肖文伍；杨勇；卫国；杨华静；傅新巧；张苏明
目的探讨反基因技术封闭缺氧诱导因子(HIF-1a)作用位点对肝癌细胞血管内皮生长因子(VEGF)的抑制作用及对细胞生长的影响.方法针对VEGF启动子区HIF-1α作用位点设计反义脱氧寡核苷酸(ODN),并以不同浓度分别转染肝癌细胞.用免疫组化SABC法、Western blot和RT-PCR技术检测肝癌细胞中VEGF mRNA和蛋白表达;同时用经转染后的肝癌细胞培养上清液刺激常规培养的人脐静脉内皮细胞和肝癌细胞,用MTT法观察细胞生长情况.结果免疫组化结果显示不同浓度正、反义ODN与肝癌细胞共同孵育48 h后,VEGF蛋白的表达在正义ODN组与空白对照组间差异无显著性意义(P＞0.05);反义ODN各浓度组与空白组比较差异均有显著性意义(P<0.05),在浓度为10μmol/L时差异有极显著性意义(P<0.01).Western blot和RT-PCR结果显示:在浓度为10μmol/L作用48 h时,正义ODN组积分灰度值和RNA相对比值分别为59 743.2±10 412.5和0.783±0.032,反义ODN组分别为38 694.5±10 925.1和0.468±0.015,两组间差异有极显著性意义(P<0.01).反义ODN对肝癌细胞生长抑制效应呈浓度依赖性.结论针对VEGF的反基因技术能够抑制肝癌细胞的VEGF表达并抑制细胞生长,有望成为抗肝癌的新一代基因治疗手段.
作者：丁磊；陈孝平；王海平 刊期： 2005年第06期
目的比较急性单核细胞白血病M5a和M5b细胞遗传学和免疫表型差异,并了解其与临床行为之间的相互关系.方法采用骨髓直接法和24 h短期培养法制备染色体标本,用G显带技术对58例成人初发急性单核细胞白血病进行核型分析,并用免疫荧光标记法及流式细胞术进行免疫表型检测,同时对其临床资料进行回顾性分析.结果58例患者中正常核型28例,异常核型30例,其中,正常核型在M5b出现率高于M5a(p＜0.01),异常核型中11q23异常和+8染色体在M5a中均较M5b常见(P＜0.01);CD68和CD11b在M5a的表达高于M5b(P＜0.01);不同患者急性单核白血病细胞的免疫表型呈现一定的异质性,但急性单核细胞白血病M5a、M5b两亚型的临床行为未见显著差异.结论M5a和M5b存在各自较独特的细胞生物学特点.
作者：刘凌波；李蕾；肖娟；仲照东；邹萍 刊期： 2005年第06期
目的加强对白塞病的认识,提高临床诊治水平.方法对41例白塞病患者的临床资料进行回顾性分析.结果白塞病发病率男女之比为1:1.16;常见症状依次是口腔溃疡(95.12%)、皮肤损害(70.73%)、生殖器溃疡(48.78%),其余症状相对较少;实验室检查和病理检查无特异性.皮肤针刺反应阳性(56.10%)是较特异的检查指标.诊断分型完全型13例(31.71%),不全型28例(68.29%).结论白塞病以女性青壮年多见.临床表现以口腔、皮肤、生殖器受累常见.诊断主要靠临床症状,皮肤针刺反应阳性有辅助诊断意义.白塞病治疗目前尚无统一方法,糖皮质激素、免疫抑制剂等治疗能很好地控制病情.
作者：舒展；李家文；鄢文慧 刊期： 2005年第06期
目的探讨肾盂癌的诊治方法,提高肾盂癌的诊治水平.方法回顾性分析32例肾盂癌患者的临床资料.结果32例均经手术治疗,病理检查提示移行细胞癌29例,其中G1级8例,G2级12例,G3级9例,低分化鳞癌3例;Rubenstein分期:T1期11例,T2期9例,T3期6例,T4期6例.结论肾盂癌的诊断主要依靠临床表现和影像学检查,联合应用输尿管镜、尿脱落细胞学检查及尿NMP22水平的测定可提高正确诊断率.根治性肾、输尿管切除术是主要的治疗方法,应重视腹腔镜等在治疗中的作用.
作者：文博；杨为民；叶章群；李国灏；刘征；周四维 刊期： 2005年第06期
目的探讨预激综合征心电图形态和消融部位之间的关系,建立适合计算机程序的数据库.方法分析100例经射频消融成功治愈的预激综合征病例的12导联心电图,寻找对旁路有判别意义的心电图特征,并创建一套适合计算机程序的流程图.结果V1导联呈RS型(R/S＞1)或R/S＜1但Ⅰ或aVL导联delta波为负向或等电位,则判为左侧,否则为右侧(敏感性91.94%,特异性97.37%).V1导联呈QS(qs)型,则是右间隔旁路(敏感性72.22%,特异性85.00%).Ⅲ、aVF导联delta波的极性在判断是前或后间隔旁路具有价值.胸导联R/S比率在区分右侧旁路时较重要,特别是V2导联.基于该数据库的心电图系统定位准确率为93%.结论在该数据库基础上建立的定位方法简单,具有较高的准确率.
作者：张繁之；吴杰；王晨；王琳 刊期： 2005年第06期
目的探讨原发性胃肠道恶性淋巴瘤的临床病理学特征.方法对42例原发性胃肠道恶性淋巴瘤活检及切除标本进行临床病理学及免疫组织化学观察.结果原发性胃肠道恶性淋巴瘤以B细胞淋巴瘤多见,其中又以低度恶性黏膜相关淋巴组织型(MALT)淋巴瘤常见.临床表现为非特异性消化道症状.结论原发性胃肠道恶性淋巴瘤临床表现无特异性,各型淋巴瘤的病理形态特点、免疫标记表达有助于诊断及鉴别诊断,胃肠道黏膜活检对原发性胃肠道淋巴瘤的早期诊断、疗效观察及随访有重要意义.
作者：张勤；阮秋蓉；付文荣；周丽梅；盛均逸 刊期： 2005年第06期
目的从米糠蛋白酶解产物中提取制备血管紧张素转化酶(ACE)抑制剂.方法采用等电点沉淀的方法提取米糠中的蛋白质,先后经胃蛋白酶和胰蛋白酶水解后,采用凝胶层析法分离酶解组分,检测各组分ACE抑制性,对活性较强的组分用阳离子交换树脂SP-Sephadex C-25作进一步的分离检测.结果获得的ACE抑制肽分子量为307.1,其等电点在5～6之间.它在消化液中具有稳定性.其IC50为0.061 mg/ml.结论从米糠蛋白酶解产物中获取了ACE抑制剂.
作者：毕昊；刘志国；屈伸；王亚林；吴琼 刊期： 2005年第06期
目的揭示星形胶质细胞对大鼠脑内IL-1β的影响及其在癫痫发病中的作用.方法将马桑内酯(coriarialactone,CL)激活的星形胶质细胞条件培养液(astrocytic conditioned medium,ACM)注射入正常SD大鼠侧脑室,观察大鼠的行为变化,运用免疫组织化学及放射免疫分析的方法,观察大脑皮质、海马区域内白细胞介素1β(IL-1β)免疫反应的变化及脑组织匀浆、脑脊液内1L-1β含量的变化.结果ACM组大鼠在注射ACM后30 min出现癫痫行为,2 h恢复正常;免疫组织化学显示:ACM作用后2 h,IL-1β免疫反应阳性神经元数和平均吸光度值明显增加(均P＜0.05),12 h恢复正常水平;放射免疫分析显示:ACM作用后2 h大脑皮质、海马IL-1β含量均开始增加,4 h达高峰(P＜0.05),脑脊液中IL-1β含量则在ACM作用后2 h即达到高峰.结论马桑内酯激活的星形胶质细胞条件培养液可增强大鼠脑内IL-1β的表达,并导致痫性发作.
作者：李忠玉；刘庆莹；朱长庚；王伟 刊期： 2005年第06期
目的探讨在复杂性眼球外伤治疗中玻璃体手术的疗效和意义.方法回顾分析复杂眼球外伤68只眼,因玻璃体大量积血混浊、伴外伤性视网膜脱离及增生性玻璃体视网膜病变(PVR)、眼后段异物、眼内炎、晶体后脱位等病变,行常规闭合式玻璃体切除术,同时根据不同伴随病变联合相应的手术治疗.结果66只眼按计划完成玻璃体手术.伴发视网膜脱离35只眼、眼后段异物19只眼、眼内炎13只眼及晶体后脱位8只眼,其治愈率分别为86%、89%、77%和100%.术后64只眼行视力检查,45只眼(70%)视力有明显提高.结论以玻璃体切除术为主的联合手术是治疗复杂眼球外伤的有效方法,尤其伤及眼后段的外伤眼多能得到挽救,视力不同程度提高.
作者：陈建斌；项楠；张虹；孙京华；杨红 刊期： 2005年第06期
目的探讨树突状细胞(DC)和小胶质细胞(MG)在脑胶质瘤局部微环境中的关系及采用疫苗治疗后的变化.方法建立大鼠C6脑胶质瘤模型.采用C6细胞冻融抗原致敏DC制备疫苗,接种于造模第2天大鼠的皮下.以免疫组化法对大鼠脑内MG和DC的表达进行研究.结果治疗组DC表达均明显高于肿瘤组,而MG表达均明显低于肿瘤组.结论采用DC疫苗治疗可以增加局部微环境中的DC数量和改善免疫抑制状态,从而提高DC的功能.
作者：牛洪泉；王煜；董震；董芳永；柳再明；雷霆；薛德麟 刊期： 2005年第06期
目的探讨淋巴瘤细胞血管内皮生长因子(VEGF)、血管内皮生长因子受体(VEGFR)的表达及姜黄素对其表达的影响.方法采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测正常人和非霍奇金淋巴瘤(NHL)患者血浆及人B细胞淋巴瘤细胞系Raji经不同浓度姜黄素作用前、后培养上清中VEGF、VEGFR的含量.结果NHL患者(n=40)血浆VEGF、VEGFR浓度分别为(670.60±113.84)、(300.56±37.23)ng/L,显著高于正常对照组的(569.38±49.13)、(224.33±31.17)ng/L(P＜0.05或P＜0.01);22例高中危、高危NHL患者的血浆VEGF、VEGFR水平为(682.63±92.42)、 (311.20±29.65)ng/L,18例低危、低中危NHL患者的血浆VEGF、VEGFR水平为(622.50±107.00)、(238.42±13,78)ng/L,两者比较差异均有显著性意义(P＜0.05或P＜0.01);Raji细胞经浓度为1.56、3.125、6.25、12.5 μmol/L的姜黄素处理24 h后,细胞培养上清中VEGF、VEGFR的含量同空白对照组相比均有降低(均P<0.05),不同药物浓度之间比较,差异具有显著性意义.结论VEGF及其受体在淋巴瘤细胞中存在高表达,姜黄素可能通过抑制淋巴瘤细胞VEGF及其受体的表达,阻断VEGF自分泌环而发挥抗肿瘤作用.
作者：薛克营；陈燕；崔国惠 刊期： 2005年第06期
目的观察两种不同信使分子CO/NO的限速酶血红素氧合酶-1(HO-1)、诱导型一氧化氮合成酶(iN-OS)在局灶性脑缺血中的表达,初步探讨HO-1、iNOS在局灶性脑缺血中的不同作用.方法采用免疫荧光技术,观察HO-1、iNOS在局灶性缺血脑组织中不同时间点的表达及分布.结果iNOS在海马、皮质、基底节均有分布以灶周皮质多.HO-1在同侧海马、皮质、基底节、丘脑均有分布,以灶周皮质为多.NOS的表达在缺血后2 h出现,24～48 h达高峰,以后逐渐下降.HO-1表达在缺血后0.5 h即出现,缺血后6～12 h达高峰.在缺血皮质半暗带的某些神经细胞有iNOS及HO-1的共同表达.结论脑缺血早期即有HO-1的表达,而iNOS表达则较晚出现,其表达的高峰期晚于HO-1.在半暗带的某些神经细胞可见有HO-1和iNOS的同时表达.
作者：符荣；赵洪洋；赵甲山；朱贤立 刊期： 2005年第06期
目的研究放射线对鼻咽癌CNE细胞细胞周期阻滞、凋亡和抑癌基因p57kip2蛋白表达的影响.方法运用流式细胞术检测放射线诱导的细胞周期阻滞、凋亡;运用免疫组织化学法检测抑癌基因p57kip2蛋白的表达.结果CNE细胞经照射后,G1期无明显阻滞,S期出现短暂堆积,G2/M期阻滞程度具剂量和时间依赖性,G2/M期阻滞在12 h与24 h时与照射剂量呈正相关(P<0.01),随照射后时间延长而增强,峰值出现于12 Gy 24 h;细胞凋亡发生率与照射剂量和照射后时间均呈正相关(P<0.01).照射后p57kip2蛋白表达随照射剂量增加和照射后时间延长而上调(均P<0.01).结论G2/M期阻滞、细胞凋亡率和p57kip2蛋白均能反映及预测鼻咽癌细胞的放射敏感性.
作者：胡国清；孙银萍 刊期： 2005年第06期
目的探讨大豆异黄酮和钙对去卵巢骨质疏松大鼠的骨密度及胰岛素样生长因子(IGF-Ⅰ)表达的影响.方法将雌性SD大鼠28只,随机分为假手术组(sham)、去卵巢组(OVX)、去卵巢补钙组[Ca,50 mg/(kg·d)]和去卵巢加大豆异黄酮组[Isof,100 mg/(kg·d)],10周后测骨密度和尿液钙含量,用免疫组化法测骨骼组织IGF-Ⅰ表达,原位杂交法测骨骼组织IGF-Ⅰ mRNA的表达.结果去卵巢组大鼠尿钙显著增高,而骨密度降低,骨IGF-Ⅰ和IGF-Ⅰ mRNA表达显著低于sham组.大豆异黄酮组大鼠尿钙丢失减少,骨密度升高,IGF-Ⅰ和IGF-Ⅰ mRNA表达增加.单纯补钙组与去卵巢组比较,各指标恢复不明显.结论大豆异黄酮表现出类似雌激素的作用,能够调节IGF-Ⅰ等生长因子的表达,减少尿钙丢失,可用于预防骨质疏松.
作者：李万里；田玉慧；沈关心 刊期： 2005年第06期
目的筛选能与TNF-α结合的环肽(称为TNF结合肽)以及既能与TNFR-Ⅰ结合又不诱导TNFR相关生物学效应的环肽(称为TNFR封闭肽).方法采用噬菌体随机肽库展示技术分别以hrTNF-α和hrTNFRⅠ为诱饵进行亲和筛选,ELISA方法进行噬菌体特异性鉴定,应用细胞毒抑制实验和RT-PCR技术等进行噬菌体的生物学效应鉴定.根据噬菌体展示肽的DNA序列合成环肽.结果对肽库进行3轮筛选后,噬菌体克隆具有良好的富集效果;5种TNF结合噬菌体克隆(5、6、7、32及38号克隆)和2种TNFR封闭噬菌体(X2、X4号克隆)分别能与TNF-α和TNFR特异性结合,并且均能显著抑制sTNF-α对L929细胞和U937细胞的杀伤作用,TNFR封闭噬菌体不仅本身无促进U937细胞IL-1β mRNA转录的作用,而且还能有效抑制sTNF-α的生物学效应;并且发现X4与32号、X4与38号联用的细胞毒抑制效应均较其单独作用的效果好,其中X4与38号联用的抑制率高达85.3%,显著高于各自单独的抑制作用(P＜0.01).选择32、38和X4号噬菌体克隆进行DNA测序并合成环肽.结论从噬菌体随机环肽库中筛选得到能够抑制sTNF-α生物学功能的TNF结合肽和TNFR封闭肽,为研制TNF相关的多肽类抗炎药物奠定了实验基础.
作者：尹丙姣；王晶；喻明霞；姜小丹；冯玮；李卓娅 刊期： 2005年第06期
目的探讨Ⅰ期子宫内膜癌(EC))的手术方式以及术后激素治疗和放疗的必要性.方法对67例EC患者进行回顾性分析,其中Ⅰ期37例、Ⅱ期8例、Ⅲ期14例、Ⅳ期8例;根据手术方式不同,将Ⅰ期患者分为3组,行次广泛/广泛子宫及附件切除术和腹膜后淋巴结清扫术或腹膜后淋巴结取样术为A组(24例),行次广泛子宫及附件切除术为B组(5例),行全子宫及附件切除术和腹膜后淋巴结清扫术为C组(8例).分析患者的生存情况,比较激素治疗、放疗对Ⅰ期患者预后的影响.结果寿命表法计算总体5年生存率为78.99%,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ期患者的5年生存率分别为88.65%、86.67%、77.92%和28.57%;细胞分级G3、深肌层侵犯、非子宫内膜样癌和淋巴结转移是影响预后的高危因素(P<0.05),Ⅰ期有高危因素组的5年生存率(80%)显著低于无高危因素组(100%),P<0.05;A、B和C组之间无明显生存差异(P＞0.05),但A组手术方式有利于正确分期;Ⅰ期患者术后激素治疗的5年生存率(100%)显著高于无辅助性治疗对照组(86.67%),放疗(88.89%)与无辅助性治疗对照组之间无明显差异.结论A组手术方式可明确分期,指导治疗,但扩大的手术范围和腹膜后淋巴结清扫或取样不作为Ⅰ期患者的治疗手段,术后仍应给予恰当的辅助性治疗;激素治疗有利于改善Ⅰ期患者的预后,放疗的必要性则有待探讨.
作者：张萍；朱涛；王常玉；陈庭惠；王世宣；李科珍；杨婉华；卢运萍；马丁；顾美皎 刊期： 2005年第06期
目的研究洛土辛(Lotusine,Lot)对失血性休克大鼠的保护作用.方法建立大鼠失血性休克模型,进行复苏与药物治疗.采用生理记录仪监测血流动力学,生物化学法测定丙二醛(MDA)、乳酸脱氢酶(LDH)和血气分析.结果Lot(2.5、5、10 mg/kg,单次缓慢静脉推注)呈剂量依赖性提升失血性休克大鼠的血压及休克24 h的存活率.Lot[5 mg/kg首剂缓慢静脉推注,维持量10μg/(kg·min)]和米力农[Mil,0.75 mg/kg首剂缓慢静脉推注,维持量3μg/(kg·min)]可显著提高失血性休克大鼠的存活率,其中Lot治疗24 h和48 h,失血休克大鼠的存活率由对照组25.00%和16.67%提高至83.33%和75.00%.Lot还显著地提高平均动脉压(MAP),改善pH、PaO2、PaCO2、H2CO3和剩余碱(BE)等血气指标,明显降低血浆MDA和LDH.结论洛土辛可改善失血性休克大鼠的心功能障碍,增加心输出量,减轻失血性休克大鼠的细胞损伤,提高大鼠的存活率,对失血性休克大鼠有较好的治疗作用.
作者：彭佳林；徐俊英；冯秀玲；王嘉陵 刊期： 2005年第06期
目的研究β-连环素、糖原合成酶激酶3β(GSK-3β)及C-jun蛋白在致癌剂引起的大鼠气道上皮鳞状化生中的表达,初步探讨鳞状化生的发生机制.方法Wistar大鼠46只,采用选择性左肺叶下部支气管灌注致癌剂3-甲基胆蒽(MCA)碘油法诱发气道上皮鳞状化生,以10只正常大鼠为对照.用免疫组织化学SP法检测β-连环素、GSK-3β及C-jun蛋白的表达,并用原位杂交法检测β-连环素mRNA的表达.结果①实验组β-连环素膜表达较正常对照组降低(P<0.01),出现胞质表达,未见胞核表达.β-连环素mRNA的表达水平无明显变化(P＞0.05).②GSK-3β表达实验组低于对照组(P<0.05).③C-jun阳性表达率实验组为50%,而对照组未见阳性表达.结论GSK 3β表达下调可引起β-连环素的异位表达,继而活化下游靶基因C-jun,使C-jun蛋白表达增高,β-连环素可能通过Wnt信号通路参与MCA引起的大鼠气道上皮鳞状化生.
作者：付世纬；王智园；王伟；郝春荣；李娜萍；吴人亮；王曦 刊期： 2005年第06期
目的研究反义基因封闭技术体外抑制细胞周期素D1(cyclin D1)表达后对肝癌细胞增殖的影响.方法肝癌HepG2细胞被转染表达cyclin D1反义互补脱氧核苷酸(AScDNA)的质粒后,观察其cyclin D1表达及体外增殖活性的改变.结果cyclin D1反义cDNA可特异性地抑制肝癌细胞cyclin D1蛋白的表达,从而调控细胞周期,抑制肝癌细胞增殖.结论利用cyclin D1反义cDNA进行细胞周期干预对肝癌的治疗具有潜在的意义.
作者：肖震宇；陈孝平；黄志勇 刊期： 2005年第06期
目的探讨表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)对生殖道沙眼衣原体(Chlamydial trachomatis,CT)感染的影响.方法制备CT生殖道感染小鼠模型.CT阴道感染后,随机分成实验组(n=24)和对照组(n=24),分别用EGF及生理盐水干预,比较不同时间各组CT感染率和阳性感染者阴道脱落菌量.结果CT感染动物模型制备成功;EGF干预组较对照组感染率明显下降;EGF组中阳性感染者阴道脱落菌量明显少于对照组.结论EGF能明显降低CT感染的发生率和降低CT的毒力,为预防生殖道CT感染开辟了新途径.
作者：夏革清；陈红峰；李红发 刊期： 2005年第06期
华中科技大学学报（医学版）杂志
主管:中华人民共和国教育部
主办：华中科技大学
