学术投稿

伤寒沙门菌fljA样基因缺陷变异株的制备

徐顺高;马洁;周丽萍;张驰宇;黄新祥

关键词:伤寒沙门菌, 基因缺陷变异, fljA, 同源重组
摘要:目的: 为探讨z66鞭毛抗原阳性伤寒沙门菌的fljA样基因的功能,制备沙门菌 fljA样基因缺陷变异株.方法: 根据伤寒沙门菌fljA样基因序列,设计PCR特异性引物并在5'-末端加接酶BglII位点,扩增fljA样基因上、下游片段,用BglII消化后,定向连接成fljA样基因的缺损性同源性核苷酸片段,先克隆至pGEM-T质粒,再经BamHI酶切后导入自杀质粒pGMB151,电转化入伤寒沙门菌(GIFU 10007),进行同源重组.用PCR观察重组现象,将完全重组的菌株作为fljA样基因的缺陷变异株,并通过相应的核苷酸序列分析加以确定.结果: PCR及序列分析证实,缺陷变异株的fljA样基因缺失231个碱基.结论: 成功构建伤寒沙门菌fljA样基因缺陷变异株,为进一步研究其在伤寒沙门菌鞭毛抗原表达的调控作用奠定了基础.
江苏大学学报(医学版)杂志相关文献
  • 综合性重症监测治疗室患者医院内感染病原菌调查分析

    重症监测治疗室(ICU)患者医院内感染问题日益突出,由于ICU患者多患有多种慢性基础疾病或受到严重的损伤,病情危重复杂,加之器官功能衰竭,免疫力减弱,防御反射差,再加上侵入性操作较多.抗生素不合理使用等诸多因素,极易发生院内感染.我院ICU自 2003年1月至2004年12月收治1 035例患者,发生医院内感染197例次,感染发生率为19%.现对其病原菌及药敏情况进行回顾性分析如下.

    作者:陆洁;邹静蓉 刊期: 2005年第03期

  • 丙泊酚复合咪达唑仑在膀胱镜检查中的应用

    目的: 观察丙泊酚、咪达唑仑及丙泊酚+咪达唑仑用于膀胱镜检查的镇静效果并进行比较. 方法: 将84例患者随机分为四组:丙泊酚组(Ⅰ组)、咪达唑仑组(Ⅱ组)、丙泊酚+咪达唑仑组(Ⅲ组)、对照组(Ⅳ组,不使用药物).观察记录各组检查前、中、后收缩压(SBP)、舒张压(DBP)、心率(Hr)、脉搏血氧饱和度(SpO2)的变化情况,并比较各组意识恢复时间、定向力恢复时间. 结果:Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组在心血管反应及舒适性等方面均优于Ⅳ组.与检查前相比,Ⅳ组中SBP、DBP、 Hr增高,而Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组中SBP、DBP、 Hr均有一过性下降,Ⅰ组的降幅稍大,但苏醒及定向力恢复时间短于Ⅱ、Ⅲ组;Ⅱ组与Ⅰ、Ⅲ组相比,苏醒及定向力恢复时间延长. 结论: 在膀胱镜检查中,应用丙泊酚+咪达唑仑可以使患者镇静、舒适而且无明显不良反应.

    作者:何文俊;阚明秀;王娟 刊期: 2005年第03期

  • β-环糊精的化学改性及其在药剂学领域中的应用进展

    β-环糊精(β-CDs)是近年来备受关注的新型药物包合材料,这主要是由于β-CDs具有特殊的分子结构,即呈闭合筒状结构,外部是亲水性的表面,内部则是一个具有一定尺寸的手性疏水管腔,能包合一定大小的药物分子,形成一种特殊的包合物,从而改变药物的特性[1,2].近年来,有关β-CD及其衍生物的研究已取得了显著的发展(见表1)[3].

    作者:李红霞;辛淮生 刊期: 2005年第03期

  • 肝细胞癌组织中环氧合酶-2表达与p27表达的关系

    目的: 观察环氧合酶-2 (COX-2) 和p27蛋白在肝细胞癌组织中的表达及相互关系.方法: 应用免疫组化法检测肝细胞癌组织COX-2与p27蛋白的表达状况,并对阳性结果进行图像分析.结果: 肝癌组织和癌旁组织中COX-2阳性表达率、p27表达阳性率﹑COX-2阳性面积百分比﹑p27阳性面积百分比均有显著性差异性(P<0.05).COX-2阳性组和COX-2阴性组中p27阳性表达率之间无显著性差异性(P>0.05).肝癌组织和癌旁组织中COX-2阳性表达面积百分比与p27阳性表达面积百分比之间无相关性(P>0.05).结论: 肝细胞癌组织存在COX-2过度表达,且与p27表达水平无相关性.

    作者:沈波;冷静;刘宁波;彭韬 刊期: 2005年第03期

  • 新生儿缺氧缺血性脑病血糖的变化

    新生儿缺氧缺血性脑病(HIE)是围生期各种原因造成新生儿缺氧引起的脑损伤,是围生期窒息后引起的常见和严重的并发症,是新生儿死亡及神经系统发育障碍的主要原因之一,重者可造成不可逆性脑损伤,产生永久性神经系统功能缺陷[1].维持血糖在正常范围是新生儿缺氧缺血性脑病支持疗法的主要方法.本文对缺氧缺血性脑病患儿进行血糖监测,并观察其病情严重程度的动态变化,为临床治疗HIE提供依据.

    作者:束祥花 刊期: 2005年第03期

  • 交锁钉与钢板治疗肱骨干骨折的疗效比较

    目的: 研究肱骨交锁髓内钉治疗肱骨干骨折的临床效果,并评价其与钢板螺钉内固定相比较.方法: 选取2003年采用肱骨交锁髓内钉治疗的肱骨干骨折56例,与1999年38例采用钢板螺钉内固定治疗肱骨干骨折的住院时间、骨折愈合时间、功能恢复效果相比较.两组患者的骨折特征和人口统计学特征无明显差异.结果: 交锁钉内固定治疗组患者住院时间(9.91+3.4)d,骨折愈合时间(74.4+7.2)d,均少于钢板螺钉内固定治疗组(12.1+2.7)d,(108.2+8.7)d.采用Rodriquez-Merchan标准评价疗效,两组患者有明显差异.结论: 与钢板螺钉内固定相比,肱骨交锁髓内钉对组织破坏小,术后功能恢复好;稍高的器械费用可以通过缩短骨折愈合时间等从经济上来弥补.肱骨交锁髓内钉更适合治疗肱骨干骨折.

    作者:邹俊;杨惠林 刊期: 2005年第03期

  • 心房颤动患者血浆心钠素C反应蛋白浓度测定及其意义

    目的: 测定孤立性房颤患者血浆中心钠素、C反应蛋白的浓度,探讨这两种物质与房颤发生的关系.方法: 使用放射免疫学方法及双抗体夹心hsCRP ELISA法测定21例孤立性阵发性房颤患者于房颤发作时及终止后一周以及23例孤立性持续性房颤患者的周围静脉血浆心钠素、C反应蛋白浓度,并与健康对照组相比较.结果: 孤立性阵发性房颤患者房颤发作时周围静脉血浆心钠素、C反应蛋白的浓度较健康对照组增高, 房颤发作时及终止后一周的周围静脉血浆C反应蛋白浓度无明显差异.孤立性持续性房颤患者血浆C反应蛋白浓度高于孤立性阵发性房颤患者,而血浆心钠素水平则低于阵发性房颤发作时.结论: 血浆C反应蛋白浓度增高,血浆心钠素的水平与心房颤动的发生和持续可能相关.

    作者:王卫明;孙建辉;许国锋;单其俊 刊期: 2005年第03期

  • 腔镜下尿道会师术12例报告

    我们于2000年12月~2004年12月采用wolf尿道内切开镜治疗不能插入软质导尿管的尿道损伤12例,临床效果满意,现报告如下.

    作者:姚震;崔飞伦;卜强;陆洪兵 刊期: 2005年第03期

  • 去铁胺对大鼠实验性脊髓损伤的观察治疗

    目的: 探讨去铁胺对急性脊髓损伤的治疗机制.方法: 将45只SD雄性大鼠分三组:空白组(S组),打开椎管未损伤脊髓;去铁胺治疗组(DFO组),损伤脊髓加去铁胺治疗;对照组(C组),损伤脊髓加生理盐水治疗.用改良Tarlov评分和斜板试验测定其神经功能以及测定脊髓匀浆丙二醛 (MDA)的含量和游离铁的浓度.结果: 神经功能恢复方面:去铁胺治疗组的角度明显高于对照组(P<0.05);去铁胺治疗组丙二醛 (MDA)的含量和游离铁的浓度明显低于对照组(P<0.05).结论: 去铁胺对急性脊髓损伤的治疗机制可能通过降低游离铁的浓度、减轻组织脂质过氧化而起作用.

    作者:印文彩;刘锦波 刊期: 2005年第03期

  • 有机溶剂对肿瘤细胞的细胞毒作用

    目的: 为了给脂溶性的抗肿瘤药物筛选高溶解性、低细胞毒性的有机溶剂. 方法: 采用MTT法,研究了丙酮、甲醇、乙醇、DMSO(二甲基亚砜)、异丙醇及甘油等6种有机溶剂对U937(人白血病细胞株)、95D(猪肺癌细胞株)及AGS(人胃癌细胞株)三种细胞株的细胞毒性. 结果: 丙酮对三种细胞株的毒性较弱,在10%的体积分数时也没有明显的毒性,是一种良好的有机溶剂,甲醇在使用时体积分数应低于1%;对U937细胞,乙醇、甘油、异丙醇、二甲基亚砜(DMSO)的IC50分别为6.28%、5.98%、6.41%、14.18%,甲醇对U937细胞不成线性关系,在体积分数<1%时没有明显的细胞毒作用,当浓度达到3%以上时表现出明显的细胞毒作用;对95D 细胞,甲醇、乙醇、甘油、异丙醇、DMSO的IC50分别为9.36%、3.23%、7.22%、1.13%、 2.15%,对人AGS细胞株,甲醇、乙醇、甘油、异丙醇、DMSO的IC50分别为9.27%、2.52%、7.22%、1.13%、2.15%; 结论:丙酮是脂溶性抗肿瘤药物的首选有机溶剂.

    作者:王振斌;马海乐;许文荣;王胜军;王文兵;吴守一 刊期: 2005年第03期

  • 川崎病并多器官损害23例分析

    川崎病(KD)除累及皮肤粘膜、淋巴结外,还可致多器官损害,而KD引起的多器官损害目前报道较少,我院自1992年~2004年共收治KD并多器官损害23例,现报告如下.

    作者:张叶华 刊期: 2005年第03期

  • 人脑胶质瘤化疗耐药研究进展

    耐药现象在人脑胶质瘤化疗中是比较常见的,也是影响治疗效果的重要因素.耐药的原因包括两个方面:血脑脊液屏障的存在以及肿瘤细胞本身出现耐药.耐药基因及其相关蛋白的异常表达与肿瘤耐药之间存在广泛联系,在人脑胶质瘤研究中也日益受到重视.

    作者:王存祖 刊期: 2005年第03期

  • 冠脉介入术前后血小板微颗粒的变化及意义

    目的: 研究经皮冠状动脉介入治疗(PCI)对外周循环血中血小板活化状态的影响,探讨血小板活化在急性和亚急性冠状动脉闭塞中的作用和临床意义.方法: 由外周血管采血,采用流式细胞术检测冠心病患者PCI术前、术后10 min和术后24 h血小板微颗粒数量的变化.结果: 29例冠心病患者术后10 min和术后24 h血小板微颗粒的数量较术前明显升高.结论: 冠心病患者PCI术后较术前有显著的血小板活化.

    作者:吕凤珍;杨志健 刊期: 2005年第03期

  • 异丙托溴铵和硫酸沙丁胺醇联合氧气驱动雾化吸入治疗婴幼儿哮喘疗效观察

    婴幼儿哮喘急性发作是儿科常见病,近年来发病率呈现上升趋势.2003年10月至2004年12月,我科采用氧气驱动雾化吸入疗法治疗婴幼儿哮喘急性发作,并就异丙托溴铵和硫酸沙丁胺醇联用与单用异丙托溴铵或硫酸沙丁胺醇进行了临床疗效比较,现报告如下.

    作者:孙龙军 刊期: 2005年第03期

  • 血清HBV-DNA定量测定与慢性乙型肝炎的临床关系

    乙型肝炎病毒(HBV)在慢性乙型肝炎的发生,发展过程中发挥着举足轻重的作用.既往其测定主要依赖于血清特异性抗原抗体,而外周血中HBV-DNA载量是病毒复制直接和可靠的标志,其含量能直接代表患者病毒血症的水平.近年来应用聚合酶链反应技术定量检测乙肝病毒基因水平已得到长足的发展[1,2],广泛开展此项检查,我们对感染乙肝病毒后常见的慢性乙型肝炎患者的血清病毒水平与临床的关系作了总结,以探讨两者之间的相关性.现报道如下.

    作者:何忠华 刊期: 2005年第03期

  • 稳恒磁场和He-Ne激光对大鼠胚胎脊髓神经细胞增殖和分化的影响

    目的: 研究稳恒磁场和He-Ne激光对大鼠胚胎脊髓神经细胞增殖分化的影响.方法: 将大鼠胚胎脊髓神经细胞随机分为一个对照组,四个实验组.用磁感应强度为16 mT、60 mT的稳恒磁场及波长为632.8 nm,输出功率为2 mW的He-Ne激光分别直接作用于96孔培养板中的大鼠胚胎脊髓神经细胞,连续作用10 d后,计数集落形成率,并与对照组进行比较.结果: 16 mT 实验组和He-Ne激光照射2 min组的集落形成率较对照组明显增加(P<0.01)而60 mT实验组和He-Ne激光照射8 min组均显著减少(P<0.01).结论: 胚胎脊髓神经细胞受不同物理因子作用其影响不同,与稳恒磁场的强度的大小;及低功率He-Ne激光照射的时间有关:稳恒磁场的强度较低,激光照射的时间较短能促进增殖分化;稳恒磁场的强度高,激光照射的时间长反而有抑制其增殖分化的作用.

    作者:吴全义;端礼荣;刘方平;丁翠兰 刊期: 2005年第03期

  • 骨髓间质干细胞的临床应用

    1986年由Friedenstein等首先提出骨髓间质干细胞(mesenchymal sterm cells, MSCs)的概念.MSC是一类存在于骨髓网状间质内的非造血干细胞,具有分化成各种间叶组织细胞的潜能.近年来研究表明,MSCs体外分离培养后,在一定的诱导条件下,具有向成骨细胞、软骨细胞、神经细胞、脂肪细胞、心肌细胞等多向分化的能力[1,2].

    作者:吴荣强;许文荣 刊期: 2005年第03期

  • 紫杉醇联合顺铂治疗晚期非小细胞肺癌的临床观察

    目的: 观察抗肿瘤药物紫杉醇(TAXOL)、顺铂(DDP)组成的TP方案和丝裂霉素(MMC)、长春地辛(VDS)和顺铂(DDP)组成的MVP方案治疗晚期非小细胞肺癌的近期疗效和毒副反应.方法: 65例入院化疗的非小细胞肺癌患者随机分为两组,分别采用TP方案和MVP方案化疗, 28天为一周期,重复3个周期.结果: 两组有效率,TP组45.5 %,MVP组34.3%,经比较两组有效率无显著性差异(P>0.05);毒副反应主要为骨髓抑制,MVP组较TP组为明显(P<0.05);其次为胃肠道反应和脱发,二组相似.结论: TP方案和MVP方案是治疗晚期非小细胞肺癌的有效方案.MVP方案骨髓抑制较TP方案严重,因此治疗晚期非小细胞肺癌用TP方案较为理想.

    作者:崔莉;裴福恩;韩仰光 刊期: 2005年第03期

  • 兔骨髓基质细胞的体外培养

    目的: 探讨兔骨髓基质干细胞(BMSCs)在体外培养的生长特点,为骨组织工程种子细胞的选择奠定基础.方法: 取三月龄新西兰大白兔经转子窝抽取骨髓,制成细胞悬液进行培养,通过倒置显微镜、透射电镜(TEM)、HE染色等观察细胞的生物学特性,计算细胞的生长曲线、贴壁率和分裂指数.结果: BMSCs在体外生长良好,传代后性状稳定,增值期为2~4 d,12 h贴壁率为90%,第4天时分裂指数高为92‰.结论: 兔BMSCs体外培养时生长性状稳定,增殖速度快,可作为骨组织工程的种子细胞.

    作者:蒋建农;郝思春 刊期: 2005年第03期

  • 丙泊酚咪达唑仑对心肌缺血再灌注损伤c-jun基因表达的影响

    目的: 观察丙泊酚、咪达唑仑在心肌缺血再灌注损伤时c-jun基因表达的影响,从基因表达水平探讨它们对心肌保护作用的机制.方法: 健康SD大鼠36只,每组12只.在心肌缺血15 min后分别给生理盐水(A组)、丙泊酚(B组)、咪达唑仑(C组)再灌注,时相为Ⅰ0 min、Ⅱ15 min、Ⅲ30 min、Ⅳ60 min、Ⅴ120 min、Ⅵ 240 min,各时相取2只大鼠,多聚甲醛灌注固定后取缺血心肌标本作石蜡切片,免疫组化方法检测c-jun基因表达,显微镜下计数阳性细胞,拍片.结果: 各组Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ时相与Ⅰ时相相比c-jun基因表达明显增强(P<0.05);A组Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ时相c-jun基因表达均比B、C组增强(P<0.05), 统计学有显著性意义.结论: 丙泊酚、咪达唑仑对缺血再灌注损伤有一定的保护作用,为心肌缺血再灌注损伤时安全可用的麻醉药,其作用与缺血再灌注时间有关,即在30~120 min内对缺血再灌注心肌有明显保护作用,这对临床选择合理时间窗用药有一定的指导意义.

    作者:尹宁;李敏;丁炯;韩群颖 刊期: 2005年第03期

江苏大学学报(医学版)杂志

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