段雷振;杨跃进;周桐;崔留欣;丁中;李世宏;程学敏;赵明旭;周郭育;巴月
目的:探讨抗人胸腺免疫球蛋白( ATG)诱导培养的细胞因子诱导的杀伤细胞( CIK)的活性和功能,为CIK培养体系优化提供依据。方法:采集9例肿瘤患者外周血10 mL,分离单个核细胞,用CD3单抗或ATG (50、250、500μg/L)联合干扰素γ、白介素2诱导培养。培养至第6~10天,采用流式细胞术检测细胞增殖状况,培养至第13天,采用流式细胞术检测 CIK 免疫表型( CD3、CD4、CD8、CD56)、激活性表面标志( CD28、CD27、CD69、NKG2D)、抑制性表面标志(PD1、CD152)及Granzyme-B、干扰素γ分泌量。结果:4种培养方式下,细胞增殖状况无统计学意义(P>0.05)。与CD3单抗相比,ATG培养的CIK中CD3+CD4+和CD3+CD8+细胞比例较低(P<0.001), CD3-CD56+与CD8+CD69+细胞比例较高,CD56+细胞干扰素γ和Granzyme-B分泌水平较高。结论:ATG诱导的CIK免疫活性优于用CD3单抗经典方案培养的CIK,抗肿瘤能力较强。
作者:黄建敏;阚全程;张震;杨双宁;赵璇;李红;王丽萍;张毅 刊期: 2016年第02期
宫颈癌是妇科常见的恶性肿瘤,其发病呈现逐年上升和年轻化的趋势[1]。早期患者接受宫颈癌根治术后多数能长期生存[2],但术后患者阴道长度明显缩短,对其性生活造成不良影响[3],尤其是年轻患者。术中同时行阴道延长术(传统盆腔腹膜缝合)可以延长术后阴道长度和改善术后性生活质量,但手术方法比较复杂,临床效果欠佳。作者自2014年起对此类患者在宫颈癌根治术中行改良盆腔腹膜缝合,上提阴道断端以延长术后阴道长度,并与传统缝合法进行对比,探讨改良盆腔腹膜缝合法延长宫颈癌根治术后阴道长度及改善性生活的效果及可行性。
作者:李娇娇;李留霞;张颖;段情;赵艳红 刊期: 2016年第02期
急性A型主动脉夹层发病迅速,病情紧急,若非手术治疗,预后极差,48 h内病死率为50%,1周内约70%,2周内可达90%[1]。近些年来随着CT血管造影( CTA)的普及及疾病防范意识的提高,很多患者都能够得到明确的诊断和治疗[2]。在主动脉夹层的外科治疗中,孙氏手术已逐步取代传统单纯升主动脉置换术,成为主流手术。2014年10月至2015年6月,郑州大学第二附属医院共对21例急性A型主动脉夹层患者按照孙氏手术进行治疗,效果显著,现报道如下。
作者:马超;法宪恩;王宏山;高成山 刊期: 2016年第02期
房间隔缺损( atrial septal defects , ASD )是常见的先天性心脏病之一,占先心病的10%~15%[1]。目前主要治疗方法有体外循环( cardiopul-monary bypass,CPB)下行ASD修补术(ASDR)[2]、内科X线下经皮导管介入ASD封堵术[3]、外科食管超声( transesophageal echocardiography , TEE )引导下经胸微创ASD封堵术[4-6]。2014年11月以来,郑州大学第一附属医院心血管外科在经胸微创ASD封堵术的基础上实施了21例TEE引导下经皮ASD封堵术,并取得了满意的临床效果,现报道如下。
作者:彭坤;赵文增;文冰 刊期: 2016年第02期
目的:观察压力超负荷左心室肥大( LVH)过程中兔心电图的动态变化。方法:将55只兔随机分为模型组30只和对照组25只。模型组采用肾上腹主动脉次全结扎法制成压力超负荷LVH模型;对照组除不行腹主动脉缩窄外,其余同上。术前及术后2、4、6、8周行心电图检查,测量12导联QRS波振幅、心电轴、QRS波宽度及QTc间期;同时行超声心动图检查测定左心室下壁厚度( LVIW)、左室后壁厚度( LVPW)及室间隔厚度( IVS);术前及术后8周行X线检查测量心胸比值。结果:模型组死亡3只,对照组死亡2只。从术后第4周开始模型组兔LVIW、LVPW及IVS明显增增大并逐渐增加(P<0.05),术后第8周心胸比值高于术前(P<0.05)。模型组从术后第2周开始,各导联QRS波振幅明显增大并逐渐增加(P<0.05);从术后第4周开始QRS波时间、QTc间期和V1~V3导联R/S比值明显增大并逐渐增加(P<0.05)。对照组上述指标术前术后无明显变化(P>0.05)。结论:压力超负荷LVH过程中兔心电图主要表现为下壁及胸前导联QRS波振幅增大、QRS波时间及QTc间期延长、胸前导联R/S比值增大;心电图的变化早于超声表现,具有一定的早期诊断价值。
作者:闫书妹;常超;衡紫微;刘桂芝 刊期: 2016年第02期
目的:探讨microRNA检测用于评价卵巢癌患者铂类药物疗效的临床价值。方法:研究纳入接受顺铂化疗的初治卵巢癌患者88例,根据ATP-TCA结果分为敏感组(45例)和耐药组(43例)。 microRNA微阵列分析2组患者血清microRNA表达的差异,并使用qRT-PCR加以验证。绘制ROC曲线,分析microRNA-151高表达与卵巢癌化疗不敏感现象的关系。体外培养SKOV3细胞并转染 pcDNA3.1-microRNA-151或 pcDNA3.1空质粒,使用3μmol/L顺铂处理细胞48 h,计算细胞存活率,同时采用qRT-PCR及Western blot 检测microRNA-151对细胞Bcl-2表达的影响。结果:与敏感组患者相比,耐药组患者中有5种microRNA表达上调,5种microRNA表达下调。 mi-croRNA-151水平的检测对于评价卵巢癌患者铂类药物疗效有临床价值(AUC=0.719,95%CI=0.607~0.831),高microRNA-151水平的患者发生对铂类药物不敏感的风险较高。高表达microRNA-151可减弱SKOV3细胞对铂类药物的敏感性,提高Bcl-2的表达(P均<0.05)。结论:检测microRNA-151水平可以评估卵巢癌患者对铂类药物的敏感性。
作者:苏纯;李巧云;范梅;陆林 刊期: 2016年第02期
目的:探讨瑞舒伐他汀对心肌肥厚大鼠心肌组织中自噬相关蛋白Beclin-1表达的影响。方法:健康雄性SD大鼠75只,随机分为假手术组、模型组和RSV组,每组25只,模型组和RSV组通过腹主动脉缩窄术建立心肌肥厚模型,术后分别给予生理盐水和瑞舒伐他汀(4 mg/kg)灌胃,1次/d,连用4周。4周后测定心脏指数,用RT-PCR和Western blot法分别检测大鼠左心室心肌组织中Beclin-1 mRNA和蛋白的表达水平。结果:与假手术组比较,模型组大鼠心肌明显肥厚,心脏指数升高,心肌组织中Beclin-1 mRNA和蛋白表达上调( P<0.05);与模型组比较, RSV组大鼠心肌无明显肥厚,心脏指数降低,心肌组织中Beclin-1 mRNA和蛋白表达下降(P<0.05)。结论:瑞舒伐他汀可抑制压力超负荷性心肌肥厚,其作用机制可能与降低自噬水平有关。
作者:丁同斌;简立国;张丽华;刘士超;赵江涛;程栋 刊期: 2016年第02期
小耳畸形是比较常见的先天性疾病。耳廓再造是整形外科中非常具有挑战性的手术[1]。目前比较成熟的耳再造方法是庄洪兴等[2]提出的扩张加植皮法外耳再造术,该方法再造耳廓外耳轮廓能明显改善,但也存在皮肤量不足等诸多缺点[3],并发症发生率相对较高。作者2012年8月至2015年2月采用大容量扩张器扩张的方法行外耳再造术19例,扩张皮瓣能完全覆盖整个耳廓支架,形态良好,并发症少,现报道如下。
作者:靳军华;刘林嶓 刊期: 2016年第02期
目的:探讨MAWD、MAWBP和Smad2蛋白在食管鳞状细胞癌( ESCC)组织中的表达及临床意义。方法:收集86例ESCC组织标本及其癌旁正常组织标本,免疫组化法测定MAWD、MAWBP及Smad2蛋白的表达。结果:MAWD、MAWBP在ESCC组织中的表达明显低于癌旁正常组织, Smad2的阳性表达率高于癌旁正常组织( P<0.05);MAWD与MAWBP在ESCC组织中的表达呈正关联(rP =0.045,P<0.001),且均与Smad2蛋白表达负关联(rP =-0.285、-0.211,P<0.05)。 MAWD阳性表达率与ESCC 组织的TNM 分期和分化程度有关(P<0.05), Smad2阳性表达率与分化程度有关(P<0.05)。结论:MAWD可能参与了ESCC的发生发展,可能成为ESCC预后判断的有效指标和治疗靶点。
作者:李冠华;郭长青;刘青青 刊期: 2016年第02期
目的:探讨Bcl-2、Bax和Caspase-9在性成熟期小鼠动情周期不同阶段子宫内膜组织中的表达及定位。方法:选取32只性成熟期健康未孕雌性昆明小鼠,通过阴道脱落细胞检测法,根据阴道涂片细胞种类,确定各小鼠所属动情周期阶段,将小鼠分4组(n=8),分别为动情前期组、动情期组、动情后期组、动情间期组。免疫组化法检测Bcl-2、Bax和Caspase-9蛋白在子宫内膜组织中的表达。结果:Bcl-2在子宫内膜上皮组织中表现出与动情周期相关的规律性表达,动情间期表达高于其他各期(P<0.05);Bax在各动情周期均有表达,不同动情周期子宫内膜组织中Bax蛋白的表达差异无统计学意义(P=0.796);Caspase-9在动情期子宫内膜组织中主要表达于黏膜上皮细胞胞质、固有层子宫腺细胞胞质、基质细胞胞质,且动情前期表达低于其他各期( P<0.05)。结论:Bcl-2、Bax、Caspase-9在动情周期中共同调节子宫内膜细胞周期性的增殖与凋亡。
作者:左俐俊;任亚萍 刊期: 2016年第02期
目的:观察依托咪酯对HEK-293细胞中异源表达的hERG钾通道电流的抑制作用及其机制。方法:采用脂质体瞬时转染的方法将野生型hERG(WT-hERG)、突变型Y652A-hERG和F656C-hERG分别转染人胚胎肾细胞HEK-293,应用全细胞膜片钳技术记录依托咪酯对转染后HEK-293细胞表达的hERG钾通道电流的抑制作用以及对激活曲线和失活曲线的影响。结果:依托咪酯可浓度依赖性地抑制WT-hERG转染的HEK-293细胞钾通道电流,其半数大抑制浓度为(6.41±2.43)μmol/L,对激活曲线和失活曲线无明显影响。与WT-hERG转染的HEK-293细胞相比,依托咪酯对突变体Y652 A-hERG及F656 C-hERG转染的HEK-293细胞内钾通道电流的抑制作用减弱。结论:F656 C可能是依托咪酯抑制hERG钾通道的重要靶点。
作者:韩圣娜;刘备;孔岚;李靓;冯馨;张卫;张莉蓉 刊期: 2016年第02期
目的:建立慢病毒介导纤维介素蛋白2( Fgl2)基因过表达自身免疫性心肌炎( EAM)大鼠模型,探讨Fgl2基因过表达对EAM大鼠心功能的影响。方法:32只雄性Lewis大鼠随机分为正常对照组、EAM组、空载体自身免疫性心肌炎组( EAM-GFP组)和Fgl2慢病毒过表达自身免疫性心肌炎组( EAM-Fgl2组)4组。在实验第60天,对各组大鼠行心脏彩色多普勒检查,检测各组大鼠的左室短轴缩短率(LVFS),计算左室射血分数(LVEF),Western blot法检测各组大鼠心肌组织中Fgl2蛋白表达情况,ELISA法检测各组大鼠静脉血脑钠肽( BNP)水平。结果:4组心肌组织中Fgl2蛋白和静脉血BNP表达的水平差异有统计学意义(P均<0.001),EAM-Fgl2组Fgl2蛋白表达高于对照组、EAM组和EAM-GFP组;与其他3组比较,EAM-Fgl2组的LVFS和LVEF均降低,差异有统计学意义( P均<0.001)。结论:慢病毒介导的Fgl2基因过表达载体能明显上调EAM-Fgl2组心肌细胞中Fgl2蛋白的表达;且慢病毒介导的Fgl2基因过表达后可恶化EAM大鼠心功能。
作者:郑振中;黄火明;梁静 刊期: 2016年第02期
目的:观察5-羟色胺(5-HT)对肠炎小鼠结肠组织葡萄糖调节蛋白78(GRP78)表达的影响。方法:将7~8周龄的C57 BL/6小鼠随机分为6组( n=8):正常对照组,低、高剂量5-HT组(分别给予1.0、2.0 mg/kg的5-HT灌肠,每3 d 1次),低、高剂量DSS组(分别饮用10或25 g/L DSS溶液),DSS+5-HT组(给予10 g/L DSS+1.0 mg/kg 5-HT),于第6天结束时处死小鼠。通过疾病活动指数评分、结肠长度测定和HE染色等方法评估肠道炎症程度,采用实时定量PCR技术检测小鼠结肠组织中IL-6、TNF-α和 GRP78 mRNA的表达水平,采用免疫组化法检测小鼠结肠组织中GRP78蛋白的表达。结果:正常对照组,低、高剂量5-HT组小鼠无肠炎,低剂量DSS组有轻微肠炎,高剂量DSS组和DSS+5-HT组有严重肠炎。 IL-6和TNF-αmRNA的表达水平随炎症程度而增加。 GRP78 mRNA和蛋白在正常对照组、低剂量5-HT组和低剂量DSS组中的表达水平差异无统计学意义(P>0.05),在高剂量5-HT组、DSS+5-HT组和高剂量DSS组,尤其是高剂量DSS组表达增高( P<0.05)。结论:5-HT可能通过上调GRP78蛋白的表达激活内质网应激反应,参与肠道炎症反应。
作者:陈梦露;董仕桢;常永超;陈攀;冯丹丹;高强 刊期: 2016年第02期
目的:探讨弥散加权成像( DWI)在儿童髓母细胞瘤鉴别诊断中的应用价值。方法:对71例儿童幕下肿瘤行常规磁共振成像( MRI)增强检查和DWI检查,测量肿瘤实质小表观弥散系数( ADC)。结果:髓母细胞瘤38例,平均小ADC值为(0.51±0.11)×10-3 mm2/s;星形细胞瘤(Ⅰ~Ⅱ级)17例,平均小ADC值为(1.59±0.51)×10-3 mm2/s;室管膜瘤16例,平均小ADC值为(0.86±0.22)×10-3 mm2/s。三种肿瘤的平均小ADC值差异有统计学意义(P<0.05)。平均小ADC值诊断髓母细胞瘤的ROC曲线下面积为0.984±0.011。平均小ADC值以0.626×10-3 mm2/s为阈值,与病理结果对照,诊断髓母细胞瘤的敏感度为94.7%,特异度97.0%,准确率为94.7%,与病理组织学结果行一致性检验,Kappa值为0.887。结论:常规MR检查联合DWI及ADC值测定对术前诊断儿童髓母细胞瘤有明显的优势。
作者:李颜良;张勇;程敬亮;卜春晓 刊期: 2016年第02期
主动脉窦瘤是一种临床上少见的心脏疾病,病情凶险,需尽早手术。由主动脉窦瘤破裂所引起的感染性心内膜炎( infective endocarditis , IE ),更增加了手术的难度及凶险。2008年1月至2015年1月,作者共收治了16例主动脉窦瘤破裂( ruptured sinus of valsalva aneurysm,RSVA)合并IE的患者,术后效果满意,现总结治疗体会,报道如下。
作者:魏廷举;郭丹风;舒礼良;苏刚;李杰;黄辰;裴宇;刘海;黄功成;徐敬 刊期: 2016年第02期
目的:探讨黄芪甲苷对过氧化氢诱导损伤的人脐静脉内皮细胞( HUVECs)的保护作用,并初步探讨其作用机制。方法:实验Ⅰ中取HUVECs后分为5组,其中4组分别给予不同质量浓度的黄芪甲苷预处理后,用过氧化氢诱导建立HUVECs损伤模型,对照组不处理。实验Ⅱ中另取HUVECs分为4组,即对照组、LiCl组、黄芪甲苷组及LiCl+黄芪甲苷组,后3组按分组处理后均同上用过氧化氢诱导。采用MTT法检测上述各组细胞存活情况,流式细胞术检测细胞凋亡,Western blot分析γ-H2 AX、β-catenin蛋白的表达。结果:过氧化氢可抑制HUVECs存活,诱导其凋亡,而黄芪甲苷可改善上述情况(P<0.05)。 Wnt通路激动剂LiCl预处理后,黄芪甲苷对损伤HUVECs的保护作用减弱,同时DNA损伤标记分子γ-H2AX以及β-catenin蛋白的表达水平升高(P<0.05)。结论:黄芪甲苷可缓解氧化应激诱导的HUVECs损伤,其机制可能与抑制Wnt/β-catenin信号通路有关。
作者:马海涛;王辉 刊期: 2016年第02期
晶状体半脱位原因可分为先天性、继发性,患者可出现高度近视、散光、单眼复视等屈光不正,也可引起继发性青光眼、视网膜脱离、葡萄膜炎等并发症[1]。根据晶状体脱位范围及浑浊程度等情况不同,治疗方式也有所不同。如晶状体囊内或囊外摘除或超声乳化摘除,前段玻璃体切除联合人工晶状体( intraocular lens , IOL )双襻缝线固定术、囊袋张力环植入、前房型IOL植入、虹膜夹型IOL植入等。但以上手术方法在治疗晶状体半脱位的同时也可能存在各种弊端如手术耗时长、花费高、术中术后并发症较多等。2011至2015年,作者使用IOL囊袋内单襻缝线固定术治疗晶状体半脱位23例25眼,疗效满意,报道如下。
作者:吕勇;杨小笛;高莎莎;杨琳 刊期: 2016年第02期
目的:评价皮下负压引流对妇科恶性肿瘤患者切口引流液中PDGF、TGF-β含量的影响。方法:接受手术治疗的妇科恶性肿瘤患者80例,分为无负压组(30例)、低负压组(30例)及高负压组(20例),三组腹壁切口均给予自然对合处理,并分别实施不同强度的腹壁负压引流,监测三组切口愈合状况及引流液中PDGF及TGF-β含量。结果:无负压组腹壁切口脂肪液化发生率高于高负压组及低负压组(P<0.05),切口甲级愈合率明显低于低负压组及高负压组(P<0.05),低负压组、高负压组切口导管留置时间及术后第3天切口引流量显著少于无负压组(P<0.05)。术后第3天低负压组、高负压组腹壁切口引流液中PDGF和TGF-β含量高于无负压组(P<0.05),而高负压组PDGF含量高于低负压组( P<0.05)。结论:高负压引流对妇科恶性肿瘤手术切口愈合过程具有一定的促进作用。
作者:李春阳;杜敏霞 刊期: 2016年第02期
目的:预测结核分枝杆菌Rv3812蛋白的抗原表位。方法:利用DNAStar软件包中Editseq软件将结核分枝杆菌Rv3812氨基酸序列进行编辑保存,然后利用Protean软件进行氨基酸序列分析,预测Rv3812蛋白的二级结构、B细胞抗原表位及T细胞抗原表位,然后再用BLAST分析其与人类抗原表位的同源性。结果:Rv3812蛋白具有丰富的二级结构和多处抗原指数较高的区段,潜在的B细胞抗原表位较少,可能位于55~68、77~99、116~120、265~280、283~294、303~326、330~337和425~435位氨基酸残基或其附近。该蛋白潜在的T细胞抗原表位较多,可能位于6~30、55~85、97~140、159~191、202~204、208~231、251~264、270~281、287~299、311~334、337~343、349~356、368~385、394~413、428~433、437~441、470~476、479~481和488~493位氨基酸残基或其附近。结论:Rv3812是一个T细胞抗原表位占优势的蛋白抗原,B细胞抗原表位略少。
作者:李江英;白雪娟;梁艳;张俊仙;阳幼荣;赵卫国;吴雪琼 刊期: 2016年第02期
目的:研究氯化锂(LiCl)联合人脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)移植对阿尔茨海默病小鼠(APP+转基因小鼠)的干预作用。方法:PCR鉴定为APP+转基因小鼠40只随机分为4组:APP+组、hUC-MSCs移植组、LiCl注射组、联合处理组( LiCl注射+hUC-MSCs移植)。处理1个月后,Morris水迷宫检测小鼠的认知水平,酶标仪法和分光光度法检测小鼠血清中超氧化物歧化酶( SOD)活性和丙二醛( MDA)含量,qRT-PCR和Western blot 法检测小鼠海马组织中Wnt/β-catenin通路相关因子的表达。结果:与APP+组比较,LiCl注射组APP+小鼠逃避潜伏期缩短,穿越平台次数增多,平台所在象限停留时间延长,MDA含量下降,小鼠海马组织中β-catenin、c-Myc mRNA和蛋白表达量增加,GSK-3βmRNA和蛋白表达量降低( P均<0.05); hUC-MSCs移植可使APP+小鼠血清中SOD活性升高(P均<0.05),其他指标的变化与LiCl注射组相同;LiCl注射联合hUC-MSCs移植对平台所在象限停留时间、MDA含量、c-Myc蛋白表达的影响具有协同效应(P<0.05)。结论:LiCl联合 hUC-MSCs移植对APP+转基因小鼠具有明显的治疗作用。
作者:孟楠;马珊珊;王欣欣;姚宁;邢衢;宋及时;黄团结;关方霞 刊期: 2016年第02期