学术投稿

产ESBLs肺炎克雷伯菌中新的氨基糖苷类修饰酶基因型

徐卫东;徐红星;糜祖煌;陈昭华;吴元健

关键词:肺炎克雷伯菌, 氨基糖苷类修饰酶, 基因
摘要:目的:了解一株产ESBLs肺炎克雷伯菌的耐药基因存在情况.方法:采用聚合酶链反应(PCR)检测aac(3)-Ⅰ,aac(3)-Ⅱ, aac(6′)-Ⅱ,ant(3″)-Ⅰ,ant(2″)-Ⅰ,aac(6′)-Ⅰb,TEM,SHV,LEN,OKP,CTX-M-1,CTX-M-2, CTX-M-9,GES,PER,VEB,OXA-10,OXA-1,DHA,ACT-1,intI1基因,部分产物进行测序.结果:TEM、aac(6′)-Ⅰb、intI1阳性,其他阴性.aac(6′)-Ⅰb经测序并与已在美国国立生物信息中心[NCBI]登录的aac(6′)-Ⅰb基因家族比对,发现与先前登录的均不相同(包括2006年初美国学者发现的新氨基糖苷类修饰酶aac(6′)-Ⅰb-Cr型).结论:从该株产ESBLs肺炎克雷伯菌中发现的aac(6′)-Ⅰb氨基糖苷类修饰酶为新的基因型.以aac(6′)-Ⅰb-Suzhou型命名,已登录于美国NCBI(登录号:EF375621).
江苏大学学报(医学版)杂志相关文献
  • 血清精子蛋白17检测的双抗夹心ELISA法及在卵巢癌诊断中的应用

    目的:建立双抗夹心ELISA法检测血清中精子蛋白17(sperm protein 17, Sp17)水平.方法:以重组Sp17蛋白为免疫原制备兔抗Sp17抗体,建立Sp17双抗夹心ELISA检测方法,鉴定其小检出限、精确度、回收率,并检测42例正常人及28例卵巢癌患者血清Sp17水平.结果:该双抗夹心ELISA法敏感度高、特异性强、重复性好.卵巢癌患者与正常人血清Sp17含量有显著差别(P<0.01),正常人血清中存在少量Sp17蛋白,而卵巢癌患者血清中Sp17含量明显升高者占39.3%.结论:卵巢癌患者血清中Sp17含量明显升高.测定血清Sp17水平的ELISA方法学确立为阐明Sp17在卵巢癌患者中的免疫生物学意义提供了实验手段.

    作者:缪家文;李芳秋;杨爱龙 刊期: 2007年第05期

  • C反应蛋白水平与脑梗死病情的关系

    近年的研究证实,缺血性脑血管疾病的发生、发展与炎症密切相关.一些感染因素可能是缺血性脑血管疾病的危险因子.血清C 反应蛋白(CRP) 是炎性反应的生物学标记物之一.

    作者:许峂嵘;刘文明;孙云 刊期: 2007年第05期

  • 人骨髓间质干细胞ING4基因的克隆及其慢病毒表达载体构建

    目的:克隆人骨髓间质干细胞ING4(inhibitor of growth famility,member4)基因,构建其慢病毒表达载体PNL-ING4.方法:提取人骨髓间质干细胞(hMSCs)总RNA,经RT-PCR扩增出ING4cDNA,克隆至PMD19-T载体,选择阳性克隆进行酶切鉴定和测序,构建慢病毒表达载体PNL-ING4,用双酶切、基因测序进行鉴定.结果:RT-PCR产物为750 bp的条带,双酶切和基因测序正确.结论:成功从hMSCs克隆了ING4基因并成功构建其慢病毒表达载体PNL-ING4,为进一步研究ING4基因的作用与抗肿瘤机制奠定了基础.

    作者:张蕾蕾;许文荣;乔纯;钱晖;朱伟;李继刚;周洪兴;司煜安;周宗海;阴晴 刊期: 2007年第05期

  • Hypno PTT监测仪在诊断阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征中的应用

    目的:探讨脉搏传导时间(pulse transit time,PTT)技术在诊断阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(obstructive sleep apnea hypopnea syndrome,OSAHS)中的应用和价值. 方法:29例鼾症患者行PTT监测,判断呼吸暂停及低通气事件,并区分阻塞性和中枢性呼吸事件,对所记录数据进行统计学分析. 结果:29例PTT监测患者中,诊断为正常1例(3.4%),诊断为轻度OSAHS者3例(10.4%),诊断为中度OSAHS者10例(34.5%),诊断为重度OSAHS者14例(48.3%),诊断为中枢性OSAHS者1例(3.4%).PTT监测所得长阻塞呼吸暂停时间(85.00±51.80 s)、长中枢呼吸暂停时间(52.03±20.74 s)和低血氧饱和度(82%±16%)在男女之间差异有统计学意义(P<0.05).结论:PTT监测仪可用于OSAHS的临床诊断,其操作简便,易被患者接受,费用经济,临床应用价值较大.

    作者:叶海波;冯云海 刊期: 2007年第05期

  • 产ESBLs肺炎克雷伯菌中新的氨基糖苷类修饰酶基因型

    目的:了解一株产ESBLs肺炎克雷伯菌的耐药基因存在情况.方法:采用聚合酶链反应(PCR)检测aac(3)-Ⅰ,aac(3)-Ⅱ, aac(6′)-Ⅱ,ant(3″)-Ⅰ,ant(2″)-Ⅰ,aac(6′)-Ⅰb,TEM,SHV,LEN,OKP,CTX-M-1,CTX-M-2, CTX-M-9,GES,PER,VEB,OXA-10,OXA-1,DHA,ACT-1,intI1基因,部分产物进行测序.结果:TEM、aac(6′)-Ⅰb、intI1阳性,其他阴性.aac(6′)-Ⅰb经测序并与已在美国国立生物信息中心[NCBI]登录的aac(6′)-Ⅰb基因家族比对,发现与先前登录的均不相同(包括2006年初美国学者发现的新氨基糖苷类修饰酶aac(6′)-Ⅰb-Cr型).结论:从该株产ESBLs肺炎克雷伯菌中发现的aac(6′)-Ⅰb氨基糖苷类修饰酶为新的基因型.以aac(6′)-Ⅰb-Suzhou型命名,已登录于美国NCBI(登录号:EF375621).

    作者:徐卫东;徐红星;糜祖煌;陈昭华;吴元健 刊期: 2007年第05期

  • 白细胞介素1受体拮抗剂诱导急性胰腺炎大鼠胰腺腺泡细胞凋亡机制的研究

    目的:从胰腺腺泡细胞凋亡的角度探讨白细胞介素1受体拮抗剂(IL-1Ra)干预急性胰腺炎的可能机制.方法:72只SD大鼠,随机分为胰腺炎组、IL-1Ra干预组、对照组,每组24只,各组造模后在1,2,6和12 h 4个时间点分别检测6只大鼠.干预组分别于制模前12,6,2 h及制模时各注射IL-1Ra 1 mg/100 mg体质量,胰腺炎组仅同时注射等量生理盐水.应用细胞凋亡原位标记(TUNEL) 染色、免疫组化技术等检测胰腺细胞凋亡及凋亡调控基因Bax,Bcl-2,Fas,FasL的蛋白表达.结果:干预组1,2,6和12 h胰腺细胞凋亡指数显著高于胰腺炎组相应时间点(均P<0.01);对照组见较弱的Bax、Fas的表达,干预组各时间点胰腺细胞Bax 、Fas染色阳性率明显高于胰腺炎组(均P<0.01) ;对照组未见Bcl-2 表达,干预组各时间点胰腺细胞Bcl-2染色阳性率与胰腺炎组相比无显著差异性(均P>0.05);胰腺炎组、干预组中均没有见到胰腺腺泡细胞中FasL 表达,但是在间质中均可见浸润的炎性细胞FasL免疫组化染色阳性.结论:IL-1Ra干预急性胰腺炎的机制可能不仅限于对炎症反应的抑制,它可能是通过上调凋亡调控基因Bax和Fas/ FasL系统的表达,诱导胰腺腺泡细胞的凋亡从而减轻胰腺炎的严重程度.

    作者:毛正发;张建新;瞿建国;王旭青;范昕;王崇高 刊期: 2007年第05期

  • 传染性单核细胞增多症患儿T细胞亚群变化及临床意义

    目的:通过检测传染性单核细胞增多症(IM)患儿外周血T细胞亚群,探讨其免疫功能与疾病的关系.早期了解疾病的发生并加以干预以减少不良的预后.方法:采用流式细胞仪对观察组18例IM患儿进行T细胞亚群测定,同时随机抽取20例健康儿童作为对照组.另外对观察组18例患儿中的10例进行治疗2周后T细胞亚群的测定.结果:观察组与对照组CD4,CD4/CD8均明显下降(P<0.001),CD8明显升高(P<0.001).观察组的10例治疗2周后T细胞亚群的测定值与入院时比较有显著差异(P<0.001).结论:EB病毒感染引起机体免疫功能改变是IM发病的关键,早期诊断治疗、长期随访都有积极的意义.

    作者:曹晓军;倪慧萍 刊期: 2007年第05期

  • Livin在乳腺癌中的表达及其与Caspase-3,Ki67表达的关系

    目的:探讨Livin在乳腺癌中的表达和临床意义及其与Caspase-3蛋白表达和细胞增殖的相互关系.方法:采用免疫组化S-P法检测Livin在正常乳腺组织、乳腺增生性病变、乳腺非浸润性癌和乳腺浸润性癌组织中Livin蛋白和Caspase-3蛋白表达以及Ki67在乳腺癌组织中的表达.结果:Livin蛋白在正常乳腺组织、乳腺增生性病变、乳腺非浸润性癌和乳腺浸润性癌组织中阳性率为7.1%,29.8%,65.0%,73.1%;Caspase-3蛋白分别为92.9%,71.4%,45.0%,34.6%,两者差异均有统计学意义(P<0.01).Livin表达与临床分期、淋巴结转移和年龄有关(P<0.05),与肿瘤大小和组织学分级无关.Livin蛋白与Caspase-3蛋白在乳腺浸润性癌表达呈负相关(P<0.01).在乳腺非浸润性癌中两者相当,无相关性(P>0.05).Livin蛋白表达阳性的乳腺癌Ki67的标记细胞增殖指数(47.32±22.34)明显高于Livin蛋白表达阴性的乳腺癌细胞Ki67的标记细胞增殖指数(18.01±23.34)( P<0.01).结论:Livin蛋白在乳腺癌中表达上调,可作为判断乳腺癌预后新的分子标记物,成为乳腺癌诱导凋亡治疗的新靶点.Livin不仅参与细胞凋亡的调控,还促进了细胞增殖及肿瘤发生、发展.

    作者:陈建华;范钦和;丛玲华;施洋;姚成虎 刊期: 2007年第05期

  • 乳腺癌组织中蛋白激酶C-βΙ与周期蛋白D1的表达

    目的:观察蛋白激酶C(protein kinase C, PKC)-βΙ与周期蛋白D1(cyclin D1)在乳腺癌组织中的表达状况,探讨癌细胞信息传递的分子生物学机制.方法:应用半定量RT-PCR检测31例乳腺癌组织与12例癌旁正常乳腺组织中PKC-βΙ mRNA表达;应用Western blot和免疫组化法检测以上组织中PKC-βΙ蛋白与cyclin D1表达. 结果:乳腺癌组织中PKC-βΙ mRNA与蛋白表达均高于癌旁正常乳腺组织(P<0.01);癌组织cyclin D1表达阳性率高于癌旁正常乳腺组织(P<0.05). 结论:乳腺癌组织中存在PKC-βΙ同工酶过度表达,它可能介导乳腺癌细胞分化的信号转导过程.cyclin D1与细胞恶性增生密切相关.

    作者:李建萍;左克强 刊期: 2007年第05期

  • 茅苍术挥发油超临界萃取工艺及气质联用分析

    目的:研究茅苍术挥发油超临界CO2萃取的佳工艺条件和挥发油的化学成分.方法:以挥发油得率为指标,采用正交试验优选超临界CO2萃取茅苍术挥发油的佳工艺;气质联用法(GC-MS)分析挥发油化学成分.结果:超临界CO2萃取茅苍术挥发油的佳工艺为:萃取时间3.5 h,萃取温度45℃,萃取压力30 MPa,流量3 L/min,挥发油得率为13.80%.GC-MS分析结果显示84个色谱峰,鉴定出67种化学成分,占总馏出峰面积的96.07%.含量高的为苍术酮(24.92%),其次为苍术素(22.26%),β-桉叶醇(10.67%)等.结论:超临界CO2萃取茅苍术挥发油具有得率高,萃取时间短,温度低,无溶剂残留等优点.

    作者:杨凌;欧阳臻;宿树兰;韩丽;冯煦 刊期: 2007年第05期

  • 胰岛素抵抗与前列腺癌的相关性研究

    目的:探讨胰岛素抵抗与前列腺癌发病的关系. 方法:随机选择健康男性50名、良性前列腺增生患者50名及前列腺癌患者50名.采用己糖激酶法测定空腹葡萄糖(Fasting blood glucose,FPG),放免法测定空腹胰岛素(Fasting serum insulin,FINS)水平.并运用HOMA模型中的胰岛素抵抗计算公式计算胰岛素抵抗指数(insulin resistance index, IRI).结果:FINS前列腺癌组为(18.098±9.237)μIU/ml,良性前列腺增生组为(11.767±6.291)μIU/ml,健康对照组为(11.275±3.001)μIU/ml.胰岛素抵抗指数前列腺癌组为1.296±0.72,良性前列腺增生组为0.935±0.383,健康对照组为0.930±0.391.前列腺癌组患者与良性前列腺增生及健康对照组FINS、IRI间差异有统计学意义.前列腺癌组患者FINS值、IRI值明显高于正常人,差异有统计学意义(P<0.01).良性前列腺增生组与健康对照组FINS、IRI间差异无统计学意义(P>0.05).多因素Logistic回归分析发现IRI与前列腺癌的发病有关,其OR值为2.784.结论:胰岛素抵抗与前列腺癌发病相关.

    作者:徐强;姚茂银 刊期: 2007年第05期

  • 尿激酶对肺纤维化干预作用及对MMP-9和TIMP-1的影响

    目的:探讨尿激酶型纤溶酶原激活剂(uPA)对肺纤维化的干预作用和对MMP-9/TIMP-1的影响.方法:SD雄性大鼠45只,随机分成3组:干预组(博莱霉素+尿激酶)、模型组(博莱霉素+生理盐水)和对照组.所有大鼠第28天处死.经HE、Masson胶原染色评价肺组织肺泡炎和肺纤维化程度.酶联免疫吸附法( ELISA)检测肺泡灌洗液中MMP-9、TIMP-1含量.结果:(1)肺泡炎程度评价:模型组为(1.7±0.6)分,干预组为(0.9±0.7)分,对照组为(0.2±0.4)分,模型组与干预组、对照组比较,差异有统计学意义(P<0.01).(2)肺纤维化程度评价:模型组为(2.0±0.8)分,干预组为(1.1±0.7)分,组间差异有统计学意义(P<0.01).(3)TIMP-1含量:模型组(1 240.8±90.3) pg/ml,对照组(1 078.3±31.6)pg/ml,干预组 (1 163.6±69.6) pg/ml,模型组与对照组比较差异有统计学意义(P<0.01);模型组与干预组比较,差异有统计学意义(P<0.05).结论:尿激酶能减轻博来霉素诱导的大鼠肺纤维化,可能是通过抑制TIMP-1途径起作用.

    作者:万兵;郑金旭;严玉兰;黄新建;吴建农 刊期: 2007年第05期

  • 胆管癌预后因素分析

    目的:探讨影响胆管癌预后的危险因素.方法:对62例胆管癌手术患者的临床资料进行回顾性研究.用Cox回归比例风险模型分析影响预后的危险因素.对每一指标行单因素分析,筛选出P<0.1的自变量方可进入多因素分析.结果:单因素分析显示影响预后的可能因素有5个,即ALP、γ-GGT、肿瘤分期、肿瘤分化程度、切缘癌细胞浸润情况.多因素分析显示显著影响预后的危险因素有3个,按影响大小依次是肿瘤分期、肿瘤分化程度、切缘癌细胞浸润情况.结论:肿瘤分期早、分化程度高、获得切缘无癌细胞浸润的胆管癌患者预后好.加强早期诊断和获得根治性切除是改善胆管癌预后的关键.

    作者:黄海;刘胜利 刊期: 2007年第05期

  • 抗人树突状细胞单克隆抗体可变区基因克隆和序列分析

    目的:为了将抗树突状细胞(dendritic cells,DC)抗体应用于临床疾病治疗,计划克隆获得抗人DC单克隆抗体(McAb)的可变区序列,在此基础上进一步获得人源化的抗人DC抗体.方法:运用RT-PCR技术,从分泌抗人DC McAb的杂交瘤细胞株(H1E11)中,克隆出VH和VL基因片段,并对VH和VL进行了测序分析.所测得的重链和轻链在基因库中与相关的Ig的VH和VL基因序列进行经Blast同源性比较.结果:通过碱基和蛋白序列的比较确认为小鼠IgG的VH和VL基因.运用Dnasis软件对VH和VL基因进行阅读框分析和模拟翻译,并参照Kabat等人(1991)编写的Ig蛋白质编码序列图谱,根据其FRs和CDRs的序列特征进行Ig的家族分析,发现VH共有414 bp,编码138个氨基酸序列,属于小鼠IgG重链Ⅲ(A)家族;VL由396 bp编码,产生132氨基酸,属于轻链κV家族.结论:成功克隆抗人DC McAb重链和轻链的可变区.

    作者:吕连峥;蔺昕;邵启祥;沈关心;王胜军;许化溪;刘恭植 刊期: 2007年第05期

  • 蚕蛹多糖对小鼠免疫功能的影响

    目的:通过测定蚕蛹多糖对小鼠淋巴细胞增殖、巨噬细胞吞噬活力及溶血素生成的影响,研究蚕蛹多糖对小鼠免疫功能的影响.方法:采用免疫重量法计算脾脏和胸腺指数、巨噬细胞测定法及溶血素测定法、淋巴细胞转化实验、MTT法测定.结果:蚕蛹多糖能明显增强B淋巴细胞和T淋巴细胞的增殖,促进小鼠巨噬细胞的吞噬活力和溶血素生成.结论:蚕蛹多糖能增强小鼠的细胞免疫和体液免疫功能.

    作者:王国基;殷伟芬;王俊;颜辉 刊期: 2007年第05期

  • KISS-1基因与恶性肿瘤关系的研究进展

    肿瘤转移是恶性肿瘤的基本生物学特性之一,是多个癌基因和抑癌基因参与调节的复杂过程.近年来,对肿瘤转移抑制基因的研究已成为肿瘤转移机制研究的热点.

    作者:吕志强;丁厚中 刊期: 2007年第05期

  • 乌司他丁对体外循环心脏手术患者体内TNF-α和中性粒细胞弹性蛋白酶的影响

    目的:探讨围麻醉期乌司他丁对体外循环(CPB)下行心脏手术患者体内TNF-α和中性粒细胞弹性蛋白酶(PMNE)的影响.方法:择期心脏瓣膜置换患者24例,随机分为乌司他丁组(U组)和对照组(C组).U组患者在麻醉后和转机时分别静脉泵注乌司他丁,泵注时间均为1 h.C组患者则给予等容积的生理盐水代替.分别于麻醉后手术前(T1),体外循环开始后30 min(T2),体外循环结束后1 h(T3),4 h (T4) 和20 h(T5)抽取颈静脉球血.采用ELISA法测定颈静脉球血TNF-α和PMNE的浓度.结果:与各自T1相比,两组患者血浆TNF-α的浓度在T2,T3,T4,T5明显升高(P<0.01或P<0.05),T4达到高峰,T5开始下降.TNF-α的浓度C组在T2,T3,T4,T5时明显高于U组.C组患者颈静脉球血PMNE浓度在体外循环开始后均明显升高(P<0.01);U组则在T2,T3,T4明显升高(P<0.01),T5回落接近手术前但高于手术前水平(P<0.05).而C组的PMNE浓度在T2,T3,T4,T5时升高幅度明显高于U组(P<0.01).结论:乌司他丁可减轻CPB心脏手术患者体内的炎性反应,从而可能对CPB后机体损伤有一定的保护作用.

    作者:邵东华;杭黎华;傅诚章;王洪;杨映红 刊期: 2007年第05期

  • 麻黄多糖对绵羊红细胞所致小鼠溶血素生成的影响

    目的:观察麻黄多糖对绵羊红细胞所致小鼠溶血素生成的影响(比色法),以了解麻黄多糖对正常小鼠免疫功能的作用.方法:运用免疫实验方法检测了正常小鼠空白组和实验组在脾指数、胸腺指数和溶血素水平等方面的测定.结果:麻黄多糖大剂量(132 mg/kg)组小鼠胸腺指数下降,与空白组相比差异有统计学意义(P<0.05).麻黄多糖3个剂量组均能使正常小鼠的半数溶血值(HC50)下降,与空白组比较,差异有统计学意义(P<0.01).结论:麻黄多糖对正常小鼠体液免疫具有一定的抑制作用.

    作者:孟达理;严士海;许芝银 刊期: 2007年第05期

  • 化学发光法检测血清TPSA,FPSA用于前列腺疾病的鉴别诊断

    前列腺特异性抗原(prostate specific antigen,PSA)作为前列腺癌的标志物已广泛应用于临床,然而,由于其只是组织特异抗原,并非肿瘤特异抗原,在前列腺增生(BPH)或前列腺炎症患者中,血清PSA也可升高[1].

    作者:陈跃华 刊期: 2007年第05期

  • 兔骨髓间充质干细胞与纳米晶胶原基骨修复材料体外构建组织工程骨的实验研究

    目的:研究兔骨髓间充质干细胞(marrow-derived mesenchymal stem cells,MSCs)与纳米晶胶原基骨修复材料(nano-hydroxyapatite/collagen,NHAC)体外复合培养的结合程度,以及构建组织工程骨的可行性.方法:分离兔MSCs体外培养、纯化,取第3代MSCs与NHAC体外复合培养,第5,10 d后扫描电镜(SEM)观察二者复合程度.结果:兔MSCs贴壁生长,增殖速度快,生长曲线符合Logistic生长曲线;兔MSCs与NHAC体外复合培养,在第5,10 d进行扫描电镜观察,发现10 d时粘附于NHAC上的MSCs细胞数(38.52±7.21)明显高于5 d时粘附的细胞数(21.28±4.70),P<0.01.结论:兔MSCs与NHAC体外复合培养结合程度较高,可以用来构建组织工程骨,为进一步的动物实验奠定基础.

    作者:李大鹏;沈铁城;黄永辉;左华;邵顺秀 刊期: 2007年第05期

江苏大学学报(医学版)杂志

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主管:江苏省教育厅

主办:江苏大学