学术投稿

人表皮生长因子真核表达载体的构建

赵国强;张立华;王莉;鲍玉洲

关键词:人表皮生长因子, 克隆, 基因表达
摘要:目的:构建人表皮生长因子的真核表达载体.方法:采用RT-PCR扩增人表皮生长因子(hEGF)cDNA基因序列并克隆入PGEM-T 载体,再用限制性内切酶切取目的基因,插入pcDNA 3.1真核表达载体.结果:重组体经转化E.coli JM109感受态大肠杆菌后可大量扩增,提取重组体进行限制性酶切及PCR可见目的片段.结论:已成功构建hEGF真核表达载体,为进一步研究hEGF的功能奠定了基础.
郑州大学学报(医学版)杂志相关文献
  • 中晚期胰腺癌248例综合治疗体会

    1995年1月至2003年12月,本院共收治中晚期胰腺癌患者248例,采用2种或2种以上的方法进行综合治疗,报道如下.

    作者:张玲;黄长山;庞春;韩风 刊期: 2004年第04期

  • 安神口服液的质量控制

    安神口服液由酸枣仁、生地、百合、丹参而制成的复方纯中药制剂,具有养阴、清热、安神的作用,临床上用于阴虚火旺型失眠.作者采用薄层色谱法对方中酸枣仁、生地、百合、丹参进行了定性鉴别,运用薄层扫描法测定丹参中原儿茶醛的含量,以控制产品质量.

    作者:刘丽娜 刊期: 2004年第04期

  • 结直肠腺瘤及癌组织中缺氧诱导因子-1α的表达

    目的:探讨缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)的表达与结直肠癌发生发展的关系.方法:用免疫组化SABC法检测27例结直肠正常黏膜、13例腺瘤和61例癌组织中HIF-1α的表达,并探讨HIF-1α与结直肠癌患者的年龄、性别、肿瘤浸润等的关系.结果:正常结直肠黏膜组织中HIF-1α无表达;腺瘤组织中阳性表达率为15.4%(2/13),且均为弱阳性表达,2组HIF-1α阳性表达率差异无统计学意义(P>0.05).癌组织中HIF-1α阳性表达率为65.6%(40/61),其中弱阳性、阳性及强阳性表达率分别为27.9%、19.7%、18.0%,癌组织中阳性表达率显著高于正常粘膜和腺瘤组织(P<0.01).HIF-1α表达与肿瘤浸润深度、淋巴结转移(P<0.05)和Dukes 分期密切相关(rs=0.554,P<0.01),而与患者年龄、性别及肿瘤部位、大小、组织病理学类型无关(P>0.05).结论:HIF-1α过表达可能是结直肠癌发生的晚期事件,与结直肠癌的浸润、转移密切相关.

    作者:任学群;索智敏;傅侃达;景红;吴江 刊期: 2004年第04期

  • 莱姆病73例治疗体会

    自河南油田在新疆探区中标后,采油工厂职工轮流去新疆油田工作.几年来先后发现部分职工及探亲家属感染莱姆病,为此河南石油勘探局自1998年至今先后3次对全局入疆返回人员进行莱姆病调查,其中采油二厂自愿接受检查706人,男677人,女29人,确诊感染(患)莱姆病毒73例并在本院接受治疗,现把诊治体会报道如下.

    作者:全晓会 刊期: 2004年第04期

  • 精液迟缓液化症患者精浆锌离子含量分析

    目的:研究精浆中锌离子含量与精液液化的关系.方法:精液迟缓液化组96例及正常液化组89例,采用WYX-9004型原子吸收分光光度计测定2组精浆中锌离子含量.结果:迟缓液化组精浆中锌离子含量为(144.81±34.02) mg/L,正常液化组为(81.01±29.22) mg/L,差异有统计学意义(P<0.01);2组在精子活动力上分别为(25.24±8.95)%,(56.97±10.34)%,差异有统计学意义(P>0.05).结论:精浆中锌离子含量高,其精液液化时间长;反之,液化时间短.

    作者:徐慧;王黎;张灯;刘红春;孙淑慧 刊期: 2004年第04期

  • 儿童外伤性白内障术后人工晶状体前膜形成34例治疗体会

    儿童外伤性白内障是儿童致盲的常见眼病[1],而人工晶状体前膜是白内障摘出人工晶状体植入术后常见的并发症,严重影响患儿的视力恢复[2].作者自1998年至2001年施行儿童外伤性白内障后房型人工晶体植入176例(176眼),术后出现人工晶状体前膜34例,现将治疗体会报道如下.

    作者:张凤妍;卢杰 刊期: 2004年第04期

  • 错颌畸形68例正畸治疗后牙釉质脱矿的临床观察

    固定矫治器具有固位良好、支抗充分、适于加各种类型的矫治力,能有效控制牙齿移动的方向等特点[1],在口腔正畸治疗中得到广泛应用.但此类矫治器结构复杂、通过粘结或结扎而固定在牙齿上,故口腔卫生不易保持,矫治结束后,牙釉质脱矿是常见的问题.作者观察了68例正畸治疗患者正畸治疗后牙釉质脱矿情况,报道如下.

    作者:崔淑霞;刘进忠;石丹 刊期: 2004年第04期

  • 术前急性高容量血液稀释用于老年患者40例临床观察

    术前急性高容量血液稀释(acute hyperroleic hemodilution, AHH)已作为一种新的减少异体输血的方法用于临床,但有关AHH用于老年患者的可行性尚未见报道.作者拟通过观察AHH对血液动力学及凝血功能的影响来评价其用于老年患者的可行性.

    作者:艾艳秋;李莉;李丽伟;张卫;马君志 刊期: 2004年第04期

  • 二维超声与心电图诊断心肌缺血结果分析

    冠心病早期多有心肌缺血的表现,如能早期诊断并及时治疗,对于提高该病的治愈率、降低病死率具有重要意义.1999年1月至2001年1月作者应用二维超声(2DE)与心电图(ECG)检查诊断心肌缺血患者95例,并对结果进行分析,报道如下.

    作者:云琳;云琪 刊期: 2004年第04期

  • 苯磺隆对雄性大鼠生殖系统的影响

    目的:了解苯磺隆对雄性大鼠生殖系统的影响.方法:SD雄性大鼠40只,随机分为A、B、C、D 4组,A组为空白对照,后3组分别以141 mg/kg、281 mg/kg、562 mg/kg剂量的苯磺隆连续灌胃.第35 d颈静脉采血后处死动物,计算睾丸和附睾的脏器系数,并进行精子头计数和睾酮含量测定.结果:与A组相比,各染毒组(B、C、D组)每周体重、睾丸质量、睾丸和附睾脏器系数、精子头计数、血清和睾丸组织睾酮含量差异均无统计学意义;562 mg/kg剂量组附睾质量低于对照组(P<0.05). 结论:苯磺隆对雄性大鼠有一定的生殖毒性.

    作者:陈小玉;李春阳;李志远;许东 刊期: 2004年第04期

  • 悬浮生长的人脐血细胞中Nestin及MAP2 mRNA的表达

    目的:探讨悬浮生长的人脐血细胞中神经元特有标志物的表达特性,进一步阐明脐血单个核细胞(MNCs)向神经细胞分化的条件和机制.方法:取健康自然分娩产妇脐血,密度梯度离心法分离单个核细胞,以1×106 ml-1细胞密度接种于含体积分数为20%胎牛血清的DMEM培养瓶内,置37 ℃、体积分数为5%CO2、饱和湿度的培养箱内培养,倒置显微镜下观察细胞形态变化.收集培养第1 d、3 d、5 d、7 d、10 d悬浮生长的细胞,用RT-PCR法检测培养前后MNCs神经元特有标志物Nestin和MAP2的mRNA的表达.结果:培养前MNCs呈小圆形,Nestin、MAP2 mRNA均表达阳性.培养后细胞体积增大,部分细胞贴壁生长,部分细胞呈悬浮生长.收集悬浮生长细胞,第1 d、3 d Nestin mRNA的表达升高,随后降低直至转阴,而MAP2 mRNA的表达随培养时间的延长而增强.结论:悬浮生长的脐血细胞表达神经元特有标志物Nestin和MAP2 mRNA,随培养时间延长前者表达减弱而后者表达增强.

    作者:鄢文海;刘计荣;王建枝;邢莹;许燕;韩雪飞;曹孟德 刊期: 2004年第04期

  • 标本离心条件和放置时间对凝血酶原时间和活化部分凝血活酶时间的影响

    凝血酶原时间t(P)和活化部分凝血活酶时间t(APT)测定是判断机体止血与凝血系统病理变化、手术前筛查凝血系统和指导临床药物治疗的重要指标.由于标本试验前处理对测定结果影响很大,作者就离心条件和放置时间是否对t(P)、t(APT)测定结果有影响进行了探讨,现报道如下.

    作者:张金莲;杨莹;高革;齐伟 刊期: 2004年第04期

  • 骨盆骨折致后尿道损伤5例护理体会

    男性尿道膜部位于尿生殖膈上下筋膜之间,并为筋膜所固定,是尿道短窄的一段,其管壁较薄弱,位置较固定,遇到冲击力滑动无余地,常因骨盆骨折而造成此段尿道损伤.1999年1月至2002年12月,本院收治5例骨盆骨折致尿道断裂的男性患者,现将护理体会报道如下.

    作者:徐梅英 刊期: 2004年第04期

  • 急性心肌梗死96例治疗体会

    2000年10月至2003年6月,作者共收治急性心肌梗死(AMI)132例,其中96例给以重组链激酶(r-SK)溶栓治疗,疗效满意,现报道如下.

    作者:彭跃华 刊期: 2004年第04期

  • 脑膜瘤组织中MMP-9、P53的表达

    目的:探讨脑膜瘤组织中基质金属蛋白酶-9(MMP-9)和P53蛋白的表达及与肿瘤血管形成和临床病理之间的关系.方法:应用免疫组织化学法检测52例脑膜瘤组织中MMP-9、P53蛋白的表达情况及微血管密度(MVD),并结合临床病理参数进行综合分析.结果:MMP-9、P53的表达与脑膜瘤组织病理分级、MVD、侵袭行为、瘤周水肿显著相关(P﹤0.05).结论:MMP-9、P53在肿瘤血管形成、恶性进展和浸润、瘤周水肿等方面起着重要作用.检测脑膜瘤组织中MMP-9、P53的表达对进一步了解脑膜瘤生物学行为、临床表现和判断预后具有重要价值.

    作者:马春晓;徐国本 刊期: 2004年第04期

  • 神经外科手术中实时B超应用33例

    B超在实质性脏器内的病灶定位十分准确,但经颅骨外不能使用普通B超,作者在颅脑手术中翻起颅骨后,在硬膜外应用术中B超对脑内病灶进行实时定位,取得了满意效果,现将1993年至2003年在神经外科手术中应用B超33例的体会报道如下.

    作者:赵明;徐欣;龙江;保健基;宋来君 刊期: 2004年第04期

  • 碱性成纤维细胞生长因子真核荧光表达载体的构建

    目的:构建可在真核细胞中表达碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)的真核表达载体,为进一步开展bFGF基因治疗缺血性脑血管疾病奠定基础.方法:①采用线栓法建立SD大鼠大脑中动脉局灶性脑缺血模型,取缺血灶周围脑组织经逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)扩增bFGF基因;②将bFGF DNA克隆到pGEM-T Easy质粒,经菌落PCR和HindⅢ和EcoRI双酶切鉴定;③然后将bFGF DNA亚克隆到pEGFP-N3质粒;通过抗性基因筛选阳性克隆,经菌落PCR、酶切和测序鉴定.结果:菌落PCR、酶切和DNA序列鉴定均证实插入片段与GenBank报道的bFGF基因序列一致. 结论: 经RT-PCR反应得到了特异的bFGF基因片段并成功构建了bFGF荧光真核表达载体.

    作者:许予明;马兴荣;宋波;秦洁;唐洲平;赵国强;张苏明 刊期: 2004年第04期

  • 胸腰段脊柱结核15例治疗体会

    1998年3月至2001年7月,作者在前路结核病灶清除、椎间植骨的基础上,采用脊柱前路钢板内固定,治疗15例胸腰段脊柱结核,效果满意,现报道如下.

    作者:陈书连;刘志成;王兆言;高延征;张敬乙;刘涛 刊期: 2004年第04期

  • 1986年至2002年信阳市丝虫病监测结果分析

    目的:巩固基本消灭丝虫病的成果,了解丝虫病基本消灭后的流行动态和传播规律,为消灭丝虫病提供科学依据.方法:从1986年起,在全市10县区开展病原学、蚊媒学纵向和横向监测,病原学监测为血检微丝蚴,蚊媒学监测为剖检幼丝虫.结果:自1988年开始在2个省级纵向监测点,血检10 213人,未发现微丝蚴阳性者,蚊媒监测仅1989年发现阳性蚊1只,为1条Ⅱ期幼虫;在蚊种构成上各监测点人房内优势蚊种为淡色库蚊,其次为中华按蚊;露宿人群叮人率波动较大,高者达360.6只/人夜,低为20.4只/人夜;帐内人群蚊媒叮人率波动较小,平均叮人率为1.34只/人夜;经产蚊比率为38.48%~84.64%.1986年至2002年横向检测,全市累计血检514 524人,1986年、1987年查出微丝蚴阳性者90例,1988年以后未再发现微丝蚴血症者;1986年至2002年共剖检蚊媒44 024只,未发现阳性蚊.2001年在10个县区开展慢性丝虫病患者普查,查出丝虫病患者1 415人,患病率0.03%,其中橡皮肿病患者1 354人,占95.69%.结论:信阳市丝虫病的传播已被阻断,已实现消灭丝虫病的目标,今后的工作重点应放在慢性丝虫病患者的照料上.

    作者:沈大勇;陈旭东;黄德 刊期: 2004年第04期

  • 保留导管法脑脊液置换治疗蛛网膜下腔出血15例

    有关脑脊液置换治疗蛛网膜下腔出血(SAH)的报道不少,但由于脑脊液置换方式、置换量的不同,其疗效也不尽相同[1~3].作者采取保留导管法进行脑脊液置换15例,疗效满意,现报道如下.

    作者:蒋中凤;许红霞 刊期: 2004年第04期

郑州大学学报(医学版)杂志

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