内漏,3例再次接受手术.本研究表明内漏的发生同夹层病变内膜裂口数量多、术前主动脉大直径大以及近端破口在小弯侧有关.结论 主动脉夹层腔内修复术具有安全、可行、有效的特点.临床的开拓性工作成功突破短瘤颈、内脏动脉假腔累及、破口位置较低和入路动脉过细等解剖学限制,在保证手术安全的情况下拓宽了手术适应症.远期疗效有待进一步观察.
作者:沈文俊;郭大乔;符伟国 刊期: 2008年第06期
目的 建立人脑脊液(cerebrospinal fluid,CSF)中两性霉素B(amphotericin B,AmB)和伊曲康唑(itraconazole,ITZ)含量测定的高效液相色谱方法,并用于隐球菌性脑膜炎患者脑脊液样品的测定.方法 脑脊液样品经固相萃取后直接进样.AmB测定采用Gemini 5w C18柱,流动相为5 mmol/L乙二胺四乙酸二钠(醋酸调pH至4.5)/乙腈(62/38,V/V),流速0.3 mL/min,DAD检测器:检测波长410 nm.ITZ测定采用YMC C18柱,流动相为0.2%三氟乙酸/乙腈(45/55,V/V),流速1.1 mL/min,荧光检测器:激发波长260 nm,发射波长365 nm.结果 AmB和ITZ的线性范围均为5 ng/mL~100 ng/mL,线性相关系数大于0.999,低定量限为5 ng/mL,低、中、高浓度质控样品在日内、日间精密度均小于7.6%.结论 该方法灵敏、快速、简便,适用于隐球菌性脑膜炎患者治疗药物监测.
作者:江峥;朱利平;于存静;郁韵秋 刊期: 2008年第06期
鼻前庭良性新生物的病理类型多样,我科运用CO2激光治疗鼻前庭肿物,疗效满意.现将2007年随访的70例病人的相关情况报告如下.
作者:顾凌澜;仇荣星;朱丽丽;张菁 刊期: 2008年第06期
目的 研究Babl/C小鼠腹腔B-1a细胞对抗原F(ab') 2GaMIgM刺激的增殖和凋亡反应.方法 腹腔灌洗获得Babl/C小鼠腹腔细胞,CD90免疫磁珠阴性选择继以CD5免疫磁珠阳性选择纯化B-1a细胞,以不同浓度的F(ab') 2GαMIgM(0、5、10、20、40 μg/mL)处理,分别培养24 h、48 h、72 h后,用噻唑蓝测定其增殖反应,Annexin-V法测定其凋亡.结果 与空白对照组相比,接受抗原刺激的B-1a细胞的增殖反应明显减弱,同时凋亡增加.抗原F(ab') 2GαMIgM浓度20 μg/mL时的效应趋向大,并且在24 h、48 h、72 h各个时间段无明显区别.结论 Babl/C小鼠腹腔B-1a细胞接受抗原刺激后,不表现出增殖反应,反而启动凋亡.
作者:化范例;谢彦晖 刊期: 2008年第06期
树突状细胞是体内功能强的抗原呈递细胞,细胞移行是其接受抗原刺激、激发T细胞免疫反应的基础,两者之间相互协调影响.从血液中的前体细胞到次级淋巴器官中成熟细胞的转化的过程中,趋化因子及其受体、黏附分子及基质金属蛋白酶的共同作用使树突状细胞得以精确迁移,发挥抗原呈递作用.
作者:刘鸣;孙爱军;葛均波 刊期: 2008年第06期
糖尿病作为胰腺癌的早期临床表现已逐渐被人们所接受,胰腺癌所伴发的糖尿病被称为新发糖尿病,通过在新发精尿病中检测某一特征标志物来提高胰腺癌的早期诊断率已成为研究热点,本文主要针对近几年对于新发糖尿病和胰腺癌关联性的研究进展作简要综述.
作者:李青;刘芳 刊期: 2008年第06期
目的 探讨应用ARIMA时间序列模型预测广西孕产妇死亡率的可行性,为广西继续降低孕产妇死亡率提供理论依据.方法 基于2002-2006年广西的逐月孕产妇死亡率,采用非条件小二乘法估计模型参数.按照残差不相关原则与简洁原则确定模型结构,依据AIC与SBC准则确定模型的拟合优度.建立预测广西孕产妇死亡率的优ARIMA模型.用所得模型预测广西2007年的孕产妇死亡率,比较预测值与实际值的差异;再以2002-2007年的数据构建模型预测广西2008年的孕产妇死亡率.结果 模型ARIMA(2,1,0)(0,1,1) 12较好拟合了既往时间段孕产妇死亡率的时间序列,模型自回归参数(AR1=-0.708,AR2=-0.537)与季节滑动平均参数(SMA1=0.511)均有统计学意义(P<0.05),AIC=33.814,SBC=39.364,模型残差为白噪声(P>0.05),模型数学函数式为(1+0.708B)(1+0.53782)(1-B)(1-B12)Zt=(1-0.511 B12)μt.2007年逐月孕产妇死亡率的预测值符合实际值的变动趋势,2007年孕产妇死亡率与实际值的相对误差率仅为2.08%.预测2008年广西的孕产妇死亡率为21.232/10万.结论 ARIMA模型可以较好地拟合孕产妇死亡率的时间变化趋势,并用于预测未来的孕产妇死亡率,是一种短期预测精度较高的预测模型.
作者:黎健;陈荔丽;陈树珍;赵耐青;钱序 刊期: 2008年第06期