蒋富强;张雪梅;马云保;耿长安;江志勇;陈纪军
目的:对黄褐毛忍冬不同采收时期(花蕾期、银花期、金花期)挥发油化学成分进行鉴定和分析.方法:采用GC-MS法测定黄褐毛忍冬不同采收时期挥发油的化学成分.结果:从这3个时期的黄褐毛忍冬挥发油中分别分离出29种,34种,28种挥发性成分,共确定出44种化合物,并用峰面积归一化法测量了各化学成分在挥发油中的相对百分含量.结论:首次报道在忍冬属植物挥发油中检测出邻甲苯异腈;不同时期的黄褐毛忍冬挥发油中醇类物质含量均较高,其次是酯类、醛类等物质;L-芳樟醇,苯乙醛,邻甲苯异腈,香叶醇,邻氨基苯甲酸甲酯等为不同采收时期的共有成分,但其含量大小存在明显差异.
作者:黄丽华;王道平;陈训 刊期: 2011年第16期
目的:对比研究淫羊藿苷( icariin,I)与染料木黄酮(genistein,G)对体外培养大鼠成骨细胞(rat calvarial osteoblasts,ROB)增殖与分化成熟的影响及其药理活性的强弱.方法:取新生SD大鼠颅骨,多次酶消化法获得成骨细胞,培养子含10% FBS的MEM培养液中,3d后首次换液,铺满90%皿底后传代培养;I与G的作用终浓度为1×10-5 mol·L-1,增殖分析采用96孔板,MTT法分析;分化成熟分析采用24孔板,于成骨性诱导培养第3,6,9,12天分别测碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性、钙盐沉积量、骨钙素,第12天进行ALP组织化学染色、茜素红染色和钙化结节计数;于成骨性诱导培养0,6,12,24,48,72 h提取总RNA,Real-time RT-PCR法检测Runx-2,bFGF,IGF-I,Osterix( OSX)等成骨性相关因子的表达情况.结果:终浓度为1×10-5 mol·L-1的I与G均不促进ROB的增殖,均能显著提高细胞ALP活性、增加钙含量、促进骨钙素分泌,并增加钙化结节数量;同时上调Runx-2,bFGF,IGF-I和Osterix等成骨性相关因子的表达量;在成骨细胞水平上I促进ROB矿化成熟的药理学活性明显强于G的活性.结论:1×10-5 mol·L-1的I与G均能促进ROB矿化成熟,均有抗骨质疏松的作用,但在成骨细胞水平上I促进ROB矿化成熟的药理学活性显著强于G.
作者:明磊国;陈克明;葛宝丰;马慧萍;周建 刊期: 2011年第16期
目的:研究炮制对黄精挥发性成分的影响.方法:采用水蒸气蒸馏-气质联用法(SD-GC-MS)和吹扫捕集-热脱附气质联用法(P&T-TD-CC-MS)分别对黄精炮制前后的挥发性成分进行分析.结果:SD-GC-MS鉴定出黄精挥发性成分51种,P&T-TD-GC-MS鉴定出11种化合物.炮制后黄精挥发性成分在含量和组成上均明显降低.结论:本研究从黄精炮制前后挥发性成分变化的角度,为进一步探讨黄精炮制的减毒机制提供了科学依据.
作者:王进;岳永德;汤锋;陶吴群 刊期: 2011年第16期
为了探究缺血性脑血管病的病理机制、药物筛选、药效评价、治疗方案优化,目前建立了许多模拟人类脑缺血疾病的实验动物模型.如何根据中药自身的特点选择合适的动物模型,进行候选药物筛选和药效评价,并将脑缺血动物模型的研究与临床疾病研究紧密地结合起来,保证动物模型的稳定性和可靠性,以对临床前中药药理研究与药效评价的有效药物,在临床上获得更好的疗效,提供方法学保证和有效的中药创新药物筛选与研发评价的研究工具.
作者:孙蓉;张亚囡 刊期: 2011年第16期
目的:对源于蟾蜍的新资源蟾衣进行化学成分研究,并对蟾衣提取物及分离得到的主要化合物进行抗肿瘤活性评价.方法:蟾衣粗粉采用95%乙醇回流提取,提取物采用正相硅胶、反相硅胶和葡聚糖凝胶Sephadex LH-20柱色谱分离,结合结晶法对化合物进行纯化,通过波谱分析鉴定化合物的结构;采用MTT法对95%乙醇提取物及分离得到的主要化合物进行体外抗肿瘤活性评价.结果:从蟾衣95%乙醇提取物中分离鉴定了8个化合物,分别为棕榈酸胆甾烯酯(1),胆甾醇(2),5α,8α-epidioxycholesta-6-en-3β-ol(3),胆甾-5-烯-3β,7β-二醇(4),胆甾-7-烯-3β,5α,6β-三醇(5),3-十八烷氧基-1,2-丙二醇(6),△4,5(E),△9,10(Z)-鞘胺醇-正十五碳酸酰胺(7)和蟾蜍噻咛(8);抗肿瘤活性筛选表明,蟾衣95%乙醇提取物和分离得到的主要化合物对试验的细胞株均无抑制作用.结论:化合物1~8均为首次从蟾衣中分离得到,其中化合物3,5~7为首次从中华大蟾蜍和蟾蜍属中分离得到.
作者:高慧敏;吴喜燕;李宗云;游云;张毅;王智民 刊期: 2011年第16期
目的:研究传统中药象皮和拟替代品猪皮、鱼鳞的胶原结构和抗氧化活性.方法:通过正交试验设计法,优选了象皮胶原的佳提取条件,与拟替代品胶原对其结构和含量进行比较,采用水杨酸法测定其各自清除羟基自由基能力.结果:首次从象皮中提取了结构完整且质量较多的胶原,与拟替代品的胶原结构类型相似,其象皮胶原、猪皮胶原、鱼鳞胶原清除自由基能力衡量值IC5o分别为0.51,0.60,0.42g·L-1.结论:通过比较和鉴定,象皮胶原蛋白为Ⅰ型胶原,抗氧化能力较强,明确了象皮的有效成分,为今后进一步探讨象皮替代品研究提供了重要参考依据.
作者:李春楠;孙佳明;张辉 刊期: 2011年第16期
目的:建立同时测定高挂草中atranol,茶渍酸,苔色酸乙酯,苔色酸甲酯含量的反相高效液相色谱法.方法:Kromasil C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);以1%冰醋酸为流动相A,乙腈为流动相B,梯度洗脱;检测波长为280 nm;流速1.0 mL·min-1;柱温25℃.结果:Atranol,茶渍酸,苔色酸乙酯,苔色酸甲酯在测定范围内均表现出良好的线性;平均回收率分别为101.9%,96.3%,95.3%,102.9%,RSD分别为2.3%,1.9%,1.9%,1.9%.结论:本方法操作简单、快捷、重现性好、准确率高,可用于同时测定裕固族草药高挂草中atranol,茶渍酸,苔色酸乙酯,苔色酸甲酯的含量.
作者:戚欢阳;陈娟;师彦平 刊期: 2011年第16期
目的:考察不同炼制温度和用量的羊脂油制淫羊藿对肾阳虚大鼠的影响.方法:采用皮下注射皮质酮(CORT)建立肾阳虚大鼠模型,以淫羊藿总黄酮为阳性对照,以症状体征、动物抓力、组织病理学检查、血清睾酮含量等为评价指标,3种制淫羊藿(羊脂油炼制温度与加入量分别为250℃,30%;120℃,30%;120℃,20%)和生淫羊藿经水提取灌胃给药,考察不同样品对肾阳虚大鼠的药理作用.结果:3个炮制品均能不同程度地增强生品的温肾壮阳作用,其中以120℃,30%的制淫羊藿增强效果佳.其作用机制可能与改善肾阳虚证大鼠下丘脑-垂体-肾上腺-胸腺(HPAT)轴病理改变和功能抑制状态有关.结论:辅料羊脂油的炼制温度影响辅料质量,进而影响饮片药效.本试验结果为进一步阐明制淫羊藿炮制原理及建立炮制辅料的国家标准提供实验数据.
作者:李寅超;黄兰岚;赵宜红;王彩芳;李娆娆;谷艳;刘学武;黄璐琦;王随华 刊期: 2011年第16期
目的:揭示开花对铁皮石斛多糖质量分数及单糖组成的影响,为优质铁皮石斛培育提供依据.方法:采集铁皮石斛开花前样品、开花结束时经人工摘除花蕾与未摘花蕾的样品,采用苯酚-硫酸法测定铁皮石斛中多糖质量分数,柱前衍生HPLC检测多糖中的单糖组分.结果:摘花蕾样品与未摘花蕾样品比较,总多糖及多糖中的甘露糖、半乳糖醛酸、葡萄糖绝对量分别高30.35%,26.44%,20.78%,57.80%,木糖,阿拉伯糖分别低28.33%,24.37%,半乳糖差异不显著.结论:开花显著消耗铁皮石斛药材中的多糖及多糖中甘露糖、半乳糖醛酸、葡萄糖的量,而开花过程可能有利于木糖、阿拉伯糖积累.
作者:金小丽;苑鹤;斯金平;张至诚;俞巧仙;汪玲娟 刊期: 2011年第16期
目的:研究不同程度PEG胁迫对黄芩悬浮细胞中黄芩苷、黄芩素的积累及相关基因表达的影响.方法:采用HPLC法检测黄芩悬浮细胞中黄芩苷、黄芩素的含量,用酶标仪检测细胞内游离脯氨酸含量,并用半定量RT-PCR的方法对相关基因的表达进行分析.结果与结论:黄芩悬浮细胞内游离脯氨酸含量随PEG胁迫浓度升高而升高,10% PEG胁迫黄芩悬浮细胞可以模拟干旱条件,提高悬浮细胞PAL基因表达量且会促进黄芩素的积累.20% PEG胁迫提高了UBGAT基因的表达量,但同时APX酶活性的提高抑制了黄芩素参与清除活性氧,导致了黄芩素向黄芩苷的转化.
作者:杨兆春;袁媛;陈敏;帅凌飞;肖倩;林淑芳 刊期: 2011年第16期
目的:利用反相高效液相色谱法测定大鼠血浆中羟基红花黄色素A的浓度,分别比较红花提取物及复方脑得生片中羟基红花黄色素A的药代动力学参数差别,探讨复方配伍对羟基红花黄色素A在大鼠体内药动学的影响.方法:以相同剂量的羟基红花黄色素A(50 mg·kg-1)对大鼠分别灌胃给予红花药材提取物和复方脑得生片,采用反相高效液相色谱法测定不同时间点血浆中羟基红花黄色素A的含量,利用3P97软件处理数据,进行药动学模型拟合并计算二者的药代动力学参数.结果:羟基红花黄色素A血浆浓度在0.03~2.56 mg·L-线性关系良好,血浆中低检测限和低定量限分别为10,30μg·L-1.高、中、低浓度样品平均回收率分别为(99.3±1.4)%,(92.8±1.8)%,(98.4±2.0)%.大鼠灌胃给予红花提取物和脑得生片后的药-时曲线均符合二房室模型,主要药动学参数AUC0-t,AUC0-∞,Cmax和tmax在红花提取物和脑得生片各组间均有显著性统计学意义.结论:本实验建立的反相高效液相色谱测定法专属、准确、灵敏,适用于羟基红花黄色素A在大鼠体内的药动学研究.脑得生片中其他配伍药材可以促进羟基红花黄色素A的吸收,提高羟基红花黄色素A的生物利用度.
作者:汤建明;欧阳臻;冯旭;方静;曹旭 刊期: 2011年第16期
目的:研究菊科药用植物三角叶凤毛菊Saussurea deltoidea的化学成分.方法:利用正/反相硅胶柱层析色谱、凝胶分子筛色谱、HPLC等色谱方法进行化合物的分离,利用波谱学方法鉴定化合物结构.结果:从三角叶凤毛菊中分离出10个化合物,其结构分别鉴定为(3R,6R,7E)-3-hydroxy-4,7 -megastigmadien-9 -one(1),(3S,5R,6S,7E)-5,6-epoxy-3-hydroxy-7-megastigmen-9-one (2),3 -h ydroxy-β-damascone(3),S-(+)-dehydrovomifoliol(4),megastigman-5 -ene-3β,9R-diol(5),coniferaldehyde(6),β-hydroxypropiovanillone (7),3-hydroxy-1- (4-hydroxy-3,5-dimethoxyphenyl)-1-propanone (8),dihydrosyringenin(9),4-[(1S)-3-hydroxy-1-methoxypropyl]-2,6-dimenthoxyphenol( 10).结论:化合物1~10均是首次从该植物中分离得到.
作者:黄火强;闫美娜;朴香兰 刊期: 2011年第16期
目的:研究了HPLC测定五味子提取物中de-hydroxy arisanlactone D,25 -hydroxy schindilactone,schindilachone A,lancifodilactone D的含量的方法.方法:Waters Symmetry色谱柱(4.6mm×250 mm,5 μm),流动相为乙腈-水(33∶67),柱温37℃,流速1 mL· min-1,检测波长246 nm.结果:De-hydroxy arisarlactone D,25-hydroxy schindilactone,schindilachoneA和lancifodilactoneD的线性范围和(μg)加样回收率分别为0.075~1.800( 98.57%),0.098~0.980(96.44%),0.095~0.950(97.96%),0.053 ~0.530(97.27%).结论:该方法分离良好、精密准确、能用于五味子提取物中4种类三萜内酯类物质的定量分析.
作者:韩晓萍;李德坤;周大铮;林瑞超;刘丽芳;叶正良 刊期: 2011年第16期
目的:探讨线粒体途径在葛根素(PUE)诱导肺动脉平滑肌细胞凋亡中的作用.方法:葛根素高、中、低剂量(1.5×104,1.5×10-4,1.5×10-5 mol·L-1)干预体外培养的大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMC),观察线粒体膜电位的变化,Western Blot检测凋亡相关基因Caspase-9,Bax和Bcl-2的蛋白表达.结果:葛根素加药组与正常组相比线粒体膜电位明显降低,葛根素可使Caspase-9的蛋白表达增强,Bcl-2蛋白表达下降而Bax蛋白表达升高,葛根素对PASMC的诱导作用还具有浓度依赖性.结论:葛根素可通过线粒体途径诱导PASMC凋亡.
作者:张晓丹;赵凤华;张秀梅;盛洁静 刊期: 2011年第16期
目的:建立大鼠血浆中龙脑浓度的GC-FID测定方法,探讨新型醒脑静静脉注射后龙脑在大鼠体内的药代动力学过程.方法:大鼠以10.00 mg· kg-1(以艾片量计)剂量尾静脉注射新型醒脑静后,0.5,1,3,5,8,12,20,30,45 min眼底采血,分离血浆,十八烷为内标,乙酸乙酯萃取,GC-FID测定血浆中龙脑浓度,以Kinetica软件拟合药动学参数.结果:龙脑血药浓度在1.67~16.67 mg·L-1线性关系良好,r =0.999 6,测得低、中、高浓度萃取回收率分别为(92.81±1.11)%,(85.38±0.86)%,(84.58±0.58)%;日内、日间精密度RSD均小于3.0%.静脉注射新型醒脑静后,龙脑在大鼠体内药动学符合二室开放模型,主要药动学参数为t1/2α=(1.18±0.20) min,t1/2β=(22.27±6.85) min,Cmax(Calc)=(18.76±2.10) mg·L-1,MRT=(23.84±7.67) min-1,AUC =(100.00±15.85) mg·min·L-1.结论:建立的GC-FID适用于龙脑血浆药物含量测定及药代动力学研究,新型醒脑静中龙脑在体内分布迅速,代谢较快.
作者:陆洋;杜守颖;陈晓兰;李鹏跃;翟永松;吴清;李冬雪 刊期: 2011年第16期
目的:观察复健片对脑梗死模型大鼠运动功能以及脑组织酪氨酸受体激酶B(trk-B)和勿动蛋白A(Nogo-A)表达的影响,探讨其促进神经再生作用机制.方法:90只Wistar大鼠随机分为药物组、模型组、假手术组,每组30只.用电凝法制备大脑中动脉闭塞大鼠模型,造模成功后6h药物组灌胃给予复健片水溶液9g·kg-1,其余2组分别灌胃给予同等量生理盐水,每天1次,共2周.用前肢放置检测法评定运动功能;分别用免疫组化法和原位杂交法观察脑组织trk-B和Nogo-A的表达,并测定染色平均灰度.结果:药物组大鼠运动功能评分( 86.34±5.48)明显高于模型组(62.26±14.87),P<0.01;trk-B表达药物组(95.98±3.55)较模型组明显增强(110.10±6.82),P<0.01;而Nogo-A药物组(131.09±8.99)表达较模型组明显减弱(121.36±11.06),P<0.01.结论:复健片可显著增强trk-B并抑制Nogo-A的表达,从而改善神经再生微环境,促进脑梗死大鼠运动功能康复.
作者:周永红;胡怀强;张玉杰;王新陆 刊期: 2011年第16期
目的:探讨不同配伍比例交泰丸对2型糖尿病(T2DM)大鼠的治疗作用.方法:采用尾静脉注射小剂量链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)加高脂高热卡喂养的方法建立大鼠T2DM模型,将大鼠随机分为模型组、交泰丸1组(黄连-肉桂2∶1)、交泰丸2组(黄连-肉桂4∶1)、交泰丸3组(黄连-肉桂10∶1)、二甲双胍组,各治疗组分别给与相应药物灌胃治疗,另设正常对照组.干预治疗8周后观察各组大鼠体重、口服葡萄糖耐量试验(OGTT)、血脂(TC,TG,HDL-C,LDL-C)、血浆肝酶活性(ALT,AST,AKP,γ-GT)、血清脂联素、游离脂肪酸(FFA)和肝组织病理学的差异.结果:与正常组比较,模型组大鼠体重增加,空腹血糖(FPG)、餐后1 h(PG-1 h)和餐后2 h(PG-2 h)升高,TC,TG,LDL-C,FFA,血浆肝酶活性均升高,HDL-C和脂联素水平均下降(P<0.01),肝组织脂肪变性明显;与模型组比较,各治疗组OGTT改善,TC,TG,LDL-C,FFA、血浆肝酶活性均下降,HDL-C和脂联素水平均升高(P<0.05,P<0.01),肝组织脂肪变性减轻;与二甲双胍组比较,交泰丸1组HDL-C明显升高(P<0.05),AKP,γ-GT均明显降低(P<0.05,P<0.01),交泰丸2组γ-GT降低(P<0.05),交泰丸3组AST,AKP,γ-GT降低(P<0.05,P<0.01);与交泰丸1组比较,交泰丸2组HDL-C降低,AKP升高,交泰丸3组HDL-C降低(P<0.05).结论:不同配伍比例交泰丸对大鼠T2DM都有一定治疗作用,而以交泰丸1组疗效佳.
作者:汪健红;陆付耳;董慧;龚艳琳;徐丽君;邹欣;陈广 刊期: 2011年第16期
目的:探讨通过生物信息学手段获得的源于阿胶中的重要蛋白组分驴血清白蛋白的生物活性肽HP-6对造血系统的作用效果.方法:分离培养入骨髓有核细胞(human bone marrow nucleated cells,hBMNCs)及小鼠骨髓基质细胞(murine bone marrow stromal cells,mBMSCs),通过与不同浓度肽HP-6(0.000 15,0.001 5,0.015,0.15,1.5 μmol·L-1)共培养一定时间考察肽HP-6对骨髓造血相关细胞的促增殖能力,并通过电镜观察作用后的细胞形态;建立失血性贫血与环磷酰胺致贫血2种贫血动物模型,随机分组并灌胃不同剂量(1,0.1,0.01 mg· kg-1)肽HP-6,同时设立相应的对照组灌胃等体积PBS,7d后检测贫血动物外周血象,对环磷酰胺致贫血小鼠加测骨髓细胞(bone marrow cells,BMCs)数.结果:肽HP-6可刺激人骨髓有核细胞和小鼠骨髓基质细胞增殖且具有浓度相关性,0.15 μmol·L-1肽HP-6使2种细胞均达到大增殖率,分别为152.11%,63.52%,之后呈降低趋势;电镜结果显示与肽HP-6作用后的细胞微观形态结构正常;灌胃1 mg·kg-1肽HP-6对提高外周血血小板数量及保护环磷酰胺损伤的小鼠骨髓具有一定的功效;灌胃0.1 mg· kg-1肽HP-6对提高外周血白细胞及红细胞数量有较好的效果,还可对化疗药物作用后小鼠的外周血起到一定的保护作用;灌胃0.01 mg· kg-1肽HP-6对提高外周血血小板数量具有极佳的效果,相对增殖率可达77.65%.结论:肽HP-6可刺激造血系统相关细胞增殖,对小鼠造血功能与抵抗化疗药物损伤有一定的增强作用.
作者:李昊;严晟旻;王浙峰;沈晓妙;饶平凡 刊期: 2011年第16期
目的:观察雷公藤甲素对大鼠肾脏的急性毒性作用,并探讨其发生机制.方法:将雄性SD大鼠随机分为1个对照组和2个实验组,对2个实验组大鼠给予腹腔注射剂量分别为1,2 mg· kg-1的雷公藤甲素,对照组大鼠则给予相当量的空白对照液.注射后48 h将所有大鼠处死,采集心脏血液并取出双侧肾脏,检测血清尿素氮(BUN)与肌酐(Cr)含量,观察HE染色切片上肾组织形态学改变情况;应用原位末端标记法(TUNEL)检测肾组织细胞凋亡情况;测定肾组织内SOD,GSH-Px活性以及MDA含量.结果:一次性大剂量注射雷公藤甲素可在短时间内对大鼠肾脏造成严重损伤,剂量越大越显著;经雷公藤甲素处理后,肾组织中SOD与GSH-Px活性明显降低,而MDA含量则明显升高,且均与肾脏的损伤程度密切相关.结论:肾脏是雷公藤甲素急性毒性作用重要的靶器官,氧化应激在雷公藤甲素对肾脏造成的毒性损害中发挥了重要作用.
作者:杨帆;卓荦;李上勋;孙婷怡;白英杰;刘良 刊期: 2011年第16期
目的:建立微渗析实验模型,并对葛根素在麻醉家兔眼内的药物动力学进行研究.方法:通过手术将微渗析探针植入麻醉家兔的眼前房室内,待灌流平衡之后眼部给予1%葛根素滴眼液100 μL,于不同时间收集渗析液,HPLC测定;流动相为甲醇-0.1%柠檬酸水溶液( 30:70),流速1.0mL·min-1,检测波长249 nm.结果:给予自制葛根素滴眼液后,其能够迅速吸收进入眼前房室中,在1h达到峰浓度,Cmax为(2.52±0.31) mg·L-1,然后渐渐降低,但在消除阶段3.5h左右出现另外1个较低的峰浓度.可能是由于葛根素抑制了房水的生成,导致药物浓度的升高.药-时曲线下面积( AUC0-t)为(5.04±0.21)mg·h·L-1,半衰期( t1/2)为(0.38±0.13)h.结论:采用微渗析技术,能够用于测定葛根素眼部的药物动力学,并且为葛根素滴眼液的临床应用提供有参考价值的药动学参数.
作者:姚晨;周绣棣;曲涛;位冬昱;慕宏杰;梁荣才;王爱萍;孙考祥 刊期: 2011年第16期