白蓉;晁志文;董瑞鸿;张博爱
目的:观察转染有人端粒酶逆转录酶基因(human telomerase reverse transcriptase, hTERT)启动子调控的单纯疱疹病毒Ⅰ型胸苷激酶(herpes simplex virus thymidine kinase, HSV-tk)基因的人卵巢癌细胞的部分生物学特性.方法:构建hTERT启动子调控的HSV-tk基因重组逆转录病毒载体,筛选携带该载体的包装细胞,测定包装细胞产生的逆转录病毒滴度,并用病毒颗粒感染人卵巢癌SKOV3细胞(SKOV3/tk细胞)并经RT-PCR方法鉴定.然后倒置显微镜下观察SKOV3/tk细胞形态,MTT法研究细胞生长特性,并观察转染细胞裸鼠体内的成瘤能力.结果:包装细胞产生的病毒滴度可达2×103 cfu·ml-1.SKOV3/tk细胞扩增出770 bp 的tk基因片段,形态与SKOV3细胞无明显差异;倍增时间72 h,无明显变化;裸鼠体内的成瘤能力较SKOV3细胞下降.结论:hTERT调控的HSV-tk基因逆转录病毒载体构建成功;转染细胞的裸鼠体内成瘤能力降低.
作者:郭玉忠;姜国忠;李克虹;史惠蓉;王建民;薛乐勋 刊期: 2004年第04期
乳癌术后局部复发较为常见,多采用放疗、化疗及内分泌治疗,但疗效较差[1].自1985年以来本科对乳癌术后的局部复发,采用以手术治疗为主的综合性治疗,疗效满意,现报道如下.
作者:李孟圈 刊期: 2004年第04期
目的:探讨脑膜瘤组织中基质金属蛋白酶-9(MMP-9)和P53蛋白的表达及与肿瘤血管形成和临床病理之间的关系.方法:应用免疫组织化学法检测52例脑膜瘤组织中MMP-9、P53蛋白的表达情况及微血管密度(MVD),并结合临床病理参数进行综合分析.结果:MMP-9、P53的表达与脑膜瘤组织病理分级、MVD、侵袭行为、瘤周水肿显著相关(P﹤0.05).结论:MMP-9、P53在肿瘤血管形成、恶性进展和浸润、瘤周水肿等方面起着重要作用.检测脑膜瘤组织中MMP-9、P53的表达对进一步了解脑膜瘤生物学行为、临床表现和判断预后具有重要价值.
作者:马春晓;徐国本 刊期: 2004年第04期
格林-巴利综合征(GBS)患者由于呼吸肌麻痹常出现咳嗽无力,不能咳出痰液而发生呼吸困难加剧.护士用手叩击患者的背部是常用的排痰方法[1,2].作者使用G5振动排痰机对GBS患者进行排痰,临床效果较好,现总结如下.
作者:陈长英;李改焕;王艳红 刊期: 2004年第04期
目的:研究糖皮质激素对小鼠支气管哮喘(简称哮喘)模型肺组织粘蛋白基因Muc5ac mRNA和蛋白表达的影响,探讨其对哮喘时气道粘液过度分泌的作用.方法:18只清洁级BALB/c小鼠被随机分为对照组、哮喘组和地塞米松组,每组6只.后2组制作哮喘模型,地塞米松组用地塞米松治疗.采用RT-PCR和免疫组化法分别检测肺组织中Muc5ac mRNA和Muc5ac蛋白的表达.结果:哮喘组肺组织Muc5ac mRNA(0.534 1± 0.030 3)和蛋白(0.190 6±0.000 8) 表达均较对照组(分别为0.199 4±0.012 8和0.119 4±0.000 7) 明显增加(P均<0.01),地塞米松治疗后2者均明显降低(分别为0.272 9±0.034 5和0.145 6±0.000 3).结论:地塞米松可下调Muc5ac mRNA和蛋白表达,可能在哮喘气道粘液过度分泌中起治疗作用.
作者:刘剑波;张珍祥;徐永健;邢丽华;张惠兰 刊期: 2004年第04期
转移性结直肠癌的治疗效果一般较差,近年随着草酸铂、开普拓、希罗达(卡培他滨)等新药不断问世,临床治疗效果有所改善.希罗达单药治疗结直肠癌疗效已有多篇报道[1,2],但其联合草酸铂方案治疗转移性结直肠癌国内少有报道,作者观察二药联合应用于转移性结直肠癌的疗效及毒副反应,现报道如下.
作者:耿丽;樊青霞;张浩 刊期: 2004年第04期
在早期胚胎发育过程中,超声早能发现的妊娠囊内容物即为卵黄囊,卵黄囊变形或大小异常往往是胚胎发生病理变化早出现的超声征象[1],对判断胎儿生长发育及预测妊娠结果具有指导意义.因此,作者应用腹部及经阴道超声技术对早孕妇女卵黄囊进行了观察及监测,探讨卵黄囊超声与妊娠结果的关系,报道如下.
作者:栗河舟 刊期: 2004年第04期
目的:构建可在真核细胞中表达碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)的真核表达载体,为进一步开展bFGF基因治疗缺血性脑血管疾病奠定基础.方法:①采用线栓法建立SD大鼠大脑中动脉局灶性脑缺血模型,取缺血灶周围脑组织经逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)扩增bFGF基因;②将bFGF DNA克隆到pGEM-T Easy质粒,经菌落PCR和HindⅢ和EcoRI双酶切鉴定;③然后将bFGF DNA亚克隆到pEGFP-N3质粒;通过抗性基因筛选阳性克隆,经菌落PCR、酶切和测序鉴定.结果:菌落PCR、酶切和DNA序列鉴定均证实插入片段与GenBank报道的bFGF基因序列一致. 结论: 经RT-PCR反应得到了特异的bFGF基因片段并成功构建了bFGF荧光真核表达载体.
作者:许予明;马兴荣;宋波;秦洁;唐洲平;赵国强;张苏明 刊期: 2004年第04期
目的:构建人表皮生长因子的真核表达载体.方法:采用RT-PCR扩增人表皮生长因子(hEGF)cDNA基因序列并克隆入PGEM-T 载体,再用限制性内切酶切取目的基因,插入pcDNA 3.1真核表达载体.结果:重组体经转化E.coli JM109感受态大肠杆菌后可大量扩增,提取重组体进行限制性酶切及PCR可见目的片段.结论:已成功构建hEGF真核表达载体,为进一步研究hEGF的功能奠定了基础.
作者:赵国强;张立华;王莉;鲍玉洲 刊期: 2004年第04期
目的:观察戊四氮点燃大鼠海马各区巢蛋白(nestin)的表达,以探讨其与癫痫发病机制的关系.方法: 将20只成年雄性SD大鼠随机分为实验组和对照组,实验组采用戊四氮点燃大鼠模型,观察大鼠痫性发作行为和脑电图表现,用免疫组织化学方法观察海马各区星形细胞活化标志巢蛋白表达的变化. 结果:实验组大鼠于4周后均达到点燃状态,而对照组行为正常.2组脑电图背境电活动以α节律为主,实验组Ⅳ或Ⅴ级痫性发作时脑电图均出现典型的高波幅棘慢波、尖慢波.实验组海马各区nestin阳性星形细胞较对照组明显增多. 结论:戊四氮点燃引起海马内 nestin阳性星性细胞明显增加,提示癫痫脑组织内存在星形细胞增生和活化,这可能是癫痫脑组织胶质化及点燃维持的病理基础.
作者:杨改清;连亚军;方树友;张志强 刊期: 2004年第04期
单克隆抗体(单抗)对肿瘤组织有较高特异性,因此,利用单抗作为特异性载体制成导向药物,从而选择性杀伤肿瘤细胞进行导向治疗,在肿瘤治疗领域里已显示出巨大的潜力和前景[1].作者用131I标记的单克隆抗体Hepama-1,治疗28例晚期肝癌,进一步探索单抗介导放射性导向治疗人肝癌的疗效及可行性.
作者:尚育红;许莉;牛广军;范魁生;魏丽远;谢弘;王根风 刊期: 2004年第04期
1998年3月至2001年7月,作者在前路结核病灶清除、椎间植骨的基础上,采用脊柱前路钢板内固定,治疗15例胸腰段脊柱结核,效果满意,现报道如下.
作者:陈书连;刘志成;王兆言;高延征;张敬乙;刘涛 刊期: 2004年第04期
自2000年6月以来,作者对60例高血压性脑出血进行微创颅内血肿粉碎穿刺治疗(下称治疗组),取得显著成效,并与同期60例因其他原因拒绝穿刺的同类患者(下称保守组)进行比较,观察疗效如下.
作者:盛茂更 刊期: 2004年第04期
先天性肥厚性幽门狭窄(congenitial hyperotrophic pyloric stenosis, HPS)传统的诊断方法是依靠临床表现及X线稀钡检查,但其不能直接显示幽门的肥厚程度,且X线易对婴儿造成损伤,还有钡剂误吸的危险.作者自1997年3月至2003年6月经B超诊断HPS 36例,均经手术证实,现报道如下.
作者:郭玲;康素玲;任翠萍;李晓飞 刊期: 2004年第04期
许多学者认为固定修复体的边缘应置龈上,因为龈上边缘符合生理要求[1].但在患者对美观的需求高或患牙修复条件有限时不得不将修复体边缘放置在龈下,此时预备体的边缘即肩台也在龈下,为使印模材料很好地再现龈缘、龈沟、肩台的细微部分,确保修复体边缘适合性良好,基牙牙周组织健康,排龈是常用的方法之一.作者观察化学排龈法和机械排龈法对修复效果的影响,报道如下.
作者:张晓 刊期: 2004年第04期
目的:探讨悬浮生长的人脐血细胞中神经元特有标志物的表达特性,进一步阐明脐血单个核细胞(MNCs)向神经细胞分化的条件和机制.方法:取健康自然分娩产妇脐血,密度梯度离心法分离单个核细胞,以1×106 ml-1细胞密度接种于含体积分数为20%胎牛血清的DMEM培养瓶内,置37 ℃、体积分数为5%CO2、饱和湿度的培养箱内培养,倒置显微镜下观察细胞形态变化.收集培养第1 d、3 d、5 d、7 d、10 d悬浮生长的细胞,用RT-PCR法检测培养前后MNCs神经元特有标志物Nestin和MAP2的mRNA的表达.结果:培养前MNCs呈小圆形,Nestin、MAP2 mRNA均表达阳性.培养后细胞体积增大,部分细胞贴壁生长,部分细胞呈悬浮生长.收集悬浮生长细胞,第1 d、3 d Nestin mRNA的表达升高,随后降低直至转阴,而MAP2 mRNA的表达随培养时间的延长而增强.结论:悬浮生长的脐血细胞表达神经元特有标志物Nestin和MAP2 mRNA,随培养时间延长前者表达减弱而后者表达增强.
作者:鄢文海;刘计荣;王建枝;邢莹;许燕;韩雪飞;曹孟德 刊期: 2004年第04期
目的:探讨长期应用卡马西平(CBZ)对大鼠小脑结构的影响.方法:将SD大鼠随机分为正常组和实验组,每组12只.①实验组:给予CBZ溶液(CBZ片在45 ℃水浴中加热振摇溶解)灌胃,浓度由60 g/L(灌胃10 d)增至80 g/L(灌胃10 d)、100 g/L(灌胃10 d)、120 g/L(灌胃60 d),每次1 ml/100 g,共灌胃90 d.②正常组:正常喂养,每d蒸馏水灌胃.观察大鼠的肢体活动、共济协调能力与精神状态等.第90 d处死大鼠,取小脑组织,光镜观察小脑的病理组织学改变,用透射电镜观察小脑超微结构的变化,并进行图像分析.结果:正常组无异常表现.实验组大鼠在灌胃期间出现呼吸急促、行走无力、拖腿、精神萎靡等表现.与正常组相比,实验组大鼠小脑突触数量减少,突触内囊泡明显减少,线粒体数量减少并且肿胀.结论:长期服用卡马西平可造成大鼠小脑超微结构明显损害,是大鼠出现平衡、姿势、行走(步态)和肢体精细运动异常等小脑功能障碍的主要原因.
作者:田新红;李成文;李伟 刊期: 2004年第04期
目的:分析MT1-MMP、MMP-2 mRNA的表达与脑胶质瘤恶性程度和侵袭性之间的关系及其意义.方法:采用原位杂交方法检测42例人脑胶质瘤和8例正常脑组织中MT1-MMP、MMP-2 mRNA 的表达.结果:MT1-MMP、MMP-2 mRNA的表达水平与肿瘤的级别呈正相关(r=0.875、0.865,P<0.01);Ⅲ~Ⅳ级脑胶质瘤组织与正常脑组织、Ⅰ~Ⅱ级脑胶质瘤组织之间标记指数差异有统计学意义(P<0.01);且MT1-MMP mRNA表达与MMP-2 mRNA表达呈正相关(r=0.882,P<0.01). 结论:MT1-MMP表达与脑胶质瘤的恶性程度和侵袭性有明显的关系;MT1-MMP与MMP-2在脑胶质瘤的侵袭过程中密切相关.
作者:牛光明;尹先印;万锋;张鹏远;王建祯;宋乐;薛德麟 刊期: 2004年第04期
目的:监测流行性感冒(流感)的流行趋势,追踪可能出现的流感病毒变异株,对流感流行尽可能作出较准确的预测预报,及时制定防制措施,降低流感对人类的危害.方法:1999年至2002年以郑州市儿童医院作为哨点医院,收集上呼吸道病例与门诊病例的总数,采集流感样病例咽拭子标本718份,用鸡胚分离、MDCK细胞培养分离鉴定病毒. 于2002年采集447名5~13岁儿童全血,进行红细胞凝集试验检测3个型别流感病毒抗体水平.结果:1999年1月至2002年4月,上呼吸道感染病例占门诊病例的60.17%~69.03%,2002年5~12月流感样病例占门诊病例的10.62%,分离出流感病毒51株,其中H3N2、H1N1和B型分别占49.02%、29.41%和21.57%,健康儿童H3N2抗体阳性率和保护性抗体分别为95.30%和74.21%,明显高于H1N1和B型(P<0.01).结论:近年来H3N2、H1N1和B型在郑州市混合流行,H3N2为流行优势株,由于H3N2和H1N1抗体水平较高,如果病毒没有较大的变异和新毒株的出现,发病不会突然增多,但由于B型抗体水平较低,可能会出现局部爆发.
作者:韩同武;董蒲梅;郑天柱;乔荣宪;张保华 刊期: 2004年第04期
目的:分析重症肌无力(MG)患者胸腺Fas基因突变及其编码蛋白质的氨基酸变异,探讨Fas分子在重症肌无力发生中的作用.方法:提取8例MG患者胸腺总RNA,经RT-PCR法扩增出Fas基因全长,克隆后用荧光标记法进行基因测序,用DNASIS、OMIGA软件与Genbank中Fas序列进行同源性比较和分析.结果:8例患者胸腺组织6例出现Fas基因突变,突变率为75%(6/8),其中5例发生2个以上位点突变,只有1个位点突变的1例(12.5%,1/8);突变类型为164位A→G,相应的氨基酸变异为55位Asp→Gly,96位His-Arg,192位Arg→Lys和251位Lys→Arg.Fas基因高度保守,患者之间同源性为99.6%~100%,Fas分子同源性为98.7%~99.7%.结论:重症肌无力患者胸腺组织中存在Fas基因突变和Fas分子结构变异,可能与患者胸腺异常有关.
作者:杜英;张清勇;赵国强;何炜;阮丽荣;张国荣 刊期: 2004年第04期