学术投稿

RFLP基因分型在动态监测乙型肝炎病毒基因变异中的应用

陈燕;王金明

关键词:基因型, HBV, 基因变异
摘要:为明确乙型肝炎病毒(HBV)基因变异在肝炎发病机理中的作用一般需要克隆后测序,动态比较肝炎发病前后的HBV核酸序列变.但是克隆后测序受混合毒株干扰,不能准确反映优势毒株的变化.因而我们研究了应用PCR产物限制性片段长度多态性(RFLP)方法与克隆后测序相给合,探讨其在重型肝炎发生前后HBV S基因变异研究中的价值.
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  • 复方脑得生中黄酮类成分的高效液相色谱指纹图谱研究

    目的 采用高效液相色谱(HPLC)法测定复方脑得生总黄酮的指纹图谱.方法 采用D-101树脂分离纯化脑得生黄酮类成分.色谱柱为Hypersil ODS- C18(4.6 mm×250 mm,5 μm);流动相为甲醇-乙腈-0.2%磷酸水溶液,梯度洗脱;检测波长210 nm;流速1.0 ml*min-1; 柱温25℃;分析时间100 min.结果 指纹图谱中标示了23个共有峰,其峰面积之和大于总峰面积的90%,方法精密度、稳定性、重复性均符合指纹图谱有关规定.利用指纹图谱相似度测试软件,测定11批脑得生总黄酮指纹图谱相似度结果均在0.95~1.00之间.结论 实验结果为脑得生制剂的质量控制提供了依据.

    作者:王光忠;李桥;宋恬;张明;樊文娟;刘焱文 刊期: 2009年第08期

  • 花椒多酚类化合物抗自由基抗氧化损伤的研究

    目的 观察花椒多酚类化合物总提取物(ZPPC)对活性氧自由基·OH、O2-·和肝脂质过氧化损伤的作用.方法 分别利用化学发光法、体外肝匀浆温育Fe2+和H2O2诱导及CCl4肝损伤实验探讨ZPPC对·OH和O2-·的清除作用及检测肝和血浆中超氧化物歧化酶(SOD)活性以及脂质过氧化物丙二醛(MDA)含量.结果 ZPPC能有效地清除活性氧自由基;口服低剂量ZPPC能显著降低CCl4 中毒小鼠血浆MDA,提高SOD活性.结论 适量ZPPC具有抗活性氧自由基和脂质过氧化的作用.

    作者:凌智群;万杰;胡苗苗;岑娇;魏萍 刊期: 2009年第08期

  • 线粒体DNA序列分析鉴定4种蛇粗毒

    目的 利用PCR技术鉴定干燥蛇粗毒的来源.方法 从4种蛇粗毒中提取总DNA--其中包括1份已保存了7年的干燥眼镜蛇粗毒,并分别以从蛇粗毒和肌肉组织中提取的总DNA作为模板用1对线粒体16S rRNA基因引物进行扩增.结果 测序结果提交NCBI,并与GenBank中的同源序列进行比对.结论 序列比对和系统发育分析的结果证实,该扩增的即为正确的蛇粗毒来源物种的线粒体16S rRNA基因序列,该技术有可能推广用于对动物粗毒的来源进行准确和直接地鉴定.

    作者:陈念;赵树进 刊期: 2009年第08期

  • 短柄南蛇藤茎普通粉与超微粉的挥发性成分的对比研究

    目的 研究短柄南蛇藤中的挥发性成分.方法 利用有机溶剂-水蒸气蒸馏提取短柄南蛇藤茎普通粉和超微粉挥发油,采用GC-MS进行测定,结合计算机检索技术对分离化合物进行结构鉴定,应用色谱峰面积归一化法计算各成分的相对百分含量.结果 从短柄南蛇藤茎普通粉和超微粉中分别分离鉴定出9种和21种化学成分,分别占挥发油总量的95.960%和97.518%.短柄南蛇藤叶两种粉末挥发油成分中,含有9种相同成分,其中含量高的为油酸(普通粉56.711%,超微粉56.988%).结论 该文首次对短柄南蛇藤茎普通粉与超微粉的挥发性成分进行对比研究.

    作者:霍昕;丁丽娜;刘建华;高玉琼;刘文炜 刊期: 2009年第08期

  • 柴胡疏肝散治疗非酒精性脂肪肝82例临床观察

    目的 探讨柴胡疏肝散对非酒精性脂肪肝的临床疗效.方法 选择非酒精性脂肪肝患者82例,随机分为两组,治疗组、对照组各41例.治疗组服用柴胡疏肝散,对照组服用东宝肝泰片.评价两组肝功能、血脂变化,比较两组临床疗效.结果 治疗组总有效率90.2%,对照组总有效率70.7%.两组比较,差异有显著性意义(P<0.05).结论 柴胡疏肝散治疗非酒精性脂肪肝有较好疗效,值得临床推广应用.

    作者:潘丰满;黄江荣 刊期: 2009年第08期

  • 黔产水龙骨科药用蕨类植物的种类和分布研究(Ⅲ)

    41 紫柄假瘤蕨又名女金芦、凤尾金星,系水龙骨科植物紫柄假瘤蕨Phymatopteris crenatopinnata(Clarke) Pichi-Serm.的全草.生于海拔1 100~2 600 m的酸性山地山坡林缘、灌丛下、山顶石隙.分布于威宁、赫章、毕节、兴义、安龙、盘县、普安、贵阳等地.性凉,味微苦.具有清热解毒、舒筋活血,止血,消积作用.主治咽喉痛,瘰疬,小儿惊风,风湿骨痛,淋症,吐血,跌打损伤,毒蛇咬伤,狂犬咬伤.

    作者:杨立勇;黄静;杨理明;赵能武;赵俊华;潘炉台 刊期: 2009年第08期

  • 通腑法开通玄府对大鼠脑缺血再灌注损伤血脑屏障及脑组织水通道蛋白4 mRNA的影响

    目的 研究通腑醒神胶囊(简称TFXSJN)通腑法开通玄府对大鼠大脑中动脉阻塞(middle cerebral artery occlusion,简称MCAO)再灌注损伤模型血脑屏障(blood brain barrier,简称BBB)通透性及脑组织水通道蛋白4(Aquaporin-4,简称AQP4)mRNA表达的影响.方法 采用线栓法制作大鼠MCAO模型,2 h后拔线造成缺血再灌注损伤.大鼠处死前2 h经股静脉注射伊文思蓝(Evans Blue,简称EB)并测量各组大鼠1,3 d及7 d时脑EB含量,以及拔线后12 h,1,2,3 d及7 d时间点大鼠神经行为评分、脑组织AQP4mRNA的表达水平.结果 TFXSJN治疗后能明显减轻大鼠在1,2,3d及7 d时的神经功能评分,与模型组相比有明显差异(P<0.05或P<0.01);造模后TFXSJN组、模型组脑EB含量在1,3,7 d时均明显高于假手术组(P<0.05),1 d时开始升高,3 d时达高峰,7 d时有所下降,但仍高于正常,其中3 d时TFXSJN组EB含量明显低于模型组(P<0.05),1,7 d时TFXSJN组EB含量均数亦低于模型组,但无统计学意义(P>0.05);TFXSJN组及模型组大鼠脑组织损伤侧AQP4mRNA的表达在12 h时已经明显升高,与健侧、假手术组及正常组相比均具有显著性差异(P<0.01);模型组在3 d时达高峰,TFXSJN组在2 d时达高峰,3 d时已有所下降,与模型组损伤侧相比有明显差异(P<0.05),但仍高于健侧(P<0.05).7 d时两组损伤侧的AQP4 mRNA表达水平基本恢复正常,与健侧、假手术及正常组相比无明显差异(P>0.05).假手术组在各时点内其损伤侧AQP4 mRNA表达水平与健侧及正常组相比均无明显差异(P>0.05).结论 脑急性缺血再灌注损伤时存在BBB通透性的增高和AQP4 mRNA基因表达的上调.而TFXSJN通腑法开通玄府法能够调节缺血再灌注损伤后BBB通透性增高与AQP4 mRNA表达的失衡,减轻缺血再灌注损伤,从而起到神经保护作用.其调节BBB通透性与AQP4mRNA基因的异常表达可能是通腑法开通玄府治疗缺血性中风的分子机制之一.因此推测玄府与BBB及细胞膜上通道蛋白(如AQP4等)之间可能存在共同的实质内涵.

    作者:胡建芳;余志辉;汪峰;黄培新;尤劲松 刊期: 2009年第08期

  • 高效液相色谱法测定龙胆花中4种活性成分的含量

    目的 建立反相高效液相色谱法同时测定龙胆花中落干酸、獐牙菜苦苷、龙胆苦苷、獐牙菜苷的含量.方法 采用ZORBAX SB-CM18(250 mm×4.6 mm,5 μm)色谱柱;流动相甲醇和水(含0.04%磷酸)为15:85的比例洗脱;检测波长为238 nm;流速1 ml·min-1;柱温30℃.结果 4种成分均达到基线分离,落干酸、獐牙菜苦苷、龙胆苦苷、獐牙菜苷的线性范围分别为0.10~6.25 μg (r 0.999 9),0.076~3.5 μg (r =0.999 8),0.04~5.65 μg(r = 0.999 9)和1.27~7.62 μg (r =0.999 8);平均回收率分别为99.2%(RSD=2.6%,n=5),103.0%(RSD=1.5%,n=5),101.0%(RSD=1.1%,n=5),99.7% (RSD=3.6%,n=5).结论 该方法测定快速,结果准确、可靠.

    作者:卢永昌;林鹏程;王欢 刊期: 2009年第08期

  • 手法联合梅花针叩刺治疗脊源性胸痛临床观察

    脊源性胸痛是指由于颈、胸椎原位病变引起胸部隐痛、紧束痛、闷痛、心律失常等类似冠心病的症状,属于脊柱相关性疾病.资料表明约有1/2胸痛属于脊源性胸痛.本临床观察旨在评价推拿手法联合梅花针叩刺治疗脊源性胸痛的疗效并对其机理作相关的阐述.

    作者:陈军;李静 刊期: 2009年第08期

  • 硼对浙贝母的生长效应研究

    目的 研究硼肥对浙贝母生长的影响.方法 采用4种不同用量的硼肥处理,以产量、品质及种子饱满率、千粒重和发芽率为指标.结果 与对照相比,各处理对产量、品质提高均有显著的作用,以每公顷施爱力硼3.0 kg为适宜,产量提高28.37%,一级品率提高45.77%,贝母素含量增加10.71%;种子质量也显著改善.结论 硼能显著提高浙贝母产量、品质和种子质量.

    作者:江建铭;倪海鹏;徐建中 刊期: 2009年第08期

  • 健脾活血方对2型糖尿病大鼠肝细胞膜胰岛素受体的影响

    目的 探讨健脾活血方对2型糖尿病胰岛素抵抗(Insulin Resistance,IR)大鼠肝细胞膜胰岛素受体(Insulin Receptor,InsR)mRNA表达的改善作用及机理.方法 取Wistar大鼠60只,雌雄各半,采用链脲佐菌素(Streptozotocin,STZ)加高脂饮食造成2型糖尿病胰岛素抵抗大鼠模型.设空白组、模型组、健脾活血方低剂量组、健脾活血方高剂量组和罗格列酮组,以RT-PCR法检测大鼠肝细胞膜InsR mRNA的表达.结果 健脾活血方高剂量组大鼠肝脏InsR mRNA的表达与罗格列酮组相当,与模型组比有显著性差异(P<0.01).结论 健脾活血方能够上调大鼠肝细胞膜InsR mRNA的表达,从而改善胰岛素抵抗.

    作者:郝贤;贾春宝 刊期: 2009年第08期

  • 蒙药阿给炒炭前后亲脂性成分的气相色谱质谱联用解析

    目的 对阿给炒炭前后亲脂性成分的变化进行探讨.方法 取用生阿给、阿给炭,分别加入醋酸乙酯,超声提取后经离心提取上清液进行气相色谱质谱联用(GC-MS)分析,通过NIST标准质谱图库进行检索鉴定各化合物,按峰面积归一化法计算各化合物在挥发油中的百分含量.结果 从中鉴定出 32个化合物,其中有 24个峰有变化.阿给中共有11个阿给炭没有检测出的成分,包括桉油精、D-樟脑、冰片、(1R-cis)- 1-甲基-2-(1-甲基乙烯基)环丁基乙醇、二戊烯、1-羟甲基-7,7-二甲基-双环[2.2.1]庚-2-酮、(-)-匙叶桉油烯醇、3,7,11,15-四甲基-2-十六碳烯-1-醇、异香茅醇、(E)-9-十八碳烯酸和廿一烷.阿给炭中共有11个阿给中没有检测出的成分,包括环己基甲基二甲氧基硅烷、1-十二碳烯、4-羟基-3-甲氧基苦杏仁酸、十二醛、碘代十八烷、2,4-二树丁基苯酚、2-甲基二十烷、十六碳酰胺、(Z)-9-十八烯酸酰胺、软脂酸, 2-羟基-1-羟甲基乙酯和硬脂酸,2-羟基-1-羟甲基乙酯.结论 阿给炒炭前后亲脂性成分种类和含量都有很大变化.

    作者:朴香兰;谢坤;崔箭 刊期: 2009年第08期

  • 液相色谱-质谱联用法鉴定海南枫蓼肠胃康颗粒剂血浆代谢产物

    目的 研究大鼠灌胃枫蓼肠胃康颗粒剂后代谢产物的动态,寻找具有代表性可作为该复方药代动力学研究指标成分的代谢产物.方法 大鼠灌胃枫蓼肠胃康颗粒剂溶液[0.9 g·(100 g)-1],血浆样品经过酶(G1512)水解后,进行色谱分析,通过与对照品比较研究其血浆中代谢产物动态;采用液相色谱-质谱联用仪检测,大气压电喷雾离子源(EPI)负离子条件下进行扫描,对观测到的代谢产物进行结构鉴定.结果 色谱分析的结果表明,枫蓼肠胃康颗粒剂血浆代谢产物中有槲皮素等黄酮类化学成分,同时质谱扫描的结果鉴定出槲皮素(m/z→301.0)的化学结构.结论 可以槲皮素为指标成分研究该复方的药代动力学.

    作者:张俊清;符乃光;陈峰;刘明生 刊期: 2009年第08期

  • 鲜壁虎的高效液相色谱指纹图谱

    目的 建立鲜壁虎的高效液相色谱指纹图谱,探讨不同壁虎间的相似程度.方法 采用高效液相色谱法分析鲜壁虎提取液中相关物质的保留时间和吸收强度,对6种壁虎样品共有峰峰面积进行聚类.结果 选定的色谱条件给出了较好的保留时间分布和吸收强度,建立起鲜壁虎的HPLC指纹图谱,聚类分析给出了相应结果.结论 该HPLC指纹图谱可用于鉴定鲜壁虎,壁虎所含化学成分的多寡等因素与其品种相关.

    作者:李耀辉;盛继文;邵建新;秦骁强;李惠;邓淑娥 刊期: 2009年第08期

  • 从古代皇帝谈中药单方

    笔者读书之余,对中医药学的理论与临床有了更深刻的认识,中医药历来为中华民族所重视,不仅贫民百姓用之,且历代皇帝也与中医药有着千丝万缕的联系.现将历史上的一些传说趣闻奉献给广大读者.

    作者:周少林 刊期: 2009年第08期

  • 玉郎伞总黄酮提取工艺研究

    目的 对玉郎伞总黄酮的几种提取工艺进行比较研究.方法 以总黄酮得率为主要指标,辅以提取时间、提取次数、试剂用量、提取成本、人员及环境保护等因素,对传统热回流提取、微波提取、冷浸提取等3种提取工艺进行比较.结果 微波提取玉郎伞总黄酮的提取率较传统热回流提取和冷浸提取高,且提取时间短、试剂用量少、成本较低.结论 提取玉郎伞总黄酮以微波提取法为佳.

    作者:简洁;林兴;黄仁彬 刊期: 2009年第08期

  • 东当归乙醇提取物对小鼠学习记忆的影响

    目的 观察东当归乙醇提取物对记忆障碍模型小鼠的作用效果.方法 应用氢溴酸东莨菪碱注射液(SCOP)制备小鼠记忆障碍模型,采用避暗实验、跳台实验、水迷宫实验和Y型电迷宫穿梭实验等方法观察不同剂量东当归乙醇提取物对记忆障碍模型小鼠的作用效果.结果 与模型组比较,东当归乙醇提取物中、高浓度组均能改善记忆障碍,作用强度类似于石杉碱甲.结论 东当归乙醇提取物对SCOP诱导的小鼠记忆障碍具有良好的改善作用.

    作者:金莉莉;付美华;杨长青 刊期: 2009年第08期

  • 广西沿海平颏海蛇和青环海蛇提取物的药效学研究

    目的 观察广西沿海平颏海蛇和青环海蛇(1:1)提取物的主要药效学作用.方法 采用佐剂致大鼠关节炎、巴豆油致小鼠耳肿胀、醋酸所致小鼠腹腔毛细血管通透性增高及棉球致大鼠肉芽组织增生、醋酸致小鼠疼痛等模型,观察广西沿海平颏海蛇和青环海蛇(1:1)提取物的药效学作用.结果 广西沿海平颏海蛇和青环海蛇提取物能明显抑制佐剂致大鼠关节炎、亦能明显抑制巴豆油所致的小鼠耳肿胀和醋酸所致小鼠腹腔毛细血管通透性增高,对棉球致大鼠肉芽组织增生有明显抑制作用,并有显著的镇痛作用.结论 广西沿海平颏海蛇和青环海蛇提取物具有抗风湿、抗炎、镇痛作用.

    作者:刘元;李星宇;宋志钊;韦焕英 刊期: 2009年第08期

  • 五味消毒饮合仙方活命饮治疗耳鼻喉科疾病的体会

    五味消毒饮源于<医宗金鉴>,方由金银花、野菊花、紫花地丁、天葵子、蒲公英组成;仙方活命饮出于<校注妇人良方>,方由白芷、贝母、防风、赤芍药、生归尾、甘草节、皂角刺、穿山甲、天花粉、乳香、没药、金银花、陈皮组成.适用于痈疡肿毒初起,热毒壅聚,气滞血瘀.本人在两方基础上随证加减治疗耳鼻喉科急性化脓性中耳炎、鼻前庭疖、扁桃体周围脓肿等诸多疾病,收到较好疗效.

    作者:郭丽娜 刊期: 2009年第08期

  • 痰热清注射液在肺切除术后的应用疗效观察

    行肺切除术患者以老年人居多,其术后易致分泌功能亢进,造成痰液粘稠、积聚,致排痰困难,造成感染机会加大.并且老年人常常合并有糖尿病、冠心病、高血压病等多种疾病,更易引起感染,并成为感染不易控制的一个重要原因.本科自2007-01~12采用痰热清注射液治疗97例肺切除术患者,取得较好的效果,未发现毒副反应.现报告如下.

    作者:祖金池;张珂;李鹤飞 刊期: 2009年第08期

时珍国医国药杂志

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