项忠元；皮兰敢；石志辉；杨佳锦；唐爱国；莫喜明
环介导恒温扩增技术(LAMP)是2000年由日本学者开发的一种新型核酸体外扩增技术.LAMP不仅广泛应用于细菌、病毒、寄生虫等病原微生物检测,而且可以进行单核苷酸多态性分析.LAMP具有灵敏度高、特异性好、可定量分析、反应时间短、操作简单等优点,特别适合在基层实验室推广应用.随着LAMP技术的不断进展,其在标本前处理、引物设计、产物的特异性可视化检测方面也日臻完善.
作者：郄春花 刊期： 2013年第07期
目的 探讨LSMI基因多态性与江苏地区汉族人精神分裂症的关联性.方法 用连接酶检测反应PCR (LDR-PCR)单核苷酸多态性(SNP)分型技术对506例精神分裂症患者和522例健康对照者LSM1基因rs16887244、rs2843738、rs2843746 3个标签单核苷酸多态性(tgSNP)进行基因分型,比较各组间等位基因、基因型分布频率.结果 与健康对照组比较,精神分裂症组rs16887244等位基因分布频率差异不显著(OR =0.992,P=0.935)；rs2843738和rs2843746等位基因分布频率也无显著差异(OR分别为1.036,1.013,P均＞0.05)；rs16887244基因型(AA/AG/GG)、rs2843738基因型(CC/CG/GG)和rs2843746基因型(CC/CT/TT)分布频率均无显著差异(x2分别为0.511,0.147,5.981,P均＞0.05).结论 江苏地区汉族精神分裂症患者与LSM1基因rs16887244、rs2843738、rs2843746多态性不相关.
作者：俞水；金春慧；袁建民 刊期： 2013年第07期
地中海贫血(地贫)是由于珠蛋白基因的缺失或点突变所致的遗传性溶血性贫血[1],我国以广东、广西、海南等发病率较高,北方地区较为少见[2].目前研究多集中在胎儿地贫基因的缺失或点突变基因诊断,较少关注胎儿染色体核型.为了解地贫孕妇与胎儿染色体核型关系及胎儿染色体的核型,本研究对用裂口PCR (gap-PCR)和PCR结合反向斑点杂交(RDB-PCR)检测确诊为地贫的孕妇进行羊水检测,并对胎儿染色体进行核型分析.
作者：邓国生；张炬光；何芳 刊期： 2013年第07期
目的 比较四分位数稳健统计和迭代稳健统计在定量检测指标室间质量评价(EQA)数据处理中的应用.方法 分析2012年参加上海市临床检验中心常规化学第1次EQA酶法检测肌酐的实验室结果,用四分位数稳健统计和迭代稳健统计分别进行统计.结果 2种方法确立的靶值基本相同,迭代稳健统计的标准差、变异系数较四分位数稳健统计大,稳健Z比分数值偏离0的程度总体上较四分位数法小,不合格实验室数较四分位数稳健统计少.结论 相对于四分位数稳健统计,迭代稳健统计是一种更宽松可靠的统计方法.
作者：金中淦；居漪；唐立萍；王美娟；刘文彬；李卿；欧元祝；虞啸炫 刊期： 2013年第07期
脂联素是体内唯一一种来源于脂肪组织的保护性脂肪因子,与乳腺癌的发生、发展密切相关.近年来关于脂联素与乳腺癌发病危险性的研究取得了较大进展,本文就脂联素及其受体基因多态性与乳腺癌的相关性研究进展做一综述.
作者：许晔琼；邓齐文；孙慧玲 刊期： 2013年第07期
我们在日常工作中发现分别检测丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、总蛋白(TP)、清蛋白(A1b)、总胆红素(T-Bil)、直接胆红素(D-Bil)、肌酸激酶(CK)、α-羟丁酸脱氢酶(HBDH)后检测钙浓度偏低,怀疑试剂携带污染对钙测定造成了负干扰.
作者：王毅；何咏婷；刘银河 刊期： 2013年第07期
目的 了解我院鲍曼不动杆菌(AB)的耐药率,探讨广泛耐药AB感染的临床用药新途径.方法 分析我院2007年1月至2011年12月临床各类送检标本中AB的耐药状况,采用微量棋盘稀释法测定头孢他啶和米诺环素对临床分离的广泛耐药鲍曼不动杆菌(XDR-AB)联合药敏情况,计算部分抑菌浓度(FIC)指数.结果 分离出的326株AB对17种抗菌药物的耐药率总体呈逐年上升趋势,其中包括XDR-AB 110株.头孢他啶与米诺环素联合应用有协同作用(77.3％)和相加作用(20.0％),2.7％的菌株表现为无关作用,未发生拮抗作用.结论 AB耐药率逐年上升,头孢他啶与米诺环素联合药敏试验对97.3％的XDR-AB菌株有协同或相加作用.
作者：彭健桥；仇杭佳；李帼宁 刊期： 2013年第07期
目的 构建hsa-miR-26b沉默载体,与其靶基因PTEN共转染HEK-293T细胞验证其沉默效果.方法 用miRNA海绵体技术设计并合成与hsa-miR-26b成熟序列反向互补的3个重复序列的双链DNA,将短发卡状RNA(shRNA)克隆入LV3-GFP-Puro载体,与靶基因PTEN共转染HEK-293T细胞,于24 h后收集细胞RNA,用real-time PCR检测hsa-miR-26b表达水平,同时用双荧光素报告系统检测其对靶基因的作用.结果 成功构建了有效的hsa-miR-26b沉默载体,经测序验证与设计序列一致；real-time PCR验证hsa-miR-26b表达水平降低了75％；双荧光素报告系统验证其对靶基因无抑制作用(P＞0.05).结论 成功构建hsa-miR-26b沉默载体,并验证其对靶基因PTEN无抑制作用.
作者：史春梅；徐广峰；宋桂仙；季晨博；陈玲；杨蕾；庞玲霞；赵亚萍；郭锡熔 刊期： 2013年第07期
目的 初步建立长沙地区健康人群胃蛋白酶原(PG)参考区间,为本地区胃癌的早期筛查提供依据.方法 选择长沙地区体检健康者1 793例,用ELISA法检测血清PG Ⅰ、PGⅡ,计算PG Ⅰ/PGⅡ比值,并作统计学分析.结果 PG Ⅰ参考区间:18 ～ 59岁为(69.5～176.9) μg/L,≥60岁为(80.8～184.2) μg/L.PGⅡ参考区间:18～44岁男性为(0～14.8) g/L、女性为(0～14.6) μg/L,45～ 59岁男性为(0～18.5) μg/L、女性为(0～18.3) μg/L,≥60岁为(0～19.0) μg/L.PG Ⅰ/PGⅡ比值的参考区间:18 ～44岁男性为≥8.8、女性为≥9.2,45～ 59岁男性为≥7.5、女性为≥7.4,≥60岁为≥7.1.结论 初步建立了长沙地区健康人群血清PG参考区间,可为本地区胃癌早期筛查提供参考.
作者：钟一鸣；刘文恩；李艳华；陈伟；罗珊 刊期： 2013年第07期
目的 利用碱基猝灭探针技术建立检测编码α-1抗胰蛋白酶基因342Glu→Lys突变位点的新型诊断方法.方法 探针3′端标记6-羧基荧光素,同时构建2个载体作为阳性对照模板,分别代表两种可能的纯合子基因型,即野生型和PiZZ纯合突变型.用熔解曲线对两种不同基因型结果进行分析判断,并验证检测方法的准确性和灵敏度.结果 熔解曲线分析显示,338例患者标本均在50℃左右出现熔解谷,即所有标本均为野生型；Kappa检验结果显示,该法的检测结果与DNA测序法完全一致(k=1,P=0.000).灵敏度分析结果显示,模板DNA量在103拷贝时可以看到明显的熔解谷.结论 构建的方法准确、简单、经济,适合大规模对α-1抗胰蛋白酶基因342Glu→Lys突变位点的分型诊断.
作者：秦莉；张俊；冯悦华；罗光华 刊期： 2013年第07期
Nucleostemin(NS)基因在干细胞中高表达,在干细胞分化时迅速减少,参与干细胞和肿瘤细胞的增殖调控,维持干细胞扩增并抑制其向成熟细胞分化,从而阻止细胞凋亡.NS基因在肿瘤细胞干细胞特性维持中也起重要作用.NS蛋白以依赖于GTP的形式穿梭于核仁和核质之间,参与核糖体特别是前核糖体rRNA的装配过程.NS基因与肿瘤发生关系密切,或可作为靶向治疗的候选基因.
作者：韩崇旭；许文荣；孙艳 刊期： 2013年第07期
用参考方法测量血清总蛋白时,选择合格试剂是做好测量的前提.双缩脲溶液中低浓度的五水硫酸铜(CuSO4·5H2O)和高浓度的碱溶液形成[Cu(OH)4]2-络离子,四水酒石酸钾钠(KNaC4H4O6·4H2O)具有络合作用可以保护[Cu(OH)4]2-不被析出形成沉淀,防止试剂失效.筛选合格的KNaC4H4O6·4H2O试剂对保证配制试剂的性能具有重要作用.本研究主要探讨如何筛选符合参考方法测量总蛋白要求的KNaC4H4O6·4H2O试剂.
作者：李月玲；邵燕；孙慧颖；胡滨；陈宝荣 刊期： 2013年第07期
唐菖蒲伯克霍尔德菌(Burkholderia gladioli)是比较少见的感染人类的病原菌.我们从胸水中发现1株唐菖蒲伯克霍尔德菌,报道如下.1 病历摘要患者,女,33岁,发热7d伴胸痛入院.拟诊:社区获得性肺炎.实验室检查:血沉65 mm/h,血常规RBC 3.8×1012/L,WBC 11.2×109/L,N 0.73,L0.21,C反应蛋白(CRP)60.5 mg/L.胸部CT:右肺下叶炎症伴右侧少到中等量胸腔积液.胸水常规:有核细胞计数2 592 2 106/L,李凡他试验3+.
作者：肖倩茹；侯伟伟；江涟；万海英 刊期： 2013年第07期
目的 探讨血清吲哚氨2,3-双加氧酶(IDO)活性测定对肺癌诊断的价值.方法 用高效液相色谱荧光法检测51例体检健康者、152例肺癌患者、31例肺良性疾病患者血清色氨酸(TRP)和犬尿氨酸(KYN)浓度,计算IDO活性,用ROC曲线评价IDO对肺癌的诊断性能.结果 肺癌组、健康人对照组与肺良性疾病组TRP浓度分别为(37.42±6.48)、(47.55±5.27)和(46.18±5.84) μmol/L；KYN浓度分别为2.58(1.55 ～3.26)、1.26 (0.87 ～ 1.75)和1.35(0.82～2.01)μmol/L,IDO活性分别是78.66(54.37～ 110.58)、25.75(16.85～36.32)和27.85(16.28 ～40.62)μmol/mmol.与健康人对照组比较,肺癌患者组TRP降低(t=-15.47,P＜0.01),而KYN和IDO升高(U分别为85.8、138.6,P均＜0.01).IDO诊断肺癌的ROC曲线下面积为0.895(95％CI:0.845～ 0.945),临界值为45.8 μmol/mmol时,敏感性为90.1％、特异性为84.2％.结论 肺癌患者血液IDO活性升高,IDO有望用于肺癌辅助诊断.
作者：项忠元；皮兰敢；石志辉；杨佳锦；唐爱国；莫喜明 刊期： 2013年第07期
SLE和类风湿关节炎(RA)的分类标准对这两种疾病患者的早期发现、临床准确诊断和规范化治疗至关重要.数十年来,分类标准不断更新、修订和完善.医学检验人员在撰写论文时应采用新修订的分类标准,避免使用二、三十年前的分类标准.本文介绍了SLE和RA分类标准的演变进程,望广大医学检验人员了解其新的分类标准,熟悉并掌握各项新的实验室检测指标.
作者：武建国 刊期： 2013年第07期
目的 探讨血栓弹力图(TEG)监测妊娠合并血小板减少症孕妇凝血功能的应用价值.方法 选择于我院就诊的妊娠合并血小板减少症孕妇56例[按血小板计数＜50×109/L、(50～79)×109/L、(80 ～99)×109/L分为A、B、C组]及同期健康孕妇226例,分别检测R值、K值、α值、MA值、CI值、凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、血浆凝血酶时间(TT)与纤维蛋白原(Fib).结果 妊娠合并血小板减少组与健康孕妇对照组比较,R值、K值、PT值、APTT值升高(t分别为2.28、5.80、3.05、3.87,P均＜0.05),α值、MA值、CI值降低(t分别为-6.67、-6.37、-6.30,P均＜0.01).妊娠合并血小板减少组中B、C组K值低于A组(P均＜0.05),α值、MA值与CI值高于A组(P均＜0.05).R值、K值、α值、MA值、CI值与PLT值相关,相关系数(r)分别为-0.13、-0.56、0.61、0.64、0.59,P均＜0.05；PT、APTT、TT、Fib值与PLT值间均无相关性.结论 TEG较传统凝血四项更能反映血小板减少症孕妇凝血功能状态.
作者：章莉；俞菁；侯雅萍；胡荷宇；李海川；俞琼琰；谭美玉；何虹；龚波 刊期： 2013年第07期
异形淋巴细胞为抗原刺激后的一类转化型细胞,其胞核和胞质都有形态学改变,特征为细胞体积增大,胞质嗜碱性增强、出现空泡,胞核变大、染色质疏松、甚至出现核仁,是一种形态异常的淋巴细胞.《全国临床检验操作规程》第3版将其称为异形淋巴细胞,国内外有称变异淋巴细胞(variant lymphocyte)[1-2],有称不典型淋巴细胞(atypical lymphocyte)[3],也有称反应性淋巴细胞(reactive lymphocyte)[4].不同的命名既影响了临床教学,也困扰着临床医师的诊疗工作,甚至引起患者疑虑.
作者：郝冀洪；李顺义 刊期： 2013年第07期
目的 对小鼠皮肤中miR-206-3p及其靶基因脑源性神经营养因子(Bdnf)进行表达与定位检测,以探讨其在皮肤发育过程中的可能作用.方法 手术剪取13.5 dpc(交配后天数)、15.5 dpc、17.5 dpc胎鼠,1 dpp(出生后天数)、4 dpp乳鼠及16周龄雄鼠的背部全层皮肤,用实时荧光定量RT-PCR检测miR-206-3p与Bdnf mRNA的表达水平,western blot检测BDNF蛋白质表达水平,原位杂交与免疫组化分别检测miR-206-3p与BDNF的组织定位.结果 皮肤中miR-206-3p在胚胎期持续升高,到17.5 dpc后逐渐降低,于成年鼠时回复至13.5 dpc时水平；BDNF表达趋势与miR-206-3p相反,而Bdnf mRNA在17.5 dpc至成年鼠并无显著改变.miR-206-3p的分布在皮肤发育过程中逐渐区域化,在出生后主要分布于上基部和毛囊外周,与同期BDNF表达区域毗邻但不重叠.结论 miR-206-3p可能通过转录后调控Bdnf参与了小鼠皮肤神经发育过程.
作者：穆原；周红；李文艳；李耀武 刊期： 2013年第07期
目的 评价血清葡萄糖(Glu)常规检测系统测量结果的正确度.方法 用参考方法和7种常规系统(A～G)测量5种不同浓度的血清Glu标准物质和30份Glu浓度为1.88～20.72 mmol/L的冰冻人血清样本(分光光度法),按分析标准物质法、方法学比对法分别评价7种常规系统测量结果的正确度.结果 依据计量学溯源标准,按分析标准物质法评价,A常规系统Glu测量结果正确度可接受,B～G常规系统Glu测量结果正确度不可接受；按方法学比对法评价,A～C常规系统Glu测量结果正确度可接受,D～G常规系统Glu测量结果正确度不可接受.结论 用不同方法评价Glu测量结果的正确度时,同一常规系统的评价结论可能不一致,实验室应选择合适的正确度评价方法并使用符合ISO 15189正确度要求的血清Glu常规检测系统.
作者：孙慧颖；邵燕；胡滨；李月玲；张天骄；张传宝；陈宝荣 刊期： 2013年第07期
目的 建立快速鉴定致病真菌的多重PCR体系.方法 选取19种致病真菌的rDNA内部转录间隔区(ITS)序列设计引物,建立两个多重PCR体系,扩增临床与环境分离真菌菌株、人类细胞及9种常见细菌DNA,检测体系的特异性；以浓度梯度的DNA模板检测体系的灵敏度.结果 对氟康唑天然耐药的克柔念珠茵、光滑念珠茵以及对两性霉素B耐药的土曲霉、镰刀茵、尖端赛多孢、根霉在该体系中可扩增出特异性条带,其他真菌可同时进行种属鉴定.74株被测真菌菌株的鉴定结果与常规鉴定的符合率为95.9％.两个多重PCR体系对人类基因组及9种常见细菌DNA的扩增结果均为阴性；扩增阳性的低模板浓度均为10 fg/μL.结论 建立的两个多重PCR体系可对致病真菌进行检测和种属鉴定.
作者：杨小康；张荣波；胡东；吴静；陈丽萍；张世武；王赜煜；干翔；赵瑜 刊期： 2013年第07期
临床检验杂志
主管:江苏省卫生厅
主办：江苏省医学会
