学术投稿

考马斯亮蓝法蛋白定量标准曲线稳定性观察

陈晓梅;刘雅文;程熠;孙静;李勇;王韶

关键词:考马斯亮蓝法, 蛋白定量, 标准曲线, 标准参照, 定量技术方法, 生物医学研究, 牛血清白蛋白, 凯氏定氮法, 准确与否, 限制条件, 可靠程度, 基础数据, 含量变化, 定量结果, 存放时间, 总蛋白, 稳定性, 适用面, 兼容性, 样品
摘要:蛋白定量结果是生物医学研究中的基础数据,其准确与否关系到研究结果的可靠程度.样品总蛋白定量技术方法[1,2]由于限制条件较多,操作复杂,适用面较窄,其中凯氏定氮法是目前常用的标准参照蛋白自身定量技术 .本文选择冻干的牛血清白蛋白,将其溶解后,在4 ℃条件下50 d内作为定量用标准参照蛋白,观察不同存放时间内标准参照蛋白含量变化和标准曲线的兼容性和稳定性[3].结果报告如下.
中国公共卫生杂志相关文献
  • 热毒平抗脂质过氧化及对腹腔巨噬细胞凋亡影响

    目的研究热毒平抗脂质过氧化以及对腹腔巨噬细胞(macrophage,M φ)凋亡的影响,为热毒平治疗重症中暑提供实验依据.方法昆明种小鼠50只,随机分为常温对照组、热毒平组、西黄芪胶组、生理盐水组和中暑模型组.在干球温度(34.5±0.5)℃,相对湿度(60±5)%的条件下建立中暑模型,测定用药组和对照组小鼠肝组织超氧化物歧化酶(SOD)活力、丙二醛(MDA)含量;提取动物腹腔巨噬细胞DNA并行凝胶电泳;用流式细胞仪检测各组小鼠腹腔M φ凋亡情况.结果热毒平均小鼠肝组织SOD活力升高,MDA含量降低;DNA电泳图中热毒平组无梯状条带;热毒平组腹腔M φ凋亡百分率比其他组低且接近正常组.结论热毒平能有效的防止高温所致的脂质过氧化、减少其腹腔M φ凋亡,对重症中暑有着良好的治疗作用.

    作者:聂红;王通;李文;杨光;罗炳德 刊期: 2006年第03期

  • 沙棘油和亚硒酸钠对汞中毒大鼠的拮抗作用

    目的探讨在体一次染毒条件下氯化汞对大鼠肝肾脏毒性作用并观察沙棘油和亚硒酸钠预处理对汞毒性的影响.方法将Wistar大鼠随机分成对照组、单纯染汞组、沙棘油和亚硒酸钠干预组.各组经染毒处理12 h后收集大鼠12 h尿液,采集血液、切取肝脏和肾皮质样品.测定肝脏、肾皮质和尿汞含量;尿N-乙酰-β-D-氨基葡萄苷酶(NAG)、碱性磷酸酶(ALP)、乳酸脱氢酶(LDH)活性和尿蛋白、血清尿素氮(BUN)含量.结果沙棘油干预组肝汞、肾皮质汞、尿NAG、尿ALP活性和BUN含量显著低于单纯染汞组.亚硒酸钠干预组肝汞含量显著高于单纯染汞组.而肾皮质汞、尿汞含量和尿NAG、ALP、LDH活性、尿蛋白、BUN含量则显著低于单纯染汞组.结论沙棘油和亚硒酸钠对汞的肝、肾脏毒性具有一定拮抗作用.

    作者:王家骏;徐兆发;贺安宁;杨敬华;徐斌 刊期: 2006年第03期

  • 脑膜炎双球菌的PCR法快速检测

    流行性脑脊髓膜炎(简称流脑)是由脑膜炎双球菌(Neisseria mengingitides, Nm)通过呼吸道传播所引起的化脓性感染[1],起病急,病情进展迅速,如果治疗不及时则很快引起死亡,而及时治疗有赖于发病早期的及时诊断.目前, 脑膜炎双球菌的病原学检查方法主要有培养法、涂片染色法、抗原检测法,这些方法均存在操作繁琐、耗时等不足.

    作者:张文艳;王海;胡中旺;张秀兰;赵宗豪;吴英 刊期: 2006年第03期

  • 饮用水细菌总数及相关指标关系

    目的研究影响饮用水中细菌总数测定的实验条件及理化指标.方法对我国北方某市市区配水管网中总余氯、自由余氯、浊度、可同化有机碳(assimilable organic carbon,AOC)等水质指标进行监测.结果采用R2A培养基(R2A Agar medium)及较长的培养时间得到的细菌总数,能较好地反映饮用水中微生物的水平;余氯与细菌总数有较好的负相关关系;浊度与细菌总数之间存在较好的正相关关系,而AOC与细菌总数的比较,二者似乎无相关关系.结论在水质条件相对较为复杂的小区中,影响水质的因素很多,不能用单一指标代表,要综合考虑各种因素.

    作者:吴卿;赵新华 刊期: 2006年第03期

  • 呼吸系统疾病住院病例流行病学分析

    目的观察1996~2003年间呼吸系统疾病住院病例构成特点及其变化趋势.方法采用回顾性调查方法,对同济医学院附属协和医院呼吸内科住院病例进行分析.结果 8年间慢性支气管炎所占比例逐步下降,其构成比由27.37%(1996年)降至15.02%(2003年),肺癌、肺炎、肺结核构成比分别从9.22%,11.55%,3.71%上升至13.88%,18.02%,6.66%.气胸、肺结核、结核性胸膜炎以<40岁中青年为主,随年龄增长,该3种疾病的构成比逐步下降;慢性支气管炎在>50岁中老年中明显上升;肺癌随年龄增长构成比缓慢增高,以60~69岁年龄段为高.结论 1996~2003年间,住院病例的构成发生变化,逐步演变为以慢性支气管炎、肺癌、肺炎3种疾病共同为主;肺结核的构成比呈现上升趋势;疾病构成与年龄相关.

    作者:马万里;叶红;辛建保;陶晓南;李元桂;白明 刊期: 2006年第03期

  • 激素类除草剂二氯喹啉酸遗传毒性比较

    目的探讨激素类除草剂二氯喹啉酸的遗传毒性.方法应用鼠伤寒沙门菌体外回复突变试验(Ames test)和彗星实验(Comet assay)对激素类除草剂二氯喹啉酸的遗传毒性进行比较研究.结果 Ames试验中TA97,TA98,TA100菌株无论代谢活化或非代谢活化,皆为阳性结果,而TA102菌株则为阴性结果.彗星实验在500,1 000,2 000 mg/(kg·bw)浓度下,二氯喹啉酸对小鼠骨髓细胞的DNA损伤与阴性对照组比较差异有统计学意义(P<0.01),且呈剂量-效应关系.结论激素类除草剂二氯喹啉酸具有一定的遗传毒性.

    作者:曹向宇;惠秀娟;马汐平;王捷 刊期: 2006年第03期

  • 泌乳乳腺作为真核基因的有效表达系统研究

    目的探讨泌乳腺组织作为真核基因快速表达系统的可行性.方法以蚓激酶(LK)作为目的标志基因,分别构建了在泛组织嗜性的巨细胞病毒(CMV)立即早期启动子、逆转录病毒长末端重复序列(LTR)和组织特异性的beta-酪蛋白启动子调控下的3种真核表达载体pICLK、pLLKSN和pIbLK.制备各重组质粒后,以泌乳期羊乳腺作为支持系统,在处于稳定泌乳阶段分别注射不同量的重组质粒于山羊乳腺组织中.在注射后不同时间采集奶汁,检测纤溶活性.结果蚓激酶的不同重组质粒在注射到乳腺组织之后迅速得到表达,注射后6~9 h蚓激酶表达量达到高峰,并可持续至72 h以上;不同表达载体间表达量略有变化,但差异无统计学意义.结论泌乳乳腺组织可以作为真核基因的1种快速有效的表达系统.

    作者:周雪艳;张守峰;姚伟;任文陟;张菲;扈荣良 刊期: 2006年第03期

  • 新型农村合作医疗综合评价指标体系测评分析

    目的对新型农村合作医疗综合评价指标体系分析和验证.方法采用相关和多元线性回归分析检验综合评价指标与内部指标间联系、信度分析和主成分因素分析,对综合评价指标体系进行评价.结果新型农村合作医疗综合评价指标同内部指标具有正相关,内部指标具有独立性,总体指标克朗巴赫α系数为0.8889,指标体系内容效度极好,主成分分析表明指标体系具有较好的结构效度.结论新型农村合作医疗综合评价指标体系的建立具有合理性、科学性和较好的信度与效度.

    作者:杜进林;李颖琰;王禄生 刊期: 2006年第03期

  • 丙烯腈对鼠胚胎脊髓神经细胞增殖分化的影响

    目的研究丙烯腈(ACN)对大鼠胚胎脊髓神经细胞增殖分化的影响.方法 16 d的大鼠胚胎脊髓组织经取材、分离、消化后作原代细胞培养,加入不同浓度的ACN 0.01,0.1,1.0,10.0,50.0,100.0,200.0 μg/ml,从细胞形态学及细胞计数角度观察细胞生长与分化过程,同时测定蛋白质含量、丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性并与对照组进行比较.结果各组ACN明显抑制胚胎脊髓神经细胞的增殖和分化,集落形成率明显减少,细胞体积小;其半数分化抑制剂量(ICD50)为29 μg/ml,半数存活抑制剂量(ICV50)为42 μg/ml,均显示剂量-效应关系.结论 ACN能抑制胚胎脊髓神经细胞增殖和分化,可能与其能抑制蛋白质合成,并引起脂质过氧化有关.

    作者:端礼荣;邢光伟;王卉芳 刊期: 2006年第03期

  • 科学构建区域性应急医疗救治体系

    在健全公共卫生体系的系统工程中,科学构建区域性突发公共卫生事件应急医疗救治体系,对提高政府应对突发事件能力至关重要.本文结合广西自治区实际,探讨如何科学构建区域性应急体系.

    作者:韦波;杨起;刘德诚 刊期: 2006年第03期

  • 育龄妇女生殖道感染就医的影响因素

    目的研究自述有生殖道感染的妇女就医行为及其利用生殖健康服务的影响因素.方法采用分层、三阶段与规模(育龄妇女人数)成正比的抽样方法获得调查对象,调查员入户面对面进行问卷调查.结果 39.2%的妇女自述有一种生殖道感染症状,12.8%的妇女自述有3种及以上症状,23.1%有生殖道感染症状的妇女曾到医疗机构就诊.因素分析显示,生殖道感染知识对妇女就医行为有重要影响,但妇女的生殖道感染知识十分欠缺.另外,未婚妇女的就医率显著低于已婚妇女,但经济水平和文化程度对妇女患病后的服务利用影响不明显.结论当前育龄妇女生殖道感染患病率较高,但生殖健康服务利用率却较低.

    作者:赵凤敏;郭素芳;吴匡时;崔颖;李伯华 刊期: 2006年第03期

  • 被动吸烟对仔鼠学习记忆功能影响及干预效应

    目的研究小鼠孕期被动吸烟对其子代学习、记忆功能的影响,并探讨不同抗氧化剂对吸烟危害的改善作用.方法建立被动吸烟模型,设立对照组、吸烟组和抗氧化剂干预组;吸烟染毒3个月后产子代,利用小鼠在方型水迷宫中学习、记忆能力的变化,通过组间对照评价吸烟组和抗氧化剂干预组的不同影响结果,及干预在子代中的改善作用.结果各干预组子代的游泳成绩均随学习时间的增加而提高,吸烟组子代提高的速度慢;水迷宫测试第1,4,8和12 d,吸烟组小鼠子代的潜伏期明显高于对照组子代;测试12 d时,维生素E(VE)干预组潜伏期与吸烟组比较明显降低;由达标后的结果分析可见,被动吸烟组子代小鼠的错误次数与对照组比较有增高趋势.结论胚胎期被动吸烟使小鼠学习记忆功能下降,通过抗氧化剂的干预可能得到改善.

    作者:姜丽娜;栗学军;李君文;刘基芳 刊期: 2006年第03期

  • 2型糖尿病影响因素非条件Logistic回归分析

    目的探讨深圳市40岁以上人群2型糖尿病的危险因素,为制定相关干预政策及措施提供依据.方法采用病例对照研究方法,对研究因素进行单因素及多因素非条件Logistic回归分析.结果糖尿病家族史、高血压、高血脂、工作压力是2型糖尿病的危险因素;而文化程度、运动锻炼是保护因素.结论在社区人群中,培养健康的生活方式,早期、及时地控制血压、血脂和体重是预防2型糖尿病发生的重要措施.

    作者:刘茂玲;吴少庭;卢祖洵 刊期: 2006年第03期

  • 松花江汞污染治理后儿童生长发育及智力调查

    目的了解松花江汞污染综合治理后儿童生长发育及智力发展状况.方法对松花江汞污染综合治理地区与无污染的对照地区环境中的汞含量进行测定;选择2个地区10~13岁儿童测量其发汞含量并进行儿童生长发育指标身高、体重、坐高、胸围、背肌力、握力的测定;用联合型-瑞文测验的方法进行智商测定.结果汞污染综合治理地区与对照地区水、土壤以及水生动物鱼类的汞含量均低于国家标准且2个地区间差异无统计学意义;2个地区稻米汞含量虽差异有统计学意义,但都远低于国家标准;2个地区儿童的发汞含量、反映儿童生长发育状况的各项指标及智商差异均无统计学意义.结论松花江汞污染综合治理后儿童的生长发育和智力发展已趋于正常水平.

    作者:李静;叶琳;陈强;胡梦林;金明华;李娟 刊期: 2006年第03期

  • 世界健康调查项目中国预调查重测信度分析

    目的评估世界健康调查(WHS)问卷在我国国情条件下应用的可靠性.方法运用Cohen's Kappa和谐相关系数和类内相关系数分别对WHS问卷中的分类测量、等级测量和定量测量的重测信度进行了计算,并采用方差分析的方法对客观性条目和主观性条目的重测信度进行比较.结果在客观性条目和主观性条目中的自报问题均显示出了较高的信度,二者κ>0.9的条目分别超过90%和80%.客观性条目、自报问题、情景问题的信度的95% CI分别为(0.9262,0.9617)、(0.7742,0.8178)、(0.6923,0.7333),三者差异有统计学意义.结论 WHS问卷在收集事实性数据方面具有很高的可靠性,但在情景问题方面的信度有待于提高.

    作者:曹阳;陈洁;曹建文;钱军程 刊期: 2006年第03期

  • 大连市城区小学生血铅水平现况调查

    随着城市化和工业化进程的加快,铅污染问题越来越突出,铅中毒成为影响儿童健康的重大公共卫生问题,已经引起全社会的普遍重视.为了解大连市区小学生的血铅水平及铅中毒流行率,为儿童铅中毒防治工作提供科学依据,我们于2004年9月~10月间采用随机整群抽样的方法对大连市甘井子区、西岗区各3所学校共1010名3~5年级小学生的血铅水平进行了调查.

    作者:朱秀芬;刘丹;王丽;江波 刊期: 2006年第03期

  • 室内空气中三氯乙烯气相色谱法测定

    三氯乙烯是一种无色液体,广泛应用于有机合成、电子工业和洗衣业,属于中等毒性物质,对中枢神经有强烈抑制和麻醉作用,对心、肝、肾也有毒性作用[1,2].我国现在尚无室内空气中三氯乙烯的卫生标准,本文参考国内外的有关资料[3,4],用采气袋采样,直接进样,气相色谱检测室内空气中三氯乙烯.现报告如下.

    作者:张玉黔;张立红;徐志洪;赵晶;栾燕 刊期: 2006年第03期

  • 云南省弥渡县新型农村合作医疗补偿机制研究

    目的调查云南省弥渡县新型农村合作医疗运行2年来的补偿机制,了解补偿方案与具体补偿情况的关系,为新型农村合作医疗的推广提供借鉴.方法收集县、乡两级合作医疗管理机构有关补偿情况的记录,并利用现有资料、通过个人访谈及集中小组访谈等方法了解试点的基本情况、补偿情况以及卫生服务情况等.结果 (1)实际补偿水平(29.32%)高于全国平均水平;(2)群众看病首选县级医疗机构,占全部参加合作医疗并就诊人群的60%以上;(3)补偿基金报销基本正常.结论应鼓励群众参与,加大对乡镇卫生院的投入,引导村民到乡镇级医疗机构就医,以合理有效地利用卫生资源.

    作者:唐松源;李迅;崔文龙;张开宁 刊期: 2006年第03期

  • 青蒿琥酯对内毒素信号转导通路中CD14的影响

    目的探讨中暑内毒素血症时,青蒿琥酯对内毒素信号通路中CD14表达的影响.方法昆明鼠随机分为常温组、高温组、生理盐水组和青蒿琥酯组(连续5d按60 mg/kg腹腔注射青蒿琥酯),用反转录PCR(RT-PCR)技术分别检测常温下和热暴露后各级小鼠腹腔巨噬细胞内CD14 mRNA的变化,酶联免疫法(ELISA)检测血浆中肿瘤坏死因子α(TNF-α)的含量.结果与常温组比较,高温组和生理盐水组CD14mRNA的表达和TNF-α的含量均显著升高(P<0.01),但青蒿琥酯组CD14 mRNA的表达明显降低,TNF-α的含量轻度升高.结论青蒿琥酯能显著降低内毒素信号转导通路上CD14的表达,减少TNF-α的分泌,可能是其抗中暑内毒素血症的机制之一.

    作者:张培;陈雪梅;罗炳德;谭庆;邹飞;万为人;郭进强 刊期: 2006年第03期

  • 唾液中钙的火焰原子吸收光谱法测定

    钙是人体必需的常量元素,它以各种形式存在于体液中.有研究表明,唾液作为牙齿的外环境,唾液中钙含量的高低,与龋病患病率密切相关[1].为了解儿童乳牙龋齿的发生发展规律,为龋病的防治提供参考,我们应用原子吸收光谱法,通过选择佳分析条件,使用0.1%的氯化镧作为释放剂,建立了用火焰原子吸收光谱法直接测定唾液中钙的方法,并进行了质量控制.

    作者:李凭建;郑力行 刊期: 2006年第03期

中国公共卫生杂志

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