刘炜
目的:探讨上皮性卵巢癌组织中P53蛋白和Survivin蛋白的表达情况.方法:应用免疫组织化学法检测61例上皮性卵巢癌组织(浆液性腺癌43例,黏液性腺癌18例;高分化30例,中分化21例,低分化10例;伴淋巴结转移30例,无淋巴结转移31例)中P53和Survivin蛋白的表达.结果:61例上皮性卵巢癌组织中P53蛋白阳性表达32例;Survivin蛋白阳性表达40例.P53和Survivin蛋白的表达与上皮性卵巢癌组织学分型无关(P>0.05 );与分化程度、临床分期和淋巴结转移有关(P<0.05).上皮性卵巢癌组织中Survivin蛋白的表达与P53蛋白表达呈正相关(r=0.558,P<0.05).结论:P53和Survivin蛋白与上皮性卵巢癌组织的发生、发展及转移有关,可作为判断卵巢癌预后不良的指标.
作者:王英芳 刊期: 2007年第05期
目的:探讨少白细胞混合浓缩血小板(LDPPCs)的制备方法与安全性.方法:利用富浆法制备出浓缩血小板(PCs)后,将7人份PCs混合,轻离心清除袋底的白细胞、红细胞,将上清液挤压转移到血小板专用保存袋.然后用生理盐水重离心洗涤2次,移出全部上清液,再加入已经分离出的单人份新鲜血浆200 mL悬浮液即为1个治疗量的LDPPCs悬液.用血小板的平均体积(MPV)、分布宽度(P-LCR)、血小板计数、pH和白细胞、红细胞残余量等指标评价血小板洗涤前后的质量变化.比较由血细胞分离机分离的单采血小板与LDPPCs的PAC-1与黏附率.随机选择临床内科需要输注血小板的16名患者,分为2组.观察组每次输注1个治疗量(血小板数≥2.5×1011)LDPPCs,对照组每次输注1个治疗量(血小板数≥2.5×1011)单采血小板,检测输前、输后24 h血小板计数,并计算CCI及血小板回收率.结果:混合、洗涤前后血小板P-LCR、pH值和Ca2+浓度相比差异无统计学意义(P>0.05),MPV、白细胞、红细胞残余量相比差异有统计学意义(P<0.05或0.01).单采血小板和LDPPCs的PAC-1和黏附率均<10%,在正常范围内.观察组与对照组输注前后血小板计数、输后CCI及血小板回收率差异无统计学意义(P>0.05).结论:利用此方法制备的LDPPCs的各项质量指标符合国家标准,临床输注安全,疗效确切,可作为单采血小板的有益补充.
作者:李建斌;张晓莉;单泓;段艳丽;张茵 刊期: 2007年第05期
目的:检测脂肪源Flk1+CD31-CD34-细胞是否具有血液血管干细胞的特性.方法:将脂肪源Flk1+CD31-CD34-细胞分别于血管内皮及造血细胞诱导培养体系中培养,采用RT-PCR、免疫组织化学方法检测分析其生物学特性.结果:脂肪源Flk1+CD31-CD34-细胞在内皮细胞诱导体系中可分化为CD31+/vWF+细胞,在基底膜胶中可形成血管样结构;在造血诱导培养体系中可定向分化为表达GATA-1、GATA-2、β及γ珠蛋白的细胞,在甲基纤维素造血培养基中,这类造血细胞可定向分化为红系集落单位.结论:脂肪源Flk1+ CD31-CD34-细胞在体外可同时向血管内皮细胞和造血细胞分化,具有血液血管干细胞的特性.
作者:宋永平;房佰俊;李玉富;林全德;吕晓东;魏旭东 刊期: 2007年第05期
目的:探讨乳癌组织中凋亡相关基因BI-1及P53的表达.方法:采用免疫组化SP法检测64例乳癌及配对的正常乳腺组织中BI-1、P53蛋白的表达.结果:乳癌组织中BI-1、P53蛋白的阳性表达率分别为76.6%和46.9%,高于正常乳腺组织中2者的阳性表达率(3.1%和4.7%,χ2分别为72.002, 29.765, P均<0.05).不同的组织学分级和临床分期之间BI-1蛋白的表达差异无统计学意义(P>0.05),而P53蛋白的阳性表达率随组织学分级和临床分期的增高而增加(P<0.05).淋巴结转移乳癌组织中BI-1和P53蛋白的表达阳性率均高于未转移组(P<0.05).在乳癌组织中BI-1与P53蛋白的表达呈正相关(r=0.672,P<0.05).结论:乳癌组织中BI-1与P53蛋白的联合检测对揭示乳癌的发病原因、判断预后及乳癌的早期诊断和基因治疗具有重要的指导意义.
作者:李孟圈;李靖若;冯宗刚;苏静;李建章 刊期: 2007年第05期
目的:调查分析河南省造血干细胞捐献者人类白细胞抗原(HLA)基因A、B、DRB1多态性和单倍型频率.方法:采用国际通用的4种DNA基因分型技术(聚合酶链反应-序列特异性引物(PCR-SSP)、SSO 杂交条技术、SSO荧光微珠流式分行法、SSO正向杂交DNA基因芯片)对24 930名干细胞捐献者的血样进行HLA基因频率及单倍型分析.结果与结论:共检出等位基因:A位点20个, B位点 35个,DRB1位点13个;较常见单倍型及频率为:A*30B*13DRB1*07(0.064 070)、A*02B46*DRB1*09(0.021 900)、A*33B*58DRB1*03(17)(0.012 767)、A*33B*44DRB1*13(0.011 318)、A*02B*13DRB1*12(0.011 021).
作者:杨瑞云;张伯伟;程四国;杜娟;马茹;赵磊;邢培清 刊期: 2007年第05期
目的:体外定向诱导成人脂肪源Flk1+CD31-CD34-细胞向胰岛样细胞分化.方法:首先将成人脂肪源Flk1+CD31-CD34-细胞培养在含适当浓度的B27、bFGF及EGF等因子的培养基(诱导液1)中诱导6 d,接着更换诱导培养基,用含适当浓度的β细胞调节素、尼克酰胺等高糖无血清培养基(诱导液2)诱导细胞向胰岛样细胞分化,诱导前后用RT-PCR法检测细胞nestin、神经元素3(ngn3)、胰岛素启动因子1(IPF-1)、胰岛素、胰高血糖素基因的表达;免疫组织化学法检测nestin、胰岛素、胰高血糖素、生长抑素抗原的表达;放射免疫分析法检测细胞胰岛素分泌情况.结果:成人脂肪源Flk1+CD31-CD34-细胞经诱导液1诱导6 d后可分化成nestin+的祖细胞;继续用诱导液2诱导6 d后变圆的细胞逐渐增多,并聚集成团,免疫荧光结果证实经2阶段诱导后的细胞表达胰岛素、胰高血糖素、生长抑素等内分泌激素,放射免疫分析结果表明诱导的胰岛样细胞团可以分泌胰岛素.结论:成人脂肪源Flk1+CD31-CD34-细胞具有胰腺干、祖细胞的固有特征,极有可能作为种子细胞用以糖尿病的细胞治疗.
作者:李玉富;宋永平;房佰俊;汪萍;林全德;马丽;张(龙天)莉 刊期: 2007年第05期
目的:检测结肠癌组织中存活素(Survivin)、PTEN和p53基因的表达,并分析其与结肠癌发生发展、临床病理特征之间的关系.方法:应用免疫组织化学SP法检测59例结肠癌、20例结肠腺瘤、19例正常结肠组织中Survivin、PTEN和p53基因的表达,并结合患者的临床病理资料进行分析.结果:结肠癌组织中Survivin、PTEN、突变型p53的阳性表达率分别为64.4%、54.2%、66.1%,Survivin和突变型p53在正常结肠组织和结肠腺瘤组织中不表达, PTEN基因在正常结肠黏膜和结肠腺瘤组织中几乎全部呈阳性表达.3项指标在不同组织中的表达阳性率差异均有统计学意义(P均<0.05).结肠癌组织中Survivin和突变型p53的阳性表达率均显著高于结肠腺瘤以及正常结肠黏膜组织 (P<0.05).随结肠癌组织学类型的变化、淋巴结的转移, Duck's分期的增加,突变型p53的阳性表达率逐渐升高(P<0.05), PTEN的阳性表达率逐渐降低(P<0.05).Survivin蛋白在结肠癌组织中的表达与其临床病理参数无关.在结肠癌组织中Survivin蛋白与突变型p53蛋白的表达呈正相关((r=0.813 5,P<0.05), 与PTEN蛋白的表达呈负相关(r=-0.773 5, P<0.05), PTEN蛋白与突变型p53蛋白的表达呈负相关(r=-0.935 0,P<0.05).结论:Survivin、PTEN和p53蛋白的异常表达与结肠癌的发生、发展和病理学特征有关.
作者:倪居;徐宏平 刊期: 2007年第05期
目的:了解实验室内各操作个体应用酶联免疫吸附试验(酶免法)检测HBsAg的检测结果间的差异,为界定酶免法检测HBsAg的可疑区域提供实验数据.方法:10名实验室工作人员与全自动酶免检测仪分别对同一样本检测20次获得11组检测数据,运用q检验、u检验、方差分析及变异系数等统计技术对各组检测数据进行分析,并计算每个操作个体的检测可疑区域.结果:各实验操作个体的检测结果相比,F=13.36,P<0.01,变异系数在5.5%~17.8%,可疑区域的大范围为64.4%~135.6%.结论:该试验中各实验操作个体的检测结果间存在较大差异,检测可疑区域的范围不能统一界定.
作者:陈保民 刊期: 2007年第05期
目的:探讨CD44V6及基质金属蛋白酶-7(MMP-7)的表达与食管癌发生、发展及浸润、转移的关系.方法:应用免疫组化SP法检测60例食管鳞癌组织、30例癌旁不典型增生组织及60例正常食管黏膜组织中CD44V6及MMP-7蛋白的表达情况.结果:癌组织、癌旁不典型增生组织及正常食管黏膜组织中CD44V6蛋白的阳性表达率依次降低,分别为76.7%(46/60)、60.0%(18/30)、43.3%(26/60),组间比较差异有统计学意义(χ2=14.222,P<0.05);癌组织、癌旁不典型增生组织及正常食管黏膜组织中MMP-7的阳性表达率分别为73.3%(44/60)、80.0%(24/30)、36.7%(22/60),组间比较差异有统计学意义(χ2=23.431,P<0.05).食管鳞癌组织中CD44V6蛋白表达与癌的浸润深度及淋巴结转移有关(P<0.05);MMP-7蛋白表达与癌的组织学分级、浸润深度及淋巴结转移有关(P<0.05).结论:在食管癌的浸润、转移及黏膜上皮癌变过程中CD44V6和MMP-7可能起重要作用,二者的联合检测可望成为食管鳞癌早期诊断和判断预后的分子指标之一.
作者:王玉兰;李晟磊;尹磊 刊期: 2007年第05期
2004至2006年,作者采用咪唑安定复合氯胺酮用于小儿眼科手术麻醉,并与单纯使用氯胺酮的麻醉效果相比较,报道如下.
作者:王莉霞 刊期: 2007年第05期
目的:观察小鼠成体脂肪源Flk1+CD31-CD34-细胞体内外能否促进造血恢复.方法:用小鼠脂肪源Flk1+CD31-CD34-细胞作滋养层,接种造血细胞,观察培养后1~4周造血细胞数及粒-巨噬细胞系集落形成单位(CFU-GM)的变化,并设对照组.30只经137Cs全身照射0.35 Gy的雌性C57BL/6小鼠随机分为3组,空白对照组尾静脉注射生理盐水,对照组注射骨髓有核细胞,实验组注射骨髓有核细胞及脂肪源Flk1+CD31-CD34-细胞,注射后均检测外周血和骨髓有核细胞数及CFU-GM变化,PCR检测受体小鼠体内Y染色体的表达.结果:体外实验中实验组接种后2~4周造血细胞数均高于对照组(P均<0.05),接种后1~4周CFU-GM值均高于对照组(P均<0.05);体内实验中空白对照组小鼠移植后10 d左右死亡,实验组小鼠外周血和骨髓有核细胞数、CFU-GM从第2周起均高于对照组(P均<0.05),第4周实验组小鼠骨髓细胞有Y染色体表达.结论:脂肪源Flk1+CD31-CD34-细胞能促进小鼠造血恢复.
作者:王桂叶;宋永平;房佰俊;林全德;汪萍;胡杰英;魏旭东 刊期: 2007年第05期
目的:检测膀胱移行细胞癌组织中KAI1 mRNA与蛋白的表达.方法:应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)及免疫组织化学方法分别检测61例膀胱移行细胞癌组织及7例正常膀胱黏膜组织中KAI1 mRNA及蛋白的表达.结果:膀胱移行细胞癌组织中KAI1 mRNA的相对含量为0.76±0.25,KAI1蛋白阳性表达率为63.9%,均低于正常膀胱黏膜组织((1.35±0.38)与100.0%,P均<0.01).膀胱移行细胞癌组织中KAI1 mRNA和蛋白的表达均与病理分级、临床分期、复发及预后相关(P<0.05或0.01).结论:KAI1基因的表达在膀胱移行细胞癌的恶性进展过程中起重要作用,有可能成为评估肿瘤恶性程度、复发及预后的新指标.
作者:杨俊福;张辉;赵亚冰;梁宏;魏金星;高建光 刊期: 2007年第05期
目的:探讨器官移植中脂肪源Flk1+CD31-CD34-细胞诱导免疫耐受的可能性.方法:20只C57BL/6小鼠经致死量射线照射后随机等分为2组,实验组移植C57BL/6小鼠骨髓细胞和BALB/c小鼠脂肪源Flk1+CD31-CD34-细胞,对照组仅移植C57BL/6小鼠骨髓细胞,以CM-DiI荧光染料示踪脂肪源Flk1+CD31-CD34-细胞的体内分布情况,并以PCR方法检测Y染色体的存在以进一步鉴定.以皮肤移植实验观察脂肪源Flk1+CD31-CD34-细胞移植小鼠对供体来源组织器官移植物的反应性,以未移植Flk1+CD31-CD34-细胞小鼠为对照.结果:脂肪源Flk1+CD31-CD34-细胞可进入并较长期(30 d)存在于异基因小鼠免疫器官内;在细胞移植组小鼠脾脏组织中可检测到供体来源T细胞占受体脾细胞的6.68%;脂肪源Flk1+CD31-CD34-细胞移植组小鼠供体来源皮肤移植物存活>90 d,未处理组为8~9 d.结论:异基因脂肪源Flk1+CD31-CD34-细胞移植后可形成稳定嵌和体,并诱导特异性免疫耐受的产生.
作者:宋永平;房佰俊;汪萍;林全德;李玉富;韩钦 刊期: 2007年第05期
目的:探讨磷酸化P38在顺铂和DTT诱导的食管癌Eca109细胞凋亡中的作用.方法:分别用DTT与顺铂诱导处理食管癌Eca109细胞,未加药组作为对照.采用流式细胞仪技术检测细胞凋亡率;用免疫组化方法检测磷酸化P38的表达情况.结果:与对照组相比,DTT处理组及顺铂处理组细胞凋亡率明显升高.免疫组化结果显示:2处理组磷酸化P38的水平均明显高于对照组(P<0.05);DTT处理组磷酸化P38大部分位于细胞核内,而顺铂组磷酸化P38则主要弥散于细胞浆内.结论:磷酸化P38在DTT和顺铂诱导的食管癌Eca109细胞凋亡时细胞内分布不同,激活的P38可能通过不同途径参与细胞凋亡.
作者:冯若;翟文龙;刘国红;金辉;张钦宪 刊期: 2007年第05期
目的:构建A型流感病毒核蛋白(NP)的原核表达质粒,分析其在大肠杆菌中的表达状况.方法:采用逆转录聚合酶链式反应技术从A型流感病毒基因组中扩增出编码核蛋白的基因片段,克隆至pGEM-T Easy载体,PCR筛选阳性克隆并测序.经酶切后将目的片段亚克隆至表达载体pGEX-4T-1,转化大肠杆菌BL2(CDE3),PCR和酶切鉴定转化菌落.将阳性菌落经异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导,十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳和免疫印迹分析目的蛋白的表达.结果:RT-PCR扩增出NP基因序列,将其亚克隆至表达载体pGEX-4T-1构建成重组表达质粒,并在BL2(CDE3)中表达了NP融合蛋白.结论:成功构建A型流感病毒NP的重组表达质粒,并在大肠杆菌中表达了NP融合蛋白.
作者:马一君;李雪莲;胡军;付庆;杜献堂 刊期: 2007年第05期
目的:探讨急诊介入治疗急性心肌梗死(AMI)联合应用替罗非班、低分子肝素防治急性血栓形成的效果及安全性.方法:54例AMI患者随机分为对照组(26例)和替罗非班组(28例),所有患者行急诊经皮冠状动脉介入治疗(PCI),术中、术后替罗非班组联合应用替罗非班、普通肝素、低分子肝素,对照组应用普通肝素和低分子肝素,观察2组患者冠脉内急性、亚急性血栓形成、术后远端血流(TIMI)分级情况,并比较无再流、慢血流发生和术后的出血危险性.结果:替罗非班组术后TIMI为0级及TIMIⅠ~Ⅱ级较对照组有显著下降,TIMI Ⅲ级2组比较差异无统计学意义.对照组术中3例发生急性血栓形成,1例发生亚急性血栓形成,2例术后出现肉眼血尿,3个月后有1例经冠脉造影检查确诊为支架内再狭窄.替罗非班组术中1例发生慢血流,2例术后出现肉眼血尿,1例出现牙龈出血,2例血小板减少,无发生急性、亚急性血栓形成和支架内再狭窄.结论:急诊PCI术中、术后联合应用替罗非班、普通肝素、低分子肝素防治急性、亚急性血栓形成,疗效可靠、安全.
作者:白树鸣;刘恒亮;开芸;郝冬琴;沈德良 刊期: 2007年第05期
2002年1月至2006年2月,本科共收治23例结缔组织病(connective tissue disease,CTD)合并肺动脉高压(pulmonary arterial hypertension, PAH)患者,现将治疗和护理情况报道如下.
作者:苗金红;李肖静 刊期: 2007年第05期
MN血型是人类较重要的一种血型系统.国内时有因MN血型抗体引起配血不合的报道[1-2].1978年6月至2005年11月,本院有10例因MN血型抗体引起输血不合,报道如下.
作者:李建英;胡利亚;王志新 刊期: 2007年第05期
食管癌是我国常见恶性肿瘤,放射治疗是颈段和胸上段食管癌有效、安全的治疗手段之一[1]. 基于剂量学原则[2],需给予肿瘤高剂量照射(60~70 Gy),同时将危险器官(脊髓)剂量控制在45 Gy(或50 Gy)以内.由于脊髓位置与放疗靶体积非常接近,常规照射技术难以达到要求.
作者:李定杰;王建华;雷宏昌;张楚敏 刊期: 2007年第05期
目的:对比人工耳蜗植入术后听功能评估中电诱发听觉脑干反应(EABR)及电诱发复合动作电位(ECAP)的作用.方法:对53例Nucleus 24R型人工耳蜗植入者行第10电极EABR及ECAP测试.EABR测试参数:刺激频率48 Hz,脉宽25 μs/相.ECAP测试参数:脉宽25 μs/相,刺激频率900 Hz.比较EABR和ECAP波形出现率.结果:EABR波形出现率为96.22%,高于ECAP波形出现率(88.68%,χ2=61.3,P<0.05).结论:EABR是对人工耳蜗植入者听功能进行客观评价的有效方法,在对人工耳蜗术后听功能评价方面优于ECAP测试.
作者:王亮;董明敏 刊期: 2007年第05期