邹容；蒋星红；周希平；涂彧
目的 研究人羊膜间充质干细胞分离培养及免疫调节作用.方法 从羊膜中分离和培养间充质干细胞,并通过形态学的结构特征及流式细胞术检测其表面标志以鉴定其纯度.建立双向混合淋巴细胞反应体系,根据不同效靶比E/T(hAMSCa/PBMC)加入丝裂霉素处理过的羊膜细胞,用3H掺入法测定淋巴细胞增殖率,观察间充质干细胞对淋巴细胞增殖的影响.结果 从羊膜组织成功培养出间充质干细胞,细胞贴壁生长,在体外短期内可以稳定增殖和传代,细胞具有与骨髓问充质干细胞相似的表面标志,与混合淋巴细胞反应体系共同培养抑制了淋巴细胞增殖,其增殖抑制率与加入的细胞数量成正比.结论 羊膜问充质干细胞可以抑制混合淋巴细胞反应体系中淋巴细胞增殖,对同种异体免疫反应具有负调节作用.
作者：孙鸿丽；吴德沛；沈云峰；毛玉文 刊期： 2009年第01期
目的 构建人源Diekkopf-1(DKK-1)基因的真核表达质粒,为进一步探讨DKK-1的生物学功能奠定基础.方法 Trizol法从人新鲜胎盘组织中抽提总RNA,RT-PCR法反转录为cDNA,以cDNA为模板扩增人源DKK-1的基因序列,将真核表达载体pcDNA3.1和DKK-1的PER产物分别在双酶切后用T4连接酶连接,构建重组质粒pcDNA3.1-DKK-1,转化至大肠杆菌后经菌落PER、NHe I和EcoR I双酶切及测序鉴定.结果 RT-PCR法从人胎盘中扩增出816 bp大小的目的 片段,重组质粒转化至大肠杆菌后菌落PER同样扩增出816 bp大小的目的 片段,NHe I和EcoRI双酶切重组质粒能切出两条目的 条带,测序后与C,enbank中DKK-1的cDNA对比,证明DKK-1的基因序列完全正确.结论 成功构建了pcDNA3.1-DKK-1重组质粒,为研究人源DKK-1的功能及其在细胞系中的作用奠定了基础.
作者：李文帅；周幽心；许期年 刊期： 2009年第01期
目的 克隆人抗黏病毒蛋白-MxA基因,构建其原核表达载体并进行表达、纯化、活性鉴定,为深入开展该蛋白功能的研究奠定基础.方法 从IFN-β诱导的A549细胞系中提取总RNA,通过RT-pCR技术扩增出MxA全长cDNA,克隆于pUC119载体,酶切鉴定后并经测序证实序列正确,再克隆于pET-32a(+)载体上构建表达载体pET-32a(+)-MxA,转化大肠杆菌BL21,经IPTG诱导表达并优化诱导条件,通过NTA-Agarose亲和层析和割胶电洗脱法获取纯化MxA蛋白,用SDS-PACE电泳分析表达产物,并通过对病毒VSV的抑制作用鉴定其活性.结果 琼脂糖凝胶电泳结果显示RT-PCR扩增出两条片段,大小同预计片段相符,并经测序证实与公布的MxA基因序列一致;重组载体转化菌经IPTG诱导表达,SDS-PAGE电泳初步鉴定,目的 蛋白约占总菌体蛋白的25%,与预计的分子量91 kd相一致.用NTA-Agarose亲和层析法可获得纯度>95%的目的 蛋白,割胶电洗脱回收法可获得纯度>90%的目的 蛋白.结论 克隆了人抗黏病毒蛋白-MxA基因,克隆基因在大肠杆菌中获得了较高水平的表达,并通过两种方法获得了该蛋白的纯化物.
作者：刘鹏；吴康；王坤；葛正珍；孟祥勋 刊期： 2009年第01期
目的 探讨佳的弥散定量测量方法,为临床及下一步的研究提供参考.方法 收集20名正常健康体检者,对其行头颅常规MRI检查及平面回波弥散加权成像(DWD检查.获得DWI图,然后在工作站上重建表观弥散系数(ADC)图.每个研究对象选6个感兴趣区(ROI),分别在DWI图及ADC图采用相应测量方法得到每个部位的不同成像方法的平均ADC值.结果 在各相异性DWI图上通过信号强度计算的丘脑ADCM、ADCP、ADCs值差异无统计学意义(P>0.05),额叶白质和内囊后肢的值差异有高度统计学意义(P<0.001);在各相异性(同性)DWI图通过信号强度计算的丘脑、额叶白质、内囊后肢ADCsve值与直接在各向异性(同性)ADC图上测量得出的ADc值差异有高度统计学意义(p<0.001).结论 额叶白质及内囊中的水分子弥散存在各相异性,丘脑中水分子弥散是各相同性的;不同的弥散定量方法所测得的ADC值有明显差异,但以通过DWI图计算出来的ADC值较为准确,定量研究脑组织的弥散还要考虑测量方法.
作者：魏友平；沈钧康；张彩元 刊期： 2009年第01期
目的 构建Rho蛋白鸟苷解离抑制因子(LyGDI)真核表达载体并建立稳定转染A549细胞株.方法 PCR扩增LyGDI基因片段,构建pEGFP-C1-LyGDI真核表达载体,经酶切、PCR、测序验证其正确性.脂质体法转染真核细胞A549,G418筛选建立稳定转染的细胞株,RT-PCR、免疫印迹检测稳定转染的细胞株.结果 构建了真核表达载体并建立了稳定转染的A549细胞株,成功表达LyGDI蛋白.结论 LyGDI真核表达载体成功构建及稳定转染A549细胞株的建立,为研究LyGDI过度表达对肿瘤侵袭性和转移的影响奠定了实验基础.
作者：董玉金；吴纪霞；王兴丹；曹丽丽；韩琴芳；周新文 刊期： 2009年第01期
目的 了解苏州市大学生睡眠质量,探讨影响睡眠质量的影响因素.方法 自制调查表,以面对面的方式,对苏州市3所大学的300名大学生的睡眠状况及影响因素进行调查,用匹兹堡睡眠质量指数(PSQI)对睡眠质量进行评分,按PSQI的分值将睡眠质量分为睡眠良好和睡眠障碍.对PSQI评分及睡眠障碍的构成情况进行描述;用等级相关和多因素Logistic同归分析睡眠质量与影响因素的关系.结果 PSQI的平均水平为7.28±2.54,睡眠障碍者占44.8%.影响其睡眠质量的因素有生活费用、居住条件、就业忧虑、学习负担、就医情况(身体状况)和感觉受冷落的程度.这些影响因素对睡眠质量作用的OR值及95%CI分别为:0.74(0.53,1.03)、1.46(0.96.2.23)、0.70(0.44,1.10)、1.44(O.92,2.25)、2.49(1.38,4.49)、0.57(0.32,1.01).结论 关心大学生身心健康并提供辅导和帮助,是提高睡眠质量的有效措施.
作者：张明芝；武书 刊期： 2009年第01期
目的 观察油酸致小鼠早期急性肺损伤(ALI)中血管内皮细胞生长因子(VEGF)表达的变化.方法 48只BALB/c小鼠随机分为两组,每组24只.ALI组从尾静脉注射油酸0.9 ml/kg制备ALI模型;正常对照组注入等量生理盐水.8 h后每组随机抽半数小鼠处死后行肺泡灌洗(BAL).另一半小鼠右肺称重后烘干,左肺留取病理标本;分别测定肺湿/干质量比、肺泡灌洗液(BALF)总细胞计数、中性粒细胞计数、蛋白含量变化;ELISA测定血清和BALF中自细胞介素6(IL-6)、VEGF的含量;免疫组化法检测组织中VEGF表达的变化.结果 AU组肺湿/干质量比、BALF中蛋白含和总细胞计数、中性粒细胞计数、血清和BALF中IL-6含量、血清VEGF含量与正常对照组比较均明显升高,AU组BALF中VEGF的含量和肺组织中VEGF表达积分吸光度值(IA)较正常对照组均明显降低,以上比较的差异均有统计学意义(均P
作者：金钧；郭强；黄芳；王俊；徐华；李娜；黄建安 刊期： 2009年第01期
目的 研究NF-κB信号通路阻断对肝癌细胞SMMC7721生长增殖的影响.方法 常规培养SMMC7721细胞,采用SN50(36 μmol/L)阻断NF-κB信号通路,Western blot检测核内p65蛋白水平.MTT比色法检测细胞生长增殖,计算肿瘤细胞牛长抑制率.PI染色、流式细胞仪分析细胞周期与凋亡,观察NF-κB信号通路阻断对肝癌细胞SMMC7721细胞周期及凋亡的影响.结果 肝细胞癌SMMC7721细胞核内存在较高水平的p65蛋白.经SN50阻断后,MTT测定显示细胞的增殖受到明显抑制,并随时间的延长而愈渐明显,24、48、72 h后细胞增殖抑制率分别为22.77%、33.33%和38.89%,与阻断前相比,差异有统计学意义(P<0.05).流式细胞仪检测发现实验组G1期细胞比例高于对照组差异有统计学意义(69.5%vs56.5%,P<0.05),S期细胞比例明显降低,与阻断前相比差异有统计学意义(11.1%vs 28.6%,P<0.05),而细胞凋亡率在实验组为38.3%,对照组仅为23.2%,差异有统计学意义(P<0.05).结论 NF-κB信号通路阻断诱导细胞周期于G1期停滞和细胞凋亡,从而抑制了SMMC7721细胞生长与增殖,提示NF-κB信号通路组成性激活参与了肝细胞癌的生长增殖与发展,以NF-κB信号通路作为治疗的靶点可能给肝细胞癌带来新的治疗选择.
作者：姚辉华；王守立；朱宝松；韩蓉；林芳；秦正红 刊期： 2009年第01期
目的 观察转染重组BMP7腺病毒(Ad-BMP7)后,兔髓核细胞BMP7和Ⅱ型胶原的表达情况.方法 (1)取20只新西兰大白兔,15只作为实验组,5只作为实验对照组.实验组椎间盘注射Ad-BMP7,实验对照组注射携带绿色荧光蛋白(GFP)基因的腺病毒(Ad-GFP),另设空白对照组.(2)分别于注射后1、2、4周各处死5只实验组兔子,注射后1周处死全部实验对照组兔子.RT-PCR和免疫组织化学染色检测BMP7的表达情况,免疫组织化学染色检测Ⅱ型胶原的表达情况.结果 (1)实验组的髓核细胞显示了BMP7染色阳性结果,1、2、4周组阳性染色率差异无统计学意义(P>O.05).(2)实验组的髓核组织问质Ⅱ型胶原呈阳性染色,1、2、4周的灰度值单因素方差分析,差异有高度统计学意义(P<0.01);SNK两两比较,第1周与第2、第4周差异有统计学意义(P<0.05),第2、第4周间差别无统计学意义(P>0.05).结论 Ad-BMP7转染兔髓核细胞后,能获得长期表达,并能促进Ⅱ型胶原合成.
作者：刘巍；成红兵；严建军；王鹏翔 刊期： 2009年第01期
目的 研究牛理浓度铁调素(Hepcidin)对人成骨细胞(hFOB 1.19)内铁离子转运的影响.方法 加入终浓度分别为100(A1组)、300(A2组)、600(A3组)nmol/L的Hepcidin,干预成骨细胞20 h后在激光共聚焦显微镜(CLSM)下测量细胞内的铁离子荧光强度.结果 细胞内铁离子荧光强度对照组(A0组)为5.23±1.54,A1组为20.74±4.90,A2组为21.65±6.55,A3组为22.32±6.91,与AO组相比,A1组、A2组、A3组荧光强度都明显升高,差异有统计学意义(P<0.05),而A1组、A2组、A3组之间的差异均无统计学意义(P>0.05).结论 Hepcidin具有升高成骨细胞(hFOB 1.19)内铁离子的作用,但在100～600 nmol/L剂量范围内,Hepcidin升高成骨细胞内的铁离子浓度无明显差异.
作者：赵东阳；徐又佳；张鹏；郝彦明；马勇；刘虎 刊期： 2009年第01期
目的 探讨利塞膦酸钠胶囊防治绝经后妇女骨质疏松症的有效性和安全性.方法 患者30例,试验组和对照组按1:1比例分配,每组15例.试验组以利寒膦酸钠胶囊加凯思立D治疗,对照组以安慰剂加凯思立D治疗.所有入组患者进入12个月的双盲期治疗,在治疗前、用药后3个月末、6个月末及12个月末进行随访,对利塞膦酸钠胶囊的有效性及安全性进行评估.结果 12个月时试验组腰椎骨密度值平均增加0.03g/cm2,髋部骨密度值平均增加0.02g/cm2,血骨钙素均值下降4.96μg/L.尿I型胶原氨基末端肽,肌酐比值(NTX/Cr)均值下降45.00μg/L;对照组腰椎骨密度值平均增加0.02 g/cm2,髋部骨密度值平均增加0.01 g/cm2,血骨钙素均值下降1.85μg/L,尿NTX/Cr均值下降38.79μg/L.两组比较腰椎骨密度及血骨钙素均值变化差异有统计学意义(p<0.05),髋部骨密度及尿NTX/Cr均值变化差异无统计学意义(P>O.05).治疗期间,两组胸椎和腰椎侧位X线检查均无新的椎体骨折发生,也未发生其他部位的骨折.试验过程中没有发生严重不良事件.结论 利塞膦酸钠能明显抑制骨吸收,减少腰椎骨量的丢失,且不良反应较少.
作者：王璐璐；沈忆新；谢宗刚 刊期： 2009年第01期
目的 观察大鼠额叶创伤后不同时间点创伤区及周边皮质神经元型一氧化氮合酶(nNOS)的表达变化.方法 采用成年健康SD大鼠(76只)脑额叶锐器损伤模型,随机分成空白对照组、假手术组和脑损伤组3组.于伤后O、1、3、6、12、24 h等6个时间点分别采用尼氏染色法、免疫荧光组织化学方法、Westem blot法来观察创伤区及周边皮质神经元的病理变化、nNOS阳性细胞和nNOS蛋白的表达变化.结果 尼氏染色显示创伤区及周边皮质神经元数目减少,胞浆染色加深,尼氏小体减少,神经元突起不明显甚至消失.免疫荧光组织化学、Western blot免疫印迹显示,空白对照组及假手术组额叶皮质中偶见nNOS阳性细胞,nNOS蛋白表达量较低;伤后1 h创伤区及周边nNOS阳性细胞表达开始增多,nNOS蛋白表达开始升高,6 h达高峰,12 h开始下降.结论 大鼠额叶创伤后早期创伤区及周边皮质有nNOS的时程表达变化.
作者：李刚强；何志贤；董玉林；张志军；郁晓燕；倪衡建 刊期： 2009年第01期
目的 探讨熊果酸(UA)对ER(-)、Her-2过表达的人乳腺癌SK-BR-3细胞增殖和凋亡的影响.方法 利用噻唑蓝(MTT)比色法观察UA对SK-BR-3细胞增殖的影响.用Hoechst 33258荧光染色及电子显微镜观察凋亡细胞核形态变化.流式细胞仪检测UA对细胞周期的影响;DNA琼脂糖凝胶电泳观察DNA片段的断裂.结果 UA明显抑制SK-BR-3细胞的增殖,差异有统计学意义(P
作者：徐新伟；郭玲玲；顾振纶；蒋小岗；周文轩；郭次仪 刊期： 2009年第01期
目的 探讨加味大柴胡汤对阻塞性黄疸大鼠TLR4 mRNA表达的影响.方法 制作急性阻塞性黄疸大鼠模型,分为7、14、21 d 3个时段,每个时段分为胆总管结扎+加味大柴胡汤组(BDL+MMDB)、胆总管结扎+生理盐水组(BDL+NS)、假手术+生理盐水组(SO+NS)3个组,每组6只大鼠.在不同时相点,检测内毒素、肝功能及用RT-PCR检测TLR4 mRNA的表达情况.结果 胆总管结扎后7、14、21 d f1静脉血浆内毒素的含量逐渐增加;TLR4 mRNA表达上调;TB增加.加味大柴胡汤治疗7、14、21 d后门静脉血浆内毒素的含量下降,TLR4 mRNA表达逐渐下调;TB 降低,肝功能损伤减轻.结论 加味大柴胡汤可以通过下调TLR4mRNA表达来降低血浆内毒素水平,从而减轻肝脏损害.
作者：谢毅；陈明；谈燚；钱海鑫 刊期： 2009年第01期
目的 探讨髋关节置换术后股骨假体周围骨折的病因及其治疗方法.方法 分析髋天节置换术后胶骨假体周围骨折患者12例的临床资料,按Vancouver分型,A型2例,采用保守治疗;B1型7例,应用形状记忆环抱器固定;C型3例,应用锁定加压接骨板内固定.结果 所有病例均获随访,随访时间12～31个,平均18.2个月,骨折均愈合,假体稳定.无感染、畸形愈合、内固定断裂等并发症发生.结论 髋关节置换术后股骨假体周围骨折的治疗比较困难,Vancouver分型标准及治疗方案是较好的指导原则.
作者：李洪伟；孙俊英；马良波 刊期： 2009年第01期
目的 研究RNA干扰抑制结肠癌移植瘤模型VEGF-C表达和抗肿瘤淋巴管生成的有效方法.方法 建立结肠癌裸鼠皮下移植瘤模型并随机分为3组(n=8):腺病毒(Ad5F35-VEGF-C-siRNA-EGFP)组、siRNA组和PBS组,对肿瘤进行原位注射,记录各组肿瘤体积变化,免疫组织化学法检测肿瘤内微血管密度(MVD)和淋巴管密度(LVD).结果 VEGF-C干扰能抑制肿瘤生长,且腺病毒组比siRNA组生长更慢.同时免疫组化显示各组MVD值的差异无统计学意义(P>0.05),siRNA组、腺病毒组和PBS组相比,LVD值的差异有统计学意义(P
作者：陈正荣；邢春根；何腾飞；吕孝东；吴永友；赵奎 刊期： 2009年第01期
目的 研究体外香烟烟雾对V79细胞增殖和凋亡的影响.方法 将V79细胞分为对照组、5%浓度组和20%浓度组进行染烟实验.染烟后检测细胞内ROS水平、细胞增殖活性、细胞周期及凋亡情况.结果 5%浓度和20%浓度染烟组与对照组相比,V79细胞ROS水平均明显升高,且20%浓度组与5%浓度组相比ROS也明显升高,差异均有统计学意义(均P<0.05).5%浓度和20%浓度染烟组与对照组相比,细胞增殖率、克隆率明显降低;G1期细胞百分比明显升高,G2期和S期细胞明显减少,差异均有统计学意义(均P<0.05).20%浓度染烟组分别与对照组和5%浓度染烟组相比,细胞凋亡率均明显升高,差异有统计学意义(P<0.05).结论 香烟烟雾可能刺激了V79细胞内ROS的增多,影响细胞增殖和凋亡率.
作者：刘海云；张素萍；童建；李建祥 刊期： 2009年第01期
目的 比较山羊卵母细胞在不同成熟时期解冻后体外成熟、体外受精及胚胎发育能力.方法 收集山羊生殖泡(GV)期未成熟卵和成熟卵,分5组行开放式拉细麦管(OPS)法玻璃化冷冻,I组:直接冷冻GV期卵;Ⅱ组:GV期卵在体外培养(IVC)8 h后冷冻;Ⅲ组:GV期卵在IVC 16 h后冷冻;Ⅳ组:GV期卵体外培养成熟(IVM)后冷冻;V组:直接冷冻体内成熟卵.解冻后比较各组卵受精率、卵裂率及8细胞胚胎形成率.结果 I组(GV期卵)冷冻解冻后存活率达56.8%,显著高于Ⅱ组(33.3%)、Ⅲ组(31.6%)、Ⅳ组(28.9%)及V组(30.4%),差异有高度统计学意义(均P<0.01).各组体外受精率、卵裂率及8细胞胚胎形成率比较,差异无统计学意义(P>0.05).结论 采用OPS法玻璃化冷冻山羊GV期卵较冷冻其他成熟时期卵效果好.
作者：吴志南；丁家桐；沈宗姬 刊期： 2009年第01期
目的 探讨大孔吸附树脂优选珍珠菜总皂苷的纯化工艺.方法 以齐墩果酸为对照品,采用紫外分光光度法测定总皂苷含量,在单因素试验的基础上,用L9(34)正交设计优化大孔吸附树脂对珍珠菜总皂苷的纯化工艺.结果 优树脂纯化工艺为:样品液pH为5.0,样品液总皂苷浓度26.75 mg/ml,洗脱剂为50%的乙醇.结论 优化了的大孔吸附树脂纯化工艺简便易行,稳定可靠.
作者：潘海敏；唐丽华；游本刚；黄荣华 刊期： 2009年第01期
目的 通过对休克新生儿血乳酸、丙酮酸、血气分析等指标的测定,寻找诊断新生儿休克的敏感指标.方法 选择休克患儿40例,Cabal休克评分确定其休克程度,将其分为轻、中、重度休克组,对照组14例,分别行各项血液指标测定.结果 新生儿休克不同程度组及对照组间血乳酸、丙酮酸和血气pH、PCO2、BE总体均有显著改变,其中血乳酸、血气BE值在对照组及不同程度休克各组间差异均有统计学意义(均P<0.05),中、重度休克患儿乳酸、BE值与阴离子间隙值间有较好的相关性.结论 血乳酸、血气BE值是判断新生儿休克程度的敏感指标,中、重度休克患儿血乳酸、BE值与阴离子间隙值相关性好,基层医院町通过血生化中的阴离子间隙值初步判断休克程度,尽早进行抗休克治疗.
作者：屠文娟；蒋红霞；赵静 刊期： 2009年第01期
苏州大学学报（医学版）杂志
主管:江苏省教育厅
主办：苏州大学
