人血管抑素的分离纯化及对不同细胞体外增殖的影响

房伯俊；李惠翔；谈立松；张云汉；马长路；杨吉龙

关键词：血管抑素, 内皮细胞, 纯化, 凋亡

摘要：目的:探讨人血管抑素(angiostatin)对不同细胞体外增殖的影响.方法:用亲和层析、分子筛技术及有限酶解法从人血浆组分Ⅲ中分离纯化得到人血管抑素(human angiostatin,以下简称angiostatin),采用MTT法分别分析angiostatin作用24 h、48 h、72 h原代培养的人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVEC)、不同剂量angiostatin(20 nmol/L,40 nmol/L,80 nmol/L,160 nmol/L,320 nmol/L及640 nmol/L)作用下HUVEC和小鼠肺动脉内皮细胞(1H11)、angiostatin为160 nmol/L时其他细胞(7721、Hela、A431、A549、H128、K562、LLC、SL7、3T3)体外增殖的抑制率;透射电镜下观察angiostatin作用后1H11细胞形态的变化.结果:纯化的angiostatin能特异地抑制HUVEC细胞的体外增殖,且呈现一定的剂量和时间依赖性,HUVEC对angiostatin的敏感性高于1H11(P<0.05);对其他细胞株的体外增殖无影响;透射电镜可见1H11内皮细胞出现典型的凋亡的形态学改变.结论:人血浆组分Ⅲ来源的angiostatin能特异地显著抑制内皮细胞的体外增殖,其作用机制之一是诱导内皮细胞凋亡.

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冠状动脉造影114例导管选择体会

术前通过超声心动图(UCG)及X线心脏三位片检查主动脉起始段(主动脉根、升主动脉和冠状动脉起源部位),指导冠状动脉造影(coronary angiography, CAG)导管的选择,与常规导管选择方法相比,更趋合理,置管完成更快捷,报道如下.

作者：郑德根；翟晓江；李萌刊期： 2003年第01期
成人急性白血病患者骨髓中p16基因的表达

目的:研究成人急性白血病患者p16基因纯合缺失和甲基化变化与其表达之间的关系,探讨其在成人急性白血病发生发展中的生物学意义.方法:分别用多重聚合酶联反应(PCR)技术及甲基化敏感限制性内切酶-PCR技术检测了71例成人急性白血病患者DNA中p16基因纯合缺失及甲基化情况;应用原位杂交及免疫化学技术检测p16 mRNA及P16蛋白表达.结果:71例成人急性白血病患者中,2例检测出 p16基因纯合缺失.在无p16基因纯合缺失的病例中,5例急性淋巴细胞白血病(5/26)和9例急性髓性白血病(9/43)患者测出p16基因甲基化.p16 mRNA及P16蛋白的阳性率分别为70.4%(50/71例)、61.9%(44/71例).结论:在成人急性白血病的发生发展中,p16基因甲基化比p16基因纯合缺失更具有意义; p16基因表达异常与成人急性白血病的发生发展密切相关.

作者：杨君峥；李晓文；孙玲；宋国英；陈辉；刘运卿刊期： 2003年第01期
前列腺增生265例护理体会

良性前列腺增生症是老年男性较常见的疾病之一,发病率随年龄增长而递增,临床以尿路梗阻为主要表现,并易继发感染、结石和膀胱憩室等[1～3].本院自1997年1月至2000年2月共收治前列腺增生症(BPH)患者265例,120例行耻骨上经膀胱前列腺摘除术(TVP),145例行经尿道前列腺电切术(TURP).比较分析2种术式,并提出相应护理措施,报道如下.

作者：刘会范；齐艳刊期： 2003年第01期
体外循环冠状动脉架桥术40例麻醉管理

作者于2000年6月至2002年9月在体外循环下开展冠状动脉搭桥术40例,其中冠状动脉(冠脉)搭桥加二尖瓣置换和主动脉瓣置换2例,冠脉搭桥加二尖瓣置换3例.现总结如下.

作者：王俭；张卫刊期： 2003年第01期
超声心动图对非Q波心肌梗死高危患者的识别作用

目的:探讨超声心动图对非Q波心肌梗死高危患者的识别作用.方法:研究196例急性非Q波心肌梗死患者(ST段抬高80例,ST段压低57例,仅有T波变化59例),全部进入CCU病房进行24 h二维(16节段模式)超声心动图检测,记录室壁运动异常(WMA)、室壁运动评分指数(WMSI)、左室射血功能(EF)、左室收缩末期容积(ESV)和左室舒张末期容积(EDV).结果:36例预后不良,与预后不良的主要有关因素有年龄,WMSI,ESV,EF和ST段压低.各因素对早期临床事件阳性和阴性的预见价值ST段压低为0.30和0.87;WMA>3节段为0.28和0.86;WMSI>1.33为0.28和0.87;收缩末容积(ESV)>46 ml为0.49和0.91;ST段压低和WMA异常>3节段为0.60和0.88.结论:超声心动图结合心电图资料,有助于非Q波心肌梗死的高危患者识别.非Q波心肌梗死伴有ST段压低和更广泛的WMA的患者是高危患者,应予积极治疗.

作者：于力；刘怀霖；杨兴明；宋涛刊期： 2003年第01期
大面积烧伤患者休克期的多指标监测

在大面积烧伤的救治中,因烧伤早期为休克期,故液体复苏至关重要.以往补液的质、量主要依据全国习用的补液公式1计算. 2000年9月,本科成立了烧伤重症监护病房 (BICU),作者在多指标监测下,对烧伤患者进行抗休克治疗,效果令人满意,现报道如下.

作者：田社民；牛希华；马文元；张业龙；李强；何建民；邱长虹；杨长青刊期： 2003年第01期
放疗加胸腔灌注治疗高龄肺癌合并胸水43例

长期以来,肺癌合并胸水一直被视为放疗禁忌证,尤其年老体弱患者更是如此1.合并胸水的肺癌往往进展迅猛,疗效极差2.为提高高龄肺癌患者的生存期和生活质量,本科从1999年10月至2001年10月,对43例高龄肺癌合并胸水患者采用了放疗加胸腔灌注治疗,现报道如下.

作者：单娟；葛红；陆寓非刊期： 2003年第01期
尿激酶治疗短暂性脑缺血发作28例

尿激酶用于脑梗死的早期溶栓治疗已被广为接受,但用于短暂性脑缺血发作(TIA)的治疗却少见报道,作者自1998年以来用尿激酶治疗TIA 28例,取得良好疗效,现报道如下.

作者：蒋中凤刊期： 2003年第01期
肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌产超广谱β-内酰胺酶的检测及耐药性分析

目的:了解产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)菌株的感染率,为临床合理选用抗生素提供依据.方法:从本院住院患者痰、血、尿、脓液等标本中分离的66株大肠埃希菌和28株肺炎克雷伯菌,先用纸片扩散初筛法选出产ESBLs可疑株后,再用纸片扩散确证法确证为产ESBLs株.结果:产ESBLs菌株占全部测试菌的24.5%,肺炎克雷伯菌及大肠埃希菌检出率分别为42.9%、16.7%,以呼吸科、重症监护病区为主.产酶菌对头孢菌素多重耐药,亚胺培南耐药率为0 %,头孢西丁耐药率为13.0%.结论:早期检测产ESBLs菌株,可指导合理使用抗生素,有效治疗此类细菌引起的感染,减少产ESBLs菌株的产生.

作者：刘强；陈书恩；赵喜元；井洪刊期： 2003年第01期
胚胎大鼠神经干细胞的培养及鉴定

目的: 探索胚胎大鼠神经干细胞培养、传代及鉴定方法.方法:从胚胎大鼠脑室下区(SVZ)组织分离得到神经干细胞,采用无血清培养技术进行培养,并诱导分化,采用SABC法对分化后的细胞进行神经元特异性烯醇化酶(NSE)、胶质纤维酸蛋白(GFAP)检测及姬姆萨染色进行细胞鉴定.结果:成功培养出了胚胎大鼠神经干细胞,培养出的细胞具有自我更新能力和增殖能力,可分化为神经元、神经胶质细胞及少突胶质细胞.结论:胚胎大鼠神经干细胞在体外适宜的培养条件下具有自我更新、增殖和多向分化潜能.

作者：张清勇；杨波；赵新利；何炜；宋来君；李红伟；冯祖荫；王树凯刊期： 2003年第01期
异位妊娠48例超声诊断体会

回顾分析本院1995至2000年经手术及病理证实的异位妊娠48例,对其声像图特征进行分析、探讨,总结如下.

作者：付艳艳刊期： 2003年第01期
神经干细胞移植治疗大鼠脑外伤

已有报道表明神经干细胞移植可在一定程度上恢复受损中枢神经系统的功能[1,2],其治疗机制是通过移植入宿主体内的神经干细胞在中枢神经系统损伤部位定居、增殖并分化成具有修复神经损伤功能的神经元和神经胶质细胞等,同时这些分化的神经元应能与周围神经系统建立起正确的突触联系[3].

作者：杨波；付震峰；王武；张美岭；宋来君；张清勇；赵新利；李红伟；冯祖荫；李惠翔；徐晓丽刊期： 2003年第01期
先天性冠状窦瘤破裂37例

先天性冠状窦瘤(RASV)较少见,约占先天性心脏病的0.31%～3.56%,一旦窦瘤破裂,会对患者的心功能造成迅速而严重的影响,产生急性充血性心力衰竭,甚至死亡1.所以应及时正确诊断,并且确诊后应尽快施术.1981年9月至2001年4月本科共收治该类患者37例,占同期心脏手术的4.1%.现就RASV的诊断及外科处理总结如下.

作者：赵高峰；僧靖静；阎保君；张新；卫洪超；乔晨晖；赵松；赵文增刊期： 2003年第01期
十二指肠损伤11例诊治体会

十二指肠在腹腔内解剖位置较深,大部分位于腹膜后,受伤的机会较少,约占腹内脏器伤的3%～5%[1],常同时合并有其他脏器损伤.十二指肠及其比邻脏器在解剖和生理上的特点,使其损伤后无特异的症状和体征,在临床诊治过程中变得异常复杂、困难,易误诊、漏诊,病死率高达10%～27.8%[2],同时合并有胰腺等相邻脏器伤病死率更高.近6 a间作者共收治十二指肠损伤11例,现着重就早期诊断,减少误诊、漏诊和治疗对策进行探讨.

作者：杨西鹏刊期： 2003年第01期
正交试验优选酸枣仁中酸枣仁皂甙A提取工艺

目的:研究酸枣仁中酸枣仁皂甙A提取工艺.方法:采用正交试验的方法进行优选,用单波长反射法锯齿扫描(λ=632 nm)测定酸枣仁皂甙A含量.结果:提取溶剂的选择,用量及提取时间对酸枣仁中酸枣仁皂甙A的提取率有很大的影响.结论:佳提取工艺为药材6倍量体积分数为50%乙醇,回流提取3 次,每次提取120 min.

作者：朱玲；苑乃香；刘伟；阿有梅；崔长杰刊期： 2003年第01期
西咪替丁对大肠癌患者免疫状态的调R节作用

目的:探讨大肠癌患者外周血T细胞亚群、可溶性的白介素2受体(sIL-2R)及肿瘤坏死因子(TNF)改变的规律及西咪替丁的免疫调节作用.方法:将40例大肠癌患者、30名正常献血者(对照组)为研究对象,40例患者随机分为西咪替丁组(n=20)和单纯手术组(n=20),西咪替丁组自术日开始每d静脉注射西咪替丁800 mg,1周后改为400 mg, 3次/d,口服.应用碱性磷酸酶-抗碱性磷酸酶法(APAAP)及酶联免疫ELISA法,检测其术前、术后7 d、14 d、21 d时T淋巴细胞亚群、血浆sIL-2R及TNF,并进行组间比较.结果:①大肠癌组术前CD3+、CD4+及CD3+/ CD8+((57±5)%、(34±4)%、1.0±0.3)明显低于对照组((63±5)%、(40±3)%、1.4±0.2,P<0.01);CD8+、sIL-2R及TNF((33±4)%、(616±124)mg*L-1、(242±46)ng*L-1)明显高于对照组((28±3)%、(262±65)mg*L-1、(91±8)ng*L-1, P<0.01).②手术可进一步加重CD3+、CD4+及CD4+/ CD8+的降低,使CD8+进一步升高,但这种变化是可逆的;而sIL-2R及TNF的降低,则是不可逆的.③应用西咪替丁可加速T细胞亚群、sIL-2R及TNF的显著改善.结论:大肠癌患者存在免疫功能低下,手术后免疫功能呈暂时抑制到逐渐恢复的过程;西咪替丁可增强患者的免疫功能,可作为结直肠癌患者的辅助治疗.

作者：沙文刊期： 2003年第01期
姐弟同患扩张型心肌病临床分析

流行病学调查虽然发现扩张型心肌病(dilated cardiomyopathy, DCM)的发病中有一定的遗传因素,但其家庭聚集性远低于肥厚性心肌病[1],作者在1995至1998年间研究病毒性心肌炎和DCM发病的免疫损伤机制时收集的临床病例中也未发现明显的家族聚集性[2].近,作者收治2例近亲结婚父母所生同胞姐弟同患DCM患儿,现报道如下.

作者：邹丽萍；王玉梅；徐灵敏；王棣华刊期： 2003年第01期
神经干细胞移植治疗大鼠脊髓损伤

目的:探讨神经干细胞移植治疗脊髓损伤的新方法,为治疗脊髓功能障碍性疾病打下基础.方法:制作脊髓横断大鼠模型,造成大鼠下肢瘫痪,分别在损伤急性期和损伤3周后移植胎鼠脑组织神经干细胞,观察移植后的动物行为变化、脊髓神经电生理变化和脊髓组织形态学变化.结果:细胞移植后第8 d即可见瘫痪大鼠的后肢肌力开始恢复,2～3周后可出现爬行,4周后后肢活动活跃;对照组瘫痪的肢体无任何恢复.脊髓诱发电位部分出现,动作电位波幅较高;对照组未出现诱发电位,且动作电位波幅明显减低.脊髓移植区肉眼可见有增生的组织充填,镜下有大量新生的细胞,表现为神经元和神经胶质细胞阳性染色.结论:神经干细胞移植可使脊髓横断大鼠运动功能恢复,有望成为治疗脊髓损伤的有效手段.

作者：马希峰；杨波；任新民；唐艳花；赵建英；张正勇；宋来君；李惠翔；徐晓丽；何炜刊期： 2003年第01期
LIF对人胚神经干细胞增殖和分化的影响

目的:探讨LIF对人胚神经干细胞(NSCs)增殖和分化的影响.方法:从孕24周流产胎儿脑组织中分离NSCs,并分4组培养.对照组用基础培养液,第1,2,3实验组分别于基础培养液中加入20 μg/L EGF和B27,20 μg/L LIF和B27,20 μg/L LIF、20 μg/L EGF及B27.观察细胞生长情况并在不同时间进行细胞计数.诱导细胞分化后,显微镜下观察.结果:培养3 d细胞开始分裂并聚集成球,后逐渐增大,培养10 d,第1,2,3实验组和对照组神经球形成数分别为(21.5±7.8),(23.8±5.4),(25.2±6.3)和(24.8±6.9),各组间差异无统计学意义.分化实验显示含LIF培养的神经干细胞分化少.结论:在体外,LIF能够促进神经干细胞的增殖并抑制神经干细胞的分化.

作者：杜英；杨波；阮丽荣；赵新利；李红伟；宋来君；张清勇；韩志强；张志强刊期： 2003年第01期
下肢动脉血栓8例介入治疗体会

近年来,随着介入放射学的发展,经血管内导管灌注尿激酶治疗动脉内血栓取得了十分显著的效果,作者自1995至2001年治疗下肢动脉血栓8例,报道如下.

作者：任建庄；韩新巍刊期： 2003年第01期