关心；杨同华；张超然；冯帅
近年来,纳米材料及其表面修饰技术的发展,使以纳米特性为基础设计生物相容性的纳米探针并用于疾病的显像、局部治疗和药物运输成为可能.其中金纳米颗粒可以与DNA[1]、多肽[2]、抗体[3]、放射性核素[4]等相偶联,实现对肿瘤的靶向检测、显像及治疗.此外,纳米颗粒在肿瘤区域具有渗透滞留效应(enhanced permeability and retention,EPR),可促进大分子物质的选择性分布,增加药效并减少系统副作用[5].在近红外区域(near infrared,NIR),生物组织中的血红蛋白和水对光的吸收少[6].
作者：张影影；覃春霞；张永学 刊期： 2017年第03期
目的 研究CD44在胶质瘤中的表达和临床意义,以及CD44下调对胶质瘤细胞增殖、侵袭和凋亡的影响.方法 检索Oncomine数据库中关于CD44的信息,对其在各类型肿瘤及胶质瘤中的表达情况进行检索.利用R2基因分析可视化平台及TCGA数据库中下载的胶质瘤基因芯片数据集,分析CD44的表达水平与胶质瘤患者预后的关系.通过siRNA抑制CD44的表达,通过CCK-8试验、Transwell小室、流式细胞术检测CD44下调对胶质瘤U251细胞增殖、侵袭和凋亡的影响.结果 Oncomine数据库中共收集了467项不同肿瘤类型的关于CD44的研究结果,对比正常组织,有统计学差异的结果有68项,其中CD44表达增高的有51项,表达降低的有17项.胶质瘤中高表达的有10项,未搜索到低表达的项目,10项研究共包括955例样本.分析R2基因分析可视化平台(包含504例胶质母细胞瘤)及TCGA数据库(包含529例低级别胶质瘤)的基因芯片数据发现,CD44高表达患者预后更差.在胶质母细胞瘤中CD44高、低表达组患者2年生存率分别为13％和25％(P=0.000 1),在低级别胶质瘤中CD44高、低表达组患者5年生存率分别为47％和61％(P=0.001 0).采用特异性针对CD44基因的siRNA转染U251胶质瘤细胞可显著抑制CD44的表达,与阴性对照组和空白对照组相比,转染组的细胞增殖和侵袭明显受到抑制,且流式细胞学显示转染组对比阴性对照组细胞凋亡率增加,分别为7.10％和4.11％ (P＜0.05).结论 CD44在胶质瘤中高表达,可作为胶质瘤预后判断指标及潜在的治疗靶点.
作者：郭秋云；胡广原；韩娜；石磊；于洋；陈承奇；张孟贤 刊期： 2017年第03期
目的 探讨重建股骨近端外侧壁完整性对A3型股骨转子间骨折行股骨近端防旋髓内钉(PFNA)内固定手术疗效的影响.方法 收集2014年6月至2016年6月在江苏大学附属医院行PFNA治疗A3型股骨转子间骨折且有完整随访资料的患者70例,按照是否重建外侧壁分为A组(外侧壁未重建组)、B组(外侧壁重建组).观察指标:年龄、骨质疏松程度(Singh指数)、手术时间、术中出血量、术后TAD(尖顶距)及Offset(偏心距)值、骨折初步愈合时间、内固定失效情况以及末次随访时Harris评分.结果 所有患者平均随访5.2个月(3～10个月).A、B两组患者的年龄、骨质疏松程度、手术时间、术中出血量及TAD之间的差异均无统计学意义(均P＞0.05).而A组的内固定失效率、Offset短缩、骨折愈合时间均大于B组,末次随访Harris评分优良率小于B组,差异均具有统计学意义(均P＜0.05).结论 A3型股骨转子间骨折由于外侧壁破损容易发生内固定失效以及转子间短缩等不良并发症;术中重建外侧壁,能够恢复其支撑作用,降低PFNA手术失效率,改善术后髋关节功能.
作者：王志钢；徐晓峰；陈奇；曹兴兵；孙继芾 刊期： 2017年第03期
尽管肿瘤的诊疗技术在不断的探索中进步,我国恶性肿瘤患者死亡率仍然呈现持续增长的趋势,癌症已经超过心血管疾病成为威胁人类健康的第一大杀手.肿瘤的形成需经历一个复杂的过程,是机体内癌基因活化、抑癌基因失活以及稳定性基因发生改变的综合结果.但实际上,在肿瘤的整个发生发展过程中,肿瘤微环境和免疫系统同时发挥着重要的作用.“肿瘤免疫监视”学说认为,一旦细胞发生癌变,免疫系统能够对其进行识别、消灭,阻止肿瘤的发生[1].但是肿瘤细胞的异质性和高突变性决定了肿瘤细胞会发生各种突变,从而逃脱免疫监视[2-3].随着肿瘤细胞的不断进化和肿瘤微环境的逐步建立,有些肿瘤细胞终将摆脱机体的免疫监视,不断增殖并在临床上形成肿瘤[4].肿瘤发展与免疫系统的相互作用是一个长期的动态变化过程,肿瘤的突变往往伴随着对肿瘤特异性免疫反应的抑制,终建立起一个肿瘤免疫抑制的微环境[5-6].
作者：孔苗；谭松巍 刊期： 2017年第03期
目的 建立小鼠变应性鼻炎(allergic rhinitis,AR)模型,观察金银花提取物对变应性鼻炎小鼠炎性因子水平的影响.方法 选取60只健康成年雄性C57BL/6小鼠,按照随机数字法随机分为4组:空白对照组、模型对照组、金银花治疗组、阳性对照组,每组15只.采用卵清蛋白(OVA)建立小鼠AR模型.采取积分法记录AR症状严重程度;取小鼠鼻中隔黏膜,用流式细胞仪分析IL-17来源;ELISA法检测各组小鼠血清中IL-2、IL-4、IL-17、IFN-γ、sIgE的表达水平;小鼠鼻中隔黏膜病理切片计数嗜酸性粒细胞;RT-PCR法检测鼻中隔黏膜中IL-17 mRNA的表达;Western blot法检测IL-17蛋白表达水平.结果 金银花治疗组及阳性对照组小鼠挠鼻、喷嚏及流涕情况较模型对照组有明显减轻.通过流式细胞仪检测发现IL-17主要来源于γδT细胞.金银花治疗组及阳性对照组小鼠鼻黏膜病理切片嗜酸性粒细胞计数,血清IL-4、IL-17、sIgE水平,组织IL-17 mRNA的表达,IL-17蛋白表达水平等,均较模型对照组降低(均P＜0.01),而血清IL-2、IFN-γ水平均上升(均P＜0.01).结论 金银花提取物可调控OVA致敏的AR小鼠炎性因子的表达,对AR具有免疫调节作用.
作者：简雷；肖才文；何庆文；李汉琳；周卫；徐翔；王勇；朱宏飞 刊期： 2017年第03期
目的 研究三七皂苷Rg1对阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)模型大鼠空间学习记忆能力和磷酸化tau蛋白的作用及机制.方法 SD大鼠左侧脑室Aβ25-35注射复制AD模型,分别用低(25 mg/kg)、中(50mg/kg)、高剂量(100 mg/kg)的三七皂苷Rg1灌胃,2次/d,4周后进行Morris水迷宫实验检测学习记忆能力,并通过免疫印迹、免疫组织化学方法,检测各组大鼠海马tau蛋白磷酸化水平及分布的变化.结果 侧脑室注射Aβ25-35后,模型大鼠学习记忆能力显著低于正常对照大鼠;免疫印迹法检测结果显示,海马tau蛋白苏氨酸231位点磷酸化(PT231)水平明显增加,非磷酸化水平明显下降;形态学检测结果显示,模型大鼠海马DG区、CA1区和CA3区的PT231水平明显增加.中剂量的三七皂苷Rg1干预能显著改善模型大鼠在Morris水迷宫中学习记忆的能力;3种剂量的三七皂苷Rg1均能降低其海马DG、CA1、CA3区的tau蛋白PT231水平,且3种剂量之间的差异无统计学意义.结论 三七皂苷Rg1能改善Aβ25-35诱导的模型大鼠AD样空间学习记忆能力障碍及降低海马tau蛋白磷酸化水平.
作者：李沐哲；吴文辉；吴之平；任美玲；陈淑贤；郭晓玲；王平；林丽 刊期： 2017年第03期
目的 检测乳腺癌肿瘤组织中HOX转录反义RNA(HOTAIR)的表达,并观察HOTAIR对乳腺癌细胞系MCF-7侵袭转移能力的影响.方法 应用荧光定量PCR检测32对乳腺癌患者的肿瘤组织和癌旁正常组织中HO-TAIR的表达差异;通过慢病毒转染构建稳定高表达HOTAIR的MCF-7细胞株,Transwel1检测高表达HOTAIR对细胞侵袭能力的影响,光学显微镜下观察细胞的形态学变化,Western blot法检测上皮-间质转化(EMT)相关蛋白的变化.裸鼠尾静脉注射HOTAIR高表达的MCF-7细胞,观察肝脏转移瘤的形成.结果 在32对乳腺癌临床标本中,有24例肿瘤组织中HOTAIR的表达高于癌旁正常组织;MCF-7高表达HOTAIR后,细胞的侵袭能力增强,细胞发生EMT为特征的形态学变化,EMT相关的E cadherin表达降低,而Vimentin及Slug的表达升高.高表达HOTAIR的MCF-7细胞肝脏转移瘤成瘤能力更强.结论 乳腺癌临床标本中HOTAIR的表达增高,乳腺癌细胞系MCF-7中高表达HO-TAIR可诱使其发生EMT,并促进其侵袭转移.
作者：吕峰；孔舒欣；于洋；梁栋；张斌 刊期： 2017年第03期
目的 探讨非手术脊柱减压系统(SDS)牵引治疗神经根型颈椎病(CSR)的疗效及其对患者颈部肌肉表面肌电信号的影响.方法 选择2014年2月～2016年2月中山大学附属第一医院康复科收治的CSR患者60例,随机分为SDS组和普通组,各30例,分别采用SDS和普通牵引系统进行颈椎牵引,采用表面肌电图记录患者颈竖脊肌和胸锁乳突肌的肌电信号,以平均肌电值(AEMG)及中位频率(MF)作为表面肌电信号评估指标,以视觉模拟评分(VAS)和颈椎功能障碍指数(NDI)评分作为疗效评估指标,对治疗前后数据进行统计学比较.结果 首次牵引时普通牵引及SDS牵引过程中、牵引后患者的患侧颈椎旁肌和胸锁乳突肌的AEMG值均小于牵引前(均P＜0.05),MF值均大于牵引前(均P＜0.05).两组患者治疗1个疗程后与治疗前比较,患侧颈竖脊肌和胸锁乳突肌的AEMG值均小于治疗前(均P＜0.05),且SDS组小于普通组(P＜0.05);两组患者的颈竖脊肌和胸锁乳突肌的MF值均大于治疗前(均P＜0.05),且SDS组大于普通组(P＜0.05).治疗1个疗程后,两组VAS和NDI评分均较治疗前明显降低(均P＜0.05),SDS组VAS和NDI评分均明显低于普通组(均P＜0.05).结论 SDS牵引对神经根型颈椎病患者的疼痛缓解、功能改善、颈部肌肉放松和减轻肌肉疲劳的效果较普通牵引更优.
作者：徐筱潇；王楚怀 刊期： 2017年第03期
目的 探讨Wnt/β-catenin信号通路的异常激活在鼻咽癌发生发展机制中可能的作用.方法 以10例正常鼻咽组织为对照,运用免疫组织化学技术检测24例鼻咽癌组织中Wnt2和β-catenin的表达水平及其在癌细胞中的定位情况;运用实时定量PCR技术和蛋白免疫印迹技术分别检测鼻咽癌组织中Wnt2和β-catenin基因和蛋白的表达水平.结果 免疫组化检测结果显示,在鼻咽癌标本中,Wnt2的表达明显高于对照组织,且阳性染色主要位于细胞质内;β-catenin在细胞膜上的表达量显著低于对照组织,而在细胞质和细胞核中的表达呈明显上调.实时定量PCR检测结果显示,Wnt-2 mRNA在鼻咽癌组织中的表达量明显高于对照组织(P＜ 0.01);β-catenin mRNA表达量则低于对照组织(P=0.016).蛋白免疫印迹技术检测结果表明,Wnt2蛋白在鼻咽癌组织中的表达高于对照组织,而β-catenin蛋白在受检肿瘤标本中的含量亦呈明显上调.结论 Wnt2、β-catenin在鼻咽癌组织中存在明显的异常表达,提示Wnt/β-catenin信号通路的异常激活可能是鼻咽癌发生发展的重要分子机制之一.
作者：黄孝文；崔伟伟；王宝凤；崔永华 刊期： 2017年第03期
近年来研究发现,肠神经胶质细胞(enteric glial cells,EGCs)不仅仅发挥营养和支持肠神经元的作用,而且对调控神经元生长发育、神经回路功能和细胞凋亡、维持肠道稳态过程中均起到重要作用.如对肠神经系统(enteric nervous system,ENS)进行结构及功能整合,维持黏膜上皮屏障,调节胃肠道动力、营养摄取、分泌及调节血流,参与免疫或炎性反应等.其中,维持肠道上皮屏障的完整性是EGCs的一个重要特点,EGCs的缺失及损害会导致大鼠肠黏膜屏障完整性缺失,使其通透性增加,从而导致肠道炎症、出血及坏死等表现,本文就这一方面的研究进展进行简单阐述.
作者：李坤；陈婕 刊期： 2017年第03期
目的 探讨CD109和DPC4/Smad4的表达与食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)发生发展的关系,以及二者的相关性.方法 采用免疫组化ElvisionTM plus法检测正常食管黏膜组织、食管鳞状上皮非典型增生(包括轻、中、重度)、食管鳞状细胞原位癌以及ESCC(包括高分化、中分化和低分化)中CD109和DPC4/Smad4的表达情况.结果 ①CD109在ESCC中的阳性表达率高于在食管正常黏膜、非典型增生和原位癌,差异有统计学意义(P＜0.05);而DPC4/Smad4在ESCC中的阳性表达率低于在食管正常黏膜、非典型增生和原位癌,差异有统计学意义(P＜0.05).②在轻、中、重度非典型增生和原位癌中,CD109的表达阳性率逐渐增加,组间差异有统计学意义(均P＜0.05);而DPC4/Smad4的表达逐渐下降,组间差异有统计学意义(P＜0.05).③随ESCC分化程度的降低,CD109表达增加,而DPC4/Smad4表达下降,差异均有统计学意义(P＜0.05);④ESCC中CD109与DPC4/Smad4的表达呈负相关(rs=-0.354,P＜0.05).结论 CD109和DPC4/Smad4与食管鳞状细胞癌的发生发展密切相关,二者在ESCC的发生发展中呈负相关.
作者：宋文庆；俞岚；周蕾；王丹娜；吴强 刊期： 2017年第03期
目的 研究亚低温治疗对小儿重症病毒性脑炎患者血清及脑脊液神经元特异性烯醇化酶(NSE)、S100B蛋白水平的影响.方法 以2012年1月～2014年12月武汉儿童医院收治的83例重症病毒性脑炎患儿为研究对象,随机分为亚低温组和常规治疗组,亚低温组于入院24 h内实施全身亚低温治疗(目标温度为肛温32～35℃,疗程3～10 d),对照组给予常规治疗.观察患儿治疗前后临床症状,监测血清及脑脊液NSE、S100B蛋白水平.结果 ①与常规治疗组比较,亚低温治疗组患儿临床症状持续时间、格拉斯哥昏迷指数(GCS)评分以及住院时间明显缩短(P＜0.05或P＜0.01);②两组血清NSE、S100B含量在治疗后0、24 h比较差异无统计学意义(均P＞0.05),在治疗后48、72 h及10d,亚低温治疗组患儿血清NSE、S100B水平低于常规治疗组,两组差异有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01);③恢复期亚低温治疗组脑脊液NSE、S100B水平均低于常规治疗组,差异具有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01).结论 亚低温治疗可以降低重症病毒性脑炎患儿血清及脑脊液NSE、S100B蛋白水平,改善临床症状.
作者：陈锋；张芙蓉；孙继民；何生松；王君 刊期： 2017年第03期
目的 评价吉林市青年学生男男性行为(males who have sex with males,MSM)人群艾滋病行为的干预效果,为制定适合该人群的综合行为干预策略提供依据.方法 采用“分类滚雪球”方法对青年学生MSM人群开展横断面调查.综合干预措施包括利用新媒体开展宣传教育、行为干预、自愿咨询检测、同伴教育、安全套推广及性病门诊规范化服务等.对干预前后各300名青年学生MSM人群采取面对面匿名的方式对人口学特征、艾滋病防治知识了解情况、高危行为及干预服务措施等影响因素进行调查和分析.结果 艾滋病相关知识知晓率,干预前后分别为67.67％和94.33％.干预前近1次和近6个月在肛交时坚持使用安全套的比例分别为23.57％和11.79％,干预后分别为76.21％和62.10％.干预前后与异性发生性行为时安全套使用比例比较,近1次与女性发生性行为安全套使用率从23.53％上升到69.60％,近6个月安全套的使用率从15.44％上升到66.40％.干预前后近1年MSM人群曾有过性病相关症状的比例从21.33％下降到7.67％.结论 通过采用综合干预措施,吉林市青年学生MSM人群艾滋病知识知晓率明显提高;高危性行为的发生率减少;安全套的使用率有所提高.利用新媒介开展青年学生MSM人群干预,成本低、操作方便,可以作为传统行为干预模式的良好辅助措施.
作者：蔡勇；乔建国；孙殿伟 刊期： 2017年第03期
目的 观察温阳药新乌头碱对白血病细胞K562和K562耐柔红霉素细胞株(K562/DNR)的抑制作用及可能的分子机制.方法 应用MTT法,结合流式细胞术检测不同浓度新乌头碱对K562和K562/DNR增殖和凋亡的影响.通过Real-time PCR检测不同浓度新乌头碱作用72 h对K562和K562/DNR细胞C/EBPα、Caspase-3、p53凋亡相关基因表达的影响.结果 K562和K562/DNR细胞的增殖抑制率随着新乌头碱浓度增加及作用时间延长而上升,呈浓度、时间依赖性(均P＜0.05).新乌头碱能引起K562和K562/DNR细胞凋亡,且随着药物浓度增加,凋亡率也逐渐升高,差异均有统计学意义(均P＜0.05).Real-time PCR结果显示,经50μmol/L新乌头碱作用72 h,K562和K562/DNR细胞的C/EBPα表达下调,Caspase-3、p53表达上调,与正常对照组相比差异均有统计学意义(均P＜0.05).结论 新乌头碱能够引起K562和K562/DNR细胞发生凋亡,并且凋亡机制可能与下调C/EBPa基因及上调Caspase-3、p53基因有关.
作者：关心；杨同华；张超然；冯帅 刊期： 2017年第03期
目的 介绍并探讨计算机辅助设计(CAD)与3D打印技术在下颌角成形术中的应用价值,以期优化手术模式与获得佳整形美容效果.方法 对来自四川大学华西口腔医院颌面外科与华中科技大学同济医院口腔科就诊的1 6例方脸患者术前拍摄头颅CBCT并进行三维数据重建,通过计算机辅助设计确定个性化下颌角截骨范围,用3D打印技术制作下颌骨模型,并制作实施准确手术的导板.在手术中用此导板引导进行下颌骨的“V-line”弧线截骨,部分患者同时结合颧骨颧弓与颏部的面部轮廓整形手术,术后效果通过3D曲线函数来评估.结果 所有患者术后均对自己面型满意,术后下颌骨两侧几乎完全对称,X线显示截骨线流畅平滑,完全达到术前设计要求.结论 计算机辅助设计与3D打印技术的有机结合为下颌角成形术的准确性、安全性与可预见性提供了新策略与新方法.数字化下颌角成形术的应用不仅提高了美容效果,而且能减少手术时间,降低手术难度并降低损伤重要神经血管的风险,值得临床推广应用.
作者：杨运强；顾旖菲；邵乐南；汤国雄；蒋梁；李殿奇；张广 刊期： 2017年第03期
目的 探索蛋白磷酸酶2A(PP2A)抑制剂LB-100对宫颈癌细胞Ca ski辐射敏感性的影响.方法 Ca ski(宫颈癌细胞株)及CCD 841 CoN(正常小肠上皮细胞株)给予不同浓度梯度(0～100 μmol/L) LB-100处理24 h后,以CCK-8法检测细胞活性,筛选佳药物作用浓度.在此药物浓度下,以对照(PBS)、单纯LB-100、单纯辐照及LB-100联合辐照等方式处理细胞(辐照剂量为0、2、4、6 Gy),通过平板克隆实验分别观察LB-100对Ca ski和CCD 841 CoN辐射敏感性的影响;再以相同的方式处理(细胞辐照剂量为6 Gy),通过流式细胞术检测凋亡及细胞周期,初探LB-100增强Ca ski辐射敏感性的机制.结果 LB-100对Ca ski及CCD 841 CoN的抑制作用呈药物剂量依赖性;2.5 μmol/L LB-100增强Ca ski细胞辐射敏感性,但对CCD 841 CoN的辐射敏感性无显著影响;LB-100联合辐照处理促进Ca ski细胞凋亡,LB-100联合辐照组细胞凋亡率与单纯辐照组比较差异有统计学意义[(8.76±1.02)％ vs.(4.65±0.72)％,P＜0.01];LB-100可下调Ca ski细胞G0/G1期所占比例,LB-100联合辐照组与单纯辐照组比较差异有统计学意义[(19.87±2.54)％vs.(30.73±1.18)％,P＜0.05].结论 PP2A抑制剂LB-100通过促进凋亡、影响细胞周期,增强了人宫颈癌细胞株Caski的辐射敏感性,同时,其对正常肠上皮细胞CCD 841 CoN无辐射增敏作用,有望成为临床上增强宫颈癌放射治疗疗效的辅助药物.
作者：方银花；李晓琴；任洞；唐才智；冉新泽；粟永萍；程红缨 刊期： 2017年第03期
目的 探讨高糖条件下肾小球系膜细胞Toll样受体4(TLR4)及其信号通路中下游因子MyD88、核因子-κB(NF-κB)以及炎性因子的表达变化,论证高糖环境下血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)与TLR4的对话关系,以期阐明TLR4信号通路在糖尿病肾病(DN)发病机制中的作用.方法 设计3对针对大鼠TLR4基因的特异性siRNA片段以及带有绿色荧光的阴性对照,筛选出转染效率高的siRNA,用于后续实验.第1部分实验在高糖的基础上分别加入AngⅡ、TLR4siRNA、血管紧张素Ⅱ受体阻断剂(ARB)、阴性对照siRNA,探讨高糖对各组细胞TLR4、MyD88及NF-κB表达的影响;第2部分实验在AngⅡ的基础上分别加入高糖、TLR4 siRNA、ARB、阴性对照siRNA,探讨AngⅡ对各组细胞TLR4,MyD88及NF-κB表达的影响.采用荧光定量PCR检测各组TLR4、MyD88 mRNA的表达,Western blot检测TLR4、MyD88及NF-κB蛋白表达水平的变化,ELISA法检测细胞上清液中白细胞介素-6(IL-6)及单核细胞趋化因子-1(MCP-1)的表达情况.结果 高糖及AngⅡ都可以上调TLR4、MyD88、NF-κB蛋白及TLR4、MyD88 mRNA的表达水平(均P＜0.05),也可上调IL-6及MCP-1的表达(均P＜0.01)且二者协同刺激情况下上调更明显.siRNA干扰及ARB可下调TLR4、MyD88、NF-κB蛋白及TLR4、MyD88 mRNA的表达,下调IL-6及MCP-1的表达,与高糖及AngⅡ组相比差异有统计学意义(均P＜0.05).结论 高糖环境和AngⅡ刺激系膜细胞TLR4/MyD88信号通路激活,特异性TLR4 siRNA基因可以部分阻断由高糖及AngⅡ诱导的TLR4信号的激活,厄贝沙坦也可部分阻断TLR4信号通路,高糖和AngⅡ共刺激增强由TLR4介导的天然免疫炎症效应,TLR4/MyD88信号通路在此效应中扮演重要角色;TLR4 siRNA基因沉默技术为寻找DN的治疗方法提供了新思路,也为临床上使用ARB延缓DN进程提供了新的理论依据.
作者：王瑜；刘思逸；程玉花；张莉；江磊；吕金雷；陈钦开 刊期： 2017年第03期
目的 利用细胞模型研究非诺贝特在缓解非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)中的作用及其分子机制.方法 首先以0～0.9 mmol/L梯度浓度的油酸处理正常肝细胞LO2 48 h建立脂肪肝细胞模型;同时,以非诺贝特处理正常细胞或模型组细胞48 h,然后用CCK-8试剂盒测定细胞活力,用油红O染色观察细胞内脂滴形成或抑制情况,利用试剂盒检测细胞中的三酰甘油(TG)以及上清液中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)水平,蛋白质免疫印迹法检测细胞中蛋白激酶B(AKT)、p-AKT、FSAN及Nrf2蛋白水平,并使用2',7'-二氯荧光黄双乙酸盐(DCFH-DA)检测细胞内的活性氧自由基(ROS)含量.结果 油酸浓度超过0.5 mmol/L后细胞活力显著降低,非诺贝特可抑制高浓度油酸对细胞的损伤.油酸处理后细胞中出现大量脂滴,细胞内TG含量以及上清液中的ALT、AST水平显著升高,给予非诺贝特处理后细胞中脂滴减少,TG、ALT和AST含量均显著降低.油酸处理后细胞中AKT、p-AKT、FSAN和Nrf2蛋白水平升高,给予非诺贝特可抑制上述蛋白水平的升高.同时,非诺贝特逆转了由油酸导致的细胞内ROS累积.结论 非诺贝特可以抑制油酸引起的脂肪积累,并缓解脂肪累积导致的细胞损伤,其机制是通过下调AKT/FSAN信号通路,从而降低ROS水平,进而减少ROS导致的细胞损伤.
作者：郭骏；陈玉媛；叶枫；李斌；徐传瑞 刊期： 2017年第03期
目的 探究母代营养过剩对雄性子代能量代谢的影响.方法 C57BL/6J雌鼠随机分为高脂饮食组和正常饮食组,分别饲喂高脂或正常饲料2个月,然后与正常饮食C57BL/6J雄鼠交配,孕鼠在孕期和哺乳期继续摄取高脂或正常饲料.子一代雄鼠性成熟后与正常饮食C57BL/6J雌鼠交配得到子二代,子二代雄鼠性成熟后再与正常饮食C57BL/6J雌鼠交配得到子三代.测定子一代、子二代、子三代雄性小鼠体重、摄食量及随机血糖值.对子一代和子二代成年雄性小鼠进行腹腔糖耐量实验并记录肝脏、附睾周脂肪、皮下脂肪湿重值.检测子二代成年雄性小鼠血清胰岛素及下丘脑能量代谢相关基因表达情况.结果 营养过剩母鼠子一代和子二代雄性小鼠的体重、摄食量、能量摄入量及随机血糖值均高于对照组(均P＜0.05),子三代之间的差异则无统计学意义(P＞0.05).营养过剩母鼠子一代和子二代的成年雄性小鼠的附睾周脂肪脂体比、皮下脂肪脂体比、肝体比及糖耐量曲线下面积均高于对照组(均P＜0.05).营养过剩母鼠子二代成年雄性小鼠的血清胰岛素浓度及下丘脑神经肽Y(NPY)、刺鼠相关蛋白(AGRP)、甘丙肽(GAL)、可卡因-安他非明转录调节肽(CART)、SIM1基因的表达量均高于对照组(均P＜0.05).结论 高脂饮食诱导的营养过剩母代对雄性子代能量代谢的影响可持续至子二代,引起子二代下丘脑能量代谢相关基因表达异常.
作者：周群；李炯；张燚；关蕴良；王萍；张果 刊期： 2017年第03期
目的 构建人可溶性Tim-3(sTim-3)的重组质粒表达载体pET28a-sTim-3-EGFP,在大肠埃希菌中进行诱导表达并对其表达条件进行优化.方法 取健康人外周血提取总RNA,RT-PCR扩增Tim-3基因胞外段序列,克隆入已构建的表达载体pET28a-EGFP中,鉴定阳性克隆.重组质粒转化BL21 (DE3),通过调整IPTG浓度、诱导时机、诱导温度与诱导时间优化蛋白表达条件.结果 成功构建原核表达载体pET28a-sTim-3-EGFP,并转化BL21 (DE3)进行诱导表达.温度和IPTG浓度对蛋白表达量影响不大;在培养至A600nm值约为0.6～0.8时于25℃诱导5h可获得较高的蛋白表达.结论 成功表达可溶性重组蛋白sTim-3-EGFP,为该蛋白的进一步纯化生产及应用奠定了良好基础.
作者：白少云；卿吉琳；刘振；谭源福；陈治中 刊期： 2017年第03期
华中科技大学学报（医学版）杂志
主管:中华人民共和国教育部
主办：华中科技大学
