张玉英；范维琥；蒋霞；李勇
目的建立胸腺细胞体外研究模型,为T细胞早期发育及相关实验提供有效技术平台.方法无菌摘取14.5天龄胚鼠胸腺,胸腺器官体外培养,FACS检测不同培养时间点细胞存活状况和表型变化,计数每个胸腺小叶的细胞数变化.结果胸腺体外培养显示:经过6 d的培养,胸腺细胞存活率均在88.0%以上,由双阴性发育至双阳性细胞,CD4+CD8+双阳性细胞由培养第0天的0上升到第6天的89.07%;细胞数量随胸腺发育(培养时间的增加)而增多,每个胸腺小叶胸腺细胞数量也由培养0 d的0.75×104个上升到第6天的1.38×106个.而体内数据显示:胸腺细胞由胚龄14.5 d的双阴性阶段发育到新生鼠的双阳性阶段,每个胸腺小叶细胞数量由14.5 d的0.75×104个上升到新生鼠的2.56×106个,同时间段CD4+CD8+双阳性细胞比例由0上升到91.22%.体内、外胸腺细胞表型、数量变化趋势一致.结论体外培养状态下胸腺细胞数量和表型变化与体内自然变化趋势一致,在体外培养可以模拟体内胸腺细胞由双阴性到双阳性的发育过程,这将为T细胞发育的研究提供简易、有效的技术平台.
作者：邵先安；张瑞华；蒋正刚；孙志平；储以微；熊思东 刊期： 2005年第05期
目的比较腕管综合征术前和正中神经松解术后(术中)两者感觉神经动作电位(sensory nerve action potential,SNAP)与复合肌肉动作电位(compound muscle action potential,CMAP)检测结果的差异.方法对20例腕管综合征患者,术中在切开屈肌支持带及正中神经松解术后,分别测定(1)拇短展肌的CMAP;(2)刺激示、中指,于腕部记录正中神经的SNAP;(3)刺激环指,于腕部分别记录正中神经和尺神经的SNAP.将三者结果与术前的相应数据行统计学分析.结果(1)术前拇短展肌CMAP的潜伏期＜4.3 ms,术后其潜伏期、波幅与术前相比差异无统计学意义(P＞0.05).(2)术后2～4指SNAP的潜伏期比术前平均缩短5%、波幅增加13%左右,两者相比差异均有统计学意义(P＜0.01).结论腕管综合征手术中,在正中神经松解术后行SNAP检测较CMAP检测的结果更为敏感和准确.
作者：朱艺 刊期： 2005年第05期
目的调查浙江省某农村地区猪群中戊型肝炎病毒的感染状况,探讨猪戊型肝炎病毒与人戊型肝炎病毒的关系.方法应用逆转录-巢式聚合酶链法(RT-nPCR)对当地某养猪场的猪粪便标本和生猪屠宰中心的猪胆汁标本进行HEV RNA的检测,并对部分阳性标本进行克隆测序和序列分析.结果132份猪粪便标本中13份为HEV RNA阳性,阳性率为9.85%;160份猪胆汁标本中有11份为阳性,阳性率为6.88%.序列分析发现猪HEV相互之间在ORF2部分区域(nt6317～6466)的核苷酸序列的同源性为90.0%～100.0%,与当地人株核苷酸序列的同源性为88.7%～100.0%,与Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ型的同源性分别为78.7%～84.0%,80.0%～85.3%,76.0%～83.3%和84.7%～95.3%.结论该地区猪HEV与当地人HEV同属HEV Ⅳ型.
作者：张潇；郑英杰；王法弟；高眉扬；朱建福；姜庆五 刊期： 2005年第05期
1型糖尿病是一种由T细胞介导的胰腺β细胞自身免疫性损害为特征的,器官特异性的自身免疫性疾病.目前有些研究尝试用环孢素、完全弗氏佐剂、卡介苗、谷氨酸脱羧酶、烟酰胺、口服胰岛素等方法,通过免疫抑制或刺激来保护β细胞,预防疾病发生或延缓其进展,但是由于所使用药物的不良反应或不确切的作用使他们在临床应用中受到限制[1～3].
作者：施念玮；吴艺捷 刊期： 2005年第05期
目的采用随机对照的方法对神经刺激器法和异感法这两种定位方法在三点腋路臂丛阻滞中的效果进行比较.方法45名拟行前臂和手部手术的病人被随机分入异感定位组(paresthesia,PAR组n=23)和周围神经刺激器定位组(peripheral nerve stimulator,PNS组n=22),分别采用异感定位法和神经刺激器定位法定位支配上肢的4支混合神经中的3支(肌皮神经、正中神经、桡神经或尺神经),将等量的2%利多卡因和0.5%布比卡因混合液40 mL分别注射于3支神经周围,其中肌皮神经5 mL,正中神经15 mL,桡神经或尺神经15 mL,另5 mL侵润上臂内侧的皮神经.臂丛阻滞成功被定义为注射30 min后,肘部远端5支神经(肌皮神经、桡神经、正中神经、尺神经和前臂内侧皮神经)支配区域的感觉阻滞完全,比较2组在臂丛阻滞成功率、时效和并发症等方面的差异.结果PNS组的阻滞成功率要高于PAR组(95.5%对54.5%,P＜0.01),两组间差异主要由于PAR组的肌皮神经和桡神经阻滞率较低(P＜0.05).PNS组的麻醉起效时间短于PAR组(19 min对29 min,P＜0.01).两组中共有3例病人(6.6%)发生术后短暂的神经功能障碍,3周内均获完全恢复.结论PNS法是一种良好的定位手段.将该方法应用于三点法腋路臂丛神经阻滞,可获得优于传统异感定位法的效果.臂丛阻滞后神经功能障碍并不少见,应引起足够重视.
作者：车薛华；梁伟民；陈佳瑶 刊期： 2005年第05期
目的研究雌激素对体外培养的卵巢透明细胞癌细胞系ES-2增殖、侵袭力的影响和对MTA3、Snail、基质金属蛋白酶2(MMP-2)表达的调节作用,以探讨雌激素作用对ES-2细胞系的影响.方法体外培养卵巢透明细胞癌ES-2细胞系,去激素培养7 d后加入17β雌二醇(E2)1×10-7、1×10-8、1×10-9mol/L,MTT法检测细胞增殖情况,流式细胞仪测定细胞周期,改良的Boyden小室检测细胞侵袭力、运动力的变化,RT-PCR检测MTA3、Snail、MMP-2 mRNA表达,免疫组化法检测Snail、MMP-2表达,明胶酶谱检测基质金属蛋白酶活性.结果RT-PCR、Western Bbt结果示ES-2细胞系为ERα阴性表达,ERβ阳性表达,E-cad为阴性表达.17βE21×10-7、1×10-8、1×10-9mol/L均可促进细胞增殖;E21×10-8mol/L可使G0～G1期细胞减少,S期细胞增加,但对细胞凋亡无影响;17βE21×10-8mol/L可显著增强ES2细胞的侵袭力和趋向运动能力,并可降低MTA3mRNA表达,增加Snail、MMP-2 mRNA及蛋白表达.结论17βE2可显著促进ES-2细胞的侵袭能力,此作用可能是通过17βE2对MTA3表达下调和对Snail、MMP-2表达的上调实现的.
作者：丁景新；殷莲华；金鸿雁；刘晓霞；尧良清；孙云燕；丰有吉 刊期： 2005年第05期
目的通过对大鼠肾小球系膜细胞(MsC)转染Smad 2基因,观察转染的阳性细胞克隆纤连蛋白(FN)及Ⅳ型胶原(ColⅣ)表达的改变,以探讨转化生长因子β(TGF-β)/Smad信号转导通路引起细胞外基质积聚导致肾小球硬化发生的分子机制.方法经磷酸钙介导将含有Smad 2重组表达质粒转染大鼠MsC,用G418筛选及Western印迹分析法鉴定,又分别采用Western印迹分析法和逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测转染阳性细胞克隆FN及ColⅣ表达的改变.结果成功建立高表达Smad 2蛋白的阳性MsC克隆(T-12、T-31、T-35、T-40),并证实其FN及ColⅣ的mRNA和蛋白的表达水平均明显上调.阳性MsC克隆FN蛋白为对照组2.4倍(P＜0.05),mRNA为对照组的2.7倍(P＜0.05);阳性MsC克隆ColⅣ蛋白为对照组的2.9倍(P＜0.01),mRNA为对照组的3.3倍(P＜0.01).结论TGF-β/Smad信号转异途径中Smad 2可能是促进FN及ColⅣ在肾小球中积聚,是导致肾小球硬化发生的重要信号转导分子.
作者：王小刚；于鸿；陈琦；赵仲华；张志刚；郭慕依 刊期： 2005年第05期
目的筛选转染人转化生长因子β1(TGF-β1)基因的大鼠系膜细胞相关反应性基因,并观察TGF-β1对其中之一的酸性核糖体蛋白P0的影响.方法筛选经SSH-PCR和反向杂交法构建的大鼠系膜细胞TGF-β1相关反应性基因cDNA消减杂交库,并进行测序及与GenBank资料作同源性比较;分别用Northern Blot、半定量RT-PCR观察TGF-β1、酸性核糖体蛋白P0基因在培养的大鼠系膜细胞和动物模型体内表达的变化.结果经筛选获得的28个反应性基因cDNA片段,长度为59～535 bp,其中7个片段均和已知酸性核糖体蛋白P0基因同源性一致.在转染TGF-β1的大鼠系膜细胞中P0基因mRNA表达增强;在大鼠抗Thy1系膜增生性肾小球肾炎模型的病变肾组织中,P0基因mRNA和TGF-β1基因mRNA的上调表达趋势一致.结论酸性核糖体蛋白P0是一个与TGF-β1基因表达密切相关的基因,可能参与TGF-β1介导的肾小球肾炎和肾小球硬化的发生机制.
作者：刘国元；沈素芹；曾文姣；蒋涛；陈琦；赵仲华；张农 刊期： 2005年第05期
类风湿关节炎(Rhumatoid Arthitis,RA)是一种累及周围关节为主的多系统性炎症性自身免疫性疾病,在西方国家患病率约1%[1],在我国稍低,约0.32%～0.36%.一般发病年龄在35～50岁,男女比1:3[2].RA自然病程在不同患者表现不一,约10%患者短期发作后可自行缓解,不留后遗症.
作者：傅辰生；丁小强 刊期： 2005年第05期
目的体外观察Con A活化淋巴细胞来源的DNA(ALD-DNA)对BALB/c小鼠巨噬细胞株RAW264.7的刺激作用.方法将ALD-DNA及未活化淋巴细胞来源的DNA(UnALD-DNA)分别与BALB/c小鼠来源的巨噬细胞株RAW264.7孵育48 h,然后以四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞的增殖情况,流式细胞仪测定细胞表面分子的表达,ELISA检测白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素12(IL-12)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的分泌情况.结果ALD-DNA在体外能够明显刺激细胞发生增殖,上调细胞表面主要组织相容性复合体(MHC)Ⅱ类分子以及共刺激分子CD40、CD80和CD86的表达,并能够诱导细胞分泌IL-6、IL-12和TNF-α.结论ALD-DNA对RAW264.7细胞具有免疫刺激作用.
作者：乔滨；徐薇；陈刚；张凤；杨秀利；熊思东 刊期： 2005年第05期
目的使用免疫组化方法研究膀胱肿瘤组织中碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的表达情况及微血管密度(MVD)水平.方法手术切除的膀胱肿瘤组织26例,应用bFGF抗体、CD34 Envision两步法进行免疫组化染色.bFGF免疫组化染色参考Matern方法进行评分,MVD的计数按Weidner法并稍改进.结果bFGF在膀胱肿瘤组织中的过表达及MVD值随着病理分级和临床分期的升高而增加,MVD的多少与bFGF表达强弱有关.结论血管生成因子bFGF促进膀胱肿瘤的微血管生成和浸润,为抑制肿瘤微血管生成的治疗提供了试验依据.
作者：汪伟；丁强；张元芳；姜昊文；龚健 刊期： 2005年第05期
目的用反义血管内皮细胞生长因子(VEGF)转染前列腺癌LNCaP C42细胞,从体外和体内研究抑制细胞内VEGF的表达后对肿瘤生长、侵袭等生物学行为的影响.方法用3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑盐(MTT)方法测定体外反义VEGF转染的肿瘤细胞增殖.在体内分析,反义VEGF转染的肿瘤细胞皮下注射入裸鼠.根据公式体积=0.52×(宽)2×(长),计算肿瘤体积[13],以此绘制肿瘤生长曲线.用小鼠抗人CD31单克隆抗体经免疫组化检测肿瘤微血管密度.苏木精-伊红(HE)染色检测肺转移结节.结果体外研究显示,反义VEGF显著抑制前列腺癌LNCaP C42细胞的增殖;与对照细胞比较发现,反义VEGF转染的细胞在裸鼠皮下致瘤能力减弱,肿瘤生长明显减慢;肿瘤微血管密度明显降低[(31±3.25):(14.25±3.40),P＜0.05],且肿瘤肺转移也显著被抑制.结论体内外研究表明,反义VEGF通过抗肿瘤新生血管形成作用可显著抑制前列腺癌的生长和转移.结果提示抑制VEGF表达对前列腺癌治疗具有潜在价值.
作者：苏伟；王起印；关明 刊期： 2005年第05期
目的研究通过改进对食管残端的处理降低吻合口瘘的发生.方法在我院接受食管贲门癌切除术并使用管状吻合器重建食管的480例患者根据术中食管残端处理方法的不同分为两组.第一组300例,食管残端用荷包钳法作荷包处理;第二组180例,食管残端在荷包钳处理的基础上,再间断全层缝合食管壁并结扎缝线,或沿食管残端连续全层缝合一周,放入抵钉座后结扎缝线.结果第一组患者吻合结束后检查切下的食管圈有10例黏膜不完整,吻合口瘘8例;第二组患者食管圈均完整,无吻合口瘘发生.结论对食管残端处理的改进有助于减少术后吻合口瘘.
作者：庞烈文；陈志明；马勤运；陈刚；陈佶 刊期： 2005年第05期
目的探讨丙戊酸在正常及癫癎大鼠海马神经元间隙液中的神经药物动力学过程.方法建立大鼠慢性癫癎模型及自由活动的清醒动物脑内在体微透析模型,结合荧光偏正免疫分析法测定急性腹腔注射丙戊酸(200mg/kg)后该药在大鼠海马胞外的动力学过程.用3P87药物动力学程序对药浓-时间数据进行拟合.结果丙戊酸在正常及癫癎大鼠海马胞外的峰浓度(Cmax)与药时曲线下面积(AUC0→∞)分别为(93.09±54.82)、(235.3±93.2)μg/mL及(6 252±3 607)、(19 286±5 219)μg·min·mL-1(n=5).结论推测由戊四氮诱发的大鼠脑病理性改变可能导致了丙戊酸在癫癎大鼠海马的蓄积,该研究为丙戊酸的临床抗癫癎治疗提供了新的实验资料.
作者：李智平；钟明康；施孝金；李中东 刊期： 2005年第05期
目的探讨两切口微创技术在全髋置换术中的临床应用价值.方法2003年12月至2004年6月间的30例行人工全髋关节置换手术者,随机分为两组:两切口微创全髋组15个、常规全髋置换组15个.比较两组在手术切口、手术时间、出血量、手术并发症、术后恢复与影像学等方面的差异.结果两切口微创全髋手术切口分别为3.6(3.0～4.5)cm、5.7(5.4～6.5)cm,常规手术组12.0(9.0～14.0)cm,P＜0.05.两切口微创组与常规手术组的手术时间、出血量分别为:100(80～220)min、80(60～150)min,760 mL、650 mL,P＜0.05,但所需输血量没有差异.两切口手术组与常规手术组比,具有手术后功能恢复快,住院时间短,双下肢不等长少,差异有显著性(P＜0.05).结论两切口人工全髋置换手术不切断髋关节周围肌肉,创伤小,具有术后恢复快,住院时间短的优点;但技术难度高,必须经过严格的培训才能开展,以防止并发症的发生.
作者：阎作勤；陈云苏；杨轶；李文俊；陈峥嵘；张光健 刊期： 2005年第05期
目的探讨婴幼儿呼吸道合胞病毒肺炎治疗前后肺功能的变化.方法采用潮气呼吸法测定23名1～19个月的呼吸道合胞病毒肺炎婴幼儿的肺功能.以26名同龄健康儿童做对照.主要参数为:达峰时间(TPTEF)、达峰时间比(TPTEF/TE)、达峰容积(VPEF)、达峰容积比(VPEF/VE)、呼吸频率(RR)、潮气量(VT/kg)、潮气呼吸容量环(TFVL).结果治疗前肺炎患儿呼吸频率(RR)为(36.300±7.154)次/分,较同龄对照组(30.950±6.00)次/分明显增快(P＜0.01),反映气道阻塞的指标:TPTEF/TE和VPEF/VE分别为(19.650±3.030)%和(23.150±2.860)%,低于健康对照组的(24.580±5.190)%和(26.020±4.340)%,P＜0.01.经治疗,患儿呼吸频率逐渐下降为(33.560±5.570)次/分,TPTEF和VPEF、TPTEF/TE、VPEF/VE均明显回升,其中TPTEF/TE、VPEF/VE显著增高,为(24.240±5.700)%和(24.760±3.040)%,P＜0.05.TBFV环形态特点:治疗前TBFV环呼气曲线升支陡、高峰提前、降支斜率增大.结论婴幼儿呼吸道合胞病毒肺炎时存在明显的小气道阻塞,潮气呼吸测定能反映肺炎气道病变的程度及临床治疗的效果.
作者：黄剑峰；张皓；陈超 刊期： 2005年第05期
目的拟从细胞水平观察阻断糜酶途径后对人血管平滑肌细胞生成血管紧张素(AngⅡ)及细胞增殖的影响.方法通过植块培养法获得人脐动脉血管平滑肌细胞,并分组为:①DMEM组(空白培养液对照组);②AngⅠ组;③AngⅠ+卡托普利组;④AngⅠ+糜酶抑素组;⑤AngⅠ+缬沙坦组.分别阻断血素紧张素转换酶、糜酶和AngⅠ受体,进行细胞计数、细胞增殖指数及培养液中AngⅡ含量的测定.结果药物干预组较AngⅠ组细胞数量减少(P＜0.01);糜酶抑素组与缬沙坦组能明显抑制细胞增殖(P＜0.01);糜酶抑素组的AngⅡ含量明显降低(P＜0.01),缬沙坦组则明显升高(P＜0.01).结论糜酶途径在血管平滑肌细胞AngⅡ生成及细胞增殖中起重要作用.
作者：沈建颖；宿燕岗；王现；虞勇；郭祺；王克强；葛均波 刊期： 2005年第05期
目的研究HBV不同感染状态对CCL20表达水平的影响,探讨CCL20在乙肝病毒感染中的作用.方法通过基因体外转染技术,建立HBV不同感染状态的肝细胞模型;以内对照定量RT-PCR检测HBV不同感染状态下CCL20的表达水平.结果HBV不同感染状态下CCL20的表达水平不同,HBV未感染肝细胞CCL20表达水平每106细胞为(2.65±0.02)pg/10μL,HBV短暂感染肝细胞CCL20的表达水平每106细胞为(3.43±0.02)pg/10μL,而HBV持续感染肝细胞CCL20的表达水平每106细胞为(1.22±0.04)pg/10 μL,上述三种不同感染状态下肝细胞表达CCL20的水平差异有统计学意义,表现为HBV短暂感染肝细胞＞未感染肝细胞＞HBV持续性感染肝细胞(P＜0.05).在HBV同一感染状态下,CCL20的表达水平与HBV感染时间、细胞的培养时间、病毒载量等因素未见显著性相关;上述细胞经乙酸肉豆蔻佛波醇(PMA)活化后,相应细胞CCL20表达均明显增加(P＜0.05),但并不改变CCL20在各细胞中的表达格局.结论HBV的不同感染状态影响了CCL20的表达.
作者：邵先安；叶巍；郑秀娟；陈习武；储以微；熊思东 刊期： 2005年第05期
目的为了研究不同淋球菌菌株的基因多态性,了解不同菌株之间的亲缘关系,选择适当的随机引物.方法以淋球菌基因组DNA为模板,对淋球菌进行RAPD扩增,选择多态性好、重复性好、稳定性强的随机引物,并用S38号引物对不同淋球菌基因组DNA进行指纹图谱区分.结果从Sagon公司50条RAPD随机引物中筛选出8条扩增效果良好的引物,经RAPD扩增出的淋球菌指纹图谱间有明显不同的DNA多态性,可对不同菌株进行聚类分析.结论利用RAPD技术对淋球菌进行随机引物的筛选,可为今后淋球菌的分子流行病学研究奠定基础.
作者：张铁军；周晓明；姜庆五 刊期： 2005年第05期
目的检测心肌梗死后大鼠缺血心肌中血管抑素的表达,探讨缺血心肌血管新生的调节机制.方法采用免疫组化和Western Bbt法检测心肌梗死大鼠7、14、21和28 d缺血心肌中血管抑素的水平;同时用免疫组织化学染色法检测缺血心肌VEGF的表达趋势.结果免疫组织化学染色显示心肌梗死大鼠缺血心肌中血管抑素表达明显增加(P＜0.05),主要分布于血管周围,在第7天表达高,以后逐渐降低,至28 d仍略高于假手术组(P＜0.05).VEGF的变化趋势与血管抑素相似.血管抑素的Western Blot检测结果与免疫组化染色结果基本一致.结论血管抑素在心肌梗死大鼠的缺血心肌中表达增加,与VEGF的动态变化趋势相似,血管抑素可能参与调节缺血心肌的血管新生.
作者：张玉英；范维琥；蒋霞；李勇 刊期： 2005年第05期
复旦学报（医学版）杂志
主管:中华人民共和国教育部
主办：复旦大学
