冯晓林;林秀中;吴海燕
目的 了解引起清远市手足口病(HFMD)的主要病原体型别及分布特征.方法 采集临床诊断手足口病病例的粪便、肛拭子、咽拭子等标本,应用Real-time RT-PCR同时检测总肠道病毒、CoxA16和EV71.结果 共收集448份手足口病临床诊断病例标本,实验室检测标本总阳性率64.73%(290/448),其中EV71阳性率41.52%(186/448),Cox-A16阳性率9.38%(42/448),其它病毒阳性率13.84%(62/448).阳性标本集中于0岁~3岁阶段,占标本总数的81.03%.结论 引起清远市手足口病的主要病原体为EV71型肠道病毒;0岁~3岁儿童是感染的主要人群.全市8个县(区、市)均有EV71感染的手足口病病例.
作者:邓远玲;陈文青;李桂杭;骆俊儒;罗文玲;朱劲涛 刊期: 2014年第03期
目的 对本实验室饲育的布氏田鼠孕鼠实施剖宫取胎,获得快速净化布氏田鼠种群的技术方法.方法 采用剖腹产手术对布氏田鼠进行子宫摘除,使用产过一胎母性良好并且同期产子的ICR雌鼠进行代乳,观察代乳雌鼠对布氏田鼠幼仔的母性及仔鼠成活率.结果 对6只布氏田鼠进行剖腹产手术,成功取出38只布氏田鼠的幼仔,剖腹产仔鼠成活率100%,离乳成活率为15.79%.结论 初步确立了布氏田鼠剖腹产手术的技术方法,代乳ICR雌鼠代乳18 d后开始食仔,造成仔鼠18 d后大量死亡.解决代乳雌鼠食仔问题是提高代乳仔鼠成活率的关键,因此代乳的技术流程需进一步优化.
作者:潘思丹;张曼;施海霞;宋铭晶 刊期: 2014年第03期
目的 建立液相色谱-三重四级杆串联质谱法对食品中痕量丙烯酰胺检测的方法.方法 样品加入同位素内标后,经用硅藻土为填料的ProElut LLE+液液萃取柱净化,采用液相色谱-三重四级杆串联质谱仪进行检测.结果 方法的检出限为0.5 μg/kg,定量限为1.5μg/kg,3类样品的加标回收率在91.1% ~ 102.0%之间,RSD均<5%,在10 μg/L~ 1000 μg/L的范围内线性关系良好,相关系数r=0.9996.结论 本方法灵敏、准确符合食品中痕量丙烯酰胺的测定要求.
作者:张琦;马金波 刊期: 2014年第03期
目的 了解同一地区不同年份CA16基因变异状况.方法 在同一地区用同一方法分离CA16;随机抽取第一代细胞分离到的病毒株,测定VP1区基因序列,应用DNAstar和DNAman分子生物学软件对VP1基因进行分析比较.结果 在2008年-2011年从104份标本中分离到47株CA16,病毒分离阳性率为45.2%;4年来,8株CA16核苷酸同源性为90.3% ~ 100.0%,其中2010年分离的二株病毒核苷酸同源性为90.3%;8株CA16氨基酸同源性为97.9%~100.0%.结论 由于在同一地区不同时间分离的CA16基因存在较大差异,因此选择CA16疫苗株时,应进行各种基因型及同一基因亚型中氨基酸变异较大毒株的交叉保护试验.
作者:郑官增;袁文平;李桂霞;裘丹红;沈伟伟;王金富 刊期: 2014年第03期
目前,离子色谱仪广泛用于空气[1,2]、食品[3]、水等多领域项目检测.其中,使用离子色谱仪代替化学法检测水中硫酸盐、氯化物、氟化物等已成为国标方法[4],其结果准确,快捷方便、灵敏度高[5,6].一般情况下,为延长离子色谱柱的寿命,在进行样品检测时,首先使用保护柱[7],保护柱的作用在于防止样品和淋洗液中的固体颗粒、样品中的强保留成分以及淋洗液中的杂质进入分析柱,它是淋洗液和样品溶液进入分析柱之前的后一道“过滤”装置;其次,长度为15 cm色谱柱的柱压高值常设为10 Mpa.
作者:田晓露;马景文;刘钧;方艳玲 刊期: 2014年第03期
目的 建立中药材中展青霉素的超高效液相色谱-三重四级杆液质法(UHPLC-MS/MS)测定方法.方法 样品经果胶酶酶解,用乙腈水提取,提取液依次通过无水硫酸镁-无水醋酸钠(4∶1)混合粉末进行分散固相萃取和多功能净化柱净化去除杂质,用高效液相色谱-三重四级杆串联质谱进行分析测定.结果 展青霉素在5 ng/ml~ 250 ng/ml范围内与离子流峰面积呈良好的线性关系,线形方程为Y=5.37×103X+151,r =0.9998,回收率在71%~ 99%之间.药材中检测限为0.3 μg/kg ~0.5 μg/kg.结论 本法灵敏、快速、准确、专属性强,可用于中药中展青霉素的测定.
作者:王少敏;张甦;毛丹;陈洁;季申 刊期: 2014年第03期
目的 尽早发现登革热与基孔肯雅热病例,了解深圳地区传播媒介白纹伊蚊携带病毒情况.方法 采集应急监测病例及疫情监测病例血液样品,采用荧光PCR检测登革病毒与基孔肯雅病毒核酸,核酸检测阴性者,再用ELISA法检测IgM抗体;用C6/36细胞对早期病例血清进行病毒分离及型别鉴定;捕捉白纹伊蚊检测病毒核酸;调查媒介布雷图指数.结果 共收集及检测267份合格血液样品.其中,应急监测病例236份,检测结果均为阴性;疫情监测病例31份,检出1份为登革热IgM抗体阳性,1份为登革热核酸阳性,为Ⅲ型;确诊2例均为登革热输入性病例.共采集11批次白纹伊蚊,均未发现携带登革和基孔肯雅病毒.4月-11月份全市平均布雷图指数波动于0.80 ~ 7.17之间.结论 通过实验室监测,发现了登革热病例,经流行病学调查系境外感染,及时控制了疫情的传播扩散,为深圳2011年世界大学生运动会公共卫生安全提供了保障.
作者:阳帆;张仁利;刘阳;许少坚;黄达娜;武伟华;李玥 刊期: 2014年第03期
目的 调查皮肤软组织来源的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)耐消毒剂基因(qacA/B)的携带情况,分析携带qacA/B的MRSA对3种消毒剂的抗性.方法 随机选取医院获得性MRSA和社区获得性MRSA各32株,采用聚合酶链反应(PCR)检测耐消毒剂基因qacA/B,对qacA/B阳性株选择小抑菌浓度(MIC)和小杀菌浓度(MBC)试验进行消毒剂抗性分析.结果 皮肤软组织来源的MRSA耐消毒剂基因qacA/B的检出率为18.5%;社区获得性MRSA和医院获得性MRSA耐消毒剂基因的检出率分别为15.6% (5/32)和21.8% (7/32),两者无统计学差异(P>0.05);qacA/B阳性组的MIC较qacA/B阴性组高(P<0.05);qacA/B阳性组抗性率大于qacA/B阴性组.结论 本地区MRSA中qacA/B的检出率较低,qacA/B阳性菌株对消毒剂的抗性增强,临床上应避免使用低浓度消毒剂.
作者:李小辉;黄松音;李红玉;刘晓强;代鑫露;伍锡泉 刊期: 2014年第03期
目的 了解万州区不同人群艾滋病病毒(HIV)的感染状况,为艾滋病监测和防治工作提供科学依据.方法 依据《全国艾滋病检测技术规范》(2009年修订版)规定的检测流程和方法进行HIV抗体筛查和确证.结果 2012年共检测各类人群161189份,确证HIV-1抗体阳性128份,阳性率0.079%.结论 随着经济的发展,流动人口的增加,万州区艾滋病疫情已进入快速增长期,通过性接触是本区艾滋病传播的主要方式,因此除了加大对特殊人群的监测外,还应加强艾滋病检测和防治知识的宣传,以遏制艾滋病在本区的流行和蔓延.
作者:杨茂瑜;郎中凯 刊期: 2014年第03期
目的 对铁皮石斛原球茎的食用安全性进行毒理学评价.方法 采用急性毒性实验、遗传毒性实验(Ames试验、小鼠骨髓微核试验、小鼠精子畸形试验)和大鼠90 d喂养试验进行评价.结果 小鼠经口MTD大于12.0 g/kg·bw;Ames试验、小鼠骨髓微核试验、小鼠精子畸形试验3项遗传毒性试验结果均为阴性;90 d喂养试验未见大鼠的生长发育、血液学、生化及脏器比有异常变化,肝脏、肾脏、脾脏、十二指肠、卵巢、睾丸等器官外观和组织切片均未发现实质性病理改变.大无损害作用剂量大于5.0 g/kg,相当于人体推荐摄入量的300倍.结论 在本实验剂量范围内,铁皮石斛原球茎为无毒、无遗传毒性、无致突变作用的新资源食品.
作者:冯旭;赵龙;陈虹;周意;汤佳静;储智勇 刊期: 2014年第03期
目的 单增李斯特菌定性检测结合实时荧光PCR、MN计数法,在食源性致病菌检测中快速进行定性及定量检测.方法 用不同浓度的单增李斯特菌的菌悬液污染样品,对细菌培养法和实时荧光PCR法进行比较;分别对当天、冷藏2d、冷冻6d的增菌液进行MPN计数法定量检测,比较三种情况下MPN计数的结果.结果 细菌培养法和实时荧光PCR法检测,两者结果相符,低检测限均为1 cfu/g; MPN计数法定量检测,三个时间段检测结果显示,(1)和(2)的结果相符,与(3)的结果有差异.结论 实时荧光PCR法和MPN计数法定量检测相结合,既避免了由于样品细菌培养法检测出阳性结果后,定量检测时重新取样而导致的结果差异,又缩短了检验周期,这样不仅减少了工作量,也大大提高了工作效率.
作者:张丽萍;高涛;张克俭;薛莉;席桂绒;薛彩娥 刊期: 2014年第03期
目的 完善朝阳区艾滋病检测网络实验室室内质量控制,促进朝阳区艾滋病检测网络实验室的规范化建设.方法 对27家艾滋病检测网络实验室各发放外部质控血清,定期回报外部质控血清S/CO值,绘制质控图,并进行分析.结果 根据检测日期分为三个阶段,质控血清W每个阶段S/CO值合格率均较高,且第三阶段合格率高.结论 通过外部质控的经常性监测,可以及时发现各筛查实验室存在的问题,及时改进;检测方法有了新变化后,能够快速反映在外部质控的数据变化中.使艾滋病筛查中心实验室能够准确掌握各筛查实验室的信息,根据实际情况调整外部质控品.在一定程度上提升了朝阳区艾滋病筛查实验室的整体检测水平.
作者:李丽;王晨;刘丹;黄平;曾照丽;张晓曦 刊期: 2014年第03期
目的 探讨绝经后女性代谢综合征(metabolic syndrome,MS)与性激素水平的关系.方法 收集到本院进行健康体检的768例年龄40岁~65岁的女性按照不同绝经阶段进行分组:绝经后早期286例;绝经后中期220例;绝经后晚期262例;163例月经周期规律者为对照组.分析绝经后女性MS与性激素水平及相关指标的关系.结果 绝经后女性腰围与月经正常组比较,差异有统计学意义(P<0.05),绝经后女性臀围、体重指数(BMI)与月经正常组比较,差异无统计学意义(P>0.05).FSH、LH、PRL在各组间比较差异无统计学意义(P>0.05),睾酮(T)、T/E2比值在各组间比较差异有统计学意义(P<0.05).睾酮(T)在MS组与非MS组间比较差异有统计学意义(P<0.05),空腹血糖(FBG)、甘油三酯(TG)与T/E2比值呈正相关(r=0.28,r =0.26,P<0.05).结论 绝经后女性血清睾酮水平与MS存在一定的相关,可作为预测绝经后女性MS的一个可选指标.
作者:陈红丽 刊期: 2014年第03期
在卫生检验中,测定酒中氰化物,异烟酸-吡唑酮分光光度法是较好的方法之一,但在测定过程中,常因高级醇等物质的干扰,容易造成溶液浑浊而影响测定结果,采用石油醚提取显色后浑浊的溶液,能达到很好的去浊效果,且能节省试剂,方法的精密度好,准确度也高.
作者:平付军;包伟华 刊期: 2014年第03期
目的 探讨血浆miR-125a-5p在肝纤维化患者中的表达及意义.方法 收集50例健康志愿者及130例慢性乙型肝炎患者的血浆进行miR-125a-5p实时荧光定量聚合酶链反应(real-time PCR)检测.结果 相对于正常组,肝纤维化S1-S4组的miR-125a-5p显著增加(P<0.05),且纤维化越严重,miR-125a-5p的表达量就越高(P<0.05).患者组中肝硬化患者经扶正化瘀等治疗后,治疗后第7d及第30 d复查miR-125a-5p表达量较治疗前明显减低(P<0.05),且随着治疗的延长,miR-125a-5p的表达表现为持续下降(P<0.05).相关性分析显示miR-125a-5p表达与child-pugh分级呈现出高度正相关(相关系数r=0.841,P<0.01).深入研究显示,患者组中HBeAg(+)患者miR-125a-5p表达量明显高于HBeAg(-)患者(P<0.05).结论 血浆miR-125a-5p的测定有助于肝纤维化的诊断及分期,并对肝硬化患者的病情估计及预后治疗有着一定的帮助.
作者:林德照;郑建建;林镯;董培红;俞富军 刊期: 2014年第03期
目的 建立难溶于水药物盐酸头孢唑兰中高分子聚合物的测定方法.方法 采用分子排阻色谱法,葡聚糖凝胶G-10(40 μm ~ 120 μm)为填充剂的玻璃柱(1.0 cm×30 cm),分别以pH7.0的0.05 mol/L磷酸盐缓冲液和水为流动相A和流动相B;流速1.0 ml/min,检测波长为254 nm,进样量为100μl.以头孢曲松替代不完全聚合的头孢唑兰作为对照,加校正因子外标法定量(头孢唑兰∶头孢曲松=1.19∶1).结果 头孢唑兰浓度在2.00 mg/ml~ 20.0 mg/ml范围内与盐酸头孢唑兰中高分子聚合物峰面积呈良好的线性关系(r=0.9999),头孢曲松对照品浓度在24.56 μg/ml~245.6 μg/ml范围内与头孢曲松中高分子聚合物峰面积呈良好的线性关系(r=0.9997).检测限为0.025 μg,定量限为0.083 μg.结论 经验证该方法能够较好地分离头孢唑兰和高聚物,可用于注射用盐酸头孢唑兰的高分子聚合物的检测.
作者:刘珊;洪利娅 刊期: 2014年第03期
目的 建立蔬菜中三大类农药的固相萃取-双柱双检测器-同一升温程序下气相色谱同时测定法.方法 样品经乙腈溶剂匀浆提取,Carb-NH2柱净化,样品间隔60 s进样2次,先经CP-Sil 5CB柱分离后进入NPD检测器进行有机磷和氨基甲酸酯类农药测定,然后经CP-Sil 24CB柱分离后进入ECD检测器进行有机氯和拟除虫菊酯测定,阳性样品双柱检测器端互换双柱验证.结果 三大类农药在0.01 μg/ml ~ 2.0 μg/ml范围内质量浓度与峰面积有良好的线性关系,方法检测限在0.0001 mg/kg ~0.010 mg/kg,加标回收率在76% ~ 124%之间,相对标准偏差(RSD)在0.95% ~4.7%.结论 该方法简便、快速,结果准确,能满足蔬菜中多种类农药残留同时分析的要求.
作者:胡浩军;黄方取 刊期: 2014年第03期
目的 了解2009年-2011年大连地区肠道病毒71型(EV71)分离株的基因特征,初步探讨VP1、VP4、5'UTR区核苷酸和氨基酸序列变异与不同临床类型的关系.方法 从手足口病例、重症病例的粪便标本中分离获得9株EV71病毒株,RT-PCR扩增VP1、VP4、5'UTR区,并进行序列测定和分析.结果 这9株EV71毒株均属于C4a亚型,其核苷酸之间的同源性为88.7% ~ 99.9%;氨基酸之间的同源性为96.7% ~ 100%;9株毒株的VP4氨基酸序列高度一致;对于5'UTR区在第208位核苷酸,重症来源的样品发生了碱基置换(G→A);在第254位核苷酸,重症来源的样品发生了碱基置换(A→G).氨基酸序列未发现一致性改变.结论 (1) 2009年-2011年大连地区分离的9株EV71毒株均属于C4a亚型.(2)基于VP4的基因分型与VP1的基因分型相一致,均为C4a亚型,且VP4序列高度保守.(3)在5'UTR序列上发现了第208位和254位核苷酸的碱基置换,这一结果还有待于进行下一步的研究.
作者:吕秋月;韩炎;侯君 刊期: 2014年第03期
目的 了解贵州省2013年上半年手足口病病原谱及分布特征,为防控提供信息.方法 各县(市、区)收集临床患者基本信息及标本送属地市(州)疾控中心,标本用realtime-PCR技术检测肠道病毒,对结果进行描述性分析.结果 共对4792例病例采集咽拭子和/或肛拭子等4836份检测,肠道病毒感染者2660例(感染率55.51%),60.94%为其他肠道病毒,25.75%为EV71,8.46%为CA16,4.40%为CA6,0.45%为EV71+ CA16.九市(州)除铜仁市以EV71(占74.51%)为主外,其余市(州)均以其他肠道病毒居多.3月-5月为感染高峰期.5岁及以下者占87.71%,呈2~岁组和5~岁组两个感染年龄峰.轻型病例以其他肠道病毒感染居多(63.29%),重症病例以其他肠道病毒(52.03%)和EV71 (43.33%)较多,死亡病例以EV71居多(60%).散发和聚集性病例均以其他肠道病毒居多(61.24%和58.00%).结论 贵州省大部分地区手足口病流行的病原谱发生变化,需进一步加强各项监测工作.
作者:姚光海;郭军;王丹;李发锦;刘慧慧;唐光鹏;邹志霆 刊期: 2014年第03期
目的 了解单核细胞增生李斯特菌在腹泻病人便标本中的携带及感染状况,探讨食源性单增李斯特菌与临床病例之间的关系,为由其引起的食物中毒病原学及食品中单增李斯特菌污染状况调查提供数据参考.方法 采集本辖区医院肠道门诊腹泻患者病例便标本,分别采用两种不同的增菌液和培养基进行分离培养,使用梅里埃VITEK 2 Compact30全自动细菌生化分析仪,进行单增李斯特菌的鉴定.结果 在410例腹泻病人便标本中,检出1株单增李斯特菌,检出率0.24%.结论 腹泻病人便标本中可以检出单增李斯特菌,为了提高感染人群标本中单增李斯特菌的检出率,需要进一步优化分离培养条件.
作者:高波;霍哲;胡三梅;白书媛;高秀媛 刊期: 2014年第03期