闵洁；王泽华
目的探讨建立慢性应激抑郁大鼠模型的实验方法及此模型的有效性.方法利用慢性不可预见的中等强度应激制作抑郁模型,观察动物的体重和摄食量的变化,用敞箱试验及液体消耗实验测定动物行为.结果大鼠抑郁模型在第28天建立成功.抑郁组大鼠体重增加量、摄食量、敞箱试验得分、液体消耗试验中糖水消耗和糖水偏爱百分比均明显下降,纯水消耗显著提高.结论慢性不可预见的中等强度应激可以成功建立大鼠抑郁模型.
作者：夏军；叶慧；周义成；张景峰；夏黎明；王承缘 刊期： 2005年第04期
目的探讨早期康复对急性脑卒中患者吞咽、上下肢运动功能及日常生活能力的影响.方法选择急性脑卒中患者96例,随机分为康复组和对照组(每组48例).用前瞻性研究方法对两组进行比较分析.两组在给予临床药物+针灸治疗的同时,康复组进行正规的康复训练,对照组进行未经指导的自我锻炼.分别于人选治疗前24 h及治疗后4周进行测评.吞咽功能、运动功能、日常生活能力、神经功能缺损分别采用日本洼田咽水试验、Fugl-Meyer运动积分法(FMA)、Barthel指数(BI)、神经功能缺损程度评分标准(1995)进行评定.结果经过4周的治疗,两组吞咽功能、肢体运动功能均有一定程度改善,日常生活能力提高,康复组改善幅度明显高于对照组(P＜0.01或P＜0.05).结论急性脑卒中患者进行早期康复治疗,能明显改善吞咽功能、肢体运动功能,提高日常生活能力,提高患者的生活质量.
作者：潘翠环；蒲蜀湘；高聪；何镜清 刊期： 2005年第04期
目的探讨牛膝多糖对外周血单核细胞是否具有激活作用.方法分别应用中性红试验检测牛膝多糖(1.250 mg/ml)对单核细胞吞噬作用的影响;非特异性脂酶染色及电镜技术检测牛膝多糖(1.250 mg/ml)诱导单核细胞内溶酶体的改变;0.312、1.250、5.000 mg/ml牛膝多糖对体外培养的外周血单核细胞进行诱导培养12 h,ELISA法测定单核细胞肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-6(IL-6)的表达.结果牛膝多糖能增强单核细胞的吞噬作用,增加单核细胞胞质内溶酶体量,显著诱导单核细胞表达TNF-α和IL-6.结论牛膝多糖对单核细胞具有激活作用.
作者：宁勇；姚彩萍；王宇学；陈家春 刊期： 2005年第04期
目的研究白细胞介素-8(IL-8)在食管癌组织中的表达变化,以及此变化对肿瘤血管形成、患者预后的影响.方法利用实时逆转录聚合酶链反应(real time RT-PCR)和免疫组织化学技术检测食管癌及正常组织中IL-8mRNA和蛋白表达,并采用Ⅷ因子相关抗原(FⅧRAg)检测微血管密度.结果食管癌组织中IL-8 mRNA及蛋白表达显著高于正常组织.IL-8 mRNA高表达与远处淋巴结转移、微血管高密度、生存时间短(＜26个月)、早期复发(＜16个月)有关(均P＜0.05).癌组织中微血管密度比周围正常组织高(P＜0.01).结论在食管癌中,IL-8mRNA高表达的患者发生转移机率高,复发早,生存时间短;IL-8可以作为一个判定食管癌预后的指标.
作者：苏铁芬；Bettina Tilton；袁永辉；李娜萍；Martin Schilling；吴人亮 刊期： 2005年第04期
目的探讨褪黑素(Mel)在甘油诱导的急性肾功能衰竭(ARF)大鼠模型中的作用及对肾组织局部肝细胞生长因子(HGF)及其受体(C-met)表达的影响.方法将SD雄性大鼠随机分为3组:对照组(CTL组)双侧后腿肌肉注射生理盐水;模型组(ARF组)双侧后腿肌肉注射甘油;褪黑素组(Mel组)腹腔注射Mel后30 min,双侧后腿肌肉注射甘油.分别在1、6、12、24、36、48、72、120 h检测血尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)、肾组织匀浆超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)水平.观察肾组织形态学改变,并用免疫组织化学法检测HGF及C-met蛋白在肾脏的表达.结果与ARF组相比,Mel组肾功能(BUN、Cr)明显改善,肾组织匀浆SOD活性升高、MDA下降,肾小管上皮细胞HGF/C-met表达增强,差异均有显著性意义(P＜0.05或P＜0.01).结论褪黑素对ARF大鼠肾脏有保护作用,能够增强HGF及其受体C-met蛋白的表达,促进损伤的肾小管恢复.
作者：沈延春；朱忠华；邓安国；祝高红 刊期： 2005年第04期
目的初步研究确定体内表达可溶性B、T淋巴细胞衰减因子(BTLA)对肿瘤生长的抑制作用,探索新的肿瘤免疫治疗途径.方法采用RT-PCR及重组DNA技术构建可溶性BTLA真核表达质粒,体外细胞转染检测重组质粒的转录表达,小鼠实体瘤模型研究基因转染抑制肿瘤生长的作用.结果用RT-PCR从小鼠脾细胞中扩增出编码BTLA胞外段cDNA,克隆至真核表达载体pcDNA3.1,获得重组表达质粒pBTLA;体外转染BHK细胞可检测到重组质粒的转录表达;肌肉内注射转染质粒pBTLA可明显抑制H22小鼠肿瘤的生长.结论可溶性BTLA能够抑制肿瘤生长,提示B7x-BTLA途径参与肿瘤免疫耐受,封闭此途径有可能成为肿瘤免疫治疗的新靶点.
作者：陈芳；朱旭昆；贺宇飞；王晶；阳诺；张桂梅；冯作化 刊期： 2005年第04期
目的建立一种分析方法证实流式细胞术对细胞凋亡分析的准确性.方法在流式细胞仪上利用Sub-G1法、TdT法、Annexin-Ⅴ法和API法4种不同的凋亡细胞分析方法,对羟基喜树碱(CAM)诱导的急性T淋巴细胞白血病细胞株(Jurkat细胞)进行流式细胞术分析并同时分选出不同时相的凋亡和非凋亡细胞,再经激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)进行形态学分析.结果①流式细胞术分选后共聚焦显微镜分析技术(PSC)能同时、准确地鉴别不同细胞周期时相的凋亡细胞和非凋亡细胞.②PSC技术能对同一群细胞内的凋亡细胞和坏死细胞进行形态学鉴别.③PSC技术证实了流式细胞术在细胞凋亡研究中的准确性.结论PSC技术结合了流式细胞术和LSCM的优点,更客观、准确地分析凋亡细胞,同时对细胞周期特异性的细胞凋亡有独到的优势,发展了细胞凋亡的分析方法.
作者：高纯；吴剑宏；冯永东；申漫里；陶德定；龚建平 刊期： 2005年第04期
目的探讨汉坦病毒H8205株G1-人源IL-2融合基因疫苗(pcDNA3.1/HisB-IL-2-G1)的免疫效应.方法将pcDNA3.1/HisB-IL-2-G1融合基因疫苗通过肌肉注射途径免疫BALB/c小鼠,每隔3周免疫1次,共免疫3次;酶联免疫法(ELISA)检测抗汉坦病毒(HTNV)抗体;空斑减少中和试验检测免疫血清中和抗体效价;淋巴细胞增殖试验(MTT法)检测免疫小鼠的细胞免疫反应;动物保护试验以BALB/c小鼠为感染动物模型,在第3次免疫后2周,腹腔内注射100 TCID50(半数感染量)HTNV,然后以免疫荧光法观察鼠肾切片,评价其保护力.结果pcDNA3.1/HisB-IL-2-G1融合基因疫苗免疫后可刺激机体产生特异性抗体和中和抗体,中和效价为1:20～1:80.MTT法结果表明,免疫小鼠的脾淋巴细胞有特异性增殖反应.动物试验表明pcDNA3.1/HisB-IL-2-G1融合基因疫苗能保护小鼠免受HTNV感染.结论pcDNA3.1/HisB-IL-2-G1融合基因疫苗可诱导特异性体液免疫应答和较强的细胞免疫应答.
作者：贾珉；张泽华；胡洪波；黄汉菊；任刚 刊期： 2005年第04期
目的研究白细胞介素-5(IL-5)对人嗜酸性粒细胞(Eos)中转化生长因子-β1(TGF-β1)表达的调控作用.方法采用改良的密度梯度离心法分离并体外培养人外周血Eos,实验组加入相同浓度的白细胞介素-4(IL-4)、IL-5和干扰素γ(IFNγ)以及不同浓度的IL-5共同培养,ELISA和RT-PCR法检测细胞培养上清液TGF-β1蛋白和mRNA的表达.结果与对照组相比,浓度均为10-9mol/L的IL-4、IL-5在蛋白水平和转录水平对TGF-β1的表达均有上调作用,而IFNγ则表现为抑制;10-11、10-9、10-7mol/L IL-5均能显著增强体外培养的Eos中TGF-β1蛋白的表达.结论Th2型细胞因子IL-5可以上调人嗜酸性粒细胞中TGF-β1的表达.
作者：黄亚冰；刘斌；朱珉；甄忠广；曾志贵；王璐；陈实 刊期： 2005年第04期
目的探讨生长激素相关基因突变与原发闭经的关系.方法对130例确诊为原发闭经的患者和30名健康女性个体进行核型分析,并采用单链构象多态性分析(SSCP)等方法,对原发闭经患者的生长激素释放激素受体基因(GHRHR)进行检测.结果有33例原发闭经患者出现染色体核型异常,1例出现GHRHR基因点突变,且该突变位点在第7个外显子中.结论GHRHR基因第7个外显子的点突变可能是原发闭经的病因之一.
作者：刘学飞；杨真荣；王慧；周波；陈燕；唐艳平 刊期： 2005年第04期
目的研究苯并(a)芘(BaP)作用下小鼠肺组织细胞色素P450 1A(CYP1A)的表达和肺组织病理形态学改变.方法昆明种雄性小鼠56只,随机分为2组(28只/组),BaP染毒组(4个亚组,7只/亚组),分别以0、0.32、1.58、7.89 mg/kg体重腹腔注射BaP,每周染毒4 d,持续7周;预热染毒组(4个亚组,7只/亚组),每次实验前39℃,预热2 h,再用染毒组相同的剂量和时间至染毒结束.其中0 mg/kg体重BaP为植物油溶剂;采用West-ern blot法检测小鼠肺组织CYP1A表达水平,光镜观察肺组织病理学变化.结果0.32 mg/kg体重BaP染毒时,小鼠肺组织CYP1A表达增加,BaP剂量继续增加,CYP1A表达反而降低;预热应激组CYP1A表达有相同的变化趋势,但比相同剂量的BaP染毒组表达水平高;BaP染毒后小鼠肺组织有炎性增生的表现.结论低剂量BaP染毒诱导小鼠肺组织CYP1A表达增加,高剂量BaP染毒则抑制CYP1A表达.
作者：徐增光；文冠华；高雅娟；杨晓波；邬堂春 刊期： 2005年第04期
目的用微量热法研究银对大肠埃希菌生长代谢的影响及其抗菌性能.方法采用微量热法得出AgNO3对大肠埃希菌作用的热功率输出曲线,通过计算机线性拟合,计算出大肠埃希菌在不同浓度的AgNO3作用下生长速率常数k、抑制率I等参数.结果随着AgNO3浓度的增加,大肠埃希菌的生长代谢速率常数减小,生长峰后移.当AgNO3的浓度为0.7μg/ml时,抑制率达到100%.结论微量热法的定量结果显示AgNO3具有优良的抗菌作用.
作者：徐瑛；石立红 刊期： 2005年第04期
目的探讨雄激素脱氢表雄酮(DHEA)对氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)表达血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)的影响.方法体外培养HUVECs,采用免疫细胞化学、Westernblot、原位杂交等方法,观察不同浓度DHEA(1,5,50μmol/L)对ox-LDL诱导的HUVECs表达VCAM-1的影响.结果ox-LDL诱导培养HUVECs后,HUVECs VCAM-1表达明显升高,预先用DHEA处理HUVECs可使VCAM-1的表达降低(P＜0.01),且这种降低呈浓度依赖性.结论DHEA能浓度依赖性地抑制ox-LDL诱导的HUVECs VCAM-1的表达.
作者：周英；宋雪芳；阮秋蓉 刊期： 2005年第04期
目的探讨肾上腺转移癌的临床特点与诊治方法.方法对1992年至2003年收治的18例肾上腺转移癌患者的病理、临床表现、治疗及预后进行回顾性研究.结果肾上腺转移癌原发肿瘤中肺癌7例,肝癌4例,乳腺癌3例,肾癌2例,胃癌和胆管癌各1例.临床表现为腰背部胀痛5例,乏力、消瘦3例.完整切除肾上腺转移癌的8例患者术后平均生存期(28个月)比非手术组(9.5个月)长(P＜0.05).结论肾上腺转移癌患者大多无特异性临床症状;B超和CT在肾上腺转移癌的诊断中具有重要作用;外科手术可延长患者生存期.
作者：李兵；曾甫清；何朝宏；张齐钧；肖传国 刊期： 2005年第04期
目的制备特异的能区分人跨膜型肿瘤坏死因子(TM-TNF-α)和分泌型肿瘤坏死因子(sTNF-α)的多克隆抗体.方法借助抗原肽预测软件对TM-TNF-α的抗原表位进行预测,合成TM-TNF-α特异的20个氨基酸的多肽,将之与匙孔碱血蓝蛋白(KLH)耦联,BALB/c小鼠皮背部多点注射,收集分离血清,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)和流式细胞术鉴定其特异性.结果成功免疫BALB/c小鼠,ELISA证实该抗血清与免疫多肽有良好的结合,而与sTNF-α、白细胞介素-2(IL-2)和γ-干扰素(IFN-γ)无交叉反应,流式细胞术显示该抗血清可与细胞系U937表达的TM-TNF-α发生特异性结合.结论成功制备了TM-TNF-α特异性多克隆抗体,为制备TM-TNF-α特异性单克隆抗体奠定了基础,为区分TM-TNF-α和sTNF-α的生物学作用提供了有力的工具.
作者：柯杭君；李清芬；李卓娅；姜小丹；冯玮；徐勇；熊平 刊期： 2005年第04期
目的观察中药粉防己碱对高脂饮食兔脂质代谢和主动脉壁血管细胞清道夫受体A(SR-A)表达的影响,进一步探讨粉防己碱抗动脉粥样硬化的机制.方法将18只雄性日本大耳白兔随机分为正常对照组(C组)、高脂模型组(CH组)和粉防己碱组(Tet组).喂养12周后处死动物,常规生化检测血浆总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)和高密度脂蛋白(HDL-C);取胸主动脉连续切片,常规苏木精-伊红染色,脂质苏丹Ⅳ染色,对血管壁形态和脂质沉积定性观察;采用逆转录聚合酶链式反应对血管壁细胞SR-A mRNA表达定量分析.结果CH和Tet组血脂水平显著高于C组(P＜0.01),而CH组与Tet组比较差异无显著性意义(P＞0.05);CH组血管壁脂质沉积明显高于C组和Tet组,C组和Tet组间无明显差别;各组均有SR-A mRNA表达,CH组显著高于C组和Tet组(P＜0.01),而C组与Tet组比较差异无显著性意义(P＞0.05).结论粉防己碱抗兔胸主动脉粥样硬化作用可能与其抑制SR-A表达,减少血管壁脂质沉积有关,而与降脂作用无关.
作者：王毅；孙宝贵；温沁竹；冯义柏；黄波 刊期： 2005年第04期
目的研究人单核细胞系在佛波酯(PMA)作用下分化为巨噬细胞的过程中酰基CoA:胆固醇酰基转移酶1(ACAT1)活性的改变及其机制.方法体外培养人THP-1单核细胞系,PMA作用使其分化为巨噬细胞.以放射性同位素标记底物法检测ACAT1活性,用Western blot法和RT-PCR法分别检测ACAT1蛋白和mRNA.结果PMA使THP-1单核细胞的形态和生长状态巨噬细胞化,在此过程中ACAT1 mRNA和蛋白明显增加(P＜0.01),酶活性升高(P＜0.05).结论PMA可促进单核细胞分化为巨噬细胞,上调ACAT1基因的表达,促进酶活性提高.
作者：何平；成蓓；王毅；王洪星 刊期： 2005年第04期
目的探讨血清转化生长因子-β1(TGF-β1)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)与2型糖尿病肾病的关系.方法采用双抗体夹心酶联免疫法和放射免疫分析法测定单纯糖尿病、早期糖尿病肾病、临床糖尿病肾病患者(各30例)空腹TGF-β1、TNF-α水平,30例健康献血者作正常对照.结果早期糖尿病肾病及临床糖尿病肾病患者TGF-β1、TNF-α水平明显高于单纯糖尿病患者和正常对照(P＜0.05或P＜0.01),且随病情进展逐渐升高;单纯糖尿病患者与正常对照比较差异无显著性意义(P＞0.05).相关及回归分析显示TGF-β1、TNF-α与尿白蛋白排泄率(UAER)呈正相关.多元线性逐步回归分析显示:TGF-β1、TNF-α是影响糖尿病肾病的主要危险因素.结论TGF-β1、TNF-α在糖尿病肾病的发生、发展中起重要作用.
作者：周燕；冼苏；苏珂；龙艳；林枫；胡永玲 刊期： 2005年第04期
目的构建CD80-IgG融合基因表达载体,表达并纯化该融合蛋白,初步探讨其增强抗肿瘤免疫的作用.方法将小鼠CD80分子胞外段和IgG Fc段cDNA串联起来,定向克隆入质粒pcDNA3.0中,使其在哺乳动物细胞中表达.采用免疫亲和层析法纯化,免疫印迹和斑点ELISA鉴定表达的融合蛋白,流式细胞术、MTT法检测其增强白血病细胞CD80分子表达及促进T细胞增殖的功能.结果DNA测序证明两段基因正确插入质粒载体;亲和层析纯化得到浓度为0.1 mg/ml,纯度为95%的蛋白质溶液;免疫印迹、ELISA表明该蛋白质即为CD80-IgG融合蛋白;流式细胞术证明其能够提高白血病细胞表面CD80分子的表达.结论成功构建融合基因表达载体,表达并纯化出融合蛋白,该蛋白可增强CD80分子的表达.
作者：何伟；刘芳；冯献启；张敏；刘凌波；邹萍 刊期： 2005年第04期
目的探讨不同饲养层细胞对小鼠胚胎干细胞(ESC)和兔囊胚内细胞团(ICM)的影响.方法分别用成系小鼠胚胎成纤维细胞(SNL)、兔胚胎成纤维细胞(REF)、兔肾脏成纤维细胞(RRF)作为饲养层饲养小鼠ESC和兔囊胚,观察它们的生长状态,并分别检测其碱性磷酸酶活性.结果生长在REF上的小鼠ESC具有显著的未分化形态,保持未分化时间长,碱性磷酸酶活性强.在REF上呈聚集生长的兔囊胚ICM的比例高.结论REF能维持小鼠胚胎干细胞的未分化状态及促进兔囊胚ICM聚集生长,可以作为ESC的饲养层细胞.
作者：邹亚芬；郑瑞珍；张苏明 刊期： 2005年第04期
华中科技大学学报（医学版）杂志
主管:中华人民共和国教育部
主办：华中科技大学
