安翠平;毕建成;李宝全;许顺江;宋国威
目的:通过分析临床儿童弱视误诊病例,强调相关辅助检查的选择和完善对于避免儿童弱视误诊的重要性。方法回顾分析2013年1月~2013年10月同济医院眼科斜视弱视专科门诊就诊的儿童患者中,既往误诊为弱视但终确诊为其他疾病的18例病例,并对典型病例进行分析。结果在误诊病例中以先天性的眼底疾病多见,其中缺乏相关的辅助检查、忽视鉴别诊断为主要的误诊原因。结论对于儿童弱视的诊断应慎重,除详细询问病史外,应重视通过必要辅助检查排除眼底及头颅的器质性疾病。另外,对于长期弱视治疗不佳的患儿应进一步查找原因,针对性地选择和完善辅助检查可减少误诊。
作者:陈嘉锡;何花;杨红;李斌;王志涛;宋琳;肖晓;孙坚 刊期: 2014年第06期
目的:探讨c‐Jun氨基末端激酶(JNK)在转化生长因子‐β1(TGF‐β1)诱导的人肺上皮细胞A549转分化中的调控作用。方法将体外培养的人肺上皮细胞(A549)随机分成3组:正常对照组、TGF‐β1组(加入10 ng/mL TGF‐β1)及抑制剂组(加入10 ng/mL TGF‐β1和20μmol/L JNK的特异性抑制剂Sp600125),培养于3%的血清培养液中,光镜下观察3组细胞形态的变化,并通过RT‐PCT检测各组A549细胞的上皮标志物E‐钙黏蛋白(E‐cadherin ,E‐cad)及间充质标志物α‐平滑肌肌动蛋白(α‐smooth muscle actin ,α‐SMA)和胶原纤维Ⅰ(collagen fibersⅠ,ColⅠ)的表达的变化,West‐ern blot检测JNK磷酸化(p‐JNK)水平的变化。结果正常对照组体外培养的A549细胞光镜下为鹅卵石样紧密排列生长,有E‐cad表达及微量的α‐SMA、ColⅠ及p‐JNK表达。TGF‐β1组培养72 h后细胞基本长成梭形、纺锤形,E‐cad表达下调,α‐SMA、ColⅠ及p‐JNK表达上调。与 TGF‐β1组比较,抑制剂组培养72 h后细胞梭形有所逆转,E‐cad表达上调,α‐SM A、ColⅠ及p‐JNK表达明显抑制;与正常对照组比较,细胞形态较扁长,E‐cad、α‐SM A、ColⅠ及p‐JNK表达差异无统计学意义。结论 JNK信号通路参与 TGF‐β1介导的人肺上皮‐间质转分化过程,JNK的特异性抑制剂Sp600125可有效抑制该过程。
作者:邹勇;曾玉兰 刊期: 2014年第06期
躯体一些基本的生理功能如触觉、听觉、本体感受以及血压感受等是通过不同的机械感受器(机械敏感性神经元)完成的。这些特殊的神经元细胞体及末梢的细胞膜上存在机械敏感性离子通道(M S通道)。机械转导是指机械刺激与生物反应的转换,由位于神经末梢上的MS通道的开放开始,由神经末梢将机械信号迅速转化成生物电信号进而向中枢传递的过程。
作者:孟庆丽;刘海霞 刊期: 2014年第06期
乳腺癌是严重危害女性身体健康的恶性肿瘤,每年全球约有49万人死于该病,发病率呈上升趋势,我国发病率也在不断上升,且出现年轻化的倾向,在大都市已跃居女性恶性肿瘤的首位,严重威胁广大妇女的健康和生命。近几十年,在分子水平揭示乳腺癌发生发展规律的研究大都集中在p53基因上,同时,p53基因也是迄今为止发现的与人类肿瘤相关性密切的基因,本文就p53与乳腺癌转移的关系进行综述。
作者:孔德光;吴高松 刊期: 2014年第06期
目的:检测黄芩苷治疗后鼠巨细胞病毒(MCMV)感染模型鼠脾细胞中 TBX21、GATA‐3蛋白的表达强度,进一步研究黄芩苷在调节Th1/Th2平衡中的作用。方法建立MCMV播散性感染模型,在MCMV接种后24 h给予黄芩苷腹腔注射60 mg/kg ,1次/d ,共14 d ,并设立安慰剂对照组和正常对照组。分别于治疗后3、7和14 d取小鼠脾脏,提取脾组织蛋白,用Western blot法分别检测Th1和Th2细胞特异性转录因子 TBX21和GATA‐3表达强度。结果治疗后3 d ,黄芩苷治疗组T BX21蛋白表达水平明显高于正常对照组和安慰剂对照组( P<0.01)。治疗后7 d和14 d ,黄芩苷治疗组T BX21蛋白表达水平明显高于正常对照组( P<0.01,P<0.05);而黄芩苷治疗组与安慰剂对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后3 d ,黄芩苷治疗组GATA‐3蛋白表达水平明显低于正常对照组(P<0.01);而与安慰剂对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后7 d和14 d ,GATA‐3蛋白表达水平3组之间差异无统计学意义(P>0.05)。结论黄芩苷在MCMV急性感染早期可明显上调TBX21蛋白表达,进而促进Th1细胞免疫应答,有利于机体清除病毒,并对MCMV诱导的Th1/Th2细胞网络改变有一定调节作用。
作者:黄永建;刘兴楼;王慧;郭珊;刘玲玲;李革;舒赛男;方峰 刊期: 2014年第06期
目的:研究Sertoli细胞对同种异体免疫反应过程中调节性T细胞(Treg)/辅助性T细胞17(Th17)平衡的影响。方法体外分离并培养Sertoli细胞、T淋巴细胞和骨髓来源的DC细胞,将Sertoli、DC细胞分别与同种异体T细胞混合培养,光镜及电镜下观察 Sertoli细胞形态,采用 Western blot检测 Sertoli细胞中人类主要组织相容性复合体(MHC)‐Ⅱ、B7‐H1蛋白的表达,收集培养上清液,采用酶联免疫吸附实验(ELISA)法检测Sertoli细胞培养上清内的转化生长因子(TGF)‐β1、IL‐17A等细胞因子水平;流式细胞术观察混合培养细胞分化结果。结果成功在体外培养Ser‐toli细胞;Western blot结果显示,Sertoli细胞与同种异体 Na?ve CD4+ T 细胞(CD4+ CD62 L+ CD25-)在体外混合培养时,其表面的M HC‐Ⅱ类分子和B7‐H1分子的表达量增加;ELISA结果显示,与同种异体Na?ve CD4+ T细胞混合培养72 h后,培养上清液中的TGF‐β1浓度较单纯Sertoli培养组显著升高[(823.10±59.07)pg/mL vs.(174.89±23.51)pg/mL ,P<0.01];流式细胞术结果显示,与同种异体Sertoli细胞共同培养的体系内,Na?ve CD4+ T 细胞(CD4+ CD62 L+CD25-)被诱导分化为CD25+ Foxp3+ Treg细胞的比例显著增加,从<1.0%增长至27.6%;用Sertoli细胞与Treg细胞混合培养上清液孵育DC细胞/Na?ve CD4+ T细胞,可明显减少培养液中IL‐17A的浓度,使其从(361.58±80.27)pg/mL降低至(137.54±52.19)pg/mL(P<0.05);同时IL‐17A+ T细胞亚群百分比也显著降低(27.2%降至17.9%)。结论 Sertoli细胞体外培养产生的抗炎细胞因子和免疫抑制细胞因子能诱导Na?ve CD4+ T细胞分化为CD25+ Foxp3+T reg细胞,Sertoli细胞可能通过调节同种异体T reg/T h17分化平衡,诱导免疫耐受。
作者:陈莲一;谢林 刊期: 2014年第06期
目的:观察龙牡壮骨颗粒复方制剂及其中、西药组分对功能性消化不良(FD)大鼠胃动素(MTL)水平和Cajal间质细胞(ICC )数量的影响,探讨其治疗FD的机制。方法50只大鼠随机分为空白对照组、模型组、龙牡壮骨颗粒复方组、中药成分组、西药成分组共5组。大鼠夹尾刺激法建立FD模型。ELISA法检测血清MTL水平,免疫组织化学法检测大鼠胃窦组织C‐kit阳性表达以反映ICC含量。结果龙牡壮骨颗粒复方制剂及其中、西药成分均提高了 FD大鼠体重、M T L水平、ICC含量等指标,且复方制剂效果优于中、西药组分。结论龙牡壮骨颗粒对FD大鼠的治疗作用与提高M T L、ICC含量有关,且复方制剂治疗效果优于中西药各成分。
作者:肖飞;李伟杰;刘秀兰;李亚洲;翟莉;游东阁;向明 刊期: 2014年第06期
目的:探讨CD64对白血病合并细菌感染的早期诊断价值。方法选取白血病合并细菌感染患者50例、白血病非细菌感染患者48例和体检正常者38例,静脉抽取外周血,分别用流式细胞术检测CD64的表达及CD4/CD8比值,免疫比浊法检测降钙素原(PCT)和C‐反应蛋白(CRP),以及电阻抗法检测中性粒细胞百分比(NEU%)。结果①白血病合并细菌感染组CD64的表达显著高于白血病非细菌感染组和正常对照组,差异具有统计学意义( P<0.01)。②白血病合并细菌感染组的淋巴细胞CD4/CD8值要显著低于白血病非细菌感染组和正常对照组,差异具有统计学意义(P<0.01),提示其细胞免疫功能受到抑制。③从ROC曲线可以得出,PCT作为诊断早期感染的指标准确性优于CRP和NEU%,而CD64诊断早期合并细菌感染时的特异度和敏感度略高于PCT ,所以CD64在诊断早期合并细菌感染时显示了更大的优势。结论 CD64对于白血病合并细菌感染具有良好的特异度,其对白血病合并细菌感染的早期诊断具有重要价值。
作者:孔曼;张红梅;罗振钊;曹晓淬;卢忠心 刊期: 2014年第06期
非窒息性气道异物在成人和儿童均是较常见的病症,随着内镜技术以及钳取设备的发展,非窒息性气道异物的病死率在逐渐下降。硬质气管镜和可弯曲支气管镜都可用于气道异物的取出[1]。但目前较少报道取出气道内玻璃异物的有效治疗方法,由于其光滑的表面使得常规设备,如活检钳、鳄鱼钳、金属网篮等难以奏效。近,我们收治1例左主支气管玻璃异物患者,在可弯曲支气管镜下应用冷冻方法成功取出,特报道如下。
作者:程胜;王正云;饶晓玲;左鹏;谢俊刚;熊维宁;徐永健 刊期: 2014年第06期
目的:研究丙戊酸钠(sodium valproate ,VPA)作为组蛋白去乙酰酶抑制剂对肺癌A549细胞人类M HCⅠ类分子链相关基因A (human M HC classⅠchain‐related A ,M ICA )蛋白表达的影响,并初步探讨其信号转导机制。方法使用不同浓度的VPA刺激处于对数生长期的肺癌A549细胞,培养24 h后使用RT‐PCR法检测肺癌A549细胞MICA mRNA水平,Western blot法检测MICA蛋白水平,得出佳VPA刺激浓度。分别以丝裂素活化蛋白激酶(mitogen‐ac‐tivated protein kinase ,MAPK)通路的3条主要通路抑制剂即 ERK1/2抑制剂(PD98059)、p38蛋白激酶抑制剂(SB203580)、JNK抑制剂(SP600125)预处理 A549细胞,再将 VPA依照预定适浓度分别加入培养24 h。使用 RT‐PCR法检测A549细胞MICA mRNA水平,Western blot法检测MICA蛋白水平。使用ELISA法检测上述各组A549细胞培养上清液中分泌型MICA(sMICA)蛋白水平。结果 RT‐PCR及Western blot检测结果显示加入VPA后A549细胞中MICA mRNA转录水平、MICA蛋白水平均显著升高(均 P<0.05);使用p38蛋白激酶抑制剂SB203580、ERK1/2抑制剂PD98059预处理,均能显著减弱VPA诱导的A549细胞MICA mRNA及蛋白水平的提高(P<0.05);各组细胞培养上清液中sMICA浓度无差异。结论 VPA能增强肺癌A549细胞MICA蛋白的表达,其机制可能与ERK、p38信号通路有关。
作者:梅花;周向东;陈贵华;蒋幼凡 刊期: 2014年第06期
目的:研究环氧合酶‐2(COX‐2)和过氧化物酶体增殖物激活受体‐γ(PPAR‐γ)蛋白在子宫内膜癌中的表达和临床意义,探讨COX‐2选择性抑制剂塞来昔布联合PPAR‐γ配体罗格列酮共同应用对于肿瘤细胞的干预效果。方法采用免疫组化方法,结合组织芯片技术,检测124例子宫内膜样腺癌、35例正常子宫内膜中COX‐2和PPAR‐γ蛋白的表达水平,结合临床病理因素进行分析。联合应用塞来昔布和罗格列酮处理RL95‐2子宫内膜癌细胞,观察其对于肿瘤细胞生物学行为的影响和协同抑瘤作用。结果在子宫内膜样腺癌中,COX‐2蛋白表达明显升高,PPAR‐γ蛋白表达相对降低,两者具有负性相关关系。塞来昔布和罗格列酮可以有效抑制RL95‐2子宫内膜癌细胞的增殖、侵袭、转移能力,联合应用抑制肿瘤的效果明显高于单独药物组。结论 COX‐2的高表达和PPAR‐γ的低表达与子宫内膜癌的发生、发展有密切关系,以COX‐2和PPAR‐γ为共同靶点,有望成为临床子宫内膜癌预防和治疗的重要手段和有效途径。
作者:冯振中;武世伍;李楠;蔡兆根;吕秀红;陈嘉薇 刊期: 2014年第06期
目的:观察奥沙利铂诱发外周神经病变时大鼠的疼痛行为学改变以及降钙素基因相关肽(calcitonin gene‐re‐lated peptide ,CGRP)的表达情况。方法20只Wistar大鼠随机分成对照组和实验组,实验组予以腹腔注射奥沙利铂(20 mg/kg)造模。分别在造模前、造模后6、24、72 h和7 d ,检测大鼠机械性痛阈和冷痛阈,应用Western blot及免疫组化检测脊髓背根神经节中CGRP蛋白的表达。结果造模后6 h大鼠机械性痛阈较正常对照组降低[(11.6±2.2)g vs.(13.9±3.7)g],并随着观察时间的延长而下降,在72 h降至低点(3.9±1.4)g ,一直持续到7 d ,冷刺激缩足潜伏期也呈现同样趋势的变化。奥沙利铂化疗后,大鼠脊髓背根神经节中CGRP表达明显升高,蛋白表达上调,并且与机械痛阈呈正相关。结论 CGRP在奥沙利铂诱导的外周神经病变大鼠中枢敏化中发挥重要促进作用。
作者:成薇婷;许凯 刊期: 2014年第06期
目的:了解珠海市2011~2013年围产儿出生缺陷的流行趋势及分布特点,并对出生缺陷的主要相关因素进行分析,为制订出生缺陷的预防措施提供依据。方法对珠海市2011~2013年所有监测机构的围产儿出生缺陷资料进行回顾性分析。结果珠海市2011~2013年间围产儿出生缺陷发生率为16.23‰,有逐年上升趋势( P<0.01);前5位出生缺陷类型依次为先天性心脏病、多指(趾)、并指(趾)、马蹄内翻足、唇裂合并腭裂;男性围产儿的出生缺陷发生率高于女性围产儿的发生率(P<0.01);城镇人口的出生缺陷发生率明显高于乡村(P<0.01)。产妇年龄大于35岁和小于20岁年龄组的围产儿出生缺陷发生率较高,分别为22.81‰、17.21‰。出生缺陷儿活产率为83.88%。临床诊断和超声诊断为主要的诊断依据,其中产前诊断所占比例为18.76%。结论珠海市围产儿出生缺陷发生率较高,应做好出生缺陷监测工作,积极开展三级预防,采取综合干预措施,降低出生缺陷的发生率。
作者:贝伟红;戚小兵;伍平;黄斯娜;于春荣;郭胜男 刊期: 2014年第06期
作者: 刊期: 2014年第06期
目的:观察钠‐钾‐氯共转运体1(Na+‐K+‐2 Cl-cotransporter 1,NKCC1)抑制剂布美他尼(Bumetanide)对脑微血管内皮细胞(BM EC )缺氧损伤后增殖的影响。方法将原代培养的大鼠BM EC分为3组:对照组、氧糖剥夺/复氧(OGD/Reo )组和OGD/Reo+Bumetanide(10μmol/L )组。在氧糖剥夺/复氧6、12、24和48 h时,用M T T法检测细胞活力,Edu染色以及流式细胞术检测细胞增殖及细胞周期情况。结果氧糖剥夺/复氧6、12、24 h ,BM EC活力下降,Edu染色阳性率减少且S期细胞减少。而与OGD/Reo组相比,OGD/Reo+Bumetanide组BM EC活力增加[复氧6 h:(0.497±0.039) v s.(0.612±0.044)],Edu染色阳性率增加[6 h时:(5.742±0.195)% v s.(7.125±0.144)%],且S期细胞增多[6 h时:(5.845±0.389)% v s.(7.124±0.542)%],差异均有统计学意义(均 P<0.05)。结论布美他尼可促进缺氧损伤后BMEC的活力及细胞增殖,提示NKCC1通路在BMEC缺氧损伤后的细胞增殖中发挥了重要作用。
作者:付佩彩;喻志源;李彩红;唐荣华;叶茂斌;王伟 刊期: 2014年第06期
目的:研究耳蜗内毛细胞带状突触在发育期铁缺乏过程中的变化特点。方法用普通饲料喂饲成熟雌性大鼠1周后,将其分成对照组和铁缺乏组,并分别给予普通饲料和铁缺乏饲料,2周后交配。仔鼠出生21 d断乳,出生40 d麻醉后行ABR听阈检测;ABR检测后,仔鼠经心脏采血,检测血红蛋白、平均红细胞容积、血清铁蛋白和血清铁;然后留取耳蜗,基底膜剥离,分别用CtBP2和VGLUT3进行免疫荧光标记,Dapi染核,激光共聚焦显微镜观察。结果发育期铁缺乏致仔鼠血清铁蛋白明显降低(P<0.05),而血红蛋白、平均红细胞容积和血清铁均无明显改变(P>0.05);发育期铁缺乏并未明显改变仔鼠ABR听阈(P>0.05),但P3与P1波间期延长(P<0.05)。另外,发育期铁缺乏降低CtBP2、VGLUT3表达水平。结论发育期铁缺乏可引起仔鼠内毛细胞带状突触形态和功能改变。
作者:于飞;郝帅;杨博;任亚浩;张瑞;杨军 刊期: 2014年第06期
基于分子印迹聚合物(molecular imprinting polymers ,M IP)的荧光传感器技术是将荧光与M IP相结合,通过光学信号的改变(包括荧光增强、荧光猝灭及波长改变等)来检测待测物。由于光学信号灵敏度高,非常适用于痕量物质的检测。而M IP又能选择性识别模板分子,将样品预处理和荧光检测两者结合起来,可实现快速、高灵敏度地检测靶分子。
作者:刘燕婕;胡玲娟;伍雅婷;吕斌 刊期: 2014年第06期
目的:探讨帕瑞昔布钠超前镇痛对子宫肌瘤患者术后镇痛效果以及细胞免疫功能的影响。方法选取2011年3月至2014年4月择期行子宫肌瘤切除术患者116例,随机分为超前组(n=58)和对照组(n=58),麻醉前30 min ,超前组采用40 mg帕瑞昔布钠进行静脉注射,对照组采用5 mL生理盐水进行静脉注射。利用视觉模拟评分法(VAS法)对两组患者术后疼痛情况进行评价,记录两组患者 PCIA泵首次触发时间、有效按压次数和芬太尼总量。分别于术前(T0)、术后6 h(T1)、24 h(T2)、48 h(T3)和72 h(T4)采集患者静脉血,采用FACS Calibur流式细胞仪检测T淋巴细胞亚群CD3+、CD4+和CD8+以及N K细胞,计算CD4+/CD8+。结果术后4、8、12、24和48 h ,超前组患者疼痛评分均低于对照组,差异均具有统计学意义(均 P<0.05);超前组患者PCIA首次触发时间晚于对照组,有效按压次数和芬太尼总量均少于对照组(均 P<0.05)。T1、T2和T3时点,超前组CD3+与CD4+细胞比例均高于对照组(均 P<0.05);T1和 T2时点,超前组CD4+/CD8+均高于对照组(均 P<0.05);T2和T3时点,超前组NK细胞比例均高于对照组(均 P<0.05)。结论帕瑞昔布钠超前镇痛应用于子宫肌瘤患者能够减轻患者术后疼痛,减少镇痛药用量,减轻免疫抑制,改善患者术后细胞免疫功能。
作者:李明勇;王倩青 刊期: 2014年第06期
目的:探讨影响主动脉夹层患者院内死亡的相关因素。方法回顾性分析482例主动脉夹层患者的临床资料,对部分相关因素进行单因素及多因素Logistic回归分析。结果主动脉夹层发病平均年龄为(54.17±11.94)岁,男女比例为3.63:1.00;临床主要以疼痛为首发症状(447例,92.74%),疼痛的部位多位于胸部和背部。Stanford A型患者胸部疼痛发生率高于Stanford B型患者,腹部疼痛发生率则低于 Stanford B型患者,差异均有统计学意义(均 P<0.05)。Stanford A型患者意识障碍和心包积液的发生率明显高于Stanford B型患者(P<0.05)。482例患者院内死亡49例,病死率为10.17%。Logistic回归分析提示,Stanford A型(OR=2.256,P=0.025)和并发意识障碍(OR=4.067, P=0.009)是主动脉夹层患者死亡的独立危险因素,入院舒张压水平偏高(OR=0.968,P<0.01)和手术或介入治疗(OR=0.170,P=0.001)是主动脉夹层的保护因素。结论主动脉夹层以疼痛为主要表现,Stanford A型、并发意识障碍是导致住院死亡的独立危险因素,舒张压水平偏高为保护因素,手术或支架治疗是降低死亡率较安全和有效的方法。
作者:刘曌宇;柴博兰;邹远林;曾和松 刊期: 2014年第06期
目的:探讨基质细胞衍化因子(SDF)‐1α诱导大鼠骨髓间充质干细胞分化的作用。方法密度梯度离心法分离培养原代大鼠骨髓间充质干细胞,经流式细胞术鉴定后传代培养,继而用重组SDF‐1α及其中和抗体孵育48 h ,以Western blot及免疫细胞化学法检测骨髓间充质干细胞表面标志表达变化,以Transwell小室法检测其迁移细胞数量的变化。结果大鼠骨髓间充质干细胞经SDF‐1α孵育后显著表达平滑肌细胞标志α‐SM A、SM‐22α和Calponin;与对照组相比,其迁移能力显著提高[(8375±1776)vs.(3950±875),P<0.05]。而在接受SDF‐1α孵育同时添加SDF‐1α中和抗体的骨髓间充质干细胞中,上述平滑肌细胞标志表达不明显,迁移力较对照组无明显变化[(4250±1816)v s.(3950±875),P>0.05]。结论 SDF‐1α可显著诱导骨髓间充质干细胞向平滑肌细胞分化,提示其可能是移植器官动脉硬化增生内膜的重要来源之一。
作者:李元;刘南;罗宏;张磊;熊俊 刊期: 2014年第06期