郝风节;陈孝平
目的 探讨高容量血液滤过治疗(high volume hemofiltration therapy,HVHF)对PiCCO监测数据的影响.方法 共有72名既接受HVHF治疗,又行PiCCO监测的患者纳入研究,其中62名患者经股静脉置入血滤管,10名患者经颈静脉置入血滤管.HVHF的血流速度>250 mL/min,置换液速度50 mL/(kg·h).在患者纳入研究时、断开血滤和重新连接血滤后通过PiCCO热稀释法进行血流动力学监测,分别记录心脏指数(cardiac index,CI),全心舒张末期容积指数(global end-diastolic volume indexed,GEDI)和血管外肺水指数(extravascular lung water indexed,EVLWI).结果 经股静脉和经颈静脉行HVHF的患者,通过PiCCO经肺热稀释技术测量在纳入研究时、断开血滤及重新连上血滤行HVHF时的 CI、GEDI和 EVLWI,经配对t检验和Wilcoxon检验差异无统计学意义(P>0.05).结论 HVHF对PiCCO经肺热稀释技术所测得的 CI、GEDI和 EVLWI不产生显著影响.血滤管路不同置入位置对PiCCO数据亦不产生显著影响.
作者:汪毓君;喻莉;刘金平;吕晓玉;龙鼎 刊期: 2013年第03期
目的 探讨Toll样受体7,8(Toll like receptor 7,8,TLR7,8)在非小细胞肺癌中的表达及其与非小细胞肺癌临床病理特征之间的关系,为进一步研究TLR在肺癌治疗中的应用提供理论依据.方法采用免疫组化SP法检测43例非小细胞肺癌组织和20例癌旁正常肺组织中TLR7、TLR8蛋白的表达水平,分析TLR7、TLR8的表达与非小细胞肺癌临床病理特征之间的关系.结果 ①TLR7主要在核周表达,TLR8在细胞质中表达,呈弥散表达.②TLR7在43例非小细胞肺癌阳性表达率为48.8%,高于癌旁正常肺组织的15.0%(P<0.05);TLR8在43例非小细胞肺癌组织阳性表达率为69.8%,高于癌旁正常肺组织的20.0%(P<0.05).③TLR7表达与年龄、吸烟、肺癌淋巴结转移、TNM分期、分化程度无相关性,与性别、病理类型有关.TLR8表达与吸烟有关.TLR7表达和TLR8表达无相关性.结论 TLR7、TLR8在非小细胞肺癌组织中的表达均高于正常肺组织.TLR7、TLR 8可能参与了肺癌的发病机制.
作者:马海丽;刘建;逯清丽 刊期: 2013年第03期
目的 分析种植体周围龈沟液(gingival crevicular fluid,GCF)中硫化物水平(sulfide levels,SUL)与种植体牙周指数之间的相关性,探讨SUL作为种植体牙周监测指标的可行性.方法 设种植体周围黏膜炎组(peri-implant mucositis,PIM)47例(47颗牙位);种植体周围炎组(peri-implantitis,PI)26例(26颗牙位)和健康种植牙对照组50例(50颗牙位).每个牙位记录6个位点,采用金刚牙周诊断仪测量所选位点GCF中SUL和种植体牙周临床指标:龈沟出血指数(sulcus bleeding index,SBI)、探诊深度(probing depth,PD)、附着丧失(attachment loss,AL).检查并记录菌斑指数(plaque index,PLI).各组数据采用SPSS 12.0进行统计学分析.结果 SUL在PI组(0.355 9±0.039 0)pg/mL、PIM组(0.125 3±0.037 1)pg/mL和对照组(0.052 8±0.017 3)pg/mL中存在统计学差异(P<0.01),且随着种植体周围组织病变程度的加重而上升;SUL与种植体牙周临床指标:PLI (r=0.733)、SBI (r= 0.859)、PD(r=0.873)、AL(r=0.606) 呈正相关(P<0.01).结论 种植体周围GCF中SUL与种植体牙周临床指标之间存在相关关系,其水平的高低变化可客观反映种植体周围组织的健康状态和病变进展.
作者:李明;逄爱慧;杨焰;吴丽娟;马净植 刊期: 2013年第03期
目的 应用慢病毒介导的shRNA基因沉默技术,有效沉默人胰腺癌细胞株Panc-1中Vimentin表达,并探讨下调Vimentin后对Panc-1细胞侵袭运动及粘附能力的影响及其机制.方法 Lv-VIM-GFP-shRNA慢病毒转染人胰腺癌细胞株Panc-1,Real-time PCR、Western blot和免疫荧光法检测慢病毒转染后Vimentin的沉默效率;Transwell小室体外运动侵袭实验及划痕实验比较细胞运动侵袭能力变化,细胞粘附实验检测细胞粘附能力的变化;Real-time PCR 和Western blot检测肿瘤侵袭和粘附相关因子的表达,免疫荧光法观察转染前后细胞骨架蛋白F-actin和黏着斑激酶FAK的变化.结果 Lv-VIM-GFP-shRNA慢病毒转染Panc-1后能稳定下调其Vimentin的表达(P<0.01).Transwell小室及划痕实验显示,下调Vimentin后能显著抑制Panc-1细胞的侵袭及迁移能力(P<0.01).粘附实验结果显示,粘附30 min后,转染Lv-VIM-GFP-shRNA组较对照组粘附Collagen Ⅳ和FN的细胞数量均减少(P<0.05).下调Vimentin后对肿瘤侵袭及粘附相关因子的mRNA和蛋白水平无明显影响(P>0.05),但能引起细胞骨架F-actin的解聚以及黏着斑激酶FAK的重排.结论 Vimentin基因沉默后可能通过引起F-actin骨架解聚、黏着斑激酶FAK重排来降低细胞与细胞外基质的粘附及细胞运动能力,从而抑制胰腺癌细胞的侵袭和转移.
作者:李旭;江建新;王敏;朱峰;田锐;申铭;秦仁义 刊期: 2013年第03期
目的 比较不同自体神经移植材料在移植修复周围混合神经缺损时的再生效果.方法 取45只SD大鼠,随机分成3组,分别切除0.5 cm右侧坐骨神经,建立神经缺损模型.运动神经移植组:取左侧后肢的股神经运动支移植修复缺损的坐骨神经;感觉神经移植组:取左侧后肢的腓肠神经移植修复缺损的坐骨神经;混合神经移植组:取左侧后肢的坐骨神经移植修复.分别于术后2、4和8周,采用神经夹捏实验测量神经再生长度,处死动物后取下术侧腓肠肌称取肌肉湿重.术后8周取胫神经远侧吻合口远端3 mm神经组织行甲苯胺蓝染色,同时电镜下观察神经纤维的直径及髓鞘的厚度,采用图像分析软件进行图片分析,计数神经纤维总数并计算神经纤维的密度.结果 神经再生长度,术后2周时3组间差异无统计学意义;术后4、8周时运动神经移植组及混合神经移植组大于感觉神经移植组(均P<0.05).腓肠肌湿重,术后2、4周时3组间差异无统计学意义;术后8周时运动神经移植组和混合神经移植组重于感觉神经移植组(均P<0.05).术后8周时,在运动神经移植组和混合神经移植组中可见大量神经纤维生长,神经纤维的数量、轴突的密度均大于感觉神经移植组(均P<0.05);再生神经轴突在运动神经移植组更加成熟.结论 不同的神经移植材料对自体神经移植再生效果有着显著影响.运动神经及混合神经移植修复自体周围神经缺损时的再生效果优于感觉神经移植.
作者:黄启顺;甘萌;郑怀远;周学武;周攀;陈振兵 刊期: 2013年第03期
淋巴瘤是临床上常见的恶性肿瘤之一,起源于淋巴结和淋巴组织,其发生与免疫应答过程中淋巴组织增殖分化产生的某种免疫细胞恶变密切相关.根据细胞形态和组织学特征,分为霍奇金淋巴瘤(Hodgkin's lymphoma,HD)和非霍奇金淋巴瘤(non-Hodgkin's lymphoma,NHL)两大类.世界卫生组织新分类指出:根据形态学特征、细胞起源以及免疫表型等数据将NHL分为20多个亚型[1].全世界淋巴瘤患者在450万以上,我国的男、女发病率分别为1.39/10万和0.84/10万,以20~40岁多见,死亡率排在恶性肿瘤的第11~13位[2-3].
作者:王朋;兰晓莉;齐红艳;张永学 刊期: 2013年第03期
目的 探讨胚胎发育不良性神经上皮瘤的临床病理特点、影像学特征、诊断及鉴别诊断.方法 采用苏木精-伊红(HE)染色法,免疫组化方法,结合影像学特征对13例胚胎发育不良性神经上皮瘤进行观察分析.结果 13例患者均以癫痫发作为主要临床表现,影像学检查显示病灶均呈T1WI低信号,T2WI高信号.肿瘤组织黏液变明显,多见囊腔形成,肿瘤细胞主要由少突胶质样细胞、神经元和星形细胞组成,可见单个神经元漂浮在微囊的黏液样基质中.免疫组化检测显示S-100(+),Syn(+),GFAP(+),Ki-67呈阳性表达,且均呈低增殖活性(<2%).结论 胚胎发育不良性神经上皮瘤属于良性肿瘤(WHO Ⅰ级),可通过临床表现、影像及病理形态学特点结合免疫组化检测明确诊断.
作者:齐琦;郭飞;武世伍;陈晓青 刊期: 2013年第03期
目的 比较两种不同超滤方法对成人心脏直视手术库血用量的影响.方法 100例成人心脏直视手术患者随机分为两组,零平衡超滤组(A组)和零平衡超滤+改良超滤组(B组),每组50例.两组在体外循环(ECC)开始后均进行零平衡超滤,ECC结束后A组停止超滤,而B组继续进行改良超滤10~12 min,流量10~15 mL/(kg·min).观察两组患者血红蛋白(Hb)在术前、术中、停机、关胸时的变化,对比两组患者库血的用量.结果 两组患者在年龄、体重及体外循环时间上差异均无统计学意义(均P>0.05);Hb水平在术前、术中、停机时差异无统计学意义,而关胸时B组明显高于A组(P<0.05);库血用量B组低于A组,差异有统计学意义(P<0.05).结论 成人心脏直视手术中应用零平衡超滤+改良超滤可以迅速提高患者术后Hb水平,明显减少临床库血用量.
作者:胡琳;孙图成;陈建锋 刊期: 2013年第03期
目的 探讨在黄体中期促性腺激素释放激素激动剂(GnRHa)长方案中促性腺激素(Gn)刺激时间对于体外受精-胚胎移植(IVF-ET)结局的影响.方法 回顾性分析了2009年1月到2011年12月在武汉大学人民医院生殖中心首次接受IVF-ET治疗的1 119例患者的临床资料,分析患者促排卵情况与Gn刺激时间的分布情况.并将患者按照Gn刺激时间分为7组,比较各组患者的一般情况、卵巢储备功能、IVF治疗经过、IVF治疗结局等,研究不同Gn刺激时间与IVF结局的关系.结果 全部患者按Gn刺激时间分为≤9 d、10 d、11 d、12 d、13 d、14 d、≥15 d,共7组,各组病例数及构成比分别为:57(5.1%)、137(12.2%)、247(22.1%)、272 (24.3%)、192 (17.2%)、122(10.9%)、92 (8.2%),其中Gn刺激时间为12 d组比例高.平均Gn刺激时间为 (11.8±1.8)d,临床妊娠率(CPR)为47.3%.各组的平均年龄、不育年限及卵巢储备情况无差异.Gn刺激时间为11~13 d组IVF结局好,临床妊娠率、活胎分娩率高,流产率和周期取消率低;而刺激时间过长(≥14 d)和过短(≤10 d)者IVF结局均较差.结论 Gn刺激时间可以初步预测IVF结局,Gn刺激时间过长与过短都可能预示不良的IVF结局.
作者:程丹;杨菁;熊承良;徐望明;李洁;邹宇洁;郭跃;彭祥炽 刊期: 2013年第03期
宫内节育器(IUD)是一种放置在子宫腔内的避孕装置,由于节育环对全身干扰较少,作用于局部,取出后不影响生育,具有安全、有效、可逆、简便、经济等优点,是常用的节育用具之一.IUD为我国育龄妇女的主要避孕措施,目前约70%妇女选用IUD作为避孕方法,占世界使用IUD避孕人数的80%[1].目前,国内IUD的种类繁多,其中,元宫型Cu365 和花式环的使用频率较高,本研究就这两种IUD的临床使用效果进行分析和比较,现将结果总结报告如下.
作者:苏莉;吴治 刊期: 2013年第03期
目的 探讨1,5-二咖啡酰奎宁酸(1,5-diCQA)是否通过激活Nrf2而减轻1-甲基-4-苯基吡啶离子(MPP+)所致的PC12细胞损伤,并对可能的信号通路进行研究.方法 采用MPP+处理具有多巴胺(DA)能神经元特性的PC12细胞作为帕金森病(PD)的体外模型.实验分为正常对照组、MPP+处理组、1,5-diCQA预处理+MPP+处理组,为了观察1,5-diCQA预处理的浓度-效应关系,将1,5-diCQA的浓度设为10、20、50、100 μmol/L.用CCK8法测定各组细胞存活率,酶标仪检测细胞谷胱甘肽(GSH)水平和活性氧族(ROS)水平,Western blot 检测各组细胞的Nrf2蛋白水平.进一步采用siRNA转染沉默Nrf2,加入MAPK家族一系列激酶抑制剂后再检测上述相关指标.结果 MPP+ (250 mmol/L)处理PC12细胞24 h后,与正常对照组相比,细胞存活率下降,GSH耗竭,ROS生成增多,说明PD细胞模型建立成功.不同浓度的1,5-diCQA预处理可以减轻MPP+导致的细胞损伤,且在一定范围内具有量效关系;不同浓度的1,5-diCQA预处理可以明显上调Nrf2蛋白的水平.沉默Nrf2后,1,5-diCQA预处理对MPP+诱导损伤的PC12细胞的保护作用消失,细胞存活率未能回升[MPP+组vs.MPP++1,5-diCQA组:(19.47 ± 1.65)% vs.(21.13 ± 2.85)%,P=0.352 6],GSH水平在Nrf2敲除的PC12细胞中明显下降[NT siRNA组vs.Nrf2 siRNA组:(15.05 ± 1.71)nmol/mg protein vs.(4.31 ± 0.83) nmol/mg protein,P<0.001],且1,5-diCQA预处理对GSH耗竭的逆转效应也消失.对MAPK激酶家族的一系列激酶进行信号通路筛选发现,Erk激酶参与了1,5-diCQA通过激活Nrf2而减轻MPP+诱导的PC12细胞损伤这一过程.结论 1,5-diCQA可浓度依赖性地减轻MPP+诱导的PC12氧化应激损伤.这种保护作用是通过激活Erk激酶,进而激活Nrf2,然后上调细胞内源性抗氧化系统来实现的.
作者:肖海兵;李建英;曹旭;刘人恺;李雯飞;杨志刚;林勤郁;杨春水 刊期: 2013年第03期
目的 基于一个完整的乙型肝炎病毒(HBV)感染自然史的4个时期(免疫耐受期、免疫清除期、不活动期和HBeAg阴性肝炎阶段),研究HBV表面抗原各抗原表位的免疫逃逸突变分布.方法 收集280例患者的临床资料及血清标本,按照HBV自然史的不同时期分为4组,提取DNA并荧光定量,通过巢式PCR扩增HBV表面基因序列,以PCR产物作为模板进行DNA测序.分析比较4组乙肝表面抗原中辅助性T细胞(Th)表位、细胞毒性T淋巴细胞(CTL)表位及B细胞抗原表位的突变差异.结果 Th抗原表位突变中,4组间比较具有差异的是17-31、37-51、67-81等区域,CTL抗原表位突变中具有差异的是14-22、41-49等区域,在B细胞抗原表位区域发现了Q101K、P120S、T126S、Q129H、M133L、M133I、和M133T等7个乙肝表面抗原免疫逃逸突变.结论在HBV感染自然史中,表面抗原突变的累积发生在免疫清除期,突变的产生有利于HBV逃避免疫系统的攻击.
作者:王卫华;宋建新 刊期: 2013年第03期
目的 观察不同时程低氧诱导的肺动脉高压小鼠肺组织中IL-17 mRNA及其蛋白表达水平的变化,探讨IL-17在低氧诱导肺动脉高压中的作用.方法 建立小鼠低氧诱导肺动脉高压模型,监测小鼠血流动力学改变、右心室肥厚指数(RV/LV+S),RT-PCR技术检测对照组及低氧3周、6周组肺组织IL-17 mRNA表达水平变化,Western blot技术检测相应蛋白表达水平变化及免疫组化方法对IL-17进行定位.结果 与对照组相比,低氧诱导下小鼠右心室收缩压力及右心室肥厚指数均明显升高,且差异有统计学意义(均P<0.01),证实肺动脉高压模型成功建立.随着低氧时间的延长,IL-17 mRNA及其蛋白表达水平也逐渐增加,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01).IL-17主要定位于内皮细胞,肺泡上皮细胞也有表达.结论 IL-17可能在低氧诱导肺动脉高压发生、发展过程中扮演了重要角色.
作者:王宏飞;张安臣;李飞飞;刘波;李冬寒;杜心灵 刊期: 2013年第03期
目的 探讨应用CT三维成像技术指导微创治疗慢性泪囊炎,以提高手术成功率.方法 通过CT三维成像技术测量骨性泪道的长度及小直径.依据泪道长度小于13.9 mm及小直径大于3.1 mm将患者分为3组:同时满足以上条件者为A组(23例),满足其中之一者为B组(26例),未达到以上条件者为C组(24例).3组患者均行泪道逆行置管手术.对照组(43例)采用泪囊鼻腔吻合术.结果患者行泪道逆行置管术的治愈率为65.75%,低于对照组(88.37%)(P<0.01).A组患者手术治愈率(82.61%)与对照组相比较差异无统计学意义(P>0.05).结论通过CT三维成像技术选择泪道长度短、直径大的患者行泪道逆行置管术,可以有效提高手术成功率.
作者:李劲;彭伟;肖琼;周秀珍;蒋莉;席兴华 刊期: 2013年第03期
目的 旨在明确目前几种骨癌痛动物模型与临床特征的拟合情况.方法 查阅从1999年到2012年5月Pubmed数据库中骨癌痛动物研究的相关文献,并采用回顾性研究,纳入2010年5月至2011年3月在同济医院肿瘤科住院的骨转移瘤患者81例以及2010年5月至2012年5月在该院就诊的原发骨肿瘤患者12例,对患者的一般资料、原发肿瘤部位、骨转移部位和骨疼痛相关信息进行统计分析.结果 共分析了7种不同骨癌痛动物模型的26项研究.临床回顾性分析显示,绝大部分骨肿瘤患者为骨转移患者;骨转移疼痛与原发骨肿瘤疼痛在发病年龄、疼痛是否为首发症状以及疼痛类型上均有显著差异;四肢近端骨转移较远端骨更为常见.结论 注射转移性肿瘤细胞造模、股骨为成瘤点、测量方法中包含爆发痛测量的动物模型相对能够较好地模拟骨癌痛临床情况,其研究结果能为临床研究和治疗提供较为有效的参考.
作者:桂琦;陈豫;于世英 刊期: 2013年第03期
目的 探讨纳米载体壳聚糖(chitosan,CS)包裹新型抑癌剂滔罗定(taurolidine,TRO)所合成的纳米凝胶对CO2气腹后HeLa细胞侵袭性的抑制作用.方法以0.02%的壳聚糖为纳米载体,制备滔罗定凝胶,采用扫描电镜观察新鲜制备的纳米凝胶形态.以终浓度为0.2 mg/mL的壳聚糖-滔罗定凝胶处理HeLa细胞24 h后,Transwell小室法检测细胞处理前后侵袭及迁徙能力的改变.结果 所制备的壳聚糖-滔罗定凝胶为匀质、透明的胶样液体,电镜下凝胶为大量纤维交织形成支架的匀质结构,支架间空隙直径为50~300 μm.CO2气腹后HeLa细胞侵袭及迁徙的数目为(69.2±1.5)和(90.5±4.1),经壳聚糖-滔罗定凝胶处理后,数目分别减少到(20.8±2.5)和(61.3±2.8),差异有统计学意义(均P<0.05).结论 壳聚糖-滔罗定凝胶能很好抑制CO2气腹后HeLa细胞的侵袭及迁徙特性,有可能成为腹腔镜CO2气腹后减少肿瘤转移的较好的治疗方式.
作者:杨琰;黄颢;严兆华;吕炎;张凤兰 刊期: 2013年第03期
目的 研究大鼠小肠对黄连粉末中盐酸小檗碱及盐酸药根碱的吸收特性.方法 采用大鼠体内肠灌注实验研究黄连粉末中盐酸小檗碱和盐酸药根碱在大鼠小肠内的吸收过程,采用高效液相色谱法分别测定其含量.结果 黄连粉末中盐酸小檗碱、盐酸药根碱与对照品盐酸小檗碱、盐酸药根碱比较,吸收速率常数(Ka)差异无统计学意义(均P>0.05),但吸收百分率差异有统计学意义(均P<0.01);黄连粉末中盐酸小檗碱吸收百分率为对照品盐酸小檗碱吸收百分率的近3.6倍,对照品盐酸药根碱吸收百分率为黄连粉末中盐酸药根碱吸收百分率的近2倍.结论 黄连粉末直接服用有利于其所含盐酸小檗碱在小肠部位的吸收,而不利于盐酸药根碱的吸收.
作者:魏世超;徐丽君;邹欣;陆付耳;王开富 刊期: 2013年第03期
目的 了解湖北省浩口地区农村居民对慢性阻塞肺疾病(COPD)的认知情况,为进一步制定针对性的健康教育和管理策略提供依据.方法 采取分层整群随机抽样方法,对浩口地区年龄≥40岁的农村居民1 554人进行调查.采用统一的流行病学调查表格,并进行体检和肺功能检测,以支气管舒张试验后(FEV1/FVC)×100%<70%作为COPD的诊断标准.结果 共检出COPD患者173例,其中Ⅰ级63例(36.42%)、Ⅱ级74例(42.77%)、Ⅲ级32例(18.50%)、Ⅳ级4例(2.31%).被调查者中无人了解COPD这一疾病名称及COPD急性加重的概念.有132人(8.49%)认为COPD的发生与吸烟有关,受检地区居民吸烟率为57.14%(888/1 554),戒烟率26.58%(236/888).COPD稳定期患者中无人规律使用长效支气管扩张剂、吸入激素或混合制剂;无人使用家庭长期氧疗及康复治疗.COPD急性加重期患者分别有69人(39.88%)和13人(7.51%)单独使用抗生素或茶碱治疗.173名COPD患者中,52人(30.06%)在家中的活动受到COPD的影响,98人(56.65%)因COPD而影响外出的频率.结论 浩口地区农村居民COPD患病率高,认知能力差,治疗不规范,防治意识欠缺,患者生活质量受损,需加强健康教育和管理.
作者:马静;刘先胜;赵建平;刘辉国;谢俊刚;熊维宁;徐永健;张珍祥 刊期: 2013年第03期
目的 论证2,3,7,8-四氯联苯对二恶英(2,3,7,8-tetrachlorodibenzo-p-dioxin,TCDD)激活芳香烃受体(aryl hydrocarbon receptor,AHR)在小鼠肾脏缺血再灌注损伤(ischemia-reperfusion injury,IRI)中的保护作用并探讨其机制.方法 建立C57BL/6小鼠肾脏缺血再灌注损伤模型,设TCDD治疗组(术前24 h腹腔注射TCDD 0.5 μg /只)及PBS对照组(术前24 h腹腔注射PBS 200 μL/只),另设假手术组及正常组.观察各治疗组模型的生存时间,评估其病理变化并评分,检测外周血肌酐、尿素氮浓度.体外实验观察TCDD对初始型T细胞(naive T细胞)定向分化为调节性T细胞(Treg细胞)的影响.流式细胞技术检测IRI模型小鼠脾脏、外周血中Treg细胞的比例.结果 与PBS对照组相比,TCDD治疗组小鼠生存时间明显延长,肾功能(血肌酐和尿素氮)明显改善(均P<0.05).TCDD治疗组肾脏病理变化明显减轻,评分优于PBS对照组(P<0.05).体外实验中TCDD的干预明显提升了Treg细胞的比例(P<0.05),而在IRI模型中TCDD激活AHR也显著提升了脾脏以及外周血中Treg细胞比例(P<0.05).结论 TCDD激活AHR明显改善小鼠肾脏缺血再灌注损伤模型的肾功能,机制可能与TCDD选择性诱导Treg细胞亚群的扩增有关.
作者:蔡兰军;余道武;高义;杨超;周鸿敏;陈忠华 刊期: 2013年第03期
目的 探讨Toll样受体家族(Toll-like receptors,TLRs)基因在人肺腺癌细胞(A549细胞)和人支气管上皮细胞(HBE细胞)中的表达及意义.方法 通过GenBank网站查找基因全序列,根据引物设计原则应用软件Primer 5.0设计TLR2、TLR3、TLR9和内参β-actin引物.体外培养A549细胞和HBE细胞,提取细胞总RNA并逆转录得到cDNA,采用实时定量荧光PCR检测TLRs基因mRNA在这2种细胞中的表达.琼脂糖凝胶电泳检测各扩增产物片段大小.采用Western blot检测TLR2、TLR3、TLR9蛋白的表达.结果 TLR2、TLR3、TLR9基因在A549细胞中的表达丰度均比在HBE细胞中高(P<0.01).琼脂糖凝胶电泳显示扩增产物符合预期片段大小.TLR2、TLR3、TLR9蛋白在A549细胞中的表达相对值分别为(0.472 8±0.010 3)、(0.319 3±0.011 2)和(0.856 9±0.007 9),而在HBE细胞中的表达相对值分别为(0.258 5±0.005 7)、(0.160 7±0.003 0)和(0.699 1±0.010 0),A549细胞中TLR2、TLR3、TLR9表达的相对值均高于HBE细胞(均P<0.01).结论 TLR2、TLR3、TLR9基因在A549细胞中的表达高于HBE细胞,提示TLRs基因可能参与人肺腺癌的发生发展.
作者:喻钧;潘铁成;魏翔;李军;潘友民;刘立刚;胡敏 刊期: 2013年第03期