学术投稿

化学发光技术在Southern印迹杂交中的应用

刘凤娟;陈清;俞守义

关键词:化学发光, CSPD, Southern印迹杂交
摘要:目的:探讨化学发光技术(CSPD)在Southern印迹杂交中的应用情况.方法:随机引物法地高辛标记模板,化学发光法直接检测探针标记效率,进行模拟杂交确定适探针浓度、检测探针敏感性.结果:化学发光法直接检测探针标记效率为0.1 pg,模拟杂交中化学发光法检测探针敏感性达到0.03 pg,适探针浓度为40 ng/ml.结论:化学发光技术检测敏感性高,可用于基因组Southern印迹杂交检测单拷贝基因.
中国卫生检验杂志相关文献
  • 台山市花生油卫生质量分析

    目的:总结台山市花生油卫生质量检验指标结果,了解台山市食用花生油的加工、销售卫生情况.方法:按照食品卫生检验方法-理化部分GB/T5009.37-1996和GB/T5009.22-1996(主要检测项目是感官、酸价、过氧化值、羰基价、砷、黄曲霉毒素)及中华人民共和国国家标准GB1534-1996和GB2716-88进行检验和评价.结果:从2000~2003年共检测花生油467份,合格410份,平均合格率为87.8%;2000年合格率为81.8%,2001年合格率为84.7%,2002年合格率为87.8%,2003年合格率为95.7%.合格率有逐年升高的趋势.有显著性差别(x2=12.43,P<0.005).黄曲霉毒素B1与其它项目比较,合格率有非常显著差别(x2=31.38,P<0.005).结论:台山市花生油检验结果合格率仍较低,存在卫生问题,今后仍要加强对食用花生油监测和监督管理,提高食用花生油的卫生质量,让人们可以放心食用.

    作者:许美玲;林永坚;赵玉喜 刊期: 2007年第06期

  • 保健食品中甘草酸测定方法的研究

    目的:建立用反相高效液相色谱内标法测定保健食品中甘草酸含量的方法.方法:采用Alltima C18柱(4.6 mm×150 m,5 μm),流动相:3%醋酸溶液+乙腈=60+40,内标物为对羟基苯甲酸丁酯,检测波长254 nm.结果:经回收率试验和试样检测,方法的回收率为87.2%~96.7%,试样测定RSD为3.05%.结论:本法操作简单,准确可靠,为质量监控提供了参考.

    作者:方从容;杨大进 刊期: 2007年第06期

  • 细菌性食物中毒诊断获得实验室支持的因素分析

    食物中毒是食源性疾病的暴发形式,也是突发公共卫生事件的重要内容之一,微生物引起的食源性疾病事件和涉及的人数目前在我国是多的.

    作者:李艳 刊期: 2007年第06期

  • 西式快餐中煎炸油与油炸食品的卫生学调查

    目的:了解西式快餐连锁店所使用的煎炸油以及所加工的油炸食品的卫生状况.方法:选择市内某西式快餐集团辖下的连锁店,抽检其加工的油炸食品,对其所使用的煎炸油进行卫生学调查,并配对抽检煎炸油及油炸食品.结果:煎炸油的合格率为92.05%;油炸薯条的合格率为67.95%;油炸禽肉的达标率为84.42%.主要是酸价检验结果不合格、不达标.结论:目前西式快餐店煎炸油及其油炸食品仍存在不少卫生问题,应引起卫生监督部门的充分重视.

    作者:梁骏;邓小冰;丛黎达;区继军;景钦隆 刊期: 2007年第06期

  • 细胞间粘附分子-1基因多态性与动脉硬化性脑梗死的相关性研究

    目的:研究细胞间粘附分子-1(ICAM-1)469K>E多态性位点等位基因分布频率及其与ACI的关系.方法:选择121名湖北地区健康汉族人及92名ACI患者,应用等位基因特异性PCR(巢式PCR),对每个个体的基因型进行鉴定.同时,采用酶法、免疫比浊法及酶联免疫吸附试验(ELISA)对研究对象血脂和ICAM-1水平进行检测.结果:二组间除性别、年龄及BMI无明显差异外,其它各项指标(吸烟、TC、TG、HDL-C、LDL-C、ICAM-1)均有明显差异(P<0.01);469K>E位点,ACI组稀有等位基因E的频率明显高于对照组(x2=11.93,P=0.001),KK、KE、EE 3种基因型在二组中的分布频率有明显差异(x2=34.94,P=0.000),且二组中KK、KE、EE 3种基因型TG与ICAM-1水平差异有统计学意义(P<0.01).结论:ICAM-1 469E等位基因与ACI患者TG及ICAM-1水平升高有关,可能是该地区人群ACI的危险因子.

    作者:周有利;朱名安;孙竟;丁妍;冯景 刊期: 2007年第06期

  • 工作场所空气中乙酸2-甲氧基乙酯气相色谱测定方法研究

    目的:建立工作场所空气中乙酸2-甲氧基乙酯浓度的测定方法.方法:选用FFAP柱分离,活性炭管采样,二氯甲烷/甲醇解吸,气相色谱法测定空气中乙酸2-甲氧基乙酯.结果:采用FFAP柱能将乙酸2-甲氧基乙酯与共存物分离.乙酸2-甲氧基乙酯浓度在0~240 μg/ml范围内呈线性关系,相关系数为0.9995,方法的检出限为9.28μg/ml,低检出浓度为6.2 mg/m3(以采集1.5 L空气样品计).方法的相对标准偏差为2.4%~6.9%.解吸效率为94.1%~98.7%.样品于室温可保存7 d.结论:该方法各项指标达到《车间空气中有毒物质测定研究规范》的要求,本方法适用于工作场所空气中乙酸2-甲氧基乙酯浓度的检测.

    作者:宋景平;陶雪 刊期: 2007年第06期

  • 高效液相色谱法测定青蒿草中青蒿素的研究

    目的:探索青蒿草中青蒿素的检测方法.方法:用无水乙醇提取青蒿草中的青蒿素,用高效液相色谱法测定,流动相为甲醇+10 mmol/L磷酸盐缓冲液(60+40),流速为1.0 ml/min,检测波长为260 nm.结果:本方法在青蒿素浓度为5.0~25.0 mg/L范围时线性相关系数r=0.9998,加标回收率在90.5%~98.5%之间,RSD在0.93%~1.31%之间;青蒿草中青蒿素的含量在0.554%~1.02%之间.结论:此方法可用于青蒿草中青蒿素的测定.

    作者:陈益元;黄道平;谢燕湘 刊期: 2007年第06期

  • 不同试剂对初筛反应性血液标本双孔复试结果的比较

    随着无偿献血的深入开展,目前我市临床用血100%均为无偿献血者所捐献.考虑到血资源的宝贵,尽量减少不必要的浪费,结合《采供血机构质量管理规范》的要求,我站对于已采集了全血的标本,若复检两次结果不符,一种试剂呈初筛反应性的标本必须重新取血样用同种试剂进行双孔复试,两孔均为阴性时该标本仍作为阴性处理,尽量排除因操作不当引起的假阳性.

    作者:王兰;袁劲涛;刘玉英;谭晓霞 刊期: 2007年第06期

  • 索氏抽提法检测脂肪应注意的问题

    脂肪是食品的主要成分之一,大多数动物性食品和一些植物性食品,尤其是植物的种子、果实或果仁,都含有脂肪或脂类化合物.在实用油脂中主要存在甘油三酸酯以及一些脂肪酸、磷酸、糖酯、脂溶性维生素等类酯化合物.脂肪有两种存在形式,即游离脂肪和结合脂肪,测定食品中脂肪含量的方法有很多,但大多数采用低沸点溶剂直接萃取,或用酸碱溶液破坏碳水化合物和蛋白质,然后用溶剂萃取或离心离析.这就是常用的索氏抽提法、酸水解法、碱水解法等,不同的食品应采用不同的方法,本文对GB/T5009.6-2003《食品中脂肪的测定》第一法-索氏抽提法进行探讨:

    作者:山瑛 刊期: 2007年第06期

  • 2004~2006年兰州市干果和蜜饯中二氧化硫残留量分析

    目的:对送检的百合干、杏肉等蜜饯制品进行亚硫酸盐检测,以了解其二氧化硫含量,并提出合理建议.方法:采用GB/T5009.34-2003盐酸副玫瑰苯胺法检测.结果:149份样品中符合国家卫生标准的61份,超标88份.结论:兰州市场销售的干果和杏肉制品中亚硫酸盐的含量超标严重,特别是杏肉制品.

    作者:孙丽枫;王艳 刊期: 2007年第06期

  • 宜昌市2002~2005年食品中二氧化硫残留量检测结果分析

    目的:对8类食品中二氧化硫残留进行检测,为执法部门提供政策执行依据.方法:样品均采集于宜昌市主要的集贸市场和超市,按照食品卫生检验方法理化部分(一)GB/T5009.34-2003第一法盐酸副玫瑰苯胺法执行.结果:其中竹笋4年的年平均合格率低,只有21.5%,经过国家对有毒竹笋的查处,情况并没有得到好转,其次是银耳、淀粉及其制品,发酵酒和糖类污染情况略好于前三类食品.结论:监测的8类食品中二氧化硫残留合格率相对食品中其他指标较低,应当引起有关部门足够重视,加大监管力度,杜绝食品生产销售中的违法行为.

    作者:马蓓蓓;陈萍;阎江红;程德明;余云芳 刊期: 2007年第06期

  • 校园小区内桶装饮用纯净水微生物检测与分析

    目的:为了解校园内市售桶装纯净水的卫生状况,保障消费者饮用健康合格的纯净水.方法:对校园小区内60份桶装纯净水进行微生物指标检测,并对结果进行分析.结果:经检测,所检项目均合格的37份,合格率61.7%.结论:结果表明校园内桶装纯净水卫生质量较差,令消费者担忧,应引起有关部门的重视.

    作者:杨玉英;王璐璐;邓洪宇;夏春雷 刊期: 2007年第06期

  • 酸性高锰酸钾法测定水中耗氧量方法改进

    化学耗氧量是指水中易被强氧化剂氧化的还原性物质在一定条件下被氧化所消耗的氧化剂量并以相当的氧计,它不是单一含义的指标,而是水体是否受到有机物污染的综合性指标,在GB5750-1985中作为参考指标,而在《生活饮用水卫生规范,2001》中作为常规项目.检验第一法均采用酸性高锰酸钾法(本文称为原法),在方法中使用了高锰酸钾和草酸钠两种标准溶液,不符合一般的方法设计且操作和计算公式极为复杂.本文根据标准溶液的使用规则和方法设计的原理加以改进.

    作者:顾建忠;周伟斌;高新芬 刊期: 2007年第06期

  • 快速检测蔬菜中农药残留的方法探讨

    目前有机磷和氨基甲酸脂类农药的检测方法有气相色谱法及快速测定方法-酶抑制法.气相色谱法是国家标准方法,要求条件较高,必须具备气相色谱仪并配有火焰光度检测器(FPD)或氮磷检测器(NPD),有适合的色谱柱等.该方法具有灵敏度高、分辨率高的特点,能够较准确的定量检测出有机磷和氨基甲酸脂类农药的浓度及种类.快速检测方法虽不是国标法,但具有检测快速设备和试剂简单、成本低的特点,适合水果蔬菜上市前农药残留毒性的检测.

    作者:邰春娇;吴晓芳 刊期: 2007年第06期

  • 稀释倍数对全血中铅含量测定结果的影响

    目的:试验对比不同稀释倍数对全血中铅含量测定的影响.方法:氢化物发生-原子荧光光谱法.结果:稀释倍数不同所引起的血铅测定值也不同.结论:在K3[Fe(CN)6]-KBH4-HCl-0.4%C2H2O4体系上建立的方法,若取1.0 ml血样消解,定容至10.0 ml上机测定,则方法的检出限为1.6μg/L.其灵敏度与检出限均能达到血铅测定的要求,适于我国绝大部分医疗机构开展铅防治工作的要求.

    作者:麦洁梅;成晓玲;张琪 刊期: 2007年第06期

  • 高效液相色谱法测定食品中阿斯巴甜的含量

    目的:建立测定各类食品中阿斯巴甜含量的系统分析方法.方法:对不同类别的食品采用针对性的前处理手段,选择C18柱和甲醇/水流动相作为分离条件,在208 nm波长处进行检测.结果:方法的低检出限为2 mg/kg,平均回收率为96.0%~98.9%,相对标准偏差为3.0%~6.1%.结论:方法简单快速,能适用于各类成分复杂的食品的定性定量分析.

    作者:蒋定国;王竹天;杨大进;李小芳;马兰 刊期: 2007年第06期

  • 高效液相色谱法同时测定蔬菜中5种氨基甲酸酯类农药

    目的:建立同时测定蔬菜中速灭威、涕灭威、呋喃丹、西维因、异丙威5种氨基甲酸酯类农药的液相色谱测定方法.方法:样品经丙酮-氯化钠-二氯甲烷提取,40℃氮吹浓缩后,经氨基-SPE柱净化,40℃氮吹浓缩至2.0 ml,HPLC测定.色谱条件:C18柱(4.6×250 mm,5 μm),流动相:甲醇-水(45:55),流速:1 ml/min,柱温:40℃,二极管阵列检测器,检测波长:210 nm.结果:5种农药不同水平加标回收率范围为:83.7%~108.0%,RSD为3.2%~5.4%,低检出浓度分别为:速灭威0.02mg/kg、涕灭威0.02 mg/kg、呋喃丹0.01 mg/kg、西维因0.006 mg/kg、异丙威0.06 mg/kg.结论:本法操作简单、灵敏、准确、重现性好,适合于蔬菜中速灭威、涕灭威、呋喃丹、西维因、异丙威等农药的同时测定.

    作者:文君;孙成均;缪红;王鲜俊;彭喜雨 刊期: 2007年第06期

  • 凝胶渗透色谱和固相萃取净化气相色谱-负化学源-质谱测定羊肠衣中的氯霉素残留量

    目的:建立羊肠衣中氯霉素残留含量的分析方法.方法:羊肠衣样品用乙酸乙酯提取,凝胶渗透色谱和固相萃取净化,净化后的提取物用BSTFA+TMCS衍生化,气相色谱-负化学源-质谱法(GC-NCI-MS)选择离子定量检测,内标法定量,间位氯霉素为内标物.结果:5个添加水平的平均回收率在78.3%~106.0%之间,相对标准偏差在1.1%~10.3%之间.检出限(LOD)为0.1 μg/kg,测定低限(LOQ)为0.3 μg/kg.结论:该法简便省时,自动化程度高,可以满足欧盟委员会决议2002/657/EC和2003/181/EC的要求.

    作者:李锋格;窦辉;全晓盾;姚伟琴 刊期: 2007年第06期

  • 呼吸道感染病原菌分布及耐药性调查

    目的:了解我院呼吸道感染病原菌谱及耐药性.方法:对我院2006年1月~9月临床送检的痰及咽拭子进行细菌培养,采用美国德灵公司Auto Scan-4微生物分析系统进行细菌鉴定和药物敏感试验;采用ATB Fungus进行真菌药物敏感试验.按NCCLS标准判定敏感菌株.结果:共分离到病原菌119株,革兰阴性杆菌占68.07%,真菌占26.05%,革兰阳性球菌仅占5.88%.革兰阴性杆菌以肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌为主,分别占病原菌总数的36.13%、7.56%、6.72%;真菌以白色假丝酵母菌为主,占真菌总数的54.84%.药敏结果提示,铜绿假单胞菌、肠杆菌属、沙雷氏菌属等均出现多重高比例耐药,真菌也对唑类药物出现强耐药性.结论:近呼吸道感染病原菌以革兰阴性杆菌和真菌为主,而且出现多重耐药.

    作者:王淑彩;金高升 刊期: 2007年第06期

  • 保健食品中总黄酮的测定方法

    目的:建立以石油醚作为洗脱剂测定保健食品中总黄酮的方法.方法:样品经甲醇提取,用聚酰胺粉吸附,经石油醚洗脱杂质后,在波长360 nm处,用分光光度法测定保健食品中总黄酮的含量.结果:采用石油醚作为洗脱剂,总黄酮浓度的含量在0~20.0 μg/ml范围内与吸光度值呈良好的线性关系(r=0.9998),方法的检出限为2.5 μg.测定样品的相对标准偏差在4.60%~6.49%之间,回收率在86.67%~101.50%之间.与用苯作为洗脱剂方法测定结果比较,两者无显著性差异.结论:该方法操作简便,重现性及稳定性好,线性范围宽,特别是减少了苯对检测人员和环境的污染,可用于保健食品中总黄酮的测定.

    作者:肖香兰;罗仁才;张楠 刊期: 2007年第06期

中国卫生检验杂志

中国卫生检验杂志

主管:中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会

主办:中华预防医学会