川芎嗪在促进大鼠结肠上皮细胞Cl-和HCO3-分泌中的作用

邢莹；何琼；朱进霞；陈小章

关键词：川芎嗪, 结肠上皮, 大鼠, 短路电流, CI-, HCO3-

摘要：目的:探讨川芎嗪对大鼠结肠上皮水、电解质转运的影响和内在的机制.方法:在药物和特异性通道阻断剂的作用下,用短路电流(Isc)技术,体外测量结肠上皮短路电流的变化.结果:离体大鼠远端结肠,在基础状态下的跨上皮电位差(PD)和Isc分别为(-5.5±0.8)mV(n=8)(黏膜面为负)和(60.3±6.7)μA/cm2(n=16),Rt为(94.9±5.9)Ω@cm2.在结肠上皮的基底膜加入川芎嗪(0.01～5 mmoL/L),能记录到一个呈剂量依赖性升高的短路电流,EC50为0.5 mmol/L(n=16);将Cl-或HCO3-从溶液中替换,分别抑制了该电流的58.4%(n=5,P＜0.01)和70.8%(n=4,P＜0.01),2种离子都被替换时,该电流减少了98.1%(n=6,P＜0.001);川芎嗪在结肠上皮产生的短路电流能被顶膜Cl-通道阻断剂DPC(2 mmol/L)(一种非选择性的Cl-通道阻断剂)和glibenclamide(1mmol/L)[囊性纤维变性跨膜电导调节器(CFTR)的特异性阻断剂]完全阻断,但对DIDS(100 mmol/L)[Ca2+激活的Cl-通道(CaCC)阻断剂]不敏感;在结肠上皮的顶膜加入Na+通道阻断剂amiloride(10 mmol/L)或将Na+从顶膜侧的溶液中替换,不影响随后川芎嗪产生的短路电流;将Na+从结肠上皮基底膜侧的溶液中替换或从顶膜和基底膜侧同时替换,完全抑制了川芎嗪在结肠上皮产生的短路电流;在结肠上皮的基底膜加入Na+-K+-Cl-共转运体(NKCC)阻断剂bumetanide(100 mmol/L)或基底膜Na+HCO3-共转运体(NBC)和Cl-/HCO3-交换器抑制剂DIDS(100 mmol/L)分别使川芎嗪产生的短路电流减少了89.3%(n=6,P＜0.001)和68.9%(n=4,P＜0.01),DIDS对川芎嗪的抑制作用与HCO3-从溶液中替换时产生的抑制作用相似,差异无统计学意义(P＞0.05);基底膜非选择性K+通道阻断剂Ba2+(3 mmol/L)完全抑制了川芎嗪在结肠上皮产生的短路电流(n=4,P＜0.001),基底膜Ca2+激活的K+通道阻断剂TEA(5 mmol/L)对此电流无影响;用BAPTA-AM(100 mmol/L)螯合细胞内、外的Ca2+,不影响川芎嗪在结肠上皮产生的短路电流.结论:川芎嗪能刺激大鼠远端结肠上皮分泌Cl-和HC03-,作用呈量效关系;川芎嗪在结肠上皮产生的短路电流是由位于结肠上皮顶膜的CFTR,以及位于基底膜的Na+-K+泵、NKGC、NBC、Cl-/HCO3-交换器和基底膜K+通道共同作用的结果.

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覆膜内支架置入气道治疗胸腔胃-气道瘘

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作者：韩新巍；吴刚；李永东；高雪梅；杨瑞民；李天晓；马南；王艳丽刊期： 2004年第01期
2种PCR方法扩增盐藻肌动蛋白基因3'旁侧序列比较

目的:比较扩增盐藻肌动蛋白基因3'旁侧序列的2种PCR方法.方法:用pvuⅡ、EcoRV和Stu I 3种限制性内切酶消化盐藻基因组DNA后,供2种PCR用,一种是连接介导法PCR(LMPCR),与用人工合成的适配子相连并用适配子引物和盐藻肌动蛋白基因特异引物扩增未知序列;另一种是反向PCR(IPCR),酶切后的DNA自身环化做模板,用2对基因特异引物反向扩增.结果:2轮PCR后,LMPCR中得到大量的非特异扩增产物,测序结果发现许多产物是由适配子引物AP2单独扩增引起.而反向PCR在得到pvuⅡ和Stu I消化的自连文库中扩增得到2.5kb特异产物,经测序发现,片段两侧为基因特异引物,部分序列与已知序列相一致.Southern也进一步证实了IPCR扩增片段来源于盐藻基因组DNA.结论:IPCR技术在克隆基因旁侧序列时优于LMPCR方法.

作者：姜国忠；谢华；郭玉忠；范天黎；薛乐勋刊期： 2004年第01期
带血管蒂包皮与交叉皮瓣一期修复尿道下裂38例

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作者：张卫斌；林泽君刊期： 2004年第01期
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作者：侯桂琴；王宁；谢华；姜国忠；柴玉荣；王天云；薛乐勋刊期： 2004年第01期
人端粒酶逆转录酶基因启动子区的克隆及其真核表达载体的构建

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作者：郭玉忠；李杰；姜国忠；王建民；薛乐勋刊期： 2004年第01期
人血管生成抑制因子canstatin原核表达载体的构建及表达

目的:构建国人血管生成抑制因子canstatin的原核表达载体并在大肠杆菌BL21中表达canstatin重组蛋白.方法:用Trizol试剂提取人肝脏组织总RNA,通过RT-PCR扩增canstatin的cDNA,克隆到pMD18-T载体中并进行序列分析.将canstatin cDNA定向克隆于原核表达载体pET30a(+)中,而后在大肠杆菌BL21中经IPTG诱导表达.结果:canstatin cDNA克隆入质粒pET30a(+)获得了重组表达载体pET30a(+)/Cans,canstatin的cDNA长度为684 bp,编码227个氨基酸.IPTG诱导原核表达载体pET30a(+)/Cans在大肠杆菌BL21中的表达量约占菌体总蛋白量的35%.结论:原核表达载体pET30a(+)/hCans在大肠杆菌BL21中高效表达canstatin重组蛋白.

作者：侯卫红；袁保梅；王天云；柴玉荣；侯桂琴；王建民；薛乐勋刊期： 2004年第01期
乳突翻查术59例分析

随着耳显微手术的迅速发展,乳突根治术后中耳炎治愈率不断提高,但仍有部分患者术后中耳长期反复感染流脓.1990年至2000年,本科做乳突翻查术59例,现将59例术中情况分析如下.

作者：耿曼英；贾艳丽刊期： 2004年第01期
脱水机运行故障后组织标本的处理方法

近几年来自动脱水机已被广泛应用于各医院病理科,在使用过程中一些意外因素,如断电、电压过低、人为操作不当等,均可以使脱水机停止运行,使制片不能按时完成,或者出现盛有组织标本的脱水篮悬吊在空中,使标本干枯、变形以至硬脆,给病理制片带来很大困难.针对以上这些情况,作者采用不同的处理方法,均取得良好的效果.

作者：孙廷谊；孔令非刊期： 2004年第01期
改良侧前方减压后路内固定治疗胸腰椎骨折并脊髓损伤23例体会

腰椎爆裂骨折,屈曲压缩Ⅱ～Ⅲ型骨折,其骨碎块后移压迫脊髓或马尾神经引起瘫痪.选择前人路可在直视下切除椎管前方致压物并行椎间植骨和内固定.但是前人路对于恢复伤椎体高度,矫正后凸畸形往往不够理想,且手术创伤较大.本院自1995年1月至2000年12月,选择适当病例,采用改良侧前方减压后路内固定,取得了较好效果.

作者：吴学建；王利民；李甲振；王卫东；皮国富刊期： 2004年第01期
膀胱镜检查患者300例健康教育体会

2001年10月至2002年8月,作者对300例膀胱镜检查的患者进行健康教育尝试,报道如下.

作者：齐艳刊期： 2004年第01期
普伐他汀对冠心病并发血脂异常患者血浆C反应蛋白的影响

研究表明,冠心病的发病与慢性炎症有关[1],血浆C反应蛋白(CRP)浓度可作为慢性炎症的标志物.治疗心血管病的药物中较少可降低血浆CRP的水平,国外近报道,普伐他汀能降低血浆CRP浓度,减少心血管事件的发生[2],国内此方面的研究甚少,为证实普伐他汀能否降低血浆中CRP浓度,作者进行了临床观察.

作者：郭应先；刘怀霖；刘祥朝刊期： 2004年第01期
改良Politano-Leadebetter法治疗严重输尿管扩张17例

输尿管扩张在小儿泌尿外科比较常见,很多原因均可造成输尿管扩张.无论何种原因,输尿管严重扩张时移植手术后发生返流的可能性加大[1],因此,有必要增加手术时的抗返流机制.Politano-Leadebetter法是输尿管移植常用的方法之一,本院1990年以来对此方法加以改良,治疗输尿管扩张患儿17例,效果良好,现总结如下.

作者：夏自强；毛远讯；许华峰刊期： 2004年第01期
抗原诱导关节炎兔关节内注射153钐-柠檬酸-羟基磷灰石的生物学分布及病理学变化

目的:研究兔关节内注射放射性核素153钐-柠檬酸-羟基磷灰石(153sm-citrate-HA)制剂的生物学分布及病理学变化.方法:将30只新西兰大白兔分为4组,其中24只制作成抗原诱导关节炎(antigen induuced arthritis,AIA)模型(AIA兔).A组为正常兔6只,B组AIA兔12只,2组膝关节腔内注射153sm-citrate-HA 3.7×107Bq后分别于第3 d、第6 d显像,用SPECT获得放射性计数并计算核素在关节内滞留率及生物学分布、漏出率.C、D组均为AIA兔6只,C组不做任何治疗,D组关节腔内注射153sm-citrate-HA 3.7×107Bq,2组观察30 d后取滑膜、软骨行病理学观察.结果:A、B组关节腔内核素的滞留率分别为(97.7±1.2)%(3 d)、(93.5±0.9)%(6 d)和(98.4±1.4)%(3 d)、(95.1±0.5)%(6 d).关节外漏出率分别为0.17%(3 d)、0.31% (6 d)和0.07%(3 d)、0.09%(6d).病理学观察:D组较C组滑膜炎症明显好转,关节软骨未发现损害.结论:153sm-citrate-HA漏出率低,关节内分布均匀且滞留率高,疗效肯定,安全性较高.

作者：汤立新；陈安民刊期： 2004年第01期