学术投稿

何首乌ISSR-PCR反应体系的建立与优化

赵振华;严萍;焦旭雯;赵树进

关键词:何首乌, 简单重复序列区间扩增多太性, 反应体系, 建立与优化
摘要:目的 建立和优化ISSR-PCR反应体系.方法 通过单因素实验研究ISSR反应体系中主要成分(模板、Taq DNA聚合酶、Mg2+、引物、dNTPs)以及退火温度对扩增结果的影响.结果 建立了适合何首乌ISSR分析的反应体系和扩增程序,即在25μl反应体系中,内含1×Taq酶配套缓冲液、100ng模板、1.5 U Taq DNA聚合酶、1.5 mmol/L Mg2+、0.6μmol/L引物、0.2 mmol/L dNTPs.扩增程序为94℃预变性5 min;然后是94℃变性45s,(据不同引物的退火温度)复性1 min,72℃延伸1.5 min,共35个循环;72℃延伸7 min,4℃保存.结论 这一优化体系的建立为今后利用ISSR标记技术进行何首乌鉴定及种质资源遗传多样性分析提供了一个标准化程序.
时珍国医国药杂志相关文献
  • 101例脑梗塞恢复期证候规律的临床研究

    目的 探讨脑梗塞恢复期患者的证候分布规律.方法 对101例脑梗塞恢复期患者进行了中风辨证量化诊断调查.结果 该病恢复期证候分布概率以阴虚阳亢高(31.7%),其次为痰证(23.8%)、火热证(20.8%)、风证(14.9%)、血淤证(6.9%)及气虚证(1.9%).证型组合形式复杂,计51个类型.脑梗塞者以2证组合居首,3证次之.结论 用统一中医辨证量化诊断标准探讨脑梗塞恢复期病理病机,并对重视恢复期量化诊断提出了建议与处理办法.

    作者:牛玉国;焦久存;刘文超 刊期: 2008年第03期

  • 黄花倒水莲提取物抗血脂作用的研究

    目的 研究黄花倒水莲提取物的抗血脂作用.方法 采用常规抗血脂作用的方法,测定血液中总胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白的含量.结果 黄花倒水莲水提取液能显著降低血液中总胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白的含量.结论 黄花倒水莲提取物具有降低小鼠血脂作用.

    作者:李良东;李洪亮;范小娜;曾靖 刊期: 2008年第03期

  • 和胃止痛片质量标准的研究

    目的 建立和胃止痛片的质量标准.方法 采用高效液相色谱法测定方中黄连药材中盐酸小檗碱(C20H17NO4·HCl)的含量.并同时对黄连、延胡索、木香进行薄层鉴别.结果 盐酸小檗碱含量测定进样量在0.085~0.850μg有良好的线性,r=0.9999,平均回收率96.7%,RSD为1.53%.TLC定性鉴别阴性无干扰,对照品与供试品溶液斑点对应整齐、清晰.结论 该检测方法方便,准确,重现性好,可用于该制剂的质量控制.

    作者:冷桂华 刊期: 2008年第03期

  • 西北燥证动物模型设想

    根据地域特点提出西北燥证动物模型构想,期望建立合理的实验方案、指标体系以及判定方法,其目的 建立不同证候动物模型的诊断标准,进一步深化病证结合模型研究,为新疆少数民族地区提供同病异治、异病同治的依据.

    作者:何佳;李鹏;周铭心 刊期: 2008年第03期

  • 关于教学效果的风险评估模型比较研究

    教学效果评估问题是当今教育教学管理中的首要问题之一.文章对教学效果的风险评估模型进行了系统的分析与总结,提出模糊综合评判方法适于教学效果评估问题,能够较为客观地描述教学过程中的影响因素与总体状况,建议在教学评估的具体实践中推广使用.

    作者:蔡宇;张荣华 刊期: 2008年第03期

  • 甘肃蜂胶中化学成分的气相色谱-质谱联用分析

    目的 为进一步研究甘肃产蜂胶提供参考.方法 采用气相色谱-质谱联用(GC-MS)法对甘肃产蜂胶索氏提取法所得乙醚提取物进行分析.结果 甘肃蜂胶醚提取物含主要成分31个.结论 甘肃蜂胶乙醚-索氏提取法所得提取物主要是挥发油、脂肪酸及小分子的酚性物质等化合物.

    作者:王小平;林励;潘建国;林芳花;卢占列 刊期: 2008年第03期

  • 高效液相色谱法测定蒙药粘毛黄芩中黄芩苷的含量

    目的 采用高效液相色谱法测定粘毛黄芩中黄芩苷含量.方法 色谱条件为:采用C18柱,以甲醇-1%冰醋酸的水溶液(54:46)为流动相,检测波长280 nm.结果 平均回收率98.7%,RSD为0.96%.结论 此法简便、灵敏、快速、可靠、重复性好,可用于粘毛黄芩药材的质量控制.

    作者:张金花;李占军;布仁;乔俊缠;薛培凤 刊期: 2008年第03期

  • 气相色谱-质谱-选择离子检测联用法测定薄荷通吸入剂主要成分的含量

    目的 建立测定薄荷通吸入剂主要成分含量的气相色谱-质谱联用方法(GC-MS法).方法 以环己酮、萘为双内标物,采用气相色谱-质谱-选择离子检测(GC-MS/SIM)联用方法中对薄荷通吸入剂主要成分进行含量测定.SPB-1701(30m×0.25mm×0.25μm)石英毛细管柱;80~250℃程序升温,选择m/z 43,95,71,120离子碎片分别对桉油精、樟脑、薄荷脑和水杨酸甲酯含量进行检测.结果 桉油精、樟脑、薄荷脑、水杨酸甲酯线性范围分别为0.24~97μg/ml(r=1.0000)、5.00~202μg/ml(r=0.9999)、2.30~947μg/ml(r=0.9998)、0.68~271μg/ml(r=1.0000);检测限分别为2.4,5.0,2.3,6.8ng/ml;平均回收率为98%~101%,相对标准偏差为1.9%~2.5%.结论 该方法快速、准确、灵敏度高、重现性好,可用于同类产品质量控制.

    作者:张晓珊;杨晶晶;张改荣 刊期: 2008年第03期

  • 高效液相色谱法测定五味子浸膏中五味子醇甲与五味子乙素的含量

    目的 建立五味子浸膏中五味子醇甲和五味子乙素含量测定方法.方法 高效液相色谱法,采用Lichrosphere C18柱(4.6mm×250mm,5μm);流动相为水(A)-甲醇(B)梯度洗脱(0~15min,60~70%B;15~25min,70%~80%B;25~35min,80~75%B;35~45min,75%B).流速1.0ml·min-1,柱温30℃,检测波长254nm.结果 五味子醇甲和五味子乙素分别在0.1824~1.6416μg(r=1.0003)和0.1896~1.7064μg(r=0.9999)范围内线性关系良好,平均加样回收率分别为98.02%和98.42%.结论 该法简便、准确、专属性强,可用于五味子浸膏的质量控制.

    作者:宣东平;窦志华;尤蝠仪;曹卫菊;李伟红;吴陈军 刊期: 2008年第03期

  • 超临界二氧化碳萃取灵芝总三萜的工艺研究

    目的 探讨超临界CO2萃取灵芝总三萜的优化工艺条件.方法 采用响应曲面法考察萃取压力、萃取温度、夹带剂用量对灵芝总三萜萃取率的影响.结果 优化萃取条件为:萃取压力30MPa,萃取温度51℃,夹带剂用量2.2ml/g.结论 该方法简便准确,预测性好.

    作者:杨军;余德顺;罗俊;罗喜荣 刊期: 2008年第03期

  • 荠菜总黄酮多囊脂质体的制备和体外释放行为研究

    目的 研究了荠菜总黄酮多囊脂质体的制备和体外释放行为的研究.方法 采用单因素实验,以芦丁为对照品,用吸光光度法测定荠菜总黄酮的含量,复乳法制备多囊脂质体,并对多囊脂质体的处方进行了筛选,同时,对荠菜总黄酮在不同释放介质中体外释放行为进行研究.结果 药材比为1:100,EPC:TO:Chol的质量比为7:2:1和初乳与4.0%的葡萄糖溶液的体积比为1:2.5时,MVLs的包封率优,对其体外释放行为研究发现,荠菜总黄酮在多囊脂质体中具有一定的缓释效应,并受释放介质pH的影响.结论 荠菜总黄酮多囊脂质体具有一定的缓释效果.

    作者:梁亦龙;戴传云;刘火安;舒坤贤 刊期: 2008年第03期

  • 6种常见中草药中重金属元素铅与镉的测定

    目的 测定常用6种中草药(板蓝根,黄芪,当归,党参,羌活,地黄)中重金属Pb、Cd含量.方法 采用原子吸收分光光度计法.结果 6种中草药重金属Pb,Cd含量依次为:板蓝根Pb 5.25 mg/kg,Cd 0.253 mg/kg;黄芪含Pb 2.25 mg/kg,Cd 0.314 mg/kg;当归Pb 1.25 mg/kg,Cd 0.137 mg/kg;党参Pb 1.50 mg/kg,Cd 0.130 mg/kg;羌活Pb 1.25 mg/kg,Cd0.090 mg/kg;地黄Pb 3.75 mg/kg,Cd 0.234 mg/kg.结论 6种中草药中都含有一定的重金属Pb,Cd,板蓝根重金属含量高,其次是地黄和黄芪,其余几种均在国家允许范围内.

    作者:雷泞菲;彭书明;李凛;陶向;冯宗徽 刊期: 2008年第03期

  • 复方荔枝草颗粒剂防治感染性结石的可行性探讨

    感染性结石是由于持续性或复发性尿路感染引起的尿路结石,在治疗前后常采用抗生素来控制尿路感染,但因抗生素易产生耐药性等缺点,疗效并不理想,复方荔枝草颗粒剂临床上用于尿路感染有确切疗效,文章分析其中各组成成分,探讨其作为感染性结石防治的一种辅助治疗方法的可行性.

    作者:黄庆;方芸 刊期: 2008年第03期

  • 湘蕾金银花佳采收时间和干燥方法的研究

    目的 确定湘蕾金银花佳采收时间和干燥方法.方法 采用高效液相色谱法测定花蕾的绿原酸含量.结果 不同时间采收的湘蕾金银花花蕾绿原酸的含量以随着花蕾增长而下降;一天中不同时间采收的花蕾绿原酸含量以清晨为高;不同干燥方法湘蕾金银花花蕾绿原酸的含量以手工炒干法高,直接烘干法低.结论 湘蕾金银花佳采收时间宜在6月27日左右;一天中以清晨采收为佳;佳干燥方法为杀青烘干法.

    作者:汪冶;肖聪颖;梅树模;郑丽 刊期: 2008年第03期

  • 薏苡仁提取物对围手术期宫颈癌组织Langerhans细胞的影响

    目的 观察薏苡仁提取物(康莱特)注射液对围手术期癌组织Langerhans细胞(LC)的影响.方法 61例宫颈癌患者按照自愿的原则随机分为治疗组32例和对照组29例,治疗组患者围手术期采用康莱特注射液治疗,采用免疫组化S-P法观察手术切除宫颈癌组织内LC的变化及形态特征,并与29例对照组进行比较.结果 与对照组比较,治疗组宫颈癌组织内LC显著增多(P<0.05),且与癌细胞密切接触,反映对癌细胞杀伤作用增强.随着肿瘤分化程度降低,浸润汉度增加,LC及间质淋巴细胞数量明显减少(P<0.01),显示肿瘤对机体免疫功能的损害.结论 薏苡仁提取物具有抗癌作用,可改善宫颈癌患者围手术期机体的免疫功能,提高手术治愈率,延长生存期.

    作者:高凤兰 刊期: 2008年第03期

  • 空心莲子草的高效液相色谱指纹图谱研究

    目的 建立空心莲子草药材的指纹图谱分析方法,探讨不同国家和地区空心莲子草药材的品质差异.方法 采用反相高效液相色谱法,Alltima C18色谱柱(250mm×4.6mm,5μm),流动相为乙腈-0.12%磷酸水溶液系统,线性梯度洗脱,检测波长345mm,进样量为10μl.结果 建立了空心莲子草药材的HPLC指纹图谱,确立了空心莲子草药材指纹图谱中的17个共有峰,计算了12批空心莲子草药材指纹图谱与对照图谱的相似度.结论 所建立的HPLC指纹图谱有很好的精密度、重复性和稳定性,能够用于空心莲子草药材的质量控制.

    作者:范文乾;熊梦晓;李琼娅;艾伦强;潘晓云;刘焱文 刊期: 2008年第03期

  • 当归对血虚小鼠抗疲劳作用的研究

    目的 研究当归对血虚小鼠的抗疲劳作用.方法 通过环磷酰胺造小鼠血虚模型,给予当归水煎液2周后,对血虚小鼠体重、外周血象、游泳时间、运动后血乳酸(LAC)和尿素氮(BUN)的影响.结果 当归水煎液能明显增加血虚小鼠体重、升高红细胞总数(RBC)、白细胞总数(WBC)和血红蛋白含量(HGB);6g/(kg·d)的当归水煎液组还能显著延长游泳时间、降低运动后的LAC及BUN.结论 当归水煎液能提高血虚小鼠的抗疲劳作用.

    作者:龚梦鹃;刘新民;王立为 刊期: 2008年第03期

  • 舒肝顺气丸质量标准研究

    目的 建立舒肝顺气丸的质量标准.方法 采用薄层色谱(TLC)、显微镜对处方中的药材进行了鉴别;用高效液相色谱(HPLC)测定制剂中的厚朴酚与和厚朴酚的含量.结果 可鉴别出白芍、枳实、木香、延胡索、佛手、甘草、香附;厚朴酚与和厚朴酚分别在0.1096~0.8220,0.1176~0.8820μg内色谱峰面积与含量呈线性关系(r=0.9997,0.9996),平均回收率为96.1%.结论 所建方法可行,专属性、重复性好,可用于舒肝顺气丸的质量控制.

    作者:林於;刘新 刊期: 2008年第03期

  • 医院服务价值模型研究

    目的 从患者角度评价医院服务价值.方法 应用层次分析和BP神经网络法.结果 建立评价医院服务价值模型.结论 所建立的模型能够客观和全面地评价医院服务价值.

    作者:谢波;陈晔;孙晓生 刊期: 2008年第03期

  • 紫外分光光度法优选黄芩总黄酮的提取工艺研究

    目的 探讨黄芩中总黄酮提取工艺中的提取溶荆用量、提取时间、提取次数对黄芩中总黄酮得率的影响.方法 采用紫外分光光度法,测定不同提取溶剂用量、不同提取时间、不同提取次数所得到总黄酮含量.结果 通过正交实验.找到黄芩中总黄酮提取的佳提取工艺条件为:30%乙醇提取3次,剂量12,10,10倍,时间2,1,1 h.结论 该研究可以为工厂化黄芩总黄酮的生产过程制定合理的提取工艺提供理论依据,对生产具有一定的指导意义.

    作者:黄志勤;朱贤森;程齐来;杨庆春 刊期: 2008年第03期

时珍国医国药杂志

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主管:湖北省黄石市卫生局

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