学术投稿

龙胆苦苷人工抗原的合成与鉴定

钱卫东;吴启航;刘婵婵;王婷;曾桥;蔡长龙

关键词:龙胆苦苷, 人工抗原, 半抗原, 酶联免疫分析法
摘要:目的 为建立龙胆苦苷免疫检测方法,需合成龙胆苦苷(GTP)的免疫抗原和包被抗原.方法 将琥珀酸酐与龙胆苦苷中的羟基进行反应,再利用混合酸酐法将龙胆苦苷半抗原与载体蛋白(BSA和OVA)偶联形成龙胆苦苷-载体蛋白人工抗原,进而利用紫外分光光度计法(UV)、红外光谱法(IR)、聚丙烯酰胺凝胶电泳法(SDS-PAGE)鉴定人工抗原,结合三硝基苯磺酸法(TNBS)测定人工抗原的偶联比率,并免疫小鼠,后用间接ELISA方法检测免疫小鼠血清中抗体效价.结果 IR、UV和SDS-PAGE法检测结果均表明龙胆苦苷与载体蛋白偶联成功,TNBS结果表明GTP-BSA(免疫抗原)和GTP-OVA(包被抗原)偶联比分别为9∶1和6∶1,间接ELISA结果表明免疫小鼠血清中抗龙胆苦苷抗体效价均达到1∶12800以上.结论 本实验成功合成并鉴定了龙胆苦苷人工抗原,为龙胆苦苷免疫分析提供了实践基础.
时珍国医国药杂志相关文献
  • 禾叶风毛菊醇提物对ANIT所致小鼠肝损伤的保护作用

    目的 观察禾叶风毛菊醇提物对α-异硫氰酸萘酯(ANIT)所致肝损伤小鼠的保护作用.方法 将60只小鼠随机分为6组,分别为正常组、联苯双酯组、模型组、禾叶风毛菊醇提物低、中、高剂量组(1.0,2.0,4.0 g·kg-1).采用灌胃ANIT花生油溶液的方式复制肝损伤模型,造模48h后眼静脉丛取血,测其血清中的丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、胆汁酸(TBA)、总胆红素(TBIL)、肿瘤坏死因子(TNF-α)的含量;剖取3份肝脏分别用于检测肝组织匀浆中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的含量,分析对TNF-αmRNA表达的影响,观察肝组织病理形态学变化.结果 与模型组相比,禾叶风毛菊醇提物各剂量组均可显著降低肝损伤小鼠血清中ALT、AST、TBA、TBIL的含量(P <0.05,P<0.01);禾叶风毛菊醇提物中、高剂量组可显著降低肝损伤小鼠血清中TNF-α的含量(P <0.05,P<0.01).禾叶风毛菊醇提物低、高剂量组可使肝损伤小鼠肝匀浆中SOD水平显著升高,MDA水平显著下降(P<0.01);中剂量组仅对MDA水平有显著影响(P<0.01);各剂量组对GSH-Px水平无显著影响.中、高剂量组均能影响肝损伤小鼠TNF-α mRNA的表达.病理切片结果显示采叶风毛菊醇提物各剂量组对肝组织的病理变化均有改善作用.结论 禾叶风毛菊醇提物对ANIT所致小鼠肝损伤有一定的保护作用,其保护作用可能与提高清除氧自由基能力,降低脂质过氧化程度以及减轻炎症反应有关.

    作者:饶雅琪;王娟;曾金祥;朱继孝;钟国跃;罗光明 刊期: 2017年第07期

  • 243例注射吸毒者艾滋病证候特点及其演变规律研究

    目的 探讨注射吸毒者艾滋病的证候特点及演变规律.方法 使用证候调查表收集243例注射吸毒者艾滋病研究对象四诊信息资料.结果 注射吸毒者艾滋病中医证候主要由实证类向虚证类演变,向气阴两虚类转变为主,肝气郁结类、脾气虚弱类次之;以气阴两虚类者居多,具体证型主要向气阴两虚证、肝肾阴虚证、脾肾阳虚证演变,体现出从气阴虚损向脏腑阴阳亏虚演变的特点,主要累及肾脾肝三脏.结论 注射吸毒者艾滋病的证候特点及其演变规律:以虚为主、虚实夹杂,其演变呈现“气郁、气虚→气阴虚损→脏腑阴阳亏虚”的过程,兼夹火热、痰湿、血瘀诸邪,病位主要在肾、脾、肝三脏,累及肺、心、胃.

    作者:王莉;赵竞;杨绍春;刘彦丽;孙俊;蔡怡;宋娜丽;贺铮铮 刊期: 2017年第07期

  • 多花黄精初生根茎破除休眠及其成苗的条件研究

    目的 研究多花黄精初生根茎的破除休眠和成苗的佳条件.方法 用不同植物生长调节剂、低温、光照、温度和覆土深度处理多花黄精初生根茎.结果 初生根茎经GA3处理不能破除休眠,FL、6-BA和4℃、10 ℃低温处理能破除休眠,FL处理出现白化苗,300 mg·L“的6-BA处理破除体眠好,出苗率为80.00%,4~10℃湿沙贮藏时间越长破除休眠越好.初生根茎分别在20 ~25℃,光照12h,覆土1 cm时成苗好.结论 本研究的方法可使多花黄精种子出苗时间比自然条件下出苗减少1年,且出苗率大幅提高,还可降低生产中育苗成本,为生产上多花黄精种子快速育苗提供参考.

    作者:陈松树;赵致;王华磊;刘红昌;李金玲 刊期: 2017年第07期

  • 壮药消痞导滞片治疗功能性消化不良180例的临床疗效研究

    目的 观察壮药消痞导滞片治疗功能性消化不良(FD)的临床疗效.方法 将180例患者随机分为治疗组(59例)、对照一组(63例)、对照二组(58例),分别予口服壮药消痞导滞片、多潘立酮片、健胃消食片,观察治疗前后上腹痛、烧灼感,餐后饱胀,早饱等症状和胃镜结果的变化.结果 治疗后三组患者的上述症状皆有所改善,且治疗组总有效率为86.9%,优于对照一组69%及对照二组67.9% (P <0.05);胃粘膜改善率治疗组为77.2%,优于对照一组60.3%(P<0.05),与对照二组(73.2%)比较差异无统计学意义(P>0.05).结论 壮药消痞导滞片具有较好的临床疗效,且较为安全,值得进一步推广应用.

    作者:牟丽环;黄贵华;陆秋静;朱健敏;林华胜;李婕;刘熙荣;周雨晴;黄瑾明;李雪梅 刊期: 2017年第07期

  • “少阳”在中医骨伤科中的运用浅析

    《黄帝内经》曾早提出“少阳”与骨之关系密切,该文简析对“少阳”的理论认识和“少阳证”的历史源流.“少阳枢机”是伤寒论六经中的重要内容,足少阳胆经、少阳胆腑和手少阳三焦共同构成“少阳枢机”影响人体的气血运行.“少阳”在中医骨伤科中运用十分广泛,多种常见骨性疼痛及现代医学检验检查结果均可作为少阳兼证的诊断依据和运用和解少阳法的指征.治疗少阳胆腑不利引起的骨质疏松症和足少阳胆经所过之处骨折时灵活运用和解少阳法可取得较好的临床疗效.

    作者:徐力立;司誉豪;马勇 刊期: 2017年第07期

  • 类风湿性关节炎的从玄府论治

    从玄府学说探讨类风湿性关节炎(RA)的中医病机证治,提出RA的病机根本是玄府闭塞,病变部位在筋膜之玄府络脉,病理机制为玄络绌急、瘀阻失养,而开通玄府是RA的基本治则,贯穿于病程之中,为进一步探讨中医药防治该病提供一定的理论依据和思路.

    作者:胡勇;邢玉瑞 刊期: 2017年第07期

  • 中药促进宫颈柱状上皮异位物理治疗后创面修复的临床观察及基于AQP2的机制探讨

    目的 观察我院国家级名老中医易修珍经验方——固气利湿汤对宫颈柱状上皮异位患者经物理治疗后创面修复的临床疗效,并且从AQP2角度探讨中药起效的作用机制.方法 62例中重度宫颈柱状上皮异位患者,随机分为对照组(n=30)和治疗组(n=32).均给予物理治疗的方法,对照组术后给予奥硝唑500mg bid口服1周预防感染,治疗组除外奥硝唑预防感染之外,同时给予中药固气利湿汤口服日一剂,持续2周.术后每2周随访一次,记录患者阴道排液持续时间、阴道排液量、阴道出血时间、创面愈合时间,同时观察术后的不良反应.两组治疗前均于阴道镜下取宫颈异位柱状上皮部位的组织活检,术后2周宫颈鳞柱交界处取材少量,测定AQP2蛋白表达量,探讨中药发挥作用的机制.结果 两组患者基本资料比较,未见统计学差异(P>0.05).治疗组的阴道排液持续时间、阴道排液量、创面愈合时间,均显著低于对照组(P<0.05),阴道出血时间未见差异(P>0.05).总的治疗效果,治疗组优于对照组(P<0.05).治疗后AQP2蛋白表达量,治疗组显著低于对照组(P<0.05).结论 宫颈柱状上皮异位患者给予物理治疗是一种安全有效的治疗方法,术后给予中药固气利湿汤治疗,可显著降低患者术后阴道排液量、阴道排液时间,促进创面的愈合,提高治疗效果.减少阴道排液的作用机制可能与下调AQP2蛋白有关系.

    作者:彭强丽;张永会;杨丽娟 刊期: 2017年第07期

  • 中医药干预对非小细胞肺癌患者生存期影响的回顾性分析

    目的 通过回顾性调查,分析中医药干预对246例非小细胞肺癌(NSCLC)患者生存期的影响.方法 回顾性分析2010年至2014年上海市中医医院收治的246例非小细胞肺癌患者临床资料,采用Kaplan-Meirer法进行生存分析,Logrank检验和Cox模型预后影响因素行单因素和多因素分析.中医药干预分为中医组(中药静脉制剂、中药汤剂中的一种或两种),中西医结合组(化疗、放疗、靶向治疗中任意一项+中医药治疗),其中中药静脉针剂组按功效细分为(扶正药、祛邪药、扶正+祛邪药).结果 246例患者1、3、5年生存率分别为72%、46%、26%,中位生存时间为37.4个月.中医组、中西医结合组中位生存期分别为29.14个月、45.73个月,1、3、5年生存率分别为61%、34%、25%;77%、52%、41%.单因素分析结果显示两组之间生存期的差异有统计学意义(X2=9.057,P=0.003).中药静脉针剂+中药汤剂+化疗、中药静脉针剂+化疗、中药静脉针剂+中药汤剂、中药静脉针剂四组患者中位生存期分别为83.35个月、44.06个月、29.63个月、14.95个月,不同治疗方式对生存期的影响的差异具有统计学意义(X2=13.37,P=0.004).中药静脉针剂中扶正组、祛邪药、扶正+祛邪药对生存期的影响无统计学差异(P>0.05).结论 中西医结合治疗能延长非小细胞肺癌患者的中位生存期;同时采用中药静脉针剂+口服中药汤剂+化疗疗效优;中药静脉针剂中扶正药、祛邪药、扶正联合祛邪药对生存期的影响无显著差异.

    作者:方志红;李天苗;詹迎江;许荣忠;徐静;吴建春;李雁 刊期: 2017年第07期

  • PCR法在蒙医用四种动物心脏药材鉴别中的应用

    目的 探讨PCR方法在蒙医常用四种动物心脏药材鉴别中的可行性,在基因层面证明四种动物心脏药材之间有差异.方法 从GenBank数据库下载四种动物心脏的EPO全基因序列,经比对分析,设计四对能准确鉴别蒙医用四种动物心脏药材的PCR引物,采用PCR程序进行扩增,通过琼脂糖凝胶电泳分析条带,对扩增产物进行测序验证结果.结果 蒙医用四种动物心脏药材在四个不同位置出现相应的目的条带,扩增产物经纯化后双向测序,BLAST比对分析,确认实验所得序列为目的条带.结论 PCR方法在蒙医用四种动物心脏药材中的鉴别简便、快速、易行并在DNA分子层面证明四种蒙医用动物心脏药材之间确实存在差异.

    作者:张媛彦;肖云峰;王玉华 刊期: 2017年第07期

  • 补肾益气方药对老年大鼠空间学习记忆能力及相关蛋白表达的影响

    目的 观察补肾方药(左归丸)、益气方药(益气聪明汤)及两方合用(合剂)对老年大鼠血清皮质酮水平、海马长时程增强(LTP)、空间学习记忆能力及突触蛋白Ⅰ(Synapsin-Ⅰ)表达变化的影响.方法 以自然衰老(24月龄)SD雄性大鼠为动物模型,随机分为老年对照组、老年左归组、老年益气组、老年合剂组和老年皮质酮(GC)拮抗组,另设青年对照组(同品系5月龄SD雄性大鼠).采用ELISA法检测大鼠血清皮质酮含量,Morris水迷宫法观察各组大鼠空间学习记忆能力,电生理方法记录各组大鼠在体LTP变化,Western blotting法检测各组大鼠海马组织Synapsin-Ⅰ表达变化,同时观察左归丸、益气聪明汤及合剂对上述指标异常变化的改善作用.结果 与青年对照组相比,老年对照组大鼠的血清皮质酮含量明显升高(P<0.05),空间学习记忆能力显著下降,海马CA1区LTP明显受到抑制(P<0.05),Synapsin-Ⅰ表达明显降低(P<0.05);左归丸、益气聪明汤及合剂均能不同程度改善上述指标的异常变化,但合剂对Synapsin-Ⅰ表达量变化的影响无统计学意义.结论 补肾方药左归丸、益气方药益气聪明汤可增加老年大鼠突触可塑性(LTP)和Synapsin-Ⅰ蛋白表达,进而改善老年大鼠空间学习记忆能力,可能与拮抗高皮质酮对老年大鼠海马神经细胞结构与功能的损伤有关.

    作者:尹芳;孙丽娥;康湘萍;金国琴 刊期: 2017年第07期

  • 《四部医典》与《阿维森纳医典》中取脉部位和季节对脉搏的影响比较探讨

    脉诊是传统医学常用的诊断手法之一,《四部医典》与《阿维森纳医典》是藏族和阿拉伯的医学经典,都记载了丰富的脉学内容并具有对比性.目前国内外尚未见两者对比的文献报道,文中从两者经典中取脉部位和季节对脉搏的影响入手,找出两者经典的取脉部位和季节对脉搏影响的异同点.提出同中找共同规律,异中求发展,保持各自特色,寻求各自发展的观点.

    作者:贡保东知;更藏加;刚焕晨雷 刊期: 2017年第07期

  • 比索洛尔联合丹参滴丸治疗老年人无症状心肌缺血近远期疗效分析

    目的 探讨老年人无症状心肌缺血的适宜治疗方法.方法 选取65岁以上老年人经动态心电图(Holter)诊断为无症状心肌缺血(SMI)患者138例,随机分为观察组48例,对照Ⅰ组45例,对照Ⅱ组45例.观察组服用富马酸比索洛尔2.5 ~5mg,1次/d,加丹参滴丸10丸,3次/d,疗程1年;对照Ⅰ组服用富马酸比索洛尔2.5~5mg,1次/d,疗程1年;对照Ⅱ组服用丹参滴丸10丸,3次/d,疗程1年.3组均于治疗前及治疗后1月、1年作24h Holter 检测,记录S-T段压低发生次数、累计持续时间及药物不良反应等.比较分析3组近、远期疗效.结果 ①观察组治疗后近、远期心肌缺血指标均显著改善,与两对照组比较P<0.05和P<0.01.②两对照组之间比较,近期Ⅰ组心肌缺血指标优于Ⅱ组(P<0.01),远期差异无显著统计学意义.③观察组总疗效近期与Ⅰ组比较P>0.05,而优于Ⅱ组(P<0.01);远期优于两对照组(P<0.05或P<0.01).④两对照组总疗效比较,近期Ⅰ组优于Ⅱ组P<0.01,远期差异无显著统计学意义.⑤疗程中未发生明显的副作用.结论 比索洛尔联合丹参滴丸治疗老年人无症状心肌缺血近远期疗效均十分显著,且安全性良好,值得推广.

    作者:潘勇军;刘红霞 刊期: 2017年第07期

  • 基于雷达图多元评价针灸治疗膝骨性关节炎国内Meta分析文献质量研究

    目的 使用雷达图评估针灸治疗膝骨性关节炎国内Meta分析的文献质量,为临床研究提供直接、客观的证据参考.方法 电子检索数据库CNKI、CBM、维普、万方.从发表年份、研究类型、同质性程度、发表偏倚风险、AMSTAR方法学质量评价、PRISMA发表质量评分6个方面,评价文献质量.用Excel 2003绘制各项目秩数的雷达图,供直观分析.结果 共纳入9篇文献,质量秩平均分7.00,主要存在纳入排除标准、资料的选择偏倚、发表情况、项目注册等问题.结论 针灸治疗膝骨性关节炎国内Meta分析的文献质量普遍不高,希望未来完善方法学质量,提供高质量证据.

    作者:林海雄;王晓彤;陈贵珍;黄枫 刊期: 2017年第07期

  • 复方白花蛇舌草胶囊中莪术挥发油提取工艺的研究

    目的 优化并确定复方白花蛇舌草胶囊中莪术挥发油的佳提取工艺条件.方法 采用L9(34)正交试验设计,考察水蒸气蒸馏法中提取时间、溶剂用量、浸泡时间3个主要因素对莪术挥发油收得率的影响.结果 莪术挥发油佳提取工艺为莪术饮片加10倍量水,浸泡2h,提取6h.结论 该提取工艺收油率高,稳定性可行,可用于复方白花蛇舌草胶囊中莪术挥发油的提取工艺研究.

    作者:王欢;李希;何惠芳;黄嫣;潘一敏;谢进 刊期: 2017年第07期

  • 蜜麸炒炮制法研究概述

    蜜麸作为樟帮和建昌帮独具特色的固体炮制辅料,有着广泛地应用和其他固体辅料所不具有的炮制作用.文章通过文献收集分析,从麸炒的历史沿革,蜜麸炒法的现代工艺,成分变化以及药理作用等方面对蜜麸进行了评价与介绍,为蜜麸特色炮制辅料的进一步研究提供参考.

    作者:童恒力;钟凌云 刊期: 2017年第07期

  • 针刺核心肌群改善脑卒中患者平衡功能的疗效研究

    目的 运用Berg平衡量表及Fugl-Meyer量表平衡部分评估患者平衡功能,探讨核心肌群针刺法治疗脑卒中后患者平衡功能的优越性.方法 采用随机数字表法将符合纳入标准的患者随机分成治疗组和对照组各30例.两组患者均给予相同的康复训练治疗,治疗组采用核心肌群针刺法,对照组接受常规针刺法,疗程为3个月.采用Berg平衡量表及Fugl-Meyer量表平衡部分评估两组患者治疗后2周、4周和3个月的疗效,数据采用spss17.0统计软件分析.结果 治疗2周后,两组患者Berg平衡量表及Fugl-Meyer量表平衡部分评分组间比较,结果均无显著性差异(P>0.05),而治疗4周及3个月后得分比较,经重复测量方差分析,两组间均具有显著性差异(P<0.01).结论 核心肌群针刺法能更有效的改善脑卒中患者的平衡功能.

    作者:陈景杰;陈俊琦;刘刚 刊期: 2017年第07期

  • 广西不同产地金樱子中黄酮类化合物的高效液相色谱法测定

    目的 建立高效液相色谱法测定广西不同产地金樱子药材中的芦丁、橙皮苷、槲皮素、山萘酚4个黄酮类化合物的含量.方法 采用醇提法提取金樱子中的芦丁和橙皮苷,以十八烷基硅烷键合硅胶为固定相,以甲醇-0.05%磷酸水溶液作为流动相,进行梯度洗脱,柱温35℃,流速0.7ml·min-1,检测波长360nm.采用酸解法提取金樱子中的槲皮素和山萘酚,以十八烷基硅烷键合硅胶为固定相,以甲醇-0.1%磷酸作为流动相,进行梯度洗脱,柱温25℃,流速为0.9ml·min-1,检测波长360hm.结果 在醇提法中,芦丁和橙皮苷两个成分的色谱峰均达到基线分离,其进样量分别在0.120~1.200μg,0.200~2.000μg范围内线性关系良好,平均加样回收率分别为100.7%和100.2%.广西不同产地金樱子中芦丁的含量为0.19 ~ 1.12mg·g-1;橙皮苷的含量为0.36 ~ 1.94mg·g-1.在酸解法中,槲皮素和山萘酚两个成分的色谱峰均达到基线分离,其进样量分别在0.070~0.700,0.036 ~0.360μg范围内线性关系良好,平均加样回收率分别为101.0%和98.7%.广西不同产地金樱子中槲皮素的含量为0.20 ~0.47mg·g-1;山萘酚的含量为0.14mg·g-1 ~0.39mg·g-1.结论 该方法简便易行、准确、重复性好,质量控制提供参考.

    作者:辛华;陈玉梅;冯阳 刊期: 2017年第07期

  • 缬草苯丙素类化学成分研究

    目的 研究缬草Valeriana officinalis根及根茎中的苯丙素类化学成分.方法 采用各种柱色谱方法分离纯化,通过理化常数测定和光谱分析鉴定苯丙素类化合物的结构.结果 从缬草20%乙醇洗脱部位中分离并鉴定了10个苯丙素类化合物.结论 化合物均为首次从缬草中分离得到.

    作者:左月明;严欢;张忠立;徐元利;刘电航 刊期: 2017年第07期

  • 礞石滚痰汤对戊四氮致痫小鼠惊厥行为及脑电图的影响

    目的 观察礞石滚痰汤对戊四氮(PTZ)致痫小鼠惊厥行为和额叶皮层电活动的改变.方法 腹腔注射PTZ 45mg/(kg·d)建立癫痫动物模型,将制备成功的小鼠随机分为4组:模型组(B)、礞石滚痰汤低(C)、高(D)剂量组、丙戊酸钠(VPA)组(E),每组各10只,另设空白对照组(A)10只.模型组给予生理盐水灌胃,C组、D组、E组分别给予礞石滚痰汤低、高剂量及丙戊酸钠等不同因素灌胃处理.给药10d后,除空白对照组外,各组小鼠再次腹腔注射PTZ 45mg/(kg·d),观察动物行为的改变,同时利用脑立体定位仪记录各组癫痫小鼠脑部单侧额叶皮质的脑电变化.结果 行为学观察显示,与模型组比较,药物治疗组小鼠癫痫发作的潜伏期延长(P<0.05),1h强直-阵挛发作的次数减少(P<0.05),发作持续时间缩短(P<0.05).脑电图结果显示,与模型组比较,药物治疗组能有效抑制小鼠痫性放电.结论 礞石滚痰汤能有效抑制戊四氮致痫小鼠惊厥行为发作和额叶皮层的异常放电.

    作者:吕珊珊;施所琴;余蕾;郑铮;王福顺 刊期: 2017年第07期

  • 对中医药创新人才培养的若干思考

    中医是中华民族的文化瑰宝,中医药事业发展人才是关键.文章对中医传统教育模式和现代中医教育模式进行了总结,分析了目前培养中医药创新人才存在的问题,提出了中医药创新型人才培养须以继承为基础;中医药教育与人文教育并重;在培养方案上,建议深化课程体系,创新教学方法;在教学制度上,建议完善中医专业教育层次;并开展多种形式的实践活动,培养创新精神,以期为我国的中医药事业培养创新型人才提供参考和指导.

    作者:刘萍;宋杰;王平 刊期: 2017年第07期

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