孙涛;万大国;宋恒良;孙慎杰
目的:构建含翻译增强序列的人canstatin杜氏盐藻叶绿体重组表达载体。方法:采用RTP-CR 的方法,获得含有人canstatin 的cDNA片段以及分别在5’UTR下游和3’UTR上游添加了翻译增强序列( UUAACUUUA)的人canstatin cDNA 片段,将得到的目的片段分别连接到PMD18-T载体上,利用该载体将目的片段连接到荧光素酶基因Lux Ct表达盒中并进行酶切鉴定。结果:RT-PCR分别得到约700 bp的cDNA片段并克隆到PMD18-T载体上。用PaeR7Ⅰ、SphⅠ双酶切 Lux Ct质粒,得到2100 bp和10000 bp 的2条片段。然后,将大片段回收后分别与上一步得到的cDNA片段进行连接,酶切鉴定结果显示含有翻译增强序列的人canstatin 片段成功插入到Lux Ct质粒中。结论:成功构建了含有翻译增强序列的人canstatin杜氏盐藻叶绿体重组表达载体。
作者:李一帆;崔柳青;韩康;薛乐勋 刊期: 2013年第05期
目的:探讨CD98与炎症性肠病( IBD)的关系。方法:雄性Balb/c小鼠48只,分为4组。正常对照组:不进行干预,自由饮食。生理盐水组:灌肠前禁食24 h,自由饮水,于实验第1、8及15天分别用100μL的生理盐水灌肠,灌肠后自由饮食。乙醇组:用体积分数50%乙醇溶液100μL灌肠,方法和步骤同生理盐水组。 TNBS+乙醇组:第1、8及15天分别用2.0、2.5和3.0 mg TNBS加体积分数50%乙醇溶液100μL灌肠,建立TNBS诱发的小鼠实验性IBD模型。实验第21天,采用流式细胞仪检测外周血CD98的表达,免疫组化SABC法检测结肠黏膜上皮组织中CD98蛋白的表达。结果:4组小鼠外周血和结肠黏膜上皮组织中CD98蛋白表达的差异均有统计学意义(F=29.460,χ2=4.567,P<0.05),TNBS+乙醇组高于其他3组。结论:CD98可能参与了IBD的发生发展。
作者:仝亚林;杨万荷;李家群;李治国;李林静;冯百岁 刊期: 2013年第05期
目的:探讨miR-106 b对宫颈癌HeLa细胞顺铂化疗敏感性的影响。方法:采用实时定量PCR检测转染miR-106b抑制剂和类似物后HeLa细胞中miR-106b的表达,MTT法及流式细胞仪检测转染后HeLa细胞对顺铂的敏感性和凋亡,Western blot检测细胞中Twist1、PTEN、p-AKT(Ser473)蛋白的表达。结果:miR-106b抑制剂可减少HeLa细胞中miR-106b的表达;而miR-106b类似物可增加HeLa细胞中miR-106b的表达。转染miR-106b抑制剂后,细胞对顺铂的敏感性增强、凋亡及PTEN蛋白表达增加,Twist1、p-AKT表达降低(P<0.05);转染miR-106b类似物后,细胞对顺铂的敏感性减弱,凋亡及PTEN蛋白表达降低,Twist1、p-AKT表达增加(P<0.05)。结论:miR-106 b可能通过调节Twist1、PTEN和p-AKT的表达影响HeLa细胞对顺铂耐药。
作者:饶玉梅;陈刚;李留霞;李秀芳;余静丽 刊期: 2013年第05期
目的:探讨雌激素受体( ER)α基因PvuⅡrs2234693位点多态性与乳癌发病风险之间的关系。方法:将2002年至2012年国内外发表的ERα基因PvuⅡrs2234693多态性与乳癌关系相关的文献进行检索,并进行异质性检验,计算OR值(95%CI)。结果:符合纳入标准的共有14篇文献,累计乳癌病例10755例,对照17074例。与野生纯合基因型TT相比,CC突变基因型异质性检验P=0.03,OR(95%CI)为0.91(0.81~1.02);CT杂合型及CC+CT联合型的异质性检验P分别为0.57、0.44,OR(95%CI)分别为0.96(0.90~1.02)、0.94(0.89~1.00)。结论:未发现ERα基因PvuⅡrs2234693位点多态性与乳癌发病风险之间的相关性。
作者:杨君霞;郭磊磊;武珍珍;吕恭进;秦洁洁;宋春花 刊期: 2013年第05期
目的:探讨结直肠癌组织中促血管生成素-2(Ang-2)及酪氨酸激酶受体-2(Tie-2)mRNA的表达及K-ras基因突变的意义。方法:采用实时荧光定量PCR法分析40例结直肠癌组织和10例正常结肠黏膜组织中Ang-2及Tie-2的表达,应用PCR-SSCP方法检测40例结直肠癌组织中K-ras基因突变情况。结果:结直肠癌组织中Ang-2和Tie-2 mRNA的表达量高于正常组织(t=39.960、9.490,P<0.05)。 K-ras基因突变率达42.5%(17/40),其中12密码子突变11例(64.7%),13密码子突变6例(35.3%)。浸润达肌层、有淋巴结转移和低未分化癌组织Ang-2 mRNA高表达率较高(χ2=6.593、10.165、5.974,P均<0.05),Dukes分期C和D期、浸润达肌层、有淋巴结转移和低未分化癌组织Tie-2 mRNA高表达率也较高(χ2=4.365、8.864、8.087和9.086,P<0.05)。 K-ras基因突变率在淋巴结转移的结直肠癌组织中高于无转移者(χ2=6.320,P<0.05),Dukes分期C、D期癌组织高于A、B期(χ2=13.961,P<0.05)。存在K-ras 基因突变的癌组织中Ang-2和Tie-2 mRNA表达水平高于无突变者( t =4.056,7.518,P<0.05)。结论:Ang-2、Tie-2的表达与结直肠癌的血管生成以及早期转移有关。 K-ras基因突变可作为评估结直肠癌转移和预后的分子生物学指标之一。
作者:王瑞华;谢建国;付强;谢天;马杰;常玉玺 刊期: 2013年第05期
目的:探讨β-连环素(β-catenin)对人羊膜间充质干细胞( AMSC)增殖的影响。方法:将β-catenin-绿色荧光蛋白(β-catenin-GFP)重组腺病毒扩增后,转染人AMSC,在荧光倒置显微镜下观察转染效率。采用CKK-8法测定AMSC的细胞生长状况。结果:荧光观察证实β-catenin-GFP融合蛋白在AMSC细胞中获得有效表达,β-cate-nin稳定高表达的AMSCs增殖率明显高于正常的AMSCs,分别为50.0%、82.5%、92.6%、169.1%和128.2%。结论:在AMSC细胞中成功表达了β-catenin-GFP融合蛋白,β-catenin高表达能有效地刺激AMSC的增殖。
作者:张一折;芦俊萍;张东丽;梁硕;迟连凯;赵永辉;王满仓;何涛;乔露华;田毅;杨波;马轩;关方霞 刊期: 2013年第05期
大鼠肾移植模型是进行器官保存和移植免疫研究必不可少的组成部分[1-2]。大鼠肾移植模型建立的方法很多,但是由于大鼠血管细小、血管壁薄,对技术要求很精细。钛轮钉吻合技术多用于尿毒症患者的自体动静脉内瘘[3],众所周知,供肾缺血时间延长会加重肾脏缺血再灌注损伤,影响移植肾功能,所以应该尽量减少肾缺血时间,特别是热缺血时间[4]。用钛轮钉吻合动脉的主要优势之一是能减少热缺血时间。作者在建立肾移植模型的过程中,首次采用钛轮钉吻合血管技术,改进大鼠肾移植血管及输尿管和膀胱的吻合,缩短了手术时间,并提高了成功率,现报道如下。
作者:张宏涛;邵凤民;乔保平;丰贵文 刊期: 2013年第05期
目的:观察高脂血症对大鼠脑组织基质金属蛋白酶-2( MMP-2)表达及新生血管的影响。方法:20只大鼠随机分为正常对照组和高脂血症组,每组10只。用高脂饲料喂养大鼠制备高脂血症大鼠模型。用ELISA法检测大鼠血清VEGF的含量;免疫组化法测定脑组织 MMP-2、细胞间黏附分子-1( ICAM-1)、血管内皮生长因子( VEGF)和CD34的表达情况;HE染色后观察大鼠脑组织皮质区病理学改变。结果:高脂血症组大鼠血清中总胆固醇、甘油三酯和低密度脂蛋白及VEGF含量高于正常对照组(t=12.772、25.705、38.141、15.879,P均<0.001),高密度脂蛋白减低(t=35.959,P<0.001);脑组织中MMP-2、ICAM-1、CD34和VEGF的表达升高(t=25.546、12.954、8.685、11.996,P均<0.001)。结论:高脂血症可诱导脑组织表达MMP-2并生成较多的新生血管。
作者:张振强;贾亚泉;宋军营;李澎涛;潘彦舒;王丛笑;吕欢欢 刊期: 2013年第05期
尿道下裂是小儿泌尿生殖系统常见的畸形之一。男性尿道下裂的发病率占存活人群的1/300~1/250[1],其中阴茎体型及冠状沟型占80%以上[2]。目前手术方式较多,如尿道口前移、阴茎头成形术( MAGPI术),带蒂横行包皮内板岛状皮瓣法( Duckett术及Onlay术),尿道板纵切卷管尿道成形术( Snodgrass 术)等。 Duckett 术、 Onlay 术及Snodgrass术式术后并发症如尿瘘、尿道狭窄、尿道憩室等发生率相对较高,家属对手术效果及术后阴茎外观相对不满意[3]。 MAGPI术式虽然术后并发症较少,但该术式未行阴茎脱套,不适用于阴茎下弯患儿,而且该型尿道下裂患儿家属对阴茎外观要求较高,多数患儿家属对该术式术后阴茎外观不满意。郑州大学第一附属医院2011年以来开展尿道松解前移-阴茎头整形术治疗远端型尿道下裂,效果满意,并发症少,阴茎外观良好,报道如下。
作者:张谦;院恩萌;汪伟;郭立华;许文坦;孙生安 刊期: 2013年第05期
目的:制备紫杉醇肿瘤靶向给药系统NGR-SWCNTs-Paclitaxel ,观察其对MCF-7乳癌细胞的影响。方法:实验分为对照组、Paclitaxel组、SWCNTs-Paclitaxel组和NGR-SWCNTs-Paclitaxel组。用荧光物质FITC标记单壁碳纳米管( SWCNTs ),采用细胞吞噬实验观察MCF-7细胞对各制剂的体外摄取情况,用MTT法观察各制剂对MCF-7细胞的增殖抑制作用,采用流式细胞术检测细胞周期和凋亡率。结果:MCF-7细胞能够有效吞噬NGR-SWCNTs-Pacli-taxel复合物,未经NGR-SWCNTs修饰的Paclitaxel 较少进入肿瘤细胞。 Paclitaxel、SWCNTs-Paclitaxel 和NGR-SWC-NTs-Paclitaxel组的细胞增殖抑制率、细胞周期和细胞凋亡率差异均有统计学意义(P<0.05);NGR-SWCNTs-Pacli-taxel对细胞的增殖抑制作用强,诱导的细胞凋亡有效,G2/M期阻滞效果也显著(P<0.05)。结论:成功制备的NGR-SWCNTs-Paclitaxel复合物有良好的肿瘤靶向性和乳癌细胞增殖抑制作用。
作者:张艳艳;张晓艳;付旭东;刘康栋;赵继敏;董子明;张振中 刊期: 2013年第05期
随着口腔种植技术的迅速发展,该项技术已越来越被广大缺牙患者所接受。种植义齿修复已成为各种牙列缺损、缺失和颌面部器官缺损患者理想的修复方式[1]。但在临床实践中有很多因素会对种植义齿修复的顺利实施造成干扰,如先天缺牙造成的缺牙间隙分布不合理,缺牙时间过长导致的邻牙倾斜及对颌牙伸长、严重的错牙合畸形引起的创伤咬合等。通常情况下这些患者在治疗前需要制定系统完善的综合治疗方案,进行以后期种植修复为导向的正畸治疗,之后行种植体植入术并完成种植义齿修复[2]。2008年至2012年,河南赛思口腔医院通过种植-正畸联合治疗牙列缺损伴错牙合畸形患者14例,获得了良好的疗效,报道如下。
作者:何宝杰;马玉霞;张炜;邹桂克 刊期: 2013年第05期
术前准确了解复杂型先天性心脏病(先心病)的形态、部位、大小及与周围组织的毗邻关系对临床采取恰当的治疗方法有一定的参考意义。近年来,随着多排螺旋 CT ( multi-detector spiral computed tomography ,MDCT)技术的进步,多种丰富的图像重建方式,如多平面重建( multiple planar reformation , MPR)、大密度投影( maximum intensity projection , MIP)和容积成像( volume rendering , VR )等可清晰、直观、多角度地显示复杂的心血管解剖结构,而且MDCT成像不受检查者经验的限制,在复杂型先心病的诊断中扮演着越来越重要的角色[1-2]。作者回顾性分析了59例复杂型先心病心外畸形的MDCT诊断结果,并与术中所见对比分析,旨在提高对MDCT诊断该类疾病心外畸形的认识。
作者:张永高;刘颖;高剑波;滑少华;刘杰;梁盼;刘书婷;郝培培 刊期: 2013年第05期
目的:研究不同浓度谷氨酸钠刺激对PC12细胞钠离子通道蛋白1.7(Nav1.7)表达的影响。方法:PC12细胞解冻后,胰蛋白酶消化传代培养,对照组为普通培养基,实验组分别用终浓度为5、10、20、40 nmol/L的谷氨酸钠刺激PC12细胞14 h。14 h后收集细胞,通过免疫荧光、RT-PCR、Western-blot等方法检测Nav1.7和SCN9A mR-NA表达量的变化。结果:各组PC12细胞RT-PCR、免疫荧光、Western-blot结果比较,差异均有统计学意义( F=11.821、61.871、23.274,P均<0.001);且除RT-PCR结果5 nmol/L谷氨酸钠刺激组与对照组相比外,其余各谷氨酸钠刺激组与对照组相比均升高(P均<0.05)。结论:PC12细胞Nav1.7的表达与疼痛有关。
作者:潘帧婕;曹靖;李鸣;任秀花;王剑南;邵金平;臧卫东 刊期: 2013年第05期
目的:采用meta分析评价单髁置换术(UKA)与全膝置换术(TKA)治疗老年膝单间室骨性关节炎的远期疗效。方法:检索PubMed、Embase、Cochrane Library、CNKI数据库,获取UKA与TKA治疗老年膝单间室骨性关节炎的随机对照(RCT)和半随机对照研究(CCT)。采用RevMan 5.0.23对术后远期优良率、翻修率及关节活动度进行meta分析。结果:共纳入6篇文献,RCT 3篇,CCT 3篇。分析结果显示,UKA与TKA术后远期优良率差异无统计学意义,RR(95%CI)=1.07(0.97~1.18),P=0.19;术后翻修率差异亦无统计学意义,RR(95%CI)=1.84(0.86~3.91),P=0.11;术后关节活动度UKA优于TKA,RR(95% CI)=0.36(0.26~0.50),P<0.001。结论:UKA治疗老年膝单间室骨性关节炎在术后关节活动度方面优于TKA。
作者:林松;许建中;王佰川;马凯歌;马秀才;邵增务 刊期: 2013年第05期
目的:探讨应用组织多普勒成像( TDI)技术评价甲状腺疾病患者右室功能的价值。方法:选取30例甲状腺功能亢进(甲亢)患者,30例甲状腺功能低下(甲低)患者,另选取30例各项检查正常者为对照。 TDI模式下,将取样容积置于患者心尖四腔心切面右室侧壁三尖瓣前叶及隔叶瓣环附着处,测量心肌收缩期峰值速度( Sa )、舒张早期峰值速度(Ea)、舒张晚期峰值速度(Aa)、等容收缩时间(ICT)、射血时间(ET)、等容舒张时间(IRT),并计算Ea/Aa和右室Tei指数。结果:①3组右室侧壁Sa、Ea、Aa、Ea/Aa、ICT、IRT及右室Tei指数差异均有统计学意义(F=61.050、35.021、29.797、272.981、9.301、40.800和81.141,P均<0.05)。与对照组比较,甲亢组Sa、Aa增大, Ea/Aa、ICT减小,Tei指数增大(P均<0.05);甲低组Tei指数、IRT增大,Ea、Ea/Aa减小(P均<0.05)。②3组右室间隔壁Sa、ICT、IRT及右室Tei指数差异有统计学意义(F=55.968、18.489、34.466和29.597,P均<0.05)。与对照组比较,甲亢组Sa、Tei指数增大,ICT减小(P均<0.05);甲低组Tei指数、IRT增大(P均<0.05)。结论:TDI参数可以较好地反映甲状腺疾病患者右室功能。
作者:李亚南;张连仲;段少博;刘琳;刘春丽 刊期: 2013年第05期
随着人类疾病谱、死因谱的改变,慢性病已经成为我国重要的公共卫生问题[1]。慢性病是可以预防与控制的。研究[2]表明健康教育在控制慢性病发生与发展、提高居民健康素养和倡导健康的生活方式方面起着重要作用。慢性病相关知识知晓率是评价健康教育效果的一项重要指标。早期筛查和诊断是规范治疗慢性病的前提[3],血压、血糖与血脂的测量对控制慢性病对人群和社会的危害,提高人们的健康水平,优化人们的生活质量具有重要意义[4]。作者对郑州市居民主要慢性病相关知识知晓情况与相关因素进行了分析,为郑州市慢性病的预防提供对策与建议。
作者:姚明解;常战军;阎秀芳;高强;吕全军 刊期: 2013年第05期
目的:评价血清糖类抗原19-9(CA19-9)和血浆纤维蛋白原(FIB)水平在良、恶性梗阻性黄疸鉴别诊断中的价值。方法:收集60例良性和75例恶性梗阻性黄疸患者,采用全自动免疫分析仪经电化学发光法检测血清CA19-9,采用全自动血栓/止血分析仪经光学法检测血浆FIB,绘制ROC曲线,确定诊断界值,计算特异度及灵敏度。结果:恶性梗阻性黄疸患者血清CA19-9及血浆FIB水平均高于良性梗阻性黄疸患者(Z=7.420,6.862,P<0.05)。 ROC曲线分析结果显示:AUC(CA19-9)为0.872,95%可信区间(0.813~0.931);AUC(FIB)为0.844,95%可信区间(0.777~0.912)。取灵敏度+特异性的高值所对应的截断点作为诊断界点,CA19-9的界点为35.085 U/mL,FIB为2.45 g/L,2者在选定界点的灵敏度(95%可信区间)分别为88.0%(82.5%~93.5%)和84.0%(77.8%~90.2%),联合检测灵敏度增加至98.7%(98.2%~99.2%)。结论:血清CA19-9与血浆FIB联合检测可提高良、恶性梗阻性黄疸鉴别诊断的灵敏度。
作者:杨万荷;李家群;仝亚林;李林静;李治国;冯百岁 刊期: 2013年第05期
心理资本是指个体的积极心理发展状态,它具有如下特点:①个体拥有付出必要努力、成功完成具有挑战性任务的自信(又称自我效能感)。②个体能对当前和将来的成功做积极归因(即乐观)。③个体为了取得成功,坚持目标,在必要时能够重新选择实现目标的路径(即希望)。④个体在遇到问题和困境时,能够坚持、很快恢复和采取变通途径来达到成功(即韧性)[1]。可见,心理资本影响个体对于变化着的环境和事件应对的方式,同时也影响个体的心理健康状况。为了解高职院校医学生的心理资本状况并有针对性地开发其心理资本,作者利用《大学生心理资本调查问卷》[2-3]对河南省高职院校医学生的心理资本状况进行了调查,现将调查结果报道如下。
作者:刘畅;张雁儒 刊期: 2013年第05期
目的:编制适用于大学生择业效能感的心理量表。方法:依据相关理论,采用访谈法,对389名河南省大学生进行施测,形成初始问卷,然后对收集的数据进行项目分析、探索性因素分析、验证性因素分析和测量学特性检验,并对问卷的信度、效度进行考察。结果:初始问卷的项目分析结果显示,在各个项目上高分端和低分端之间的差异有统计学意义;探索性因素分析表明,在特征值检验、碎石图陡阶检验、理论上的可解释性和项目数标准4个方面,所选取的6个因素都较为合理;进一步参照因素负荷、标准差、共同度和交叉负荷4个方面的标准,选取5个因素的20个项目,经验证性因素分析表明,5个因素的结构模型与数据拟合良好,符合心理测量学要求,形成了包含20个项目的大学生择业效能感正式问卷;问卷包含自我概念、自我评价、目标设定、问题应对和制定计划5个维度。结论:量表具有良好的信度和效度,可以作为有效的测量工具适用于河南省大学生择业效能感的测量。
作者:路平 刊期: 2013年第05期
目的:探讨PTEN基因在食管鳞癌细胞中的表达水平及突变情况。方法:采用RT-PCR技术检测高分化的Eca109、低分化的EC 9706和EC1食管鳞癌细胞株细胞中PTEN mRNA的表达水平,并克隆PTEN基因全长,与野生型PTEN基因序列比对,分析突变情况。结果:EC1、EC9706、Eca109细胞株中PTEN mRNA的表达水平分别为(0.06±0.02)、(0.24±0.02)、(0.41±0.01),3株细胞中PTEN mRNA 的表达水平差异有统计学意义(F =306.330,P<0.001),Eca109细胞中PTEN mRNA的表达水平高于 EC9706和 EC1细胞(P<0.05)。3株细胞中PTEN基因均存在不同程度突变,突变主要集中在外显子5和8。结论:食管鳞癌细胞中PTEN表达水平与细胞的分化程度有关,PTEN基因突变与食管鳞癌的发生发展有关。
作者:侯桂琴;贝维娟;杨帅;王琼叶;鲁照明 刊期: 2013年第05期