明江华；周庞虎；周剑鹏
目的:针对目前体外培养成骨细胞方法的不足,建立一种理想的原代培养成骨细胞的方法,为骨替代材料的研究提供成骨细胞.方法:本实验用新生1～2 d大鼠颅盖骨,采用多次酶消化法进行细胞体外培养. 倒置显微镜观察细胞形态,并对其碱性磷酸酶(ALP)活性及矿化能力进行鉴定. 结果:所培养细胞具有体内成骨细胞的生物学行为.结论:本实验原代培养成骨细胞的方法切实可行,为体外研究提供了一种客观而有效的实验手段.
作者：陈筠；尹美珍；李世普 刊期： 2005年第05期
目的:探讨流式细胞术中细胞周期常规分析方法的误区和潜在的合理分析方法.方法:设立空白对照,观察MOLT-4细胞经0.1 μmol·L-1喜树碱诱导细胞周期阻滞7 h后细胞周期变化情况,并从常规DNA直方图分析法(方法一)和本实验意外发现的方法(方法二)进行细胞周期分析,并评价两种方法获得的结果.结果:方法一分析的细胞周期分布结果G0/G1期、S期和G2/M期分别为(65.42±4.73)%、(25.01±2.58)%、(9.57±1.96)%,方法二分析结果分别为(31.51±2.13)%、(59.32±5.92)%、(9.17±1.61)%.两种分析方法获得的结果存在显著差异(n=8,P<0.01).结论:流式细胞术常规细胞周期分析方法存在严重的误区.一种新的基于细胞周期特异性标志物的定量技术或形态学方法应用于细胞周期的分析较合理.
作者：钟以胜；潘长穿；金昌男；熊共鹏；沈关心 刊期： 2005年第05期
目的:探讨单侧隐睾鼠双侧睾丸生殖细胞和 Sertoli 细胞变化和还原型谷胱甘肽(GSH)对睾丸的保护作用.方法:30只SD雄性大鼠分为对照组(A组), 隐睾组 (B组),隐睾加 GSH组 (C组),每组各 10只.采用化学比色法测定双侧睾丸GSH、丙二醛(MDA)含量;生物素-dUTP/酶标亲和素法检测睾丸生殖细胞的凋亡;透射电镜观察Sertoli细胞的超微结构.结果:术后2周,与A组比较,B组双侧睾丸GSH明显降低,MDA和细胞凋亡明显增加(P<0.01), Sertoli细胞线粒体和滑面内质网扩张.C组这种变化则明显减轻(P<0.01),与A组比较无差别 (P>0.05).结论:外源性GSH对单侧隐睾鼠双侧睾丸生殖细胞和Sertoli细胞有保护作用.
作者：朱保平；郑新民；李世文；胡礼泉；张国辉 刊期： 2005年第05期
本文总结了近年来在结直肠癌癌变机理、早期诊断、综合治疗、化学预防方面的研究新动向.提出基础结合临床、将基础研究成果快速转化为指导临床实践服务,是提高结直肠癌诊治水平的必由之路.
作者：李雁；杨国梁；袁宏银 刊期： 2005年第05期
目的:制备抗人hER单克隆抗体. 方法:用原核表达的人雌激素受体(hER)重组蛋白为抗原,免疫BalB/c小鼠,取免疫小鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤SP2/0细胞,进行细胞融合.结果:通过ELISA和免疫组织化学法筛选,有限稀释克隆化,得到一株分泌抗hER单克隆抗体的杂交瘤细胞株(2B8/1C5/2C3),经鉴定2B8/1C5/2C3分泌的单克隆抗体为IgG2a,利用Western Blot分析,显示在23 kU处针对hER重组蛋白位置有一特异性条带;利用乳腺癌组织进行的免疫组织化学染色结果显示该株细胞产生的单克隆抗体与细胞核呈强阳性反应.结论:该单克隆抗体适于乳腺癌组织hER的免疫组化检测.
作者：陈伟；尹娟；李文鑫 刊期： 2005年第05期
目的:研究发育期大鼠海马CA1区星形胶质细胞与突触数量和成熟度的关系.方法:取健康初生(＜24 h)、幼年(28～30 d)和成年大鼠(90～100 d)各20只,分别用免疫组织化学方法和电子显微镜观察海马CA1区星形胶质细胞数量和突触超微形态结构特点,用高压液相色谱法检测其胆固醇含量.结果:在各组大鼠海马CA1区,初生组存在大量神经元,但星形胶质细胞少,末见突触结构;幼鼠组可见星形胶质细胞和不成熟的突触结构;成鼠组可见大量星形胶质细胞和远比幼鼠丰富的成熟突触结构(P<0.01);胆固醇含量为初生组(2.92±0.03) g·kg-1, 幼鼠组(11.20±3.41) g·kg-1,成鼠组(12.91±1.25)g·kg-1, 相互间差别均有显著性意义(P<0.01).结论:大鼠发育过程中海马CA1区星形胶质细胞数量可能影响突触数量和成熟度, 此影响可能与胆固醇有关.
作者：谭来勋；段申汉；王细林；孙圣刚 刊期： 2005年第05期
目的:探讨经皮射频消融(RFA)联合肝动脉栓塞化疗术(TACE)在难以手术切除的原发性肝癌治疗中的价值.方法:55例原发性肝癌患者,30例行单纯TACE治疗,25例行RFA联合TACE治疗,治疗后定期复查B超、CT或MRI,确定肿瘤坏死范围,应用流式细胞术检测治疗前和治疗后4周两组外周血CD4+、CD8+、CD4+/CD8+的变化,采用酶联免疫吸附分析法(ELISA)检测治疗后12周患者血清甲胎蛋白(AFP)的情况,Kaplan-Meier法计算预期生存率并预测平均生存期.结果:TACE组治疗前CD+4 为28.68%±7.58%,治疗后为30.16%±6.33%,二者之间差异无显著性意义(P>0.05).TACE组CD8+、CD4+/CD8+治疗前后均无显著性差异(P>0.05).综合组治疗后CD4+、CD4+/CD8+明显高于治疗前(P<0.05).综合组治疗后CD8+显著低于治疗前(P<0.05).TACE组与综合组术后肿瘤坏死范围分别为(0.25±0.07) cm和(2.01±0.26) cm,二者之间差异有显著性(P<0.01).综合组术后血清AFP含量为(32.77±4.66) μg·L-1,与TACE组术后血清AFP含量(256.33±17.85)μg·L-1相比差异有显著性意义(P<0.01).综合组术后平均生存时间明显长于TACE组(P<0.01).结论:对于难以手术切除的原发性肝癌,经皮射频消融联合肝动脉栓塞化疗可明显改善患者免疫功能,提高临床疗效.
作者：徐旭东；刘志苏；孙权 刊期： 2005年第05期
目的:了解武汉市并发糖尿病肺结核住院患者临床特征,为制订我市结核病防治措施提供依据.方法:对确诊的并发糖尿病肺结核患者456例临床特征进行分析.结果:并发糖尿病肺结核患者随着年龄的增大,其占总患病人数的构成比显著增加,发病人数主要集中在45岁以上人群,占89.04%;地区间存在显著性差异( P<0.01),其构成比市区高于城区,城区高于郊区.就发病特征而言,有典型糖尿病症状(之一)者仅为22.18%,并发2型糖尿病者占92.98%;与一般肺结核患者比较,并发糖尿病肺结核患者咯血、发热、痰菌阳性率、继发型肺结核、空洞形成、病灶≥2个肺野、复治肺结核等比例分别高达49.78%, 41.45%, 56.80%, 87.94%, 42.54%, 89.25%, 35.96%,存在显著性差异( P<0.01).在疗效特征上,并发糖尿病肺结核规则治疗者中,痰菌2月末阴转率、空洞缩小率、病灶明显吸收率高;细菌学复发/失败率、放射学恶化率分别仅为5.64%、6.90%,与一般肺结核规则治疗者无显著性差异(P>0.05),与不规则治疗者比较均存在显著性差异( P<0.01);并发糖尿病肺结核不规则治疗者中,痰菌2个月末阴转率、空洞缩小率、病灶明显吸收率极低,细菌学复发/失败率、放射学恶化率高达26.28%,29.93%,与一般肺结核患者比较,均存在显著性差异( P<0.01).结论:糖尿病对武汉市结核病疫情已产生了一定的影响,应重点加强城市中老年肺结核病患者的糖尿病诊断,做到早发现,及时规则治疗,大限度地降低肺结核病的复发率、致残率和病死率.
作者：郑春兰；胡永峰；孙学智 刊期： 2005年第05期
目的:探讨中线T细胞淋巴瘤(MTL)的免疫表型特征及其与EB病毒(EBV)感染的关系.方法:采用免疫组织化学方法检测41例MTL组织 CD45RO、CD3ε、CD56、CD20、TIA-1、Granzyme B以及EBV潜伏膜蛋白(LMP-1)的表达,原位杂交技术检测EBV转录产物RNA(EBER1/2).结果:① CD45RO阳性41例(100%),CD3ε、TIA-1阳性25例(60.98%),Granzyme B阳性22例(53.66%),CD56阳性21例(51.22%),CD20全部阴性.②EBER1/2阳性29例(70.73%),LMP-1阳性17例(41.46%);NK/T细胞淋巴瘤(21/25)明显高于外周T细胞淋巴瘤(8/16)的EBER1/2阳性表达(P<0.05).结论: MTL以NK/T细胞淋巴瘤为多见,EBV感染与MTL关系密切,EBV感染率与MTL的免疫表型有关,EBV感染在MTL的发生发展中可能起重要作用.
作者：明萌；明星辰；王大斌；邹典定；易建华；姚俊霞 刊期： 2005年第05期
目的:通过检测反映脑组织损伤程度及免疫功能的实验指标客观评价冷冻手术与常规手术对脑组织的创伤程度.方法:实验小鼠随机分为正常组、冷冻手术组、常规手术组.以常规免疫组织化学及放射免疫法检测正常组、冷冻手术组及常规手术组术后相同时间段内的脑组织c-fos、NOS、CD4、CD8的表达程度及IL-2、IL-6脑组织含量,相同时间段内以t检验进行统计学处理,不同时间段内行Newman-Keuls检验.结果:相同时间段内冷冻手术组c-fos、nNOS的表达明显低于常规手术组,而CD4、CD8的表达明显高于常规手术组,统计学显示差异有显著性(P<0.01);冷冻手术组IL-2、IL-6的含量明显高于正常组及常规手术组,并形成两次分泌高峰,统计学显示结果差异有显著性(P<0.01).结论:冷冻手术对脑组织的创伤程度明显小于常规手术,同时冷冻手术可以激发脑组织的免疫功能.
作者：罗杰；张力；涂汉军；黄宽明；李新建；付锐 刊期： 2005年第05期
目的:探讨中国人Van der Woude综合征(VWS)的临床表型及遗传学特点.方法:先证者法收集5个VWS家系并进行口腔专科检查和家系调查,分析不同VWS家系个体或同一家系不同个体的临床表型,绘制家系图谱,明确可能的遗传方式.结果:5个VWS家系基本符合常染色体显性遗传特征,患者多数表现为典型的VWS症状,个别患者表现为罕见的唇瘘微型.不同家系个体和同一家系的不同个体临床表型存在明显差异.结论:收集的5个家系均为常染色体显性VWS,且疾病的外显率高,表现度变异大.
作者：叶晓茜；边专；金辉喜 刊期： 2005年第05期
目的:分析CR系统自动曝光控制(电离室)X线摄影特点,探讨图像后处理技术对影像质量的影响.方法:①以A、B、C 3组(每组180例)不同组合的kV、mAs、密度补偿、感速、探测野等,对胸部拟人水模及IP板自动曝光控制摄影;② 检测3种组合患者影像不同曝光条件、曝光指数、kV与mAs变化及照片密度值.结果:① A组125 kV与0.6～1.0 mAs组合,图像对比度差;低密度偏高;信噪比低;量子斑点多噪声大.② B组70～85 kV与5～30 mAs组合,图像对比度好;层次清楚;锐利度高;量子斑点少噪声小.A、B两组差异有显著意义,P＜0.001. ③ C组42～52 kV与5～20 mAs组合,图像对比度高;层次清楚;锐利度高;量子斑点少噪声小.B、C两组差异没有统计学意义(P＞0.05).④ 测量胸片、腰、颈椎等的密度值均在0.8～1.30范围内.结论:CR系统自动曝光控制不宜采用高kV或太低kV摄影,检测病灶细微结构应使用尺寸相对较小的成像板.数字化摄影图像信息后处理技术,保证了照片质量,提高了影像学诊断范围及准确率.
作者：潘鄂武；杨福文；陈军；彭宙峰；唐兴桥；钱葵；容海峰；叶丽琼；刘昌盛；徐佑林 刊期： 2005年第05期
目的:研究肺癌患者外周血清中内皮抑素的含量与肺癌临床和病理生理特征的关系.方法:采用ELISA法检测70例原发肺癌与20例健康人血清中内皮抑素的含量.结果:血清内皮抑素含量在肺癌及健康人分别为(105.14±32.59)ng·ml-1和(55.56±19.78)ng·ml-1,P＜0.01;血清内皮抑素含量与肺癌原发肿瘤的大小、有无远处转移、细胞分化程度及临床分期密切相关(P＜0.05),与性别、年龄、组织学类型及淋巴结转移无显著相关.结论:肺癌患者血清中内皮抑素的表达水平是预测肿瘤恶性行为的有效指标.
作者：毛梅；余爱荣；司斌；傅祖红 刊期： 2005年第05期
目的:建立生长期大鼠缺锌模型,为研究饮食锌缺乏对大鼠生长发育的影响作准备. 方法:配制人工半合成饲料,分别检测正常饲料和缺锌饲料锌含量.刚断奶的雄性大鼠随机分成对照组(ZA)、缺锌组(ZD)、配饲组(PF)3组,每组10只;观察生长发育过程,喂养15 d后采静脉血,分别检测血清锌含量. 结果:正常饲料和缺锌饲料锌含量分别为29.5 μg·g-1和0.4 μg·g-1;ZD组3 d后开始出现缺锌症状,并随着喂养时间的延长而加重,至实验结束时,其体重、饲料效价及血清锌浓度均明显低于ZA和PF组.结论:饮食锌缺乏严重影响大鼠生长发育,本实验生长期大鼠缺锌模型建立成功,能较好代表儿童期生长发育特点.
作者：程红；夏莺；张芳蓉 刊期： 2005年第05期
目的:研究银杏叶提取物对雌性阿尔茨海默病(AD)大鼠学习记忆能力的影响.方法:以D-半乳糖和三氯化铝建立老年痴呆动物模型,用不同浓度的银杏叶提取物分别灌胃AD大鼠,利用Y-型迷宫进行被动回避反应和辨别性学习能力的测试,观察AD大鼠学习记忆能力及辨别性学习能力的改变.结果:实验组大鼠学习能力和记忆保持率均显著优于模型对照组(P<0.01).结论:银杏叶提取物能有效改善阿尔茨海默病大鼠的学习和记忆能力.
作者：李红枝；陈伟强 刊期： 2005年第05期
目的:建立吸毒成瘾的实验动物模型,使动物出现类似人类的毒品戒断综合征,然后观察生物制剂的治疗效果及其本身是否形成依赖性.方法:小鼠皮下注射吗啡,大鼠通过安置颈静脉导管注射吗啡,从而使动物吸毒上瘾和形成毒品依赖性.建立小鼠竖尾现象,大鼠呈湿狗样摇体反应的吸毒模型.然后使用生物制剂进行治疗并观察其疗效.通过吗啡和生物制剂交叉替代试验,确定生物制剂是否成瘾.结果:吸毒成瘾的小鼠竖尾模型,大鼠摇体的模型,戒断症状明显,行为特征易观察,重复性好.结论:生物制剂对大、小鼠吸毒成瘾的戒断症状治疗效果显著且无成瘾性.
作者：陈为民；张宗泽；赵林 刊期： 2005年第05期
目的:探讨血清转铁蛋白受体(sTfR)在儿童缺铁性贫血(IDA)诊断中的意义.方法:6月～12岁缺铁性贫血儿童50例及正常儿童20例均进行血红蛋白(Hb)、血清转铁蛋白受体(sTfR)、血清铁蛋白(SF)、血清铁(SI)、总铁结合力(TIBC)测定,并将受测对象分为正常对照组(C组)、轻度IDA组(IDA1组)、中-重度IDA组(IDA2组),以1989年洛阳会议制定儿童IDA诊断标准为据,以不同浓度sTfR为临界点计算其诊断IDA的敏感度及特异度,以确定佳的诊断临界点.结果:以sTfR浓度 40 nmol·L-1为缺铁性贫血的诊断标准时,其敏感度和特异度分别为90%和85%,为诊断本组IDA敏感度和特异度之和大的临界点. 结论:当sTfR为40 nmol·L-1 时诊断IDA准确度高,即为IDA的佳临界点.
作者：王捷荣；邹典定 刊期： 2005年第05期
目的:检测恶性腹水可溶性CD44v6(sCD44v6)、Ⅳ型胶原酶,为临床恶性腹水诊断提供依据.方法:收集各种类型腹水,采用酶联免疫吸附实验(ELISA)的方法检测sCD44v6含量,用明胶酶谱法检测Ⅳ型胶原酶活性. 结果:恶性腹水sCD44v6水平为(89.22±38.20) ng·ml-1,明显高于肝硬化、结核性腹水(P均<0.01), 而后二者间比较sCD44v6水平差别无显著性(P>0.05).肝硬化、结核性腹水不能检出基质金属蛋白酶-2,-9(MMP-2,-9),而恶性腹水MMP-2检出率为87.0%,MMP-9检出率为78.3%,且MMP-2活性高于MMP-9活性(P=0.022).结论:恶性腹水 sCD44v6显著升高且Ⅳ型胶原酶阳性.sCD44v6、Ⅳ型胶原酶对良、恶性腹水的鉴别诊断有重要价值.
作者：吴建红；孙晓敏 刊期： 2005年第05期
目的:分析成人CD4抗原阳性的T淋巴细胞(CD4淋巴细胞)计数与总淋巴细胞计数(TLC)的相关性,了解用TLC预测CD4淋巴细胞计数的可行性及方法.方法:选取32例21～58岁艾滋病病人全血标本,共72人次.用Becton Dickinson公司生产的FACSCount自动化仪检测CD4淋巴细胞计数.用美国雅培公司生产的CEIL-DYN3700血液全自动分析仪检测全血TLC. 结果:CD4值为(124±26)个·mm-3(±s,以下相同),TLC值为(1 202±118)个·mm-3.CD4淋巴细胞计数与TLC之间存在显著的直线正相关性(r=0.621).结论:在无条件检测CD4淋巴细胞计数的情况下,可用TLC预测CD4淋巴细胞计数值.以TLC＜1 300个·mm-3预测CD4＜200个·mm-3是比较合适的.
作者：陈铁龙；桂希恩；荣玉萍；高世成 刊期： 2005年第05期
目的:研究天然红心鸭蛋紫杉紫素对人星形胶质瘤U251细胞增殖、凋亡的干预作用.方法:研究对象为U251人星形胶质瘤细胞系,细胞增殖采用MTT比色法检测,细胞凋亡采用荧光显微镜、激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)技术法检测,U251细胞浆中钙离子浓度采用LSCM测定.结果:天然红心鸭蛋紫杉紫素对胶质瘤细胞的生长具有明显的抑制作用,使用小剂量(0.25 μmol·L-1)的紫杉紫素能有效地诱导胶质瘤细胞凋亡,并显著提高胶质瘤细胞内Ca2+浓度.结论:天然红心鸭蛋紫杉紫素可以显著抑制U251细胞增殖,且呈时间-效应和剂量-效应依赖关系,同时使U251细胞内Ca2+浓度升高,诱导U251细胞凋亡.
作者：余振；黄书岚；陈健；张大兴；吴立权；刘刚 刊期： 2005年第05期
武汉大学学报（医学版）杂志
主管:中华人民共和国教育部
主办：武汉大学
