学术投稿

血清精子蛋白17检测的双抗夹心ELISA法及在卵巢癌诊断中的应用

缪家文;李芳秋;杨爱龙

关键词:精子蛋白17(Sp17), 卵巢癌, ELISA
摘要:目的:建立双抗夹心ELISA法检测血清中精子蛋白17(sperm protein 17, Sp17)水平.方法:以重组Sp17蛋白为免疫原制备兔抗Sp17抗体,建立Sp17双抗夹心ELISA检测方法,鉴定其小检出限、精确度、回收率,并检测42例正常人及28例卵巢癌患者血清Sp17水平.结果:该双抗夹心ELISA法敏感度高、特异性强、重复性好.卵巢癌患者与正常人血清Sp17含量有显著差别(P<0.01),正常人血清中存在少量Sp17蛋白,而卵巢癌患者血清中Sp17含量明显升高者占39.3%.结论:卵巢癌患者血清中Sp17含量明显升高.测定血清Sp17水平的ELISA方法学确立为阐明Sp17在卵巢癌患者中的免疫生物学意义提供了实验手段.
江苏大学学报(医学版)杂志相关文献
  • 大鼠蛛网膜下腔注射脂多糖后脊髓神经细胞内肿瘤坏死因子的表达及其动态变化

    目的:探讨蛛网膜下腔注射脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)后,肿瘤坏死因子(TNF-α)在脊髓组织内表达水平的动态变化及其在神经细胞内的定位.方法:SD大鼠蛛网膜下腔注射LPS后,采用ELISA法检测大鼠脊髓组织匀浆内TNF-α含量;脊髓组织切片经神经丝(NF)和TNF-α免疫荧光双染色后,在荧光显微镜下观察TNF-α在脊髓神经细胞内的定位.结果:脊髓组织内的TNF-α于蛛网膜下腔注射LPS后 1 h 开始升高,6 h 达到第一个高峰,随后下降,至24 h 降至低但仍高于正常水平,而后又开始上升,在第5天时达到第二个高峰后再逐渐下降,到第14天仍略高于正常水平.结论:脊髓组织内的细胞受LPS刺激后,可产生大量的TNF-α,介导神经组织的炎症反应;脊髓灰质内的神经细胞是LPS的主要靶细胞,可能具有调节脊髓损伤局部炎症反应的生物学功能.

    作者:许燕;苏一星;孙湘兰;龚爱华;张志坚;许化溪 刊期: 2007年第05期

  • 蚕蛹多糖对小鼠免疫功能的影响

    目的:通过测定蚕蛹多糖对小鼠淋巴细胞增殖、巨噬细胞吞噬活力及溶血素生成的影响,研究蚕蛹多糖对小鼠免疫功能的影响.方法:采用免疫重量法计算脾脏和胸腺指数、巨噬细胞测定法及溶血素测定法、淋巴细胞转化实验、MTT法测定.结果:蚕蛹多糖能明显增强B淋巴细胞和T淋巴细胞的增殖,促进小鼠巨噬细胞的吞噬活力和溶血素生成.结论:蚕蛹多糖能增强小鼠的细胞免疫和体液免疫功能.

    作者:王国基;殷伟芬;王俊;颜辉 刊期: 2007年第05期

  • 人骨髓间质干细胞ING4基因的克隆及其慢病毒表达载体构建

    目的:克隆人骨髓间质干细胞ING4(inhibitor of growth famility,member4)基因,构建其慢病毒表达载体PNL-ING4.方法:提取人骨髓间质干细胞(hMSCs)总RNA,经RT-PCR扩增出ING4cDNA,克隆至PMD19-T载体,选择阳性克隆进行酶切鉴定和测序,构建慢病毒表达载体PNL-ING4,用双酶切、基因测序进行鉴定.结果:RT-PCR产物为750 bp的条带,双酶切和基因测序正确.结论:成功从hMSCs克隆了ING4基因并成功构建其慢病毒表达载体PNL-ING4,为进一步研究ING4基因的作用与抗肿瘤机制奠定了基础.

    作者:张蕾蕾;许文荣;乔纯;钱晖;朱伟;李继刚;周洪兴;司煜安;周宗海;阴晴 刊期: 2007年第05期

  • 麻黄多糖对绵羊红细胞所致小鼠溶血素生成的影响

    目的:观察麻黄多糖对绵羊红细胞所致小鼠溶血素生成的影响(比色法),以了解麻黄多糖对正常小鼠免疫功能的作用.方法:运用免疫实验方法检测了正常小鼠空白组和实验组在脾指数、胸腺指数和溶血素水平等方面的测定.结果:麻黄多糖大剂量(132 mg/kg)组小鼠胸腺指数下降,与空白组相比差异有统计学意义(P<0.05).麻黄多糖3个剂量组均能使正常小鼠的半数溶血值(HC50)下降,与空白组比较,差异有统计学意义(P<0.01).结论:麻黄多糖对正常小鼠体液免疫具有一定的抑制作用.

    作者:孟达理;严士海;许芝银 刊期: 2007年第05期

  • Livin在乳腺癌中的表达及其与Caspase-3,Ki67表达的关系

    目的:探讨Livin在乳腺癌中的表达和临床意义及其与Caspase-3蛋白表达和细胞增殖的相互关系.方法:采用免疫组化S-P法检测Livin在正常乳腺组织、乳腺增生性病变、乳腺非浸润性癌和乳腺浸润性癌组织中Livin蛋白和Caspase-3蛋白表达以及Ki67在乳腺癌组织中的表达.结果:Livin蛋白在正常乳腺组织、乳腺增生性病变、乳腺非浸润性癌和乳腺浸润性癌组织中阳性率为7.1%,29.8%,65.0%,73.1%;Caspase-3蛋白分别为92.9%,71.4%,45.0%,34.6%,两者差异均有统计学意义(P<0.01).Livin表达与临床分期、淋巴结转移和年龄有关(P<0.05),与肿瘤大小和组织学分级无关.Livin蛋白与Caspase-3蛋白在乳腺浸润性癌表达呈负相关(P<0.01).在乳腺非浸润性癌中两者相当,无相关性(P>0.05).Livin蛋白表达阳性的乳腺癌Ki67的标记细胞增殖指数(47.32±22.34)明显高于Livin蛋白表达阴性的乳腺癌细胞Ki67的标记细胞增殖指数(18.01±23.34)( P<0.01).结论:Livin蛋白在乳腺癌中表达上调,可作为判断乳腺癌预后新的分子标记物,成为乳腺癌诱导凋亡治疗的新靶点.Livin不仅参与细胞凋亡的调控,还促进了细胞增殖及肿瘤发生、发展.

    作者:陈建华;范钦和;丛玲华;施洋;姚成虎 刊期: 2007年第05期

  • 尿激酶对肺纤维化干预作用及对MMP-9和TIMP-1的影响

    目的:探讨尿激酶型纤溶酶原激活剂(uPA)对肺纤维化的干预作用和对MMP-9/TIMP-1的影响.方法:SD雄性大鼠45只,随机分成3组:干预组(博莱霉素+尿激酶)、模型组(博莱霉素+生理盐水)和对照组.所有大鼠第28天处死.经HE、Masson胶原染色评价肺组织肺泡炎和肺纤维化程度.酶联免疫吸附法( ELISA)检测肺泡灌洗液中MMP-9、TIMP-1含量.结果:(1)肺泡炎程度评价:模型组为(1.7±0.6)分,干预组为(0.9±0.7)分,对照组为(0.2±0.4)分,模型组与干预组、对照组比较,差异有统计学意义(P<0.01).(2)肺纤维化程度评价:模型组为(2.0±0.8)分,干预组为(1.1±0.7)分,组间差异有统计学意义(P<0.01).(3)TIMP-1含量:模型组(1 240.8±90.3) pg/ml,对照组(1 078.3±31.6)pg/ml,干预组 (1 163.6±69.6) pg/ml,模型组与对照组比较差异有统计学意义(P<0.01);模型组与干预组比较,差异有统计学意义(P<0.05).结论:尿激酶能减轻博来霉素诱导的大鼠肺纤维化,可能是通过抑制TIMP-1途径起作用.

    作者:万兵;郑金旭;严玉兰;黄新建;吴建农 刊期: 2007年第05期

  • 偶发性肾癌34例临床分析

    随着社会经济的发展以及人们健康意识的提高,偶发性肾癌的检出率明显增高.我院自1995年1月至2006年6月共收治肾癌患者(均经手术及病理证实)97例,其中偶发性肾癌34例,现报告如下.

    作者:朱贵如;马克钧;孙浩;蒋国波;潘鹏;徐强 刊期: 2007年第05期

  • C反应蛋白水平与脑梗死病情的关系

    近年的研究证实,缺血性脑血管疾病的发生、发展与炎症密切相关.一些感染因素可能是缺血性脑血管疾病的危险因子.血清C 反应蛋白(CRP) 是炎性反应的生物学标记物之一.

    作者:许峂嵘;刘文明;孙云 刊期: 2007年第05期

  • 乳腺癌组织中蛋白激酶C-βΙ与周期蛋白D1的表达

    目的:观察蛋白激酶C(protein kinase C, PKC)-βΙ与周期蛋白D1(cyclin D1)在乳腺癌组织中的表达状况,探讨癌细胞信息传递的分子生物学机制.方法:应用半定量RT-PCR检测31例乳腺癌组织与12例癌旁正常乳腺组织中PKC-βΙ mRNA表达;应用Western blot和免疫组化法检测以上组织中PKC-βΙ蛋白与cyclin D1表达. 结果:乳腺癌组织中PKC-βΙ mRNA与蛋白表达均高于癌旁正常乳腺组织(P<0.01);癌组织cyclin D1表达阳性率高于癌旁正常乳腺组织(P<0.05). 结论:乳腺癌组织中存在PKC-βΙ同工酶过度表达,它可能介导乳腺癌细胞分化的信号转导过程.cyclin D1与细胞恶性增生密切相关.

    作者:李建萍;左克强 刊期: 2007年第05期

  • 小剂量氟西汀治疗伴抑郁症的肠易激综合征

    目的:应用小剂量抗抑郁药氟西汀治疗伴有抑郁症的肠易激综合征患者,观察其对患者的精神症状和消化道症状的影响.方法:72例临床诊断为伴抑郁症的肠易激综合征患者,随机分为两组各36例,治疗组(匹维溴胺、氟西汀),对照组(匹维溴胺),疗程均为12周.治疗期间根据Hamilton抑郁量表24项版评分并观察临床疗效.结果:治疗组疗效评价36例中有效32例,有效率88.9%.对照组36例中有效21例,有效率58.3%.治疗组Hamilton抑郁评分下降明显,两组比较差异有统计学意义(P<0.01).结论:小剂量抗抑郁药氟西汀联用匹维溴胺能明显改善肠易激综合征患者的精神症状和消化道症状,是肠易激综合征药物治疗的一种有效方法.

    作者:许应坤;张红光;刘强 刊期: 2007年第05期

  • 红景天多糖的提取纯化及其分散片制备工艺

    目的:筛选红景天分散片处方及制备工艺.方法:采用均匀设计优选红景天多糖提取工艺;通过对ZTC1+1吸附法,壳聚糖吸附法,醇沉法的比较,选出佳精制工艺;应用正交试验设计筛选分散片处方.结果:红景天多糖佳提取工艺为:提取温度为95℃,用12倍的水,提取3次,每次2.5 h.采用ZTC1+1吸附澄清法精制.以8%低取代羟丙基纤维素(L-HPC)、8%羧甲基淀粉钠(CMS-Na)、5%聚乙烯吡咯烷酮(PVPK-30)、6%微晶纤维素(MCC)为崩解剂,内外比例为25∶75,20%乙醇溶液为润湿剂,采用湿法制粒压片.结论:制得的红景天分散片崩解时限符合<中国药典>(2005年版)规定.

    作者:段丹丹;姜树红;汪珠燕 刊期: 2007年第05期

  • 胰岛素抵抗与前列腺癌的相关性研究

    目的:探讨胰岛素抵抗与前列腺癌发病的关系. 方法:随机选择健康男性50名、良性前列腺增生患者50名及前列腺癌患者50名.采用己糖激酶法测定空腹葡萄糖(Fasting blood glucose,FPG),放免法测定空腹胰岛素(Fasting serum insulin,FINS)水平.并运用HOMA模型中的胰岛素抵抗计算公式计算胰岛素抵抗指数(insulin resistance index, IRI).结果:FINS前列腺癌组为(18.098±9.237)μIU/ml,良性前列腺增生组为(11.767±6.291)μIU/ml,健康对照组为(11.275±3.001)μIU/ml.胰岛素抵抗指数前列腺癌组为1.296±0.72,良性前列腺增生组为0.935±0.383,健康对照组为0.930±0.391.前列腺癌组患者与良性前列腺增生及健康对照组FINS、IRI间差异有统计学意义.前列腺癌组患者FINS值、IRI值明显高于正常人,差异有统计学意义(P<0.01).良性前列腺增生组与健康对照组FINS、IRI间差异无统计学意义(P>0.05).多因素Logistic回归分析发现IRI与前列腺癌的发病有关,其OR值为2.784.结论:胰岛素抵抗与前列腺癌发病相关.

    作者:徐强;姚茂银 刊期: 2007年第05期

  • 化学发光法检测血清TPSA,FPSA用于前列腺疾病的鉴别诊断

    前列腺特异性抗原(prostate specific antigen,PSA)作为前列腺癌的标志物已广泛应用于临床,然而,由于其只是组织特异抗原,并非肿瘤特异抗原,在前列腺增生(BPH)或前列腺炎症患者中,血清PSA也可升高[1].

    作者:陈跃华 刊期: 2007年第05期

  • 血清精子蛋白17检测的双抗夹心ELISA法及在卵巢癌诊断中的应用

    目的:建立双抗夹心ELISA法检测血清中精子蛋白17(sperm protein 17, Sp17)水平.方法:以重组Sp17蛋白为免疫原制备兔抗Sp17抗体,建立Sp17双抗夹心ELISA检测方法,鉴定其小检出限、精确度、回收率,并检测42例正常人及28例卵巢癌患者血清Sp17水平.结果:该双抗夹心ELISA法敏感度高、特异性强、重复性好.卵巢癌患者与正常人血清Sp17含量有显著差别(P<0.01),正常人血清中存在少量Sp17蛋白,而卵巢癌患者血清中Sp17含量明显升高者占39.3%.结论:卵巢癌患者血清中Sp17含量明显升高.测定血清Sp17水平的ELISA方法学确立为阐明Sp17在卵巢癌患者中的免疫生物学意义提供了实验手段.

    作者:缪家文;李芳秋;杨爱龙 刊期: 2007年第05期

  • 产ESBLs肺炎克雷伯菌中新的氨基糖苷类修饰酶基因型

    目的:了解一株产ESBLs肺炎克雷伯菌的耐药基因存在情况.方法:采用聚合酶链反应(PCR)检测aac(3)-Ⅰ,aac(3)-Ⅱ, aac(6′)-Ⅱ,ant(3″)-Ⅰ,ant(2″)-Ⅰ,aac(6′)-Ⅰb,TEM,SHV,LEN,OKP,CTX-M-1,CTX-M-2, CTX-M-9,GES,PER,VEB,OXA-10,OXA-1,DHA,ACT-1,intI1基因,部分产物进行测序.结果:TEM、aac(6′)-Ⅰb、intI1阳性,其他阴性.aac(6′)-Ⅰb经测序并与已在美国国立生物信息中心[NCBI]登录的aac(6′)-Ⅰb基因家族比对,发现与先前登录的均不相同(包括2006年初美国学者发现的新氨基糖苷类修饰酶aac(6′)-Ⅰb-Cr型).结论:从该株产ESBLs肺炎克雷伯菌中发现的aac(6′)-Ⅰb氨基糖苷类修饰酶为新的基因型.以aac(6′)-Ⅰb-Suzhou型命名,已登录于美国NCBI(登录号:EF375621).

    作者:徐卫东;徐红星;糜祖煌;陈昭华;吴元健 刊期: 2007年第05期

  • 多排螺旋CT灌注成像在慢性阻塞性肺疾病诊断中的初步运用

    目的:探讨多排螺旋CT灌注成像对慢性阻塞性肺疾病(COPD)的诊断价值.方法:通过20例志愿者和20例COPD患者的多排螺旋CT灌注成像,采用8排螺旋CT灌注成像,扫描方式为cine(电影扫描),层厚5 mm/1i,扫描时间为45 s,碘海醇(300 mg/ml)60 ml用高压注射器以4 ml/s的流速率通过肘前静脉注入.CT perfusion3软件分析测量兴趣域血流量、血容量、平均通过时间、表面通透性和时间-密度曲线.结果:COPD患者的时间-密度曲线较志愿者曲线平坦,峰值明显降低.COPD患者血流量、血容量及表面通透性明显低于志愿者,具有统计学意义(P<0.05).结论:多排螺旋CT肺灌注扫描对COPD的诊断有一定的辅助作用.

    作者:戴伊红;伍建林;钱农;邵燕惠 刊期: 2007年第05期

  • 镇江市健康人群尿硫氰酸盐参考值调查

    目的:制订健康人群尿硫氰酸盐(USCN)参考值范围,为职业毒物接触工人健康监护评价提供科学依据.方法:采集在镇江居住3年以上的某高校156名学生晨尿,用吡啶-巴比妥酸分光光度法测定USCN,同时测定尿肌酐含量用于校正.结果:检测结果呈偏态分布,服从对数正态分布;未用肌酐校正USCN含量测定范围是5.18~62.62 mg/L,几何均数和几何均数标准差分别为19.62 mg/L和1.67 mg/L;肌酐校正后USCN含量测定范围是1.18~82.74 mg/gCr,几何均数是11.03 mg/gCr、几何均数标准差2.58 mg/gCr;男性USCN水平较女性低,且差别具有统计学意义.结论:建议镇江市健康人群USCN正常参考值分别为:女27.96 mg/L,男16.66 mg/L;经肌酐校正后USCN正常参考值:女21.24 mg/gCr,男8.16 mg/gCr.

    作者:王苏华;陆荣柱;邢光伟;韩方岸 刊期: 2007年第05期

  • 胆管癌预后因素分析

    目的:探讨影响胆管癌预后的危险因素.方法:对62例胆管癌手术患者的临床资料进行回顾性研究.用Cox回归比例风险模型分析影响预后的危险因素.对每一指标行单因素分析,筛选出P<0.1的自变量方可进入多因素分析.结果:单因素分析显示影响预后的可能因素有5个,即ALP、γ-GGT、肿瘤分期、肿瘤分化程度、切缘癌细胞浸润情况.多因素分析显示显著影响预后的危险因素有3个,按影响大小依次是肿瘤分期、肿瘤分化程度、切缘癌细胞浸润情况.结论:肿瘤分期早、分化程度高、获得切缘无癌细胞浸润的胆管癌患者预后好.加强早期诊断和获得根治性切除是改善胆管癌预后的关键.

    作者:黄海;刘胜利 刊期: 2007年第05期

  • 可溶性TNF-α受体I重组腺病毒治疗2型糖尿病的实验研究

    目的:观察可溶性TNF-α受体Ⅰ重组腺病毒(AdsTNFRⅠ)过继阻断体内TNF-α的生物学活性,探讨其对2型糖尿病模型鼠的治疗作用.方法:利用高脂饮食结合链脲佐菌素(STZ)诱导2型糖尿病小鼠模型,观察其TNF-α的表达.在进行可溶性TNF-α受体Ⅰ重组腺病毒过继治疗后,检测治疗前后模型鼠外周空腹血糖的变化,并在蛋白水平与mRNA水平分析外周血及脂肪组织中TNF-α与sTNFR-Ⅰ的表达.结果:该2型糖尿病小鼠模型外周血及脂肪组织中高表达TNF-α.AdsTNFRⅠ过继治疗后,肝组织及外周血中可检测到sTNFRⅠ的表达,并可降低外周血中TNF-α及空腹血糖水平.但AdsTNFRⅠ的治疗不能降低脂肪组织中TNF-α的mRNA表达.结论:AdsTNFRⅠ可中和2型糖尿病模型鼠外周血中的TNF-α水平,并降低其空腹血糖水平,有一定的治疗作用.

    作者:谈青芬;夏圣;钱宇平;马洁 刊期: 2007年第05期

  • 乌司他丁对体外循环心脏手术患者体内TNF-α和中性粒细胞弹性蛋白酶的影响

    目的:探讨围麻醉期乌司他丁对体外循环(CPB)下行心脏手术患者体内TNF-α和中性粒细胞弹性蛋白酶(PMNE)的影响.方法:择期心脏瓣膜置换患者24例,随机分为乌司他丁组(U组)和对照组(C组).U组患者在麻醉后和转机时分别静脉泵注乌司他丁,泵注时间均为1 h.C组患者则给予等容积的生理盐水代替.分别于麻醉后手术前(T1),体外循环开始后30 min(T2),体外循环结束后1 h(T3),4 h (T4) 和20 h(T5)抽取颈静脉球血.采用ELISA法测定颈静脉球血TNF-α和PMNE的浓度.结果:与各自T1相比,两组患者血浆TNF-α的浓度在T2,T3,T4,T5明显升高(P<0.01或P<0.05),T4达到高峰,T5开始下降.TNF-α的浓度C组在T2,T3,T4,T5时明显高于U组.C组患者颈静脉球血PMNE浓度在体外循环开始后均明显升高(P<0.01);U组则在T2,T3,T4明显升高(P<0.01),T5回落接近手术前但高于手术前水平(P<0.05).而C组的PMNE浓度在T2,T3,T4,T5时升高幅度明显高于U组(P<0.01).结论:乌司他丁可减轻CPB心脏手术患者体内的炎性反应,从而可能对CPB后机体损伤有一定的保护作用.

    作者:邵东华;杭黎华;傅诚章;王洪;杨映红 刊期: 2007年第05期

江苏大学学报(医学版)杂志

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